Test af in vitro - og in vivo-effektiviteten af mRNA-lipidnanopartikler formuleret ved mikrofluidisk blanding

Lipidnanopartikler (LNP'er) har tiltrukket sig stor opmærksomhed for nylig med den vellykkede udvikling af COVID-19 mRNA-vaccinerne af Moderna og Pfizer/BioNTech. Disse vacciner har vist effektiviteten af mRNA-LNP-terapi og åbnet døren for fremtidige kliniske anvendelser. I mRNA-LNP-systemer fungerer LNP'erne som leveringsplatforme, der beskytter mRNA-lasten mod nedbrydning af nukleaser og formidler deres intracellulære levering. LNP'erne består typisk af fire komponenter: et ioniserbart lipid, et phospholipid, kolesterol og et lipidforankret polyethylenglycol (PEG) konjugat (lipid-PEG). Her formuleres LNP'er, der indkapsler mRNA-kodende firefly luciferase ved mikrofluidisk blanding af den organiske fase indeholdende LNP-lipidkomponenter og den vandige fase indeholdende mRNA. Disse mRNA-LNP'er testes derefter in vitro for at evaluere deres transfektionseffektivitet i HepG2-celler ved hjælp af et bioluminescerende pladebaseret assay. Derudover evalueres mRNA-LNP'er in vivo i C57BL/6-mus efter en intravenøs injektion via den laterale halevene. Helkropsbioluminescensbilleddannelse udføres ved hjælp af et in vivo-billeddannelsessystem. Repræsentative resultater vises for mRNA-LNP-egenskaberne, deres transfektionseffektivitet i HepG2-celler og den totale selvlysende flux i C57BL/6-mus.