Abstract
Bioengineering
전임상 유전자 치료 연구, 특히 설치류 및 대형 동물 모델에서는 수율과 순도가 높은 AAV 벡터의 생산이 필요합니다. 연구 실험실의 전통적인 접근 방식은 종종 HEK293T 세포를 배양하기 위해 세포 배양 접시를 광범위하게 사용하는 것을 포함하는데, 이는 힘들고 문제가 될 수 있는 과정입니다. 여기에서는 특정 셀 팩토리(또는 셀 스택, CF10) 플랫폼으로 이 프로세스를 단순화하는 고유한 사내 방법을 제시합니다. 폴리에틸렌 글리콜/수용성 2상 분할과 요오딕사놀 그래디언트 초원심분리의 통합은 생성된 AAV 벡터의 수율과 순도를 모두 향상시킵니다. AAV 벡터의 순도는 SDS-PAGE 및 은 염색을 통해 검증되며, 전체 입자와 빈 입자의 비율은 투과 전자 현미경(TEM)을 사용하여 결정됩니다. 이 접근법은 in vivo 연구에 대한 품질 요구를 충족하기 위해 개선된 정제 방법과 함께 높은 수율로 AAV 벡터를 생산할 수 있는 효율적인 cell factory 플랫폼을 제공합니다.
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