اختبار الكفاءة في المختبر وفي الجسم الحي للجسيمات النانوية mRNA-Lipid التي تمت صياغتها عن طريق خلط الموائع الدقيقة

جذبت الجسيمات النانوية الدهنية (LNPs) اهتماما واسع النطاق مؤخرا مع التطوير الناجح للقاحات COVID-19 mRNA بواسطة Moderna و Pfizer / BioNTech. أثبتت هذه اللقاحات فعالية علاجات mRNA-LNP وفتحت الباب أمام التطبيقات السريرية المستقبلية. في أنظمة mRNA-LNP ، تعمل LNPs كمنصات توصيل تحمي شحنة mRNA من التدهور بواسطة النيوكليازات وتتوسط في توصيلها داخل الخلايا. تتكون LNPs عادة من أربعة مكونات: الدهون المؤينة ، والفوسفوليبيد ، والكوليسترول ، واقتران البولي إيثيلين جلايكول (PEG) المرتبط بالدهون (lipid-PEG). هنا ، يتم صياغة LNPs التي تغلف mRNA بتشفير لوسيفيراز اليراع عن طريق خلط الموائع الدقيقة للمرحلة العضوية التي تحتوي على مكونات الدهون LNP والمرحلة المائية التي تحتوي على mRNA. ثم يتم اختبار mRNA-LNPs في المختبر لتقييم كفاءة نقلها في خلايا HepG2 باستخدام مقايسة قائمة على لوحة التوهج الحيوي. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تقييم mRNA-LNPs في الجسم الحي في الفئران C57BL / 6 بعد الحقن في الوريد عبر الوريد الجانبي الذيل. يتم إجراء تصوير التلألؤ الحيوي لكامل الجسم باستخدام نظام التصوير في الجسم الحي . تم عرض النتائج التمثيلية لخصائص mRNA-LNP ، وكفاءة نقلها في خلايا HepG2 ، والتدفق الكلي للإنارة في الفئران C57BL / 6.