סינון אנלוגי פנטניל באמצעות LC-TIMS-TOF MS/MS

Summary

שיטה לסינון אנלוגים של פנטניל המבוססת על זמן השמירה שלהם, ניידות ותבנית פיצול ספקטרומטריית מסות.

Abstract

השימוש בפנטניל והופעתם של אנלוגים פנטניל בעשורים האחרונים הפכו לדאגה גוברת לקהילה בכללותה. פנטניל והאנלוגים שלו הם התורמים העיקריים למנת יתר קטלנית ולא קטלנית בארצות הברית. רוב המקרים האחרונים של מנת יתר הקשורה לפנטניל קשורים לפנטניל המיוצר באופן לא חוקי ולעוצמה הקיצונית הנלווית אליו. בעבודה הנוכחית, אנו מתארים פרוטוקול אנליטי בעל תפוקה גבוהה להקרנה של אנלוגים פנטניל. השימוש בכרומטוגרפיה נוזלית משלימה, ספקטרומטריית ניידות יונים לכודים וספקטרומטריית מסות טנדם מאפשרים הפרדה והקצאה של מאות אנלוגים של פנטניל מדגימה אחת בסריקה אחת. הגישה המתוארת מנצלת את ההתפתחות האחרונה של רכישה תלוית נתונים ורכישה בלתי תלויה בנתונים באמצעות הצטברות מקבילית במלכודת הניידות ואחריה פיצול רציף באמצעות דיסוציאציה הנגרמת על ידי התנגשות. אנלוגים פנטניל מוקצים בביטחון מבוסס על זמן השמירה שלהם, ניידות, דפוס פיצול MS.

Introduction

פנטניל והאנלוגים שלו הם התורמים העיקריים למנת יתר קטלנית ולא קטלנית בארצות הברית ^1,2. המרכז לבקרת מחלות ומניעתן (CDC) דיווח כי מספר מקרי המוות ממנת יתר סינתטיים הקשורים לאופיואידים בין השנים 2013 ל-2021 היה מעל 258,000. בשנת 2021 לבדה, ניתן לייחס מעל 68,000 מקרי מוות ממנת יתר לאופיואידים סינתטיים, בסך הכל 82% מכלל מקרי המוות הקשורים למנת יתר במדינה³. מאז 2013 זוהו מאות אנלוגים של פנטניל, בעוצמות משתנות⁴. עם הופעתם של אנלוגים פנטניל המיוצרים באופן לא חוקי, אופיואיד סינתטי לוח II עצמו נשאר אופיואיד סינתטי הפופולרי ביותר זמין בארצות....

Protocol

1. הכנת מדגם

1. אחסן את ערכת ההקרנה האנלוגית פנטניל ב -20 ° C לאחר קבלתם. יש להשהות מחדש כל דגימה לריכוז סופי של 400 מיקרוגרם/מ"ל על ידי תוספת של 500 מיקרוליטר מתנול טהור בדרגת LC/MS.
2. מערבבים באמצעות מערבל צלחות או מערבולת במהירות 400 סל"ד למשך שעה או מערבולת במהירות.......

Discussion

ההפרדה האנליטית של דגימות ביולוגיות המכילות תוכן איזומרי גבוה יכולה להיות מאתגרת מבחינה אנליטית. במאמר זה, השיטה המתוארת שואפת לאפיין 29 קבוצות איזומרים, ובסך הכל 185 אנלוגים מתוך ערכה סטנדרטית של 250 אופיואידים. במהלך הכנת קבוצת הבדיקה, חשוב לוודא שאין שני אנלוגים עם m/z שלא.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Ammonium formate for HPLC	Fluka	17843-50G
Eppendorf Snap-Cap Microcentrifuge Safe-Lock Tubes	Fisher	05-402-25
ESI-L Low Concentration Tuning mix	Agilent	G1969-85000
Fentanyl Analog Screening (FAS) Kit	Cayman Chemical	9003237, 9003286, 9003380, 9003381	kit of 250 snthetic opioids, 210 fentanyl analogs, broken up into one kit and emergent panel versions 1-4
Formic acid Optima LC/MS	Fisher	A117-50
Onyx guard column (5 x 4.6 mm)	Phenomenex	CHO-7649	guard column for C18 columns
Onyx monolithic C18 HPLC column (100 x 4.6 mm)	Phenomenex	CHO-7643	reverse phase C18 LC column
Optima grade acetonitrile	Fisher	A996-4
Optima grade methanol	Fisher	A454-4
Optima grade water	Fisher	W7-4
Pipette	Fisher	05-719-510	kit of 1-10 µL, 10-100 µL, and 100-1000 µL pipette
Pipette tips 10µL	Fisher	94060100
Pipette tips 1000µL	Fisher	94056710
Pipette tips 200µL	Fisher	94060310
Plate mixer	IKA	MS 3 D S1	IKA MS 3 digtital
Prominence LC-20 CE ultrafast liquid chromatograph	Shimadzu, Japan		equiped with DGU-20A5, LC-20AD, SIL-20AC, CTO-20A, SPD-M20A, CBM-20A, SPD-20A
timsTOF Pro	Bruker Daltonics Inc., Billerica, MA		timsTOF instrument with PASEF