Single Cell Fate Mapping in Zebrafish

The ability to differentially label single cells has important implications in developmental biology. For instance, determining how hematopoietic, ...

Cincinnati Children's Hospital Medical Center

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&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5242;&#x9677;&#x9631;&#x884C;&#x7EAA;&#x8981;&#x4E2D;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x6C34;&#x901A;&#x9053;&#x86CB;&#x767D; 1a &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;

Aquaporin 1 (Aqp1) is a water channel protein, expressed widely in microvascular endothelial cells and implicated in mammalian tumor angiogenesis. However, its developmental expression has not yet been characterized in great detail. An enhancer trap screen was performed using a Tol2-derived GFP reporter in zebrafish embryos. An insertional Et(GBT-B1)tpl1 line was identified that has reporter insertion in the vicinity of the aqp1a gene. We further characterized the embryonic expression pattern of this GFP reporter line, as well as that of endogenous aqp1a. Both endogenous aqp1a and reporter GFP expression were restricted to the vascular endothelial cells within the dorsal aorta, cranial, intersegmental and other secondary vessels, but were absent in the axial venous vasculature. In addition, endogenous aqp1a expression was observed in both primitive and definitive hematopoietic erythroid progenitors, as well as in the otic vesicle, swim bladder, pneumatic duct, intestine and a subset of neurons within the retina and the midbrain-hindbrain region. We further show that gata1 and etsrp/etv2 function is required for hematopoietic and endothelial aqp1a expression, respectively. Aqp1a expression is restricted to endothelial and erythroid cells during early embryogenesis. The transgenic Et(GBT-B1)tpl1 line recapitulates endogenous endothelial aqp1a expression. Because currently very few reporter lines can differentiate between arterial and venous endothelial cells, the Et(GBT-B1)tpl1 transgenic line and characterization of the aqp1a expression pattern will be useful for future studies of endothelial and arterial-venous differentiation.

Zebrafish enhancer trap line recapitulates embryonic aquaporin 1a expression pattern in vascular endothelial cells.

Aquaporin 1 (AQP1) est une prot&#xE9;ine canal d&#x26;#39;eau, exprim&#xE9;e largement dans les cellules endoth&#xE9;liales microvasculaires et impliqu&#xE9;s dans l&#x26;#39;angiogen&#xE8;se tumorale chez les mammif&#xE8;res. Cependant, son expression de d&#xE9;veloppement n&#x26;#39;a pas encore &#xE9;t&#xE9; caract&#xE9;ris&#xE9; en d&#xE9;tail. Un &#xE9;cran pi&#xE8;ge enhancer a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;e en utilisant un rapporteur GFP Tol2-d&#xE9;riv&#xE9;e dans embryons de poisson z&#xE8;bre. Un insertion Et (IBG-B1) de ligne tpl1 a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9; que l&#x26;#39;insertion a rapporteur au voisinage du g&#xE8;ne aqp1a. On, caract&#xE9;ris&#xE9; en outre le motif d&#x26;#39;expression embryonnaire de cette ligne rapporteur GFP, ainsi que celle de aqp1a endog&#xE8;ne. Les deux aqp1a endog&#xE8;ne et expression de la GFP journaliste ont &#xE9;t&#xE9; limit&#xE9;es &#xE0; des cellules endoth&#xE9;liales vasculaires au sein de l&#x26;#39;aorte dorsale, cr&#xE2;niennes, intersegmentaire et d&#x26;#39;autres vaisseaux secondaires, mais &#xE9;taient absents dans le syst&#xE8;me vasculaire veineux axiale. En outre, l&#x26;#39;expression endog&#xE8;ne aqp1a a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e dans les deux prog&#xE9;niteurs &#xE9;rythro&#xEF;des primitives et d&#xE9;finitive h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques, ainsi que dans la v&#xE9;sicule otique, la vessie natatoire, pneumatique conduit, l&#x26;#39;intestin et un sous-ensemble de neurones dans la r&#xE9;tine et dans la r&#xE9;gion du m&#xE9;senc&#xE9;phale-rhombenc&#xE9;phale. Nous montrons en outre que GATA1 et etsrp/etv2 fonction est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;expression aqp1a h&#xE9;matopo&#xEF;&#xE9;tiques et endoth&#xE9;liales, respectivement. Expression Aqp1a est restreinte aux cellules endoth&#xE9;liales et &#xE9;rythro&#xEF;des durant l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se pr&#xE9;coce. Le ET transg&#xE9;nique (GBT-B1) r&#xE9;capitule ligne tpl1 endog&#xE8;ne d&#x26;#39;expression endoth&#xE9;liale aqp1a. Parce que actuellement les lignes de reporter tr&#xE8;s peu de faire la diff&#xE9;rence entre art&#xE9;riels et veineux des cellules endoth&#xE9;liales, l&#x26;#39;Et (GBT-B1) tpl1 la lign&#xE9;e transg&#xE9;nique et la caract&#xE9;risation du profil d&#x26;#39;expression aqp1a sera utile pour de futures &#xE9;tudes de la diff&#xE9;renciation endoth&#xE9;liale et art&#xE9;rio-veineuse.

Le poisson z&#xE8;bre Pi&#xE8;ge Enhancer ligne r&#xE9;capitule la embryonnaire Aquaporin le mod&#xE8;le d&#x26;#39;expression dans 1a cellules endoth&#xE9;liales vasculaires

Aquaporin-1 (Aqp1) ist ein Wasser-Kanal-Protein, weithin in mikrovaskul&auml;re Endothelzellen und S&auml;ugetier-Tumorangiogenese in Verbindung gebracht. Jedoch hat Entwicklungsst&ouml;rungen Ausdrucksform noch nicht im Detail gepr&auml;gt. Ein Enhancer-Trap-Bildschirm wurde mit einen Tol2 abgeleitete GFP-Reporter in den Zebrafish Embryos durchgef&uuml;hrt. Ein muss Et (GBT-B1) tpl1 Linie wurde identifiziert, die Einf&uuml;gung der Reporter in der N&auml;he des aqp1a-Gens hat. Wir gekennzeichnet weitere Muster des embryonalen Ausdrucks dieser GFP-Reporter-Linie sowie der endogenen aqp1a. Endogene aqp1a und Reporter-GFP-Expression wurden auf die vaskul&auml;ren Endothelzellen innerhalb der dorsalen Aorta, kraniale, intersegmental und andere sekund&auml;re Schiffe beschr&auml;nkt, sondern Abwesenheit in die axiale ven&ouml;sen Gef&auml;&szlig;system. Dar&uuml;ber hinaus wurde die endogene aqp1a Ausdruck in beiden primitiven und endg&uuml;ltigen h&auml;matopoetischen Erythroid Vorl&auml;uferzellen sowie in der otogenes Vesikel, Schwimmblase, pneumatische Duct, Darm und eine Teilmenge von Nervenzellen in der Netzhaut und das Mittelhirn-Hinterhirn-Region beobachtet. Wir zeigen weitere gata1 und Etsrp/etv2 Funktion f&uuml;r h&auml;matopoetischen und endothelial aqp1a Ausdruck, bzw. ist erforderlich. Aqp1a Ausdruck beschr&auml;nkt sich auf endothelial und Erythroid Zellen w&auml;hrend der fr&uuml;hen Embryogenese. Die transgenen Et (GBT-B1) tpl1 Linie rekapituliert endogene endothelial aqp1a Ausdruck. Da derzeit sehr wenige Reporter-Linien zwischen arteriellen und ven&ouml;sen Endothelzellen, die Et (GBT-B1) zu unterscheiden, k&ouml;nnen tpl1 transgene Linie und Charakterisierung der aqp1a Muster des Ausdrucks werden f&uuml;r zuk&uuml;nftige Studien der endothelial und arterielle und ven&ouml;se Differenzierung hilfreich sein.

Zebrafisch-Enhancer-Trap-Linie rekapituliert embryonalen Aquaporin 1a Ausdrucksmuster in den vaskul&auml;ren endothelialen Zellen.

Acquaporina 1 (Aqp1) &egrave; una proteina di canale d&#39;acqua, ampiamente espressa nelle cellule endoteliali Microvascolari ed implicati nella angiogenesi tumorale dei mammiferi. Tuttavia, l&#39;espressione evolutiva &egrave; non ancora stato caratterizzato in grande dettaglio. Uno schermo di enhancer trap &egrave; stato eseguito utilizzando un reporter GFP Tol2-derivato in embrioni di zebrafish. Un Et inserzionale (GBT-B1) linea tpl1 fu identificato con inserimento di reporter in prossimit&agrave; del gene aqp1a. Abbiamo caratterizzato ulteriormente il modello di espressione embrionale di questa linea di reporter GFP, cos&igrave; come quella di aqp1a endogeni. Aqp1a endogeni sia espressione di GFP reporter sono stati limitati per le cellule endoteliali vascolari all&#39;interno dell&#39;aorta dorsale, intersegmentaria, craniale e altre navi secondarie, ma erano assenti nel sistema vascolare venoso assiale. Inoltre, espressione aqp1a endogeno &egrave; stata osservata in entrambi progenitori eritroidi hematopoietic primitiva e definitivo, cos&igrave; come nella vescicola otic, vescica natatoria, dotto pneumatico, intestino e un subset di neuroni all&#39;interno della retina e la regione del mesencefalo-hindbrain. Mostriamo ulteriormente che la funzione gata1 ed etsrp/etv2 &egrave; necessaria per aqp1a ematopoietiche ed endoteliali espressione, rispettivamente. Aqp1a espressione &egrave; limitato a endoteliali e le cellule eritroidi durante l&#39;embriogenesi precoce. L&#39;Et transgenici (GBT-B1) linea tpl1 ricapitola espressione endogena aqp1a endoteliale. Perch&eacute; attualmente pochissime righe reporter possono distinguere tra cellule endoteliali arteriose e venose, Et (GBT-B1) linea transgenica tpl1 e caratterizzazione del modello di espressione aqp1a sar&agrave; utile per gli studi futuri di differenziazione endoteliale e arterioso-venoso.

Linea di zebrafish enhancer trap ricapitola aquaporina embrionale 1a modello di espressione in cellule endoteliali vascolari.

&#x30A2;&#x30AF;&#x30A2;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;1&#xFF08;AQP1&#xFF09;&#x306F;&#x6C34;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5E83;&#x304F;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x5F0F;&#x306F;&#x307E;&#x3060;&#x8A73;&#x7D30;&#x306B;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x753B;&#x9762;&#x304C;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;Tol2&#x306E;&#x7531;&#x6765;&#x306E;GFP&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x633F;&#x5165;&#x6027;&#x306E;Et&#xFF08;GBT-B1&#xFF09;tpl1&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;aqp1a&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8FD1;&#x508D;&#x306B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x80DA;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;GFP&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;aqp1a&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;aqp1a&#x3068;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;GFP&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x3001;&#x8133;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x9593;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5BB9;&#x5668;&#x3001;&#x80CC;&#x5074;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5185;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9650;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x9759;&#x8108;&#x8840;&#x7BA1;&#x7CFB;&#x306B;&#x306F;&#x5B58;&#x5728;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;aqp1a&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30DF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x3068;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x306A;&#x9020;&#x8840;&#x8D64;&#x8840;&#x7403;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x8033;&#x80DE;&#x3001;&#x6C34;&#x6CF3;&#x8180;&#x80F1;&#x3001;&#x7A7A;&#x6C17;&#x30C0;&#x30AF;&#x30C8;&#x3001;&#x8178;&#x3001;&#x7DB2;&#x819C;&#x3068;&#x4E2D;&#x8133;&#x5F8C;&#x8133;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;GATA1&#x3068;etsrp/etv2&#x95A2;&#x6570;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x3001;&#x9020;&#x8840;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x76AE;aqp1a&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Aqp1a&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x6642;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x8D64;&#x82BD;&#x7403;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;ET&#xFF08;GBT-B1&#xFF09;tpl1&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x53CD;&#x5FA9;&#x3059;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;aqp1a&#x5F0F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5C11;&#x6570;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x52D5;&#x8108;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9759;&#x8108;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x3001;aqp1a&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;ET&#xFF08;GBT-B1&#xFF09;tpl1&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5185;&#x76AE;&#x3001;&#x52D5;&#x8108;&#xB7;&#x9759;&#x8108;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3002;

&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3059;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x80DA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30A2;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3;1a&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;

Aquaporin 1 (Aqp1)&#xC740; &#xBB3C; &#xCC44;&#xB110; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, microvascular &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xACE0; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC885;&#xC591; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC544;&#xC9C1; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC544;&#xC8FC; &#xC790;&#xC138;&#xD558;&#xAC8C;. &#xC99D;&#xAC15; &#xD2B8;&#xB7A9; &#xD654;&#xBA74; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Tol2 &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; GFP &#xAE30;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xD589; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Insertional &#xC678; (GBT B1) tpl1 &#xB77C;&#xC778; aqp1a &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xAE30;&#xC790; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354;&#xC774; GFP &#xAE30;&#xC790; &#xC120;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC0DD; aqp1a&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xB4F1; &#xCABD; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5;, &#xB450;&#xAC1C;&#xACE8;, &#xAC1C;&#xCD95; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xBCF4;&#xC870; &#xC120;&#xBC15; &#xB0B4; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC81C;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACB0; &#xC11D; &#xD588;&#xB2E4; &#xC0DD; aqp1a &#xBC0F; &#xAE30;&#xC790; GFP &#xC2DD; &#xCD95; &#xC815; &#xB9E5; &#xD608;&#xAD00;&#xC5D0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0DD; aqp1a &#xC2DD; &#xBAA8;&#xB450; &#xC6D0;&#xC2DC;&#xC640; &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; &#xC870; &#xD608; erythroid progenitors &#xBE44;&#xB86F;&#xD574; otic &#xAE30;, &#xC218;&#xC601; &#xBC29;&#xAD11;, &#xACF5; &#xC555; &#xB355;&#xD2B8;, &#xC18C;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBC0F; midbrain hindbrain &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAC01;&#xAC01; gata1 &#xBC0F; etsrp/etv2 &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xC870; &#xD608;&#xACFC; &#xB0B4; &#xD53C; aqp1a &#xC2DD;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Aqp1a &#xB0B4; &#xD53C; &#xC81C;&#xD55C;&#xB294; &#xACE0; &#xCD08;&#xAE30; embryogenesis &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; erythroid. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC678; (GBT B1) tpl1 &#xC120; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC0DD; &#xB0B4; &#xD53C; aqp1a &#xC2DD;. &#xD604;&#xC7AC; &#xAC70;&#xC758; &#xAE30;&#xC790; &#xC120; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xBC0F; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB3D9;&#xBD80; &#xD45C;&#xC900;&#xC2DC; (GBT B1) &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD6C;&#xBD84;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; tpl1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778;&#xACFC; aqp1a &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xB3D9;&#xB9E5; &#xC815; &#xB9E5; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBD84;&#xD654;&#xC758; &#xBBF8;&#xB798; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish &#xC99D;&#xAC15; &#xD2B8;&#xB7A9; &#xB77C;&#xC778; &#xBC30;&#xC544; aquaporin 1a &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Acuaporina 1 (AQP1) es una prote&#xED;na del canal de agua, expresada ampliamente en las c&#xE9;lulas endoteliales microvasculares e implicados en la angiog&#xE9;nesis tumoral mam&#xED;feros. Sin embargo, su expresi&#xF3;n del desarrollo todav&#xED;a no se ha caracterizado en gran detalle. Una pantalla de trampa potenciador se realiz&#xF3; con un reportero GFP Tol2 derivado de embriones de pez cebra. Una inserci&#xF3;n Et (GBT-B1) de la l&#xED;nea tpl1 se identific&#xF3; que tiene la inserci&#xF3;n reportero en la vecindad del gen aqp1a. Se caracteriza adem&#xE1;s el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n embrionaria de esta l&#xED;nea reportero GFP, as&#xED; como la de aqp1a end&#xF3;geno. Tanto aqp1a end&#xF3;geno y la expresi&#xF3;n de GFP reportero se limita a las c&#xE9;lulas del endotelio vascular en la aorta dorsal, vasos secundarios craneales, intersegmental y de otro tipo, pero estuvieron ausentes en la vasculatura venosa axial. Adem&#xE1;s, la expresi&#xF3;n end&#xF3;gena aqp1a se observ&#xF3; en ambos progenitores eritroides primitivos y definitiva hematopoy&#xE9;ticas, as&#xED; como en la ves&#xED;cula &#xF3;tica, la vejiga natatoria, neum&#xE1;tica conducto, intestino y un subconjunto de neuronas dentro de la retina y la regi&#xF3;n del mesenc&#xE9;falo-rombenc&#xE9;falo. Adem&#xE1;s, muestran que GATA1 y la funci&#xF3;n etsrp/etv2 se requiere para la expresi&#xF3;n aqp1a hematopoy&#xE9;ticas y endoteliales, respectivamente. Aqp1a expresi&#xF3;n est&#xE1; restringida a las c&#xE9;lulas endoteliales y eritroides durante la embriog&#xE9;nesis temprana. El Et transg&#xE9;nico (GBT-B1) tpl1 recapitula la l&#xED;nea de expresi&#xF3;n end&#xF3;gena aqp1a endotelial. Debido a que actualmente las l&#xED;neas de reportero muy pocas personas pueden diferenciar entre las c&#xE9;lulas endoteliales arteriales y venosas, el ET (GBT-B1) tpl1 l&#xED;nea transg&#xE9;nica y la caracterizaci&#xF3;n del patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n aqp1a ser&#xE1; &#xFA;til para futuros estudios de diferenciaci&#xF3;n endotelial venosa y arterial.

El pez cebra trampa Enhancer recapitula la l&#xED;nea embrionaria Aquaporin 1a patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n en las c&#xE9;lulas endoteliales

&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6210;&#x5FC3;&#x7BA1;&#x3001; &#x5305;&#x56F4;&#x5FC3;&#x808C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7684;&#x5185;&#x5C42;&#x3002;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8C03;&#x8282;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x89C4;&#x8303;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x5F88;&#x5927;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x672A;&#x77E5;&#x4E0E;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8D77;&#x6E90;&#x4ECD;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x8FA9;&#x8BBA;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x8C03;&#x8282;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; NFATc1 &#x540C;&#x6E90;&#x662F;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8BC1;&#x660E; Hedgehog (Hh) &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; VegfA &#x6216;&#x51F9;&#x53E3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x65E9;&#x671F;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;Hh cyclopamine &#x5904;&#x7406;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x6807;&#x8BB0;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E27;&#x5931;&#x3002;&#x540C;&#x65F6;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x97F3;&#x901F;&#x523A;&#x732C;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#xFF0C;&#x5618; twhh &#x6216; Hh co-receptor &#x548C; smoothened (smo) &#x5BFC;&#x81F4;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;Hh &#x4FE1;&#x53F7;&#x6291;&#x5236;&#x9020;&#x6210;&#x65E9;&#x5728; 10-&#x4F53;&#x8282;&#x821E;&#x53F0;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; Hh &#x4FE1;&#x53F7;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x89C4;&#x8303;&#x7684;&#x6700;&#x65E9;&#x9636;&#x6BB5;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D; (fn1) &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x663E;&#x793A;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;&#x4E2D;&#x8FC1;&#x79FB;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x89C4;&#x8303;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6216;&#x540C;&#x65F6;&#x6E90;&#x6027;&#x810A;&#x7D22; Hh &#x7684;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x662F;&#x89C4;&#x8303;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x9A6C;&#x8D5B;&#x514B;&#x4F7F;&#x7528; Smo &#x51FD;&#x6570;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x4E3B;&#x5728;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x663E;&#x793A;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8BA4;&#x4E3A; Hh &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x89C4;&#x8303;&#x4E0E;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

&#x523A;&#x732C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3002;

Endocardial cells form the inner endothelial layer of the heart tube, surrounded by the myocardium. Signaling pathways that regulate endocardial cell specification and differentiation are largely unknown and the origin of endocardial progenitors is still being debated. To study pathways that regulate endocardial differentiation in a zebrafish model system, we isolated zebrafish NFATc1 homolog which is expressed in endocardial but not vascular endothelial cells. We further demonstrate that Hedgehog (Hh) but not VegfA or Notch signaling is required for early endocardial morphogenesis. Pharmacological inhibition of Hh signaling with cyclopamine treatment resulted in nearly complete loss of the endocardial marker expression. Simultaneous knockdown of the two zebrafish sonic hedgehog homologs, shh and twhh or Hh co-receptor smoothened (smo) resulted in similar defects in endocardial morphogenesis. Inhibition of Hh signaling resulted in the loss of fibronectin (fn1) expression in the presumptive endocardial progenitors as early as the 10-somite stage which suggests that Hh signaling is required for the earliest stages of endocardial specification. We further show that the endoderm plays a critical role in migration but not specification or differentiation of the endocardial progenitors while notochord-derived Hh is a likely source for the specification and differentiation signal. Mosaic analysis using cell transplantation shows that Smo function is required cell-autonomously within endocardial progenitor cells. Our results argue that Hh provides a critical signal to induce the specification and differentiation of endocardial progenitors.

Hedgehog signaling is required for differentiation of endocardial progenitors in zebrafish.

Cellules endocavitaires former la couche int&#xE9;rieure du tube endoth&#xE9;lial coeur, entour&#xE9; par le myocarde. Voies de signalisation qui r&#xE9;gulent la sp&#xE9;cification des cellules endocardiques et la diff&#xE9;renciation sont en grande partie inconnue et l&#x26;#39;origine des prog&#xE9;niteurs endocardiques est encore en discussion. Pour &#xE9;tudier les voies qui r&#xE9;gulent la diff&#xE9;renciation endocardique dans un syst&#xE8;me mod&#xE8;le de poisson z&#xE8;bre, nous avons isol&#xE9; le poisson-z&#xE8;bre NFATc1 homologue qui est exprim&#xE9;e dans l&#x26;#39;endocarde, mais pas les cellules endoth&#xE9;liales vasculaires. Nous avons en outre d&#xE9;montrer que Hedgehog (Hh), mais pas VEGFA ou la signalisation Notch est n&#xE9;cessaire pour la morphogen&#xE8;se endocardique pr&#xE9;coce. Inhibition pharmacologique de la signalisation Hh avec un traitement cyclopamine a entra&#xEE;n&#xE9; la perte presque compl&#xE8;te de l&#x26;#39;expression marqueur endocardique. Knockdown simultan&#xE9;e des deux homologues de poisson z&#xE8;bre Sonic Hedgehog, Shh et twhh ou Hh co-r&#xE9;cepteur smoothened (SMO) a entra&#xEE;n&#xE9; des d&#xE9;fauts similaires dans la morphogen&#xE8;se endocardique. L&#x26;#39;inhibition de la signalisation Hh a entra&#xEE;n&#xE9; la perte de la fibronectine (FN1) expression dans les prog&#xE9;niteurs pr&#xE9;sum&#xE9;s endocardiques d&#xE8;s le stade 10 somites qui sugg&#xE8;re que Hh signalisation est n&#xE9;cessaire pour les premi&#xE8;res &#xE9;tapes de sp&#xE9;cification endocardique. Nous montrons en outre que l&#x26;#39;endoderme joue un r&#xF4;le essentiel dans la migration, mais pas les sp&#xE9;cifications ou la diff&#xE9;renciation des prog&#xE9;niteurs endocardiques tout notocorde d&#xE9;riv&#xE9; Hh est une source probable de la sp&#xE9;cification et le signal de diff&#xE9;renciation. Analyse mosa&#xEF;que en utilisant la transplantation de cellules montre que la fonction Smo est n&#xE9;cessaire de cellules-autonome au sein des cellules prog&#xE9;nitrices endocardiques. Nos r&#xE9;sultats soutiennent que Hh fournit un signal essentiel pour induire la sp&#xE9;cification et la diff&#xE9;renciation des prog&#xE9;niteurs endocardiques.

De signalisation Hedgehog est requise pour la diff&#xE9;renciation des prog&#xE9;niteurs endocardiques chez le poisson z&#xE8;bre

Endokard Zellen bilden die endotheliale Innenschicht der Herz-R&ouml;hre, umgeben von Myokard. Signalisieren, dass die Bahnen, die Endokard Zelle Spezifikation und Differenzierung zu regulieren sind weitgehend unbekannt und die Herkunft der Endokard Vorl&auml;uferzellen wird noch debattiert. Um Wege zu erforschen, die Endokard Differenzierung im Zebrafisch Modellsystem zu regulieren, isoliert wir Zebrafisch NFATc1 Homolog dem Endokard aber nicht vaskul&auml;ren endothelialen Zellen ausgedr&uuml;ckt wird. Weiter zeigen wir, dass Igel (Hh) aber nicht VegfA oder Notch Signalisierung wird ben&ouml;tigt f&uuml;r die fr&uuml;hen Endokard Morphogenese. Pharmakologische Hemmung der Hh Signalisierung mit Cyclopamine Behandlung ergab fast v&ouml;lligen Verlust des Ausdrucks Endokard Markierung. Gleichzeitige Niederschlag von die zwei Zebrafisch sonic Hedgehog UCP1, shh und Twhh oder Hh Co-receptor gespachtelten (Smo) ergab &auml;hnliche Defekte bei Endokard Morphogenese. Hemmung der Signalisierung Hh f&uuml;hrte zum Verlust von Fibronektin (fn1) Ausdruck in die vermutliche Endokard Vorl&auml;ufer bereits in der 10-Somiten was darauf hindeutet, dass Hh Signalisierung f&uuml;r den fr&uuml;hesten Stadien der Endokard Spezifikation erforderlich ist. Weiter zeigen wir, dass die Endodermis eine wichtige Rolle in Migration aber keine Spezifikation spielt oder Differenzierung der Endokard Vorreiter bei der Chorda dorsalis abgeleitete Hh wahrscheinlich Quelle f&uuml;r die Spezifikation und Differenzierung-Signal ist. Mosaik-Analyse mit Zelle Transplantation zeigt, dass Smo-Funktion Zelle-autonom innerhalb Endokard Vorl&auml;uferzellen erforderlich ist. Unsere Ergebnisse argumentieren, dass Hh eine kritische Signal stellt an die Spezifikation und die Differenzierung der Endokard Vorl&auml;uferzellen induzieren.

Igel Signalisierung ist erforderlich zur Differenzierung von Endokard Vorl&auml;uferzellen im Zebrafisch.

Endocardica cellule formano lo strato endoteliale interno del tubo cuore, circondato da miocardio. Signaling pathways che regolano la differenziazione ed endocardica cella specifica sono in gran parte sconosciuto e l&#39;origine dei progenitori dell&#39;endocardio si sta ancora discutendo. Per studiare i percorsi che regolano la differenziazione dell&#39;endocardio in un sistema modello zebrafish, abbiamo isolato zebrafish dell&#39;omologo di NFATc1 che &egrave; espressa nelle cellule endoteliali endocardica ma non vascolare. Noi dimostrare ulteriormente che Hedgehog (Hh), ma non VegfA o tacca di segnalazione &egrave; necessaria per primi morfogenesi endocardica. Inibizione farmacologica di segnalazione con trattamento cyclopamine Hh ha provocato perdita quasi completa dell&#39;espressione marcatore endocardica. Simultanea atterramento dei due omologhi di sonic hedgehog zebrafish, shh e twhh o Hh corecettore lisciato (smo) portato a simili difetti nella morfogenesi dell&#39;endocardio. Inibizione di segnalazione Hh ha provocato la perdita di fibronectina (fn1) espressione in progenitori endocardio presunti pi&ugrave; presto la fase 10-somite che suggerisce che Hh segnalazione &egrave; necessaria per i primi stadi della specifica dell&#39;endocardio. Mostriamo ulteriormente che l&#39;endoderma svolge un ruolo critico nella migrazione ma non specifica o differenziazione dei progenitori endocardio mentre Hh notocorda-derivato &egrave; una probabile fonte del segnale specifica e differenziazione. Mosaico analisi utilizzando cellule trapianto spettacoli che Smo funzione &egrave; necessaria cella-autonomamente all&#39;interno di cellule progenitrici endocardica. I nostri risultati sostengono che Hh fornisce un segnale critico per indurre la specificazione e la differenziazione dei progenitori dell&#39;endocardio.

Hedgehog signaling &egrave; necessaria per la differenziazione dei progenitori endocardica nello zebrafish.

&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x306B;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x5FC3;&#x7BA1;&#x306E;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x5185;&#x76AE;&#x5C64;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3084;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x306A;&#x70B9;&#x304C;&#x591A;&#x3044;&#x3068;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8D77;&#x6E90;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x3060;&#x8B70;&#x8AD6;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3067;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x304C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;NFATc1&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#xFF08;Hh&#xFF09;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;VegfA&#x307E;&#x305F;&#x306F;Notch&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x65E9;&#x671F;&#x306B;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30B7;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D1;&#x30DF;&#x30F3;&#x6CBB;&#x7642;Hh&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30BD;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B6;&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x306E;&#x540C;&#x65CF;&#x4F53;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;SHH&#x3068;twhh&#x307E;&#x305F;&#x306F;HH&#x5171;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x5E73;&#x6ED1;&#x5316;&#xFF08;SMO&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Hh&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;Hh&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x4ED5;&#x69D8;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;10&#x4F53;&#x7BC0;&#x6BB5;&#x968E;&#x65E9;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x63A8;&#x5B9A;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;FN1&#xFF09;&#x5F0F;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3084;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x304C;&#x810A;&#x7D22;&#x7531;&#x6765;&#x306E;HH&#x306F;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3068;&#x5DEE;&#x5225;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x690D;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;SMO&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x81EA;&#x5F8B;&#x7684;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;HH&#x306F;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x524D;&#x99C6;&#x4F53;&#x306E;&#x4ED5;&#x69D8;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x4E3B;&#x5F35;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30D8;&#x30C3;&#x30B8;&#x30DB;&#x30C3;&#x30B0;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5FC3;&#x5185;&#x819C;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;

Endocardial &#xC140; &#xC2EC;&#xADFC;&#xC73C;&#xB85C; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC5EC; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC758; &#xC548;&#xCABD; &#xB0B4; &#xD53C; &#xCE35;&#xC744; &#xD615;&#xC131;. Endocardial &#xC140; &#xC0AC;&#xC591; &#xBC0F; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xB85C; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6; &#xBC0F; endocardial progenitors &#xCD9C;&#xCC98; &#xC2E0;&#xD638; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xB17C;&#xC758; &#xB418; &#xACE0;&#xB294;. Zebrafish &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; endocardial &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xB85C; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; endocardial &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xB2E8;&#xC704;&#xB85C; zebrafish NFATc1 &#xCCB4; &#xACE0;&#xB9BD;. &#xB354; &#xD5E4; &#xC9C0; &#xD638; &#xADF8; (Hh) &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; VegfA &#xB610;&#xB294; &#xB178;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xCD08;&#xAE30; endocardial morphogenesis&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cyclopamine &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; &#xC2E0;&#xD638; Hh&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC800;&#xD574; endocardial &#xB9C8;&#xCEE4; &#xC2DD;&#xC758; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC190;&#xC2E4; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xB450; zebrafish &#xC18C;&#xB2C9; &#xD5E4; &#xC9C0; &#xD638; &#xADF8; homologs&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC26C;&#xC774; &#xC787; &#xD558; &#xACE0; twhh &#xB610;&#xB294; Hh co-receptor endocardial morphogenesis &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; smoothened (smo). Hh &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xC800;&#xD574; fibronectin (fn1) &#xC2DD; &#xCD94;&#xC815; endocardial progenitors&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xBA74; Hh &#xC2E0;&#xD638;&#xB294; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; endocardial &#xC0AC;&#xC591;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xC548; 10 somite &#xBB34;&#xB300;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB354; endoderm &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC0AC;&#xC591;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; notochord&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; Hh &#xB3D9;&#xC548; endocardial progenitors&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB294; &#xC0AC;&#xC591;&#xACFC; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Smo &#xD568;&#xC218;&#xB294; endocardial &#xC870;&#xC0C1; &#xC140; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; &#xC790;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xC2DD; &#xC1FC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB17C;&#xC7C1; Hh &#xC0AC;&#xC591;&#xACFC; endocardial progenitors&#xC758; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACE0;&#xC2B4;&#xB3C4;&#xCE58; &#xC2E0;&#xD638; zebrafish endocardial progenitors&#xC758; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

Endocardial c&#xE9;lulas formar la capa interna del tubo endotelial coraz&#xF3;n, rodeado por el miocardio. V&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n que regulan la diferenciaci&#xF3;n celular endoc&#xE1;rdica y la diferenciaci&#xF3;n son en gran parte desconocida y el origen de los progenitores endoc&#xE1;rdicos se sigue sometido a debate. Para el estudio de las v&#xED;as que regulan la diferenciaci&#xF3;n del endocardio en un sistema modelo de pez cebra, se aisl&#xF3; el pez cebra hom&#xF3;logo NFATc1 que se expresa en las c&#xE9;lulas endoteliales vasculares, pero no endoc&#xE1;rdicos. Adem&#xE1;s, demuestran que Hedgehog (Hh), pero no VEGF o la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de Notch se requiere para la morfog&#xE9;nesis temprana del endocardio. La inhibici&#xF3;n farmacol&#xF3;gica de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Hh con el tratamiento con ciclopamina como resultado la p&#xE9;rdida casi completa de la expresi&#xF3;n de los marcadores del endocardio. Ca&#xED;da simult&#xE1;nea de los dos hom&#xF3;logos de pez cebra Sonic Hedgehog, shh, y twhh o HH co-receptor smoothened (SMO) dio lugar a defectos similares en la morfog&#xE9;nesis del endocardio. La inhibici&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Hh resultado en la p&#xE9;rdida de la fibronectina (FN1) expresi&#xF3;n en los progenitores como presuntos endoc&#xE1;rdicos desde la etapa de 10 somite lo que sugiere que la se&#xF1;alizaci&#xF3;n Hh es necesaria para las etapas m&#xE1;s tempranas de la especificaci&#xF3;n del endocardio. Adem&#xE1;s, muestran que el endodermo desempe&#xF1;a un papel fundamental en la migraci&#xF3;n pero no la especificaci&#xF3;n o la diferenciaci&#xF3;n de los progenitores, mientras que endoc&#xE1;rdicos notocorda derivado de Hh es una fuente probable de la especificaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n de la se&#xF1;al. El an&#xE1;lisis del mosaico utilizando el trasplante de c&#xE9;lulas que muestra la funci&#xF3;n SMO es requerido por c&#xE9;lulas de forma aut&#xF3;noma dentro de las c&#xE9;lulas progenitoras endoc&#xE1;rdicos. Nuestros resultados sostienen que Hh proporciona una se&#xF1;al cr&#xED;tica para inducir la especificaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n de los progenitores endoc&#xE1;rdicos.

Kira Rehn

Division of Developmental Biology

Cincinnati Children's Hospital Medical Center

Single Cell Fate Mapping in Zebrafish

Kira Rehn

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Cincinnati Children's Hospital Medical Center

Single Cell Fate Mapping in Zebrafish

Division of Developmental Biology