सेल फैक्ट्री प्लेटफॉर्म का उपयोग करके उच्च-टिटर, उच्च-गुणवत्ता वाले एडेनो-जुड़े वायरस वैक्टर उत्पन्न करने के लिए एक सुव्यवस्थित और मानकीकृत प्रक्रिया

प्रीक्लिनिकल जीन थेरेपी अनुसंधान, विशेष रूप से कृंतक और बड़े पशु मॉडल में, उच्च उपज और शुद्धता के साथ एएवी वैक्टर के उत्पादन की आवश्यकता होती है। अनुसंधान प्रयोगशालाओं में पारंपरिक दृष्टिकोण में अक्सर HEK293T कोशिकाओं की खेती के लिए सेल कल्चर व्यंजनों का व्यापक उपयोग शामिल होता है, एक प्रक्रिया जो श्रमसाध्य और समस्याग्रस्त दोनों हो सकती है। यहां, एक अनूठी इन-हाउस विधि प्रस्तुत की गई है, जो इस प्रक्रिया को एक विशिष्ट सेल फैक्ट्री (या सेल स्टैक, CF10) प्लेटफॉर्म के साथ सरल बनाती है। आयोडिक्सानॉल ग्रेडिएंट अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन के साथ पॉलीथीन ग्लाइकॉल/जलीय दो-चरण विभाजन का एकीकरण उत्पन्न एएवी वैक्टर की उपज और शुद्धता दोनों में सुधार करता है। एएवी वैक्टर की शुद्धता एसडीएस-पेज और चांदी धुंधला के माध्यम से सत्यापित की जाती है, जबकि पूर्ण से खाली कणों का अनुपात ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (टीईएम) का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है। यह दृष्टिकोण उच्च पैदावार पर एएवी वैक्टर के उत्पादन के लिए एक कुशल सेल फैक्ट्री प्लेटफॉर्म प्रदान करता है, जो विवो अध्ययनों में गुणवत्ता की मांगों को पूरा करने के लिए एक बेहतर शुद्धि विधि के साथ मिलकर है।