Testning av in vitro - och in vivo-effektiviteten hos mRNA-lipidnanopartiklar formulerade genom mikrofluidisk blandning

Lipidnanopartiklar (LNP) har väckt stor uppmärksamhet på senare tid i och med den framgångsrika utvecklingen av mRNA-vaccinerna mot covid-19 av Moderna och Pfizer/BioNTech. Dessa vacciner har visat effekten av mRNA-LNP-terapier och öppnat dörren för framtida kliniska tillämpningar. I mRNA-LNP-system fungerar LNP:erna som leveransplattformar som skyddar mRNA-lasten från nedbrytning av nukleaser och förmedlar deras intracellulära leverans. LNP:erna består vanligtvis av fyra komponenter: en joniserbar lipid, en fosfolipid, kolesterol och ett lipidförankrat polyetylenglykolkonjugat (PEG) (lipid-PEG). Här formuleras LNP:er som kapslar in mRNA-kodande eldflugeluciferas genom mikrofluidisk blandning av den organiska fasen som innehåller LNP-lipidkomponenter och den vattenhaltiga fasen som innehåller mRNA. Dessa mRNA-LNP:er testas sedan in vitro för att utvärdera deras transfektionseffektivitet i HepG2-celler med hjälp av en bioluminescerande plattbaserad analys. Dessutom utvärderas mRNA-LNPs in vivo i C57BL/6-möss efter en intravenös injektion via den laterala svansvenen. Helkroppsbioluminiscensavbildning utförs med hjälp av ett in vivo-avbildningssystem . Representativa resultat visas för mRNA-LNP-egenskaperna, deras transfektionseffektivitet i HepG2-celler och det totala luminescerande flödet i C57BL/6-möss.