Массив капли Femtoliter для массивно параллельного синтеза белка от одиночных молекул дна

Достижения в области пространственного разрешения и чувствительность к обнаружению научных приборов позволяют применять небольшие реакторы для биологических и химических исследований. Чтобы удовлетворить спрос на высокопроизводительные микрореакторы, мы разработали устройство для капель femtoliter (FemDA) и стали примером его применения в массово параллельных реакциях на синтез белка без клеток (CFPS). Более одного миллиона однородных капель были легко сгенерированы в области размером с палец с помощью двухступенчатого протокола уплотнения масла. Каждая капля была поставлена на якорь в микрохоморе femtoliter, состоящей из гидрофильных дна и гидрофобной боковины. Гибридная гидрофильная в гидрофобной структуре и выделенные герметичные масла и сурфаканты имеют решающее значение для стабильного сохранения эффективного раствора в пространстве фемтолитров без потери испарения. Конфигурация фемтолитров и простая структура устройства FemDA позволили минимальное потребление реагентов. Равномерное измерение капельных реакторов сделало крупномасштабные количественные и временные измерения убедительными и надежными. Технология FemDA соотнесла выход белка реакции CFPS с количеством молекул ДНК в каждой капле. Мы упростили процедуры микрофабрики устройства, формирования капель фемтолитров, а также приобретения и анализа микроскопических данных изображения. Подробный протокол с оптимизированной низкой стоимостью работы делает технологию FemDA доступной для всех, кто имеет стандартные помещения для очистки и обычный флуоресценционный микроскоп на своем месте.