A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
שיטה לסינון אנלוגים של פנטניל המבוססת על זמן השמירה שלהם, ניידות ותבנית פיצול ספקטרומטריית מסות.
השימוש בפנטניל והופעתם של אנלוגים פנטניל בעשורים האחרונים הפכו לדאגה גוברת לקהילה בכללותה. פנטניל והאנלוגים שלו הם התורמים העיקריים למנת יתר קטלנית ולא קטלנית בארצות הברית. רוב המקרים האחרונים של מנת יתר הקשורה לפנטניל קשורים לפנטניל המיוצר באופן לא חוקי ולעוצמה הקיצונית הנלווית אליו. בעבודה הנוכחית, אנו מתארים פרוטוקול אנליטי בעל תפוקה גבוהה להקרנה של אנלוגים פנטניל. השימוש בכרומטוגרפיה נוזלית משלימה, ספקטרומטריית ניידות יונים לכודים וספקטרומטריית מסות טנדם מאפשרים הפרדה והקצאה של מאות אנלוגים של פנטניל מדגימה אחת בסריקה אחת. הגישה המתוארת מנצלת את ההתפתחות האחרונה של רכישה תלוית נתונים ורכישה בלתי תלויה בנתונים באמצעות הצטברות מקבילית במלכודת הניידות ואחריה פיצול רציף באמצעות דיסוציאציה הנגרמת על ידי התנגשות. אנלוגים פנטניל מוקצים בביטחון מבוסס על זמן השמירה שלהם, ניידות, דפוס פיצול MS.
פנטניל והאנלוגים שלו הם התורמים העיקריים למנת יתר קטלנית ולא קטלנית בארצות הברית 1,2. המרכז לבקרת מחלות ומניעתן (CDC) דיווח כי מספר מקרי המוות ממנת יתר סינתטיים הקשורים לאופיואידים בין השנים 2013 ל-2021 היה מעל 258,000. בשנת 2021 לבדה, ניתן לייחס מעל 68,000 מקרי מוות ממנת יתר לאופיואידים סינתטיים, בסך הכל 82% מכלל מקרי המוות הקשורים למנת יתר במדינה3. מאז 2013 זוהו מאות אנלוגים של פנטניל, בעוצמות משתנות4. עם הופעתם של אנלוגים פנטניל המיוצרים באופן לא חוקי, אופיואיד סינתטי לוח II עצמו נשאר אופיואיד סינתטי הפופולרי ביותר זמין בארצות....
1. הכנת מדגם
ערכת הסינון האנלוגית פנטניל של 250 תקני אנלוגים חולקה ל -14 קבוצות: 12 קבוצות של 17 אנלוגים ו -2 קבוצות של 16 אנלוגים, כדי למנוע הפרעות m/z. כל אנלוגי מאופיין גם על ידי m/z, זמן שמירה (RT), ניידות (K) ותבנית פיצול MS/MS.
דוגמאות להפרדות איזומריות מוצגות באיור 3
ההפרדה האנליטית של דגימות ביולוגיות המכילות תוכן איזומרי גבוה יכולה להיות מאתגרת מבחינה אנליטית. במאמר זה, השיטה המתוארת שואפת לאפיין 29 קבוצות איזומרים, ובסך הכל 185 אנלוגים מתוך ערכה סטנדרטית של 250 אופיואידים. במהלך הכנת קבוצת הבדיקה, חשוב לוודא שאין שני אנלוגים עם m/z שלא.......
המחבר מבקש להודות על התמיכה הראשונית של ד"ר סזאר רמירז במהלך פיתוחי השיטה הראשוניים.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Ammonium formate for HPLC | Fluka | 17843-50G | |
Eppendorf Snap-Cap Microcentrifuge Safe-Lock Tubes | Fisher | 05-402-25 | |
ESI-L Low Concentration Tuning mix | Agilent | G1969-85000 | |
Fentanyl Analog Screening (FAS) Kit | Cayman Chemical | 9003237, 9003286, 9003380, 9003381 | kit of 250 snthetic opioids, 210 fentanyl analogs, broken up into one kit and emergent panel versions 1-4 |
Formic acid Optima LC/MS | Fisher | A117-50 | |
Onyx guard column (5 x 4.6 mm) | Phenomenex | CHO-7649 | guard column for C18 columns |
Onyx monolithic C18 HPLC column (100 x 4.6 mm) | Phenomenex | CHO-7643 | reverse phase C18 LC column |
Optima grade acetonitrile | Fisher | A996-4 | |
Optima grade methanol | Fisher | A454-4 | |
Optima grade water | Fisher | W7-4 | |
Pipette | Fisher | 05-719-510 | kit of 1-10 µL, 10-100 µL, and 100-1000 µL pipette |
Pipette tips 10µL | Fisher | 94060100 | |
Pipette tips 1000µL | Fisher | 94056710 | |
Pipette tips 200µL | Fisher | 94060310 | |
Plate mixer | IKA | MS 3 D S1 | IKA MS 3 digtital |
Prominence LC-20 CE ultrafast liquid chromatograph | Shimadzu, Japan | equiped with DGU-20A5, LC-20AD, SIL-20AC, CTO-20A, SPD-M20A, CBM-20A, SPD-20A | |
timsTOF Pro | Bruker Daltonics Inc., Billerica, MA | timsTOF instrument with PASEF |
Explore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved