Centrifugation is a separation technique based on differences in density or size. It is commonly used to separate solids from aqueous interferents. During centrifugation, the sample is placed in centrifugation tubes and spun at high angular velocity, which allows centrifugal force to act differentially on the different densities or masses of the components. After spinning, the supernatant liquid is decanted. Depending on the specific application, either the pellet or the supernatant is retained for further purification. Sometimes, the supernatant is subjected to additional rounds of centrifugation and downstream processing.

In principle, centrifugation separates particles based on differences in size and density. Larger particles tend to be heavier and tend to sediment first. If particles are similar in size, denser particles tend to sediment first due to higher sedimentation rates. In practice, complex mixtures such as cell lysates may not yield distinctly separated particles despite differences in density or size. To address this issue, researchers have devised a variety of centrifugation techniques.

The simplest centrifugation technique is differential centrifugation. Here, the particles to be separated have similar densities, so larger particles will sediment at lower speeds. The speed is increased stepwise until the target particles are isolated.

A more sophisticated method is equilibrium density gradient centrifugation. In this technique, the analyte is placed in a solution with a preformed density gradient or a solution that forms a density gradient during centrifugation. Here, the density of the solution increases towards the bottom of the tube, so the sedimentation rate of each analyte component decreases as it moves toward the bottom. When a component's density equals that of the solution, the centrifugal force acting on it becomes zero, and sedimentation ceases. As a result, each component is isolated in a layer equal to its density.

Etiketler
CentrifugationSeparation TechniqueDensitySizeCentrifugal ForceSupernatantPelletPurificationDifferential CentrifugationEquilibrium Density Gradient CentrifugationSedimentation RatesCell LysatesDensity Gradient

Bölümden 4:

article

Now Playing

4.4 : Centrifugation

Ayırma Yöntemlerine Giriş

1.8K Görüntüleme Sayısı

article

4.1 : Maddenin halleri ve faz değişimleri

Ayırma Yöntemlerine Giriş

789 Görüntüleme Sayısı

article

4.2 : Damıtma: Buhar-Sıvı Dengesi

Ayırma Yöntemlerine Giriş

2.4K Görüntüleme Sayısı

article

4.3 : Filtrasyon

Ayırma Yöntemlerine Giriş

614 Görüntüleme Sayısı

article

4.5 : Sublime

Ayırma Yöntemlerine Giriş

628 Görüntüleme Sayısı

article

4.6 : Yeniden kristalleşme: katı-çözelti dengesi

Ayırma Yöntemlerine Giriş

865 Görüntüleme Sayısı

article

4.7 : Kristal Büyümesi: Kristalleşme İlkeleri

Ayırma Yöntemlerine Giriş

1.1K Görüntüleme Sayısı

article

4.8 : Yağış ve Birlikte Yağış

Ayırma Yöntemlerine Giriş

1.4K Görüntüleme Sayısı

article

4.9 : Koagülasyon

Ayırma Yöntemlerine Giriş

189 Görüntüleme Sayısı

article

4.10 : Elektrodepozisyon

Ayırma Yöntemlerine Giriş

270 Görüntüleme Sayısı

article

4.11 : Çıkarma: Bölme ve Dağıtım Katsayıları

Ayırma Yöntemlerine Giriş

1.3K Görüntüleme Sayısı

article

4.12 : Ekstraksiyon: pH'ın etkileri

Ayırma Yöntemlerine Giriş

264 Görüntüleme Sayısı

article

4.13 : Ekstraksiyon: Gelişmiş Yöntemler

Ayırma Yöntemlerine Giriş

248 Görüntüleme Sayısı

article

4.14 : Kromatografi: Giriş

Ayırma Yöntemlerine Giriş

2.3K Görüntüleme Sayısı

article

4.15 : Diyaliz

Ayırma Yöntemlerine Giriş

463 Görüntüleme Sayısı

See More

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır