Abstract
Medicine
Brugen af in vitro-cellelinje modeller til kræftforskning har været et nyttigt redskab. Det er imidlertid blevet vist, at disse modeller ikke pålideligt efterligne patientens tumorer i forskellige assays 1. Humane tumorxenoplantater repræsenterer den gyldne standard med hensyn til tumor biologi, lægemiddelforskning, og metastase forskning 2-4. Tumorxenografter kan afledes af forskellige typer af materiale som tumorcellelinier, tumorvæv fra primære patientens tumorer 4 eller serielt transplanterede tumorer. Når opformeret in vivo, er xenotransplanteret væv infiltreret og vaskulariseret af celler af museoprindelse. Flere faktorer såsom tumor enhed, oprindelsen af xenotransplanteret materiale, vækstrate og region transplantation påvirke sammensætningen og mængden af museceller stede i tumorxenotransplantater. Men selv når disse faktorer holdes konstante, graden af kontaminering muse celle er meget varierende.
Contaminating museceller væsentligt forringe downstream analyser af humane tumorxenoplantater. Som musefibroblaster viser høj plating effektiviteter og spredning satser, de har tendens til at vokse kulturer af humane tumorceller, især langsomt prolifererende subpopulationer. Muse celleafledt DNA, mRNA og protein komponenter kan forspænding nedstrøms genekspression analyse, næste generation sekventering, samt proteomanalyse 5. For at overvinde disse begrænsninger, har vi udviklet en hurtig og nem metode til at isolere uberørte humane tumorceller fra xenotransplanteret tumorvæv. Denne procedure er baseret på omfattende udtømning af celler af museoprindelse ved at kombinere automatiseret væv dissociation med benchtop væv dissociator og magnetisk cellesortering. Her viser vi, at humane målceller kan være kan opnås med renheder højere end 96% inden for mindre end 20 min uafhængigt af tumortype.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved