Quantitation and Analysis of the Formation of HO-Endonuclease Stimulated Chromosomal Translocations by Single-Strand Annealing in <em>Saccharomyces cerevisiae</em>

Genetic variation is frequently mediated by genomic rearrangements that arise through interaction between dispersed repetitive elements present in every ...

University of Southern California, Norris Comprehensive Cancer Center

&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x662F;&#x751F;&#x7269;&#x5708;&#x4E2D;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x548C;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x751F;&#x547D;&#x7684;&#x751F;&#x6001;&#x5E73;&#x8861;&#x4E2D;&#x626E;&#x6F14;&#x4E3B;&#x8981;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5341;&#x4E2A;&#x65B0;&#x5206;&#x79BB;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x566C;&#x83CC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x8868;&#x660E;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6574;&#x4F53;&#x4EBA;&#x53E3;&#x6781;&#x5176;&#x591A;&#x6837;&#x5316;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x5E8F;&#x5217;&#x4FE1;&#x606F;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x5708;&#x4E2D;&#x7684;&#x86EE;&#x8352;&#x4E4B;&#x5730;&#x6700;&#x5927;&#x6C34;&#x5E93;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x566C;&#x83CC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6BD4;&#x8F83;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x6211;&#x4EEC;&#x7406;&#x89E3;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x4FE1;&#x670D;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x975E;&#x5A5A;&#x751F;&#x91CD;&#x7EC4;&#x6C34;&#x5E73;&#x9057;&#x4F20;&#x4EA4;&#x6362;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x610F;&#x5916;&#x57FA;&#x56E0;&#x5305;&#x62EC;&#x90A3;&#x4E9B;&#x88AB;&#x7275;&#x8FDE;&#x8FDB;&#x5206;&#x679D;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x3001; &#x5206;&#x679D;&#x6746;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EA2;&#x6591;&#x72FC;&#x75AE;&#x7B49;&#x81EA;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x54CD;&#x5E94;&#x5217;&#x5165;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x4E71;&#x4EA4;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F66;&#x8F86;&#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x5728;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6BD2;&#x529B;&#x66F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x53C2;&#x4E0E;&#x548C;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6027;&#x611F;&#x67D3;&#x4E3B;&#x673A;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5EA6;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B;&#x5206;&#x679D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x3002;

Bacteriophages are the most abundant organisms in the biosphere and play major roles in the ecological balance of microbial life. The genomic sequences of ten newly isolated mycobacteriophages suggest that the bacteriophage population as a whole is amazingly diverse and may represent the largest unexplored reservoir of sequence information in the biosphere. Genomic comparison of these mycobacteriophages contributes to our understanding of the mechanisms of viral evolution and provides compelling evidence for the role of illegitimate recombination in horizontal genetic exchange. The promiscuity of these recombination events results in the inclusion of many unexpected genes including those implicated in mycobacterial latency, the cellular and immune responses to mycobacterial infections, and autoimmune diseases such as human lupus. While the role of phages as vehicles of toxin genes is well established, these observations suggest a much broader involvement of phages in bacterial virulence and the host response to bacterial infections.

Origins of highly mosaic mycobacteriophage genomes.

Les bact&eacute;riophages sont les organismes les plus abondants dans la biosph&egrave;re et jouent un r&ocirc;le majeur dans l&#39;&eacute;quilibre &eacute;cologique de la vie microbienne. Les s&eacute;quences g&eacute;nomiques de dix mycobact&eacute;riophages nouvellement isol&eacute;s sugg&egrave;rent que la population de bact&eacute;riophage dans son ensemble est &eacute;tonnamment diverse et peut repr&eacute;senter le plus grand r&eacute;servoir inexplor&eacute; des informations de s&eacute;quence dans la biosph&egrave;re. Comparaison g&eacute;nomique de ces mycobact&eacute;riophages contribue &agrave; notre compr&eacute;hension des m&eacute;canismes de l&#39;&eacute;volution du virus et fournit des preuves convaincantes pour le r&ocirc;le de recombinaison ill&eacute;gitime en &eacute;change g&eacute;n&eacute;tique horizontal. La promiscuit&eacute; de ces &eacute;v&eacute;nements de recombinaison se traduit par l&#39;inclusion de nombreux g&egrave;nes inattendus, y compris ceux impliqu&eacute;s dans la latence de mycobact&eacute;ries, les r&eacute;ponses cellulaires et immunitaires aux infections mycobact&eacute;riennes et maladies auto-immunes comme le lupus humain. Alors que le r&ocirc;le des phages comme v&eacute;hicules des g&egrave;nes de la toxine est bien &eacute;tabli, ces observations sugg&egrave;rent une implication beaucoup plus large des phages dans la virulence bact&eacute;rienne et la r&eacute;ponse de l&#39;h&ocirc;te aux infections bact&eacute;riennes.

Origines des g&eacute;nomes de mycobacteriophage hautement mosa&iuml;que.

Urspr&#xFC;nge der hoch Mosaik Mykobakteriophagen Genome.

I batteriofagi sono gli organismi pi&ugrave; abbondanti nella biosfera e svolgono un ruolo importante nell&#39;equilibrio ecologico della vita microbica. Le sequenze genomiche di dieci mycobacteriophages recentemente isolato suggeriscono che l&#39;intera popolazione del batteriofago &egrave; incredibilmente vario e pu&ograve; rappresentare il pi&ugrave; grande serbatoio inesplorato di informazioni di sequenza nella biosfera. Genomic confronto di questi mycobacteriophages contribuisce alla nostra comprensione dei meccanismi di evoluzione virale e fornisce una prova convincente per il ruolo di ricombinazione illegittima in scambio genetico orizzontale. La promiscuit&agrave; di questi eventi di ricombinazione comporta l&#39;inclusione di molti geni imprevisti compresi quelli implicati nella latenza micobatterica, il cellulare e immune responses to infezioni micobatteriche e malattie autoimmuni come lupus umano. Mentre il ruolo dei fagi come veicoli di geni della tossina &egrave; ben consolidato, queste osservazioni suggeriscono un coinvolgimento molto pi&ugrave; ampio di fagi in virulenza batterica e risposta dell&#39;ospite alle infezioni batteriche.

Origini di altamente genomi di mycobacteriophage mosaico.

&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x751F;&#x7269;&#x570F;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x3001;&#x5FAE;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x6D3B;&#x306E;&#x751F;&#x614B;&#x7CFB;&#x306E;&#x30D0;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;10 &#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x30DF;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x4EBA;&#x53E3;&#x5168;&#x4F53;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306F;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x591A;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6700;&#x5927;&#x306E;&#x672A;&#x8E0F;&#x8CAF;&#x6C34;&#x6C60;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x570F;&#x3067;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30DF;&#x30B3;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3001;&#x975E;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x6C34;&#x5E73;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x4EA4;&#x63DB;&#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x8AAC;&#x5F97;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x518D;&#x7D50;&#x5408;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4E71;&#x4EA4;&#x5305;&#x542B;&#x6297;&#x9178;&#x83CC;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3082;&#x542B;&#x3081;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x4E88;&#x671F;&#x305B;&#x306C;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x6297;&#x9178;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3068;&#x4EBA;&#x9593;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30B9;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x514D;&#x75AB;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x6BD2;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8ECA;&#x4E21;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x306E;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x95A2;&#x4E0E;&#x7D30;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3078;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.

&#x9AD8;&#x3044;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF; mycobacteriophage &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x3002;

Bacteriophages&#xB294; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xAD8C;&#xC5D0; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC720;&#xAE30; &#xCCB4; &#xBC0F; &#xBBF8;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xBA85;&#xC758; &#xC0DD;&#xD0DC; &#xADE0;&#xD615;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC694; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218;&#xD589;. 10 &#xC0C8;&#xB85C; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; mycobacteriophages&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC804;&#xCCB4; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; &#xC778;&#xAD6C;&#xB294; &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xAD8C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC815;&#xBCF4;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD070; &#xBBF8;&#xAC1C;&#xCC99;&#xB41C; &#xC800;&#xC218;&#xC9C0;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218;&#xB294; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; mycobacteriophages&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xBE44;&#xAD50; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD654;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xD3C9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAD50;&#xD658;&#xC5D0; &#xBD88;&#xBC95;&#xC801;&#xC778; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC131;&#xD589;&#xC704; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9CE;&#xC740; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; mycobacterial &#xB300;&#xAE30; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;&#xB97C; &#xBE44;&#xB86F; mycobacterial &#xAC10;&#xC5FC;&#xACFC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB8E8; &#xD478; &#xC2A4; &#xAC19;&#xC740; &#xC790;&#xAC00; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568;. &#xB3C5; &#xC18C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCC28;&#xB7C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC740; &#xC798; &#xC124;&#xB9BD;,&#xC774; &#xAD00;&#xCE21; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C5;&#xC131;&#xC5D0; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC758; &#xD6E8;&#xC52C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xCC38;&#xC5EC; &#xC138;&#xADE0; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; mycobacteriophage &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xC6D0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Bacteri&oacute;fagos son los organismos m&aacute;s abundantes en la Biosfera y desempe&ntilde;an un papel importante en el equilibrio ecol&oacute;gico de la vida microbiana. Las secuencias gen&oacute;micas de diez Micobacteri&oacute;fagos reci&eacute;n aislados sugieren que la poblaci&oacute;n de bacteri&oacute;fagos como un todo es incre&iacute;blemente diversa y puede representar la mayor reserva inexplorada de informaci&oacute;n de la secuencia en la Biosfera. Comparaci&oacute;n gen&oacute;mica de estos Micobacteri&oacute;fagos contribuye a nuestra comprensi&oacute;n de los mecanismos de la evoluci&oacute;n viral y proporciona la evidencia convincente para el papel de recombinaci&oacute;n ileg&iacute;tima en intercambio gen&eacute;tico horizontal. La promiscuidad de estos resultados de eventos de recombinaci&oacute;n en la inclusi&oacute;n de muchos genes inesperados los implicados en la latencia de micobacterias, incluyendo las respuestas celulares e inmunes a infecciones micobacterianas y enfermedades autoinmunes como el lupus humano. Mientras que el papel de fagos como veh&iacute;culos de genes de la toxina est&aacute; bien establecido, estas observaciones sugieren una participaci&oacute;n mucho m&aacute;s amplia de los fagos en la virulencia bacteriana y la respuesta del hu&eacute;sped a las infecciones bacterianas.

Or&iacute;genes de altamente genomas de mycobacteriophage de mosaico.

Recombination by site-specific recombinases is a highly concerted process that requires synapsis of the correct pair of DNA substrates. Phage-encoded serine-integrases are unusual among the serine-recombinase family, which includes transposon resolvases and DNA invertases, in that they utilize two simple but different DNA substrates (attB and attP) and do not require accessory sites, additional proteins, or DNA supercoiling. Synapsis must therefore be directed solely by integrase-DNA interactions. We show here that the Bxb1 serine-integrase binds as a dimer to its two DNA substrates (attB, attP) and recombinant products (attL, attR) with similar affinities. However, synapsis occurs only between attP and attB, and not between any of the other nine possible site combinations. The Bxb1 integrase domain structure, the unusual DNA-binding properties of the integrase, and the characterization of a mutant protein with altered site-discrimination, are consistent with synaptic selectivity being derived from DNA sequence-induced changes in the conformations of integrase-DNA complexes.

Synapsis in phage Bxb1 integration: selection mechanism for the correct pair of recombination sites.

&#x7531;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x628A;&#x91CD;&#x7EC4;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x6B63;&#x786E;&#x5BF9; DNA &#x5E95;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x7F16;&#x7801;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;-integrases &#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x91CD;&#x7EC4;&#x9176;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#x8F6C;&#x5EA7;&#x5B50; resolvases &#x548C; DNA &#x8F6C;&#x5316;&#x5229;&#x7528; &#xFF08;attB &#x548C; attP&#xFF09; &#x4E24;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x4F46;&#x4E0D;&#x540C; DNA &#x57FA;&#x677F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x8F85;&#x52A9;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3001; &#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6216; DNA &#x8D85;&#x7EC6;&#x4E4B;&#x4E2D;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x7531;&#x6574;&#x5408;&#x9176; DNA &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5FC5;&#x987B;&#x9488;&#x5BF9;&#x7A81;&#x89E6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A; Bxb1 &#x4E1D;&#x6C28;&#x9178; hiv-1 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x4E8C;&#x805A;&#x4F53;&#x5BF9;&#x5176;&#x4E24;&#x4E2A; DNA &#x57FA;&#x677F; attP attB&#xFF09; &#x548C;&#x91CD;&#x7EC4;&#x4EA7;&#x54C1; attR &#x5965;&#x7279;&#x5C14;&#xFF09; &#x4E0E;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x4EB2;&#x7F18;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x7A81;&#x89E6;&#x53D1;&#x751F;&#x4EC5;&#x4E3A; attP &#x81F3; attB&#xFF0C;&#x548C;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E5D;&#x79CD;&#x53EF;&#x80FD;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7EC4;&#x5408;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E0D;&#x3002;Bxb1 &#x6574;&#x5408;&#x9176;&#x57DF;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x9176;&#xFF0C;DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x8868;&#x5F81;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6539;&#x53D8;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x6B67;&#x89C6;&#xFF0C;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408;&#x7A81;&#x89E6;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x6B63;&#x5728;&#x4ECE; DNA &#x5E8F;&#x5217;&#x5F15;&#x8D77;&#x6784;&#x8C61;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x9176;-DNA &#x590D;&#x5408;&#x7269;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53; Bxb1 &#x96C6;&#x6210;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7F51;&#x7AD9;&#x7684;&#x6B63;&#x786E;&#x9009;&#x62E9;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Recombinaison par les recombinases in sites est un processus tr&egrave;s concert&eacute; qui requiert la synapse de la paire correcte des substrats de l&#39;ADN. Bact&eacute;riophage-encod&eacute;es s&eacute;rine-integrases sont rares parmi la famille des s&eacute;rine-recombinase, qui comprend le transposon resolvases et invertases ADN, car ils utilisent des deux substrats simples mais diff&eacute;rents ADN (attB et attP) et ne n&eacute;cessitent pas de sites accessoires, prot&eacute;ines additionnelles ou ADN supercoiling. Synapsis doit donc &ecirc;tre r&eacute;alis&eacute; uniquement par des interactions ADN-int&eacute;grase. Nous montrons ici que la s&eacute;rine-int&eacute;grase Bxb1 lie comme un dim&egrave;re &agrave; ses deux substrats de l&#39;ADN (attB, attP) et les produits recombinants (attL, attR) avec des affinit&eacute;s similaires. Toutefois, synapsis intervient seulement entre attP et attB et pas entre l&#39;un des neuf autres combinaisons possibles de site. La structure de domaine int&eacute;grase du Bxb1, les propri&eacute;t&eacute;s particuli&egrave;res de la liaison &agrave; l&#39;ADN de l&#39;int&eacute;grase et la caract&eacute;risation d&#39;une prot&eacute;ine mutante avec discrimination site alt&eacute;r&eacute;e, sont compatibles avec la s&eacute;lectivit&eacute; synaptique &eacute;tant d&eacute;riv&eacute;e de changements induits par la s&eacute;quence de l&#39;ADN dans les conformations des complexes ADN-int&eacute;grase.

Synapsis en phage Bxb1 int&eacute;gration : m&eacute;canisme de s&eacute;lection pour la bonne paire de sites de recombinaison.

Synapsis in Phagen Bxb1 Integration: Auswahlmechanismus f&#xFC;r die korrekte Paar von Rekombinationsstellen.

Ricombinazione di ricombinasi sito-specifici &egrave; un processo altamente concordato che richiede synapsis la corretta coppia di substrati di DNA. Serina-integrases dei fagi-codificati sono insoliti tra la famiglia di serina-ricombinasi, che comprende transposon resolvases e invertases del DNA, in quanto essi utilizzano due semplici ma diversi DNA substrati (attB e attP) e non necessitano di siti accessori, proteine aggiuntive o Superavvolgimento del DNA. Synapsis deve pertanto essere regia esclusivamente interazioni integrase-DNA. Mostriamo qui che la serina-integrasi Bxb1 si lega come un dimero ai suoi due substrati di DNA (attB, attP) e prodotti ricombinanti (attL, attR) con affinit&agrave; simile. Tuttavia, synapsis si verifica solo tra attP e attB e non tra qualsiasi delle altre nove combinazioni possibili del sito. La struttura di dominio di integrase Bxb1, le insolite Propriet&agrave; DNA-binding del integrase e la caratterizzazione di una proteina mutante con alterata sito-discriminazione, sono coerenti con selettivit&agrave; sinaptica essendo derivato da alterazioni indotte dalla sequenza del DNA in conformazioni dei complessi DNA-integrasi.

Synapsis in phage Bxb1 integrazione: meccanismo di selezione per la corretta coppia di siti di ricombinazione.

&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x56FA;&#x6709;&#x306E; recombinases &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048; DNA &#x306E;&#x6B63;&#x3057;&#x3044;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x9AD8;&#x3044;&#x5354;&#x8ABF;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; integrases &#x306F;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x3060;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B; DNA &#x57FA;&#x677F;&#x3092; 2 &#x679A; (attB &#x304A;&#x3088;&#x3073; attP) &#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B5;&#x30EA;&#x30FC; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x307E;&#x305F;&#x306F; DNA &#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30BE;&#x30F3; resolvases &#x3068; DNA &#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D9;&#x30EB;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; recombinase &#x5BB6;&#x65CF;&#x9593;&#x3067;&#x901A;&#x5E38;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; DNA &#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3082;&#x3063;&#x3071;&#x3089;&#x6307;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067; Bxb1 &#x306E;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x305D;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E; DNA &#x57FA;&#x677F; (attB, attP) &#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x7523;&#x7269; (attL&#x3001;attR) &#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;attP &#x3068; attB&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E; 9 &#x3064;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Bxb1 &#x30FB; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x73CD;&#x3057;&#x3044; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x5909;&#x8CEA;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;-&#x5DEE;&#x5225;&#x3001;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; DNA &#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x7ACB;&#x4F53;&#x69CB;&#x9020;&#x306E; DNA &#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x8A98;&#x8D77;&#x5909;&#x5316;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x6027;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; Bxb1 &#x7D71;&#x5408;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;: &#x9078;&#x629E;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CD;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306E;&#x6B63;&#x3057;&#x3044;&#x30DA;&#x30A2;&#x3002;

&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; recombinases&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; DNA &#xAE30;&#xD310;&#xC758; &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; &#xC30D;&#xC758; &#xC0C1;&#xC0C1;&#xC758; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC77C;&#xCE58; &#xB41C; &#xACFC;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; integrases &#xADF8; &#xB450; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xB978; DNA &#xAE30;&#xD310; (attB &#xBC0F; attP)&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC561;&#xC138;&#xC11C;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, &#xCD94;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB610;&#xB294; DNA supercoiling &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC544;&#xB3C4; transposon resolvases DNA invertases &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; recombinase &#xAC00;&#xC871; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xD3C9;&#xC18C; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xC0C1;&#xC758; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; integrase DNA &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xB3C5; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; Bxb1 &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; integrase &#xB450; DNA &#xAE30;&#xD310; (attB, attP)&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xAC00;&#xC9C4; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xC81C;&#xD488; (attL, attR) dimer&#xB85C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC0C1;&#xC0C1;&#xC758; attP &#xBC0F; attB, &#xC0AC;&#xC774; &#xC5D0;&#xC11C;&#xB9CC; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; 9 &#xAC1C;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC870;&#xD569; &#xC0AC;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; integrase, &#xD2B9;&#xC774; &#xD55C; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;-&#xCC28;&#xBCC4;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; Bxb1 integrase &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; DNA &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xC720;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD654; integrase DNA &#xB2E8;&#xC9C0; conformations&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB418; &#xACE0; &#xC120;&#xD0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xB3C4;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;.

&#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; Bxb1 &#xD1B5;&#xD569;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xC0C1;&#xC758;: &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xC62C;&#xBC14;&#xB978; &#xC30D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC120;&#xD0DD; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

Recombinaci&oacute;n por recombinasas espec&iacute;ficas es un proceso altamente concertado que requiere sinapsis del par correcto de sustratos de ADN. Fago-codificado serina-integrases son inusuales entre la familia de serina-Recombinasa, que incluye el transposon resolvases y las invertasas de ADN, que utilizan dos simples pero diferentes ADN sustratos (attB y attP) y no requieren accesorios sitios, prote&iacute;nas adicionales o superenrollamiento del ADN. Sinapsis por lo tanto deben orientarse exclusivamente por las interacciones de la integrasa-DNA. Aqu&iacute; mostramos que la Bxb1 serina-integrasa se une como un dimer para sus dos sustratos de ADN (attB, attP) y productos recombinantes (attL, attR) con afinidades similares. Sin embargo, la sinapsis ocurre solamente entre attP y attB y no entre cualquiera de las otras nueve combinaciones posible sitio. La estructura de dominios Bxb1 integrasa, las propiedades de uni&oacute;n a DNA inusuales de la integrasa y la caracterizaci&oacute;n de una prote&iacute;na mutante alterado sitio-discriminaci&oacute;n, son consistentes con la selectividad sin&aacute;ptica se deriva de los cambios inducidos por la secuencia de ADN en las conformaciones de complejos de integrasa-DNA.

Sinapsis en Fago Bxb1 integraci&oacute;n: mecanismo de selecci&oacute;n para el par correcto de sitios de recombinaci&oacute;n.

&#x7535;&#x79BB;&#x8F90;&#x5C04;&#x7167;&#x5C04;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x4EE5;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x5DF2;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230;&#x80BF;&#x7624;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x91CD;&#x6392;&#x3002;&#x8BB8;&#x591A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x91CD;&#x6392;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2; &#xFF08;DSBs&#xFF09; &#x7684;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5206;&#x6563;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x91CD;&#x590D;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4; (HR)&#x3002;&#x5242;&#x91CF;&#x8F90;&#x5C04;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x521B;&#x5EFA; DSBs &#x4E2D;&#x6216;&#x9644;&#x8FD1;&#x591A;&#x4E2A;&#x91CD;&#x590D;&#x5143;&#x7D20;&#x540C;&#x65F6;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D1;&#x8D77;&#x5355;&#x94FE;&#x9000;&#x706B; (SSA)&#xFF0C;&#x9AD8;&#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x8BF1;&#x53D8;&#xFF0C;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684; DSB &#x4FEE;&#x590D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x9057;&#x4F20;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x81EA;&#x53D1;&#x5730;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x6613;&#x4F4D;&#x548C;&#x90A3;&#x4E9B;&#x6784;&#x6210; DSBs &#x6BD7;&#x90BB;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x975E;&#x540C;&#x6E90;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x4E4B;&#x540E;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BF9;&#x523A;&#x6FC0;&#x6253;&#x7834;&#x4E86;&#x79FB;&#x4F4D;&#x7684;&#x660E;&#x663E;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x4FEE;&#x590D;&#x4F7F;&#x7528; 300bp &#x548C; 60bp &#x91CD;&#x7EC4;&#x886C;&#x5E95;&#x662F;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x57FA;&#x677F;&#x957F;&#x5EA6;&#x6539;&#x53D8; SSA &#x7684;&#x5668;&#x5177;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;RAD59 &#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x77ED;&#x886C;&#x5E95;&#x6750;&#x6599;&#x7684;&#x90A3;&#x90E8;&#x5206;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; RAD52 &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x9AD8;&#x9891;&#x7387;&#x8868;&#x660E; SSA &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6025;&#x6027;&#x8F90;&#x5C04;&#x7167;&#x5C04;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x91CD;&#x7EC4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x91CD;&#x8981;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x540C;&#x65F6;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6613;&#x4F4D;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x7684;&#x9AD8;&#x6548;&#x4FEE;&#x590D;&#x9700;&#x8981; RAD59&#x3002;

Exposure to ionizing radiation results in a variety of genome rearrangements that have been linked to tumor formation. Many of these rearrangements are thought to arise from the repair of double-strand breaks (DSBs) by several mechanisms, including homologous recombination (HR) between repetitive sequences dispersed throughout the genome. Doses of radiation sufficient to create DSBs in or near multiple repetitive elements simultaneously could initiate single-strand annealing (SSA), a highly efficient, though mutagenic, mode of DSB repair. We have investigated the genetic control of the formation of translocations that occur spontaneously and those that form after the generation of DSBs adjacent to homologous sequences on two, non-homologous chromosomes in Saccharomyces cerevisiae. We found that mutations in a variety of DNA repair genes have distinct effects on break-stimulated translocation. Furthermore, the genetic requirements for repair using 300bp and 60bp recombination substrates were different, suggesting that the SSA apparatus may be altered in response to changing substrate lengths. Notably, RAD59 was found to play a particularly significant role in recombination between the short substrates that was partially independent of that of RAD52. The high frequency of these events suggests that SSA may be an important mechanism of genome rearrangement following acute radiation exposure.

RAD59 is required for efficient repair of simultaneous double-strand breaks resulting in translocations in Saccharomyces cerevisiae.

L&#x26;#39;exposition &#xE0; des r&#xE9;sultats de rayonnements ionisants dans une vari&#xE9;t&#xE9; de r&#xE9;arrangements g&#xE9;nomiques qui ont &#xE9;t&#xE9; li&#xE9;s &#xE0; la formation de tumeurs. Bon nombre de ces r&#xE9;arrangements sont consid&#xE9;r&#xE9;s comme provenant de la r&#xE9;paration des cassures double-brin (CDB) par plusieurs m&#xE9;canismes, y compris la recombinaison homologue (RH) entre les s&#xE9;quences r&#xE9;p&#xE9;titives dispers&#xE9;es dans le g&#xE9;nome. Les doses de rayonnement suffisante pour cr&#xE9;er CDB dans ou &#xE0; proximit&#xE9; de plusieurs &#xE9;l&#xE9;ments r&#xE9;p&#xE9;titifs pourrait lancer simultan&#xE9;ment un seul brin de recuit (SSA), un tr&#xE8;s efficace, si mutag&#xE8;ne, le mode de r&#xE9;paration des CDB. Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; le contr&#xF4;le g&#xE9;n&#xE9;tique de la formation de translocations qui se produisent spontan&#xE9;ment et ceux sous forme qu&#x26;#39;apr&#xE8;s la g&#xE9;n&#xE9;ration des CDB adjacentes aux s&#xE9;quences homologues sur deux, les chromosomes non homologues dans Saccharomyces cerevisiae. Nous avons constat&#xE9; que des mutations dans une vari&#xE9;t&#xE9; de g&#xE8;nes de r&#xE9;paration de l&#x26;#39;ADN ont des effets distincts sur la rupture stimul&#xE9; la translocation. En outre, les exigences g&#xE9;n&#xE9;tiques pour la r&#xE9;paration en utilisant des substrats de recombinaison 300 pb et de 60pb &#xE9;taient diff&#xE9;rents, ce qui sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;appareil SSA peut &#xEA;tre modifi&#xE9;e en r&#xE9;ponse &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;volution des longueurs de substrat. Notamment, RAD59 a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; &#xE0; jouer un r&#xF4;le particuli&#xE8;rement important dans la recombinaison entre les substrats courts qui a &#xE9;t&#xE9; partiellement ind&#xE9;pendante de celle de RAD52. La fr&#xE9;quence &#xE9;lev&#xE9;e de ces &#xE9;v&#xE9;nements sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;Afrique subsaharienne peut &#xEA;tre un m&#xE9;canisme important de r&#xE9;arrangement du g&#xE9;nome suite &#xE0; une exposition aigu&#xEB; au rayonnement.

RAD59 est n&#xE9;cessaire pour la r&#xE9;paration efficace des simultan&#xE9;es des cassures double brin r&#xE9;sultant de translocations chez Saccharomyces cerevisiae

Exposition gegen&uuml;ber ionisierender Strahlung f&uuml;hrt zu einer Vielzahl von Genom-Umlagerungen, die zur Tumorbildung verkn&uuml;pft wurden. Viele von diesen Umlagerungen werden gedacht, um aus der Reparatur von Br&uuml;chen Doppel-Str&auml;nge (DSBs) ergeben, durch mehrere Mechanismen, einschlie&szlig;lich homologe Rekombination (HR) zwischen repetitive Sequenzen, die das Genom verstreut. Strahlendosen ausreichend DSBs gleichzeitig in oder in der N&auml;he mehrere sich wiederholende Elemente erstellen konnte Single-Strand Gl&uuml;hen (SSA), initiiert einen hocheffizienten, obwohl Mutagene, DSB-Reparatur-Modus. Wir haben untersucht, die genetische Kontrolle der Bildung von Translokationen, die spontan auftreten und solche, die nach der Generierung von DSBs neben homologe Sequenzen auf zwei, nicht-homologe Chromosomen in Saccharomyces Cerevisiae zu bilden. Wir fanden, dass Mutationen in einer Vielzahl von DNA-Reparatur-Gene unterschiedliche Auswirkungen auf die Pause-stimuliert Translokation haben. Dar&uuml;ber hinaus die genetischen Voraussetzungen f&uuml;r Reparatur mit 300bp und 60bp Rekombination Substrate waren unterschiedlich, was darauf hindeutet, dass der SSA-Apparat in sich ver&auml;ndernden Substrat L&auml;ngen ver&auml;ndert werden kann. RAD59 fand sich insbesondere bei Rekombination zwischen den kurzen Substrate, die teilweise unabh&auml;ngig von jenem des RAD52 war eine besonders wichtige Rolle zu spielen. Die hohe Frequenz der diese Ereignisse legt nahe, dass SSA ein wichtiger Mechanismus der Genom-Umlagerung nach akuten Strahlenbelastung sein kann.

RAD59 ist erforderlich f&uuml;r effiziente Reparatur von gleichzeitigen Doppel-Strang-Br&uuml;chen, was zu Translokationen in Saccharomyces Cerevisiae.

L&#39;esposizione a radiazioni ionizzanti si traduce in una variet&agrave; di riarrangiamenti del genoma che sono stati collegati alla formazione di tumori. Molti di questi riarrangiamenti sono pensati per derivare dalla riparazione delle rotture a doppio filamento (DSBs) da diversi meccanismi, tra cui la ricombinazione omologa (HR) tra sequenze ripetitive dislocati in tutto il genoma. Dosi di radiazioni sufficiente a creare DSBs in o vicino a pi&ugrave; elementi ripetitivi contemporaneamente potrebbero avviare single-strand ricottura (SSA), una modalit&agrave; altamente efficiente, sebbene mutageni, di riparazione DSB. Abbiamo studiato il controllo genetico della formazione di traslocazioni che si verificano spontaneamente e quelli che si formano dopo la generazione di DSBs adiacente sequenze omologhe su due, cromosomi non omologhi in Saccharomyces cerevisiae. Abbiamo trovato che mutazioni in diversi geni di riparazione del DNA hanno effetti distinti sulla traslocazione break-stimolata. Inoltre, i requisiti genetici per ripristino utilizzando 300bp e substrati di ricombinazione 60bp erano differenti, suggerendo che l&#39;apparato SSA pu&ograve; essere alterato in risposta alle mutevoli lunghezze di substrato. In particolare, RAD59 &egrave; stato trovato a giocare un ruolo particolarmente significativo nella ricombinazione tra i substrati brevi che fu parzialmente indipendente da quella di RAD52. L&#39;alta frequenza di questi eventi suggerisce che SSA pu&ograve; essere un importante meccanismo di riarrangiamento del genoma dopo esposizione acuta alle radiazioni.

RAD59 &egrave; richiesto per una riparazione efficiente di simultanea double-strand break con conseguente traslocazioni in Saccharomyces cerevisiae.

&#x816B;&#x760D;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x96FB;&#x96E2;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x5206;&#x6563;&#x53CD;&#x5FA9;&#x914D;&#x5217;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#xFF08;HR&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#xFF08;DSB&#x306E;&#xFF09;&#x306E;&#x4FEE;&#x7406;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x53CD;&#x5FA9;&#x8981;&#x7D20;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5468;&#x8FBA;&#x306E;DSB&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x306E;&#x7DDA;&#x91CF;&#x306F;&#x30A2;&#x30CB;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#xFF08;SSA&#xFF09;&#x3001;DSB&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x3001;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF08;Saccharomyces cerevisiae&#xFF09;&#x306E;2&#x3064;&#x3001;&#x975E;&#x76F8;&#x540C;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x4E0A;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;DSB&#x306E;&#x751F;&#x6210;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;DNA&#x4FEE;&#x5FA9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AF;&#x523A;&#x6FC0;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;300bp&#x3068;60bp&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x57FA;&#x677F;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8981;&#x4EF6;&#x306F;&#x3001;SSA&#x88C5;&#x7F6E;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x306E;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x5FDC;&#x3058;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;RAD59&#x306F;RAD52&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x30B7;&#x30E7;&#x30FC;&#x30C8;&#x57FA;&#x677F;&#x9593;&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3067;&#x306F;&#x7279;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x9AD8;&#x5468;&#x6CE2;&#x306F;&#x3001;SSA&#x306F;&#x6025;&#x6027;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x88AB;&#x3070;&#x304F;&#x5F8C;&#x306B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x518D;&#x7DE8;&#x6210;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

RAD59&#x306F;&#x3001;Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x4E8C;&#x91CD;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x4FEE;&#x7406;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

&#xC804;&#xB9AC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xC591; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;. &#xB9CE;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4; &#xAC8C;&#xB188;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xBD84;&#xC0B0; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xAC04;&#xC758; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; (HR)&#xB97C; &#xBE44;&#xB86F; &#xD55C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB098;&#xB204;&#xAE30; (DSBs)&#xC758; &#xC218;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xB9CC;&#xB4E4; DSBs &#xB610;&#xB294; &#xADFC;&#xCC98;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC1C;&#xC758; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120;&#xC758; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC744; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xC5B4; &#xB2D0; &#xB9C1; (SSA), &#xC2DC;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xBE44;&#xB85D; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131;, DSB &#xBCF5;&#xAD6C; &#xBAA8;&#xB4DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; translocations&#xC640; DSBs &#xB450;, &#xBE44; &#xB3D9;&#xC885; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC885; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; &#xC138;&#xB300; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xD615;&#xC131; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC804; &#xD734;&#xC2DD;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; 300bp&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC640; 60bp &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xAE30;&#xD310; &#xB2E4;&#xB978; &#xD2B9;&#xC218; &#xC7A5;&#xCE58; &#xAE30;&#xD310; &#xAE38;&#xC774; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, RAD59 rad52&#xC758; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3C5;&#xB9BD; &#xD588;&#xB2E4; &#xC9E7;&#xC740; &#xAE30;&#xD310; &#xAC04;&#xC758; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBC1D;&#xD600;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xD2B9;&#xC218; &#xAC8C;&#xB188; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xAE09;&#xC131; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC774; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rad59&#xB294; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; translocations&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xB098;&#xB204;&#xAE30;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La exposici&#xF3;n a radiaci&#xF3;n ionizante en una variedad de reordenamientos del genoma que se han ligado a la formaci&#xF3;n de tumores. Muchos de estos reordenamientos se cree que deriva de la reparaci&#xF3;n de doble filamento se rompe (DSBs) por varios mecanismos, incluyendo la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga (HR) entre las secuencias repetitivas dispersas por todo el genoma. Las dosis de radiaci&#xF3;n suficiente para crear DSBs en o cerca de varios elementos repetitivos al mismo tiempo podr&#xED;a iniciar una sola l&#xED;nea de recocido (SSA), un muy eficiente, aunque mutag&#xE9;nica, el modo de reparaci&#xF3;n de DSB. Hemos investigado el control gen&#xE9;tico de la formaci&#xF3;n de translocaciones que se producen espont&#xE1;neamente y aquellos forma que despu&#xE9;s de la generaci&#xF3;n de DSBs adyacentes a las secuencias hom&#xF3;logas en dos, no cromosomas hom&#xF3;logos en Saccharomyces cerevisiae. Hemos encontrado que las mutaciones en una variedad de genes de reparaci&#xF3;n del ADN tienen efectos distintos sobre la ruptura estimula la translocaci&#xF3;n. Por otra parte, los requisitos gen&#xE9;ticos para la reparaci&#xF3;n mediante recombinaci&#xF3;n sustratos 300pb y 60bp fueron diferentes, lo que sugiere que el aparato de la SSA puede ser alterada en respuesta a los cambios en la longitud del sustrato. En particular, RAD59 fue encontrado a desempe&#xF1;ar un papel particularmente significativo en la recombinaci&#xF3;n entre los sustratos cortos que fue parcialmente independiente de la de RAD52. La alta frecuencia de estos eventos sugiere que la SSA puede ser un mecanismo importante de la reordenaci&#xF3;n del genoma despu&#xE9;s de exposici&#xF3;n a la radiaci&#xF3;n aguda.

RAD59 es necesaria para la reparaci&#xF3;n eficiente de simult&#xE1;neas doble filamento se rompe Como resultado de translocaciones en Saccharomyces cerevisiae

&#x5728;&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001; &#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6025;&#x6027;&#x8F90;&#x5C04;&#x7167;&#x5C04;&#x6240;&#x81F4;&#x7684;&#x53CC;&#x94FE;&#x65AD;&#x88C2;&#x4FEE;&#x590D;&#x5927;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x91CD;&#x590D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5143;&#x7D20;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x540C;&#x6E90;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5148;&#x524D;&#x6240;&#x8FF0;&#x5728;&#x5141;&#x8BB8;&#x6211;&#x4EEC;&#x6A21;&#x578B;&#x5982;&#x4F55;&#x4FEE;&#x590D;&#x591A;&#x4E2A;&#x65AD;&#x70B9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6613;&#x4F4D;&#x7684;&#x5355;&#x94FE;&#x9000;&#x706B; (SSA) &#x548C;&#x53D1;&#x73B0; Rad59&#x3001; paralog &#x7684;&#x5355;&#x94FE; DNA &#x5206;&#x5B50;&#x9000;&#x706B;&#x86CB;&#x767D; Rad52&#xFF0C;&#x662F;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6781;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x5EFA;&#x6210;&#x51E0;&#x4E2A; rad59 &#x5F02;&#x4E49;&#x57FA;&#x56E0;&#x8981;&#x66F4;&#x7EC6;&#x81F4;&#x5730;&#x7814;&#x7A76;&#x5176;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x900F;&#x9732;&#x6613;&#x4F4D;&#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x81EA;&#x53D1;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x91CD;&#x590D;&#x91CD;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x53D1;&#x751F;&#x7684; SSA &#x7684;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;&#x7ED3;&#x5408; rad59 &#x5F02;&#x4E49;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0E;&#x7A7A;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684; RAD1&#xFF0C;&#x5B83;&#x5C06;&#x7F16;&#x7801;&#x975E;&#x540C;&#x6E90;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x4ECE;&#x9000;&#x706B;&#x4E2D;&#x95F4;&#x4F53;&#x7684;&#x62C6;&#x9664;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6838;&#x9178;&#x9176;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x5927;&#x5E45;&#x6291;&#x5236;&#x4F4E;&#x9891;&#x6613;&#x4F4D; rad1 &#x7A7A;&#x5355;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E00;&#x4E2A;&#x89D2;&#x8272;&#x6613;&#x4F4D;&#x4E2D; Rad59 &#x7684; SSA &#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x652F;&#x6301;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x975E;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x5288;&#x88C2;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x3002;

RAD59 &#x548C; RAD1 &#x5355;&#x94FE;&#x9000;&#x706B;&#x5728;&#x917F;&#x9152;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x6CD5;&#x5408;&#x4F5C;&#x6613;&#x4F4D;&#x5F62;&#x6210;&#x3002;

Studies in the budding yeast, Saccharomyces cerevisiae, have demonstrated that a substantial fraction of double-strand break repair following acute radiation exposure involves homologous recombination between repetitive genomic elements. We have previously described an assay in S. cerevisiae that allows us to model how repair of multiple breaks leads to the formation of chromosomal translocations by single-strand annealing (SSA) and found that Rad59, a paralog of the single-stranded DNA annealing protein Rad52, is critically important in this process. We have constructed several rad59 missense alleles to study its function more closely. Characterization of these mutants revealed proportional defects in both translocation formation and spontaneous direct-repeat recombination, which is also thought to occur by SSA. Combining the rad59 missense alleles with a null allele of RAD1, which encodes a subunit of a nuclease required for the removal of non-homologous tails from annealed intermediates, substantially suppressed the low frequency of translocations observed in rad1-null single mutants. These data suggest that at least one role of Rad59 in translocation formation by SSA is supporting the machinery required for cleavage of non-homologous tails.

RAD59 and RAD1 cooperate in translocation formation by single-strand annealing in Saccharomyces cerevisiae.

Les &#xE9;tudes chez la levure bourgeonnante, Saccharomyces cerevisiae, ont d&#xE9;montr&#xE9; qu&#x26;#39;une fraction substantielle de double-brin de r&#xE9;paration des cassures d&#x26;#39;exposition au rayonnement &#xE0; la suite aigu&#xEB; implique une recombinaison homologue entre r&#xE9;p&#xE9;titives &#xE9;l&#xE9;ments g&#xE9;nomiques. Nous avons pr&#xE9;c&#xE9;demment d&#xE9;crit un essai chez S. cerevisiae qui nous permet de mod&#xE9;liser la fa&#xE7;on dont la r&#xE9;paration des cassures multiples conduit &#xE0; la formation de translocations chromosomiques par simple brin recuit (SSA) et a constat&#xE9; que Rad59, un paralogue de l&#x26;#39;ADN simple brin recuit prot&#xE9;ines Rad52, rev&#xEA;t une importance cruciale dans ce processus. Nous avons construit plusieurs all&#xE8;les faux-sens rad59 d&#x26;#39;&#xE9;tudier sa fonction de plus pr&#xE8;s. La caract&#xE9;risation de ces mutants ont r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; des anomalies dans la formation de la translocation proportionnelles &#xE0; la fois spontan&#xE9;e et directe-repeat recombinaison, qui est aussi pens&#xE9; &#xE0; se produire par l&#x26;#39;Afrique subsaharienne. En combinant les all&#xE8;les faux-sens rad59 avec un all&#xE8;le nul de RAD1, qui code une sous-unit&#xE9; d&#x26;#39;une nucl&#xE9;ase n&#xE9;cessaire &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;limination de la non-homologues queues de produits interm&#xE9;diaires recuites, sensiblement supprim&#xE9; la faible fr&#xE9;quence des translocations observ&#xE9;es dans RAD1 nuls simples mutants. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;au moins un r&#xF4;le de Rad59 dans la formation de la translocation par SSA soutient la machinerie n&#xE9;cessaire pour le clivage de la non-homologues queues.

RAD59 et RAD1 coop&#xE9;rer &#xE0; la formation de translocation par simple brin Recuit chez Saccharomyces cerevisiae

Studien in der Backhefe, haben bewiesen, dass ein wesentlicher Teil der Doppel-Strang Pause Reparatur nach akuten Strahlenbelastung homologe Rekombination zwischen den sich wiederholenden genomische Elemente beinhaltet. Wir haben zuvor ein Assay in S. Cerevisiae beschrieben, die uns zu modellieren, wie Reparatur von mehreren Br&uuml;chen f&uuml;hrt zu der Bildung von chromosomalen Translokationen durch Single-Strand Gl&uuml;hen (SSA) und festgestellt, dass Rad59, eine Paralog der einzeln-angeschwemmte DNA Protein Rad52, Gl&uuml;hen entscheidender Bedeutung in diesem Prozess ist erlaubt. Wir haben mehrere rad59 Missense-Allele um seine Funktion genauer studieren errichtet. Charakterisierung von diese Mutanten offenbart proportional M&auml;ngel in Translokation Bildung und spontane direkt-Wiederholung-Rekombination, die auch gedacht wird, Auftreten von SSA. Kombination der Allele Missense rad59 mit einem null-Allel RAD1, das eine Untereinheit des eine Nuklease ben&ouml;tigt, f&uuml;r die Beseitigung von nicht-homologe Schw&auml;nze aus gegl&uuml;htem Zwischenprodukte codiert, unterdr&uuml;ckt wesentlich die Niederfrequenz der Umsiedlung in rad1-Null einzigen Mutanten zu beobachten. Diese Daten legen nahe, dass mindestens eine Rolle von Rad59 in Translokation unterst&uuml;tzt Bildung von SSA die Maschinen, die f&uuml;r die Spaltung der nicht-homologe Schw&auml;nze n&ouml;tig.

RAD59 und RAD1 kooperieren bei Translokation Bildung durch Single-Strand Gl&uuml;hen in Saccharomyces Cerevisiae.

Studi in lievito germogliante, Saccharomyces cerevisiae, hanno dimostrato che una frazione sostanziale di riparazione double-strand break dopo esposizione acuta alle radiazioni comporta la ricombinazione omologa tra elementi ripetitivi genomici. In precedenza abbiamo descritto un dosaggio in S. cerevisiae che ci permette di modellare come riparazione di rotture multiple porta alla formazione di traslocazioni cromosomiche da ricottura single-strand (SSA) e trovato che Rad59, un paralog del DNA single-stranded ricottura proteina Rad52, &egrave; di fondamentale importanza in questo processo. Noi abbiamo costruito diversi alleli di missenso rad59 per studiare pi&ugrave; da vicino la sua funzione. Caratterizzazione di questi mutanti ha rivelato difetti proporzionali in formazione traslocazione sia spontaneo ricombinazione diretta-ripetizione, che pensa anche al verificarsi di SSA. Combinando gli alleli missenso rad59 con un allele null di RAD1, che codifica per una subunit&agrave; di una nucleasi necessaria per l&#39;eliminazione delle code non omologhe da intermedi ricotti, sostanzialmente soppresso la bassa frequenza di traslocazioni osservata nel singoli mutanti rad1-null. Questi dati suggeriscono che almeno un ruolo di Rad59 nella traslocazione formazione da SSA sta sostenendo i macchinari necessari per la scissione delle code non omologhe.

RAD59 e RAD1 cooperare nella formazione di traslocazione di single-strand ricottura in Saccharomyces cerevisiae.

&#x51FA;&#x82BD;&#x9175;&#x6BCD;&#x3001;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30ED;&#x30DF;&#x30BB;&#x30B9;&#xB7;&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#xFF08;Saccharomyces cerevisiae&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4E8C;&#x672C;&#x9396;&#x5207;&#x65AD;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x5F8C;&#x306B;&#x6025;&#x6027;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x88AB;&#x3070;&#x304F;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x304C;&#x53CD;&#x5FA9;&#x7684;&#x306A;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30D6;&#x30EC;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x304C;&#x30A2;&#x30CB;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#xFF08;SSA&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;Rad59&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30A2;&#x30CB;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E00;&#x672C;&#x9396;DNA&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;S.&#x30BB;&#x30EC;&#x30D3;&#x30B7;&#x30A8;&#x3067;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x8A18;&#x8F09;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Rad52&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;rad59&#x30DF;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;SSA&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x81EA;&#x767A;&#x7684;&#x306A;&#x30C0;&#x30A4;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EA;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C8;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x3057;&#x305F;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A2;&#x30CB;&#x30FC;&#x30EB;&#x3057;&#x305F;&#x4E2D;&#x9593;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x975E;&#x76F8;&#x540C;&#x5C3E;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;RAD1&#x306E;&#x30CC;&#x30EB;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;rad59&#x30DF;&#x30B9;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;rad1 null&#x3067;&#x5358;&#x4E00;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x4F4E;&#x5468;&#x6CE2;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;SSA&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rad59&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;1&#x3064;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x76F8;&#x540C;&#x5C3E;&#x306E;&#x5207;&#x65AD;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x68B0;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

RAD59&#x3068;RAD1&#x306F;&#x3001;Saccharomyces cerevisiae&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30CB;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30EB;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x3067;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5354;&#x529B;&#x3059;&#x308B;

&#xC5F0;&#xAD6C; &#xC2E0;&#xC9C4; &#xD6A8; &#xBAA8;, Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC911; &#xAC00;&#xB2E5; &#xBE0C;&#xB808;&#xC774;&#xD06C; &#xC218;&#xB9AC; &#xAE09;&#xC131; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBD84;&#xC218; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC801;&#xC778; &#xAC8C;&#xB188; &#xC694;&#xC18C; &#xAC04;&#xC758; &#xB3D9;&#xC885; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD3EC;&#xD568; &#xC785;&#xC99D;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC218;&#xB9AC; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB098;&#xB204;&#xAE30;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; &#xC5B4; &#xB2D0; &#xB9C1; (SSA)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; translocations&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C; &#xBAA8;&#xB378; Rad59, Rad52, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC5B4; &#xB2D0; &#xB9C1; &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; DNA paralog&#xC740;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xC218; &#xC788;&#xB294; S. cerevisiae&#xC5D0; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB354; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xADF8; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC5EC;&#xB7EC; rad59 missense &#xB300;&#xB9BD;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD55C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC804; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD2B9;&#xC218; &#xB418;&#xB824;&#xBA74; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB610;&#xD55C; &#xC790;&#xBC1C;&#xC801;&#xC778; &#xC9C1;&#xC811; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Rad1 null &#xB2E8;&#xC77C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; translocations&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; rad59 missense &#xB300;&#xB9BD; RAD1 nuclease &#xB2E8;&#xB828; &#xD55C; &#xC911;&#xAC04;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44; &#xB3D9;&#xC885; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294;&#xC758; null &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xACB0;&#xD569; &#xD558; &#xC5EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; Rad59 &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0;&#xC758; &#xD2B9;&#xC218; &#xD615;&#xC131; &#xBE44; &#xB3D9;&#xC885; &#xAF2C;&#xB9AC;&#xC758; &#xBD84;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAE30;&#xACC4; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rad59&#xC640; RAD1 &#xB2E8;&#xC77C; &#xAC00;&#xB2E5; Saccharomyces cerevisiae&#xC5D0; &#xC5B4; &#xB2D0; &#xB9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xD611;&#xC870;.

Los estudios en la levadura de gemaci&#xF3;n Saccharomyces cerevisiae, han demostrado que una fracci&#xF3;n sustancial de la reparaci&#xF3;n de doble filamento romper despu&#xE9;s de exposici&#xF3;n a la radiaci&#xF3;n aguda consiste en la recombinaci&#xF3;n hom&#xF3;loga entre repetitivos elementos gen&#xF3;micos. Hemos descrito previamente un ensayo en S. cerevisiae que nos permite modelar c&#xF3;mo reparaci&#xF3;n de las roturas m&#xFA;ltiples conduce a la formaci&#xF3;n de translocaciones cromos&#xF3;micas por una sola l&#xED;nea de recocido (SSA) y encontraron que Rad59, un paralog del ADN monocatenario recocido prote&#xED;na Rad52, es de vital importancia en este proceso. Hemos construido varios alelos rad59 cambio de sentido para estudiar su funci&#xF3;n m&#xE1;s de cerca. Caracterizaci&#xF3;n de estos mutantes revel&#xF3; defectos proporcionales en la formaci&#xF3;n de translocaci&#xF3;n tanto espont&#xE1;nea y directa de la repetici&#xF3;n de recombinaci&#xF3;n, que tambi&#xE9;n se cree que ocurre por la SSA. La combinaci&#xF3;n de los alelos rad59 missense con un alelo nulo de RAD1, que codifica una subunidad de una nucleasa requerido para la eliminaci&#xF3;n de colas no hom&#xF3;logas de compuestos intermedios recocidos, sustancialmente suprimida la baja frecuencia de translocaciones se observan en RAD1 nulo mutantes individuales. Estos datos sugieren que al menos un papel de Rad59 en la formaci&#xF3;n de translocaci&#xF3;n por el Seguro Social est&#xE1; apoyando la maquinaria necesaria para la divisi&#xF3;n de colas no hom&#xF3;logas.

Nicholas Pannunzio

Department of Biochemistry and Molecular Biology

University of Southern California, Norris Comprehensive Cancer Center

Quantitation and Analysis of the Formation of HO-Endonuclease Stimulated Chromosomal Translocations by Single-Strand Annealing in Saccharomyces cerevisiae

Nicholas Pannunzio

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Biochemistry and Molecular Biology

University of Southern California, Norris Comprehensive Cancer Center

Quantitation and Analysis of the Formation of HO-Endonuclease Stimulated Chromosomal Translocations by Single-Strand Annealing in Saccharomyces cerevisiae

Department of Biochemistry and Molecular Biology