Rotorod Rat Yürüyüş Kalitatif Analiz için bir yöntem olarak kullanımı

Özet

Rotorod test hemi-Parkinson analog sıçanlarda yürüme hareketi motor durumunu değerlendirmek için kullanılır.

Özet

Hayvanlar dönen bir tambur üzerinde yürümek rotorod testi, yaygın laboratuar kemirgenler motor durumunu değerlendirmek için kullanılır. Performans, bir hayvan, davul hızının bir fonksiyonu olarak davul üzerinde kalmasını süresi ile ölçülür. Burada görev yürüme hareketleri nitel yönleri hakkında bilgi zengin bir kaynak sağladığını bildirmektedir. Hareketleri sabit bir yerde yapılır çünkü, onlar hemen yüksek hızda video kayıt yöntemleri kullanılarak incelenir olabilir. Bu çalışmada (nigrostriatal dopamin tüketmek için, sağ nigrostriatal paket içine enjeksiyon, 6 hydroxydopamine (6-OHDA) tarafından üretilen hemi-Parkinson analog sıçan, yürüme hareketleri niteliksel değişiklikler ortaya çıkarmak için rotorod potansiyelini incelemek için yapıldı DA .) Gün cerrahi sonrası başlayan ve onlar rotorod üzerinde yürürken daha sonra periyodik olarak önümüzdeki iki ay içinde, fareler, ön, yan ve arka kez çekildi. Davranış kare-kare video kayıtları tekrar analiz edildi. Davranış adım Derecelendirme ölçekleri, hemi-Parkinson sıçanlarda kronik kendi duruş ve DA-tükenmesi kontralateral kol ve bacaklarda kullanımı engelli olduğunu belirtti. Sadece postural ve hareket anormallikleri görüntülenmez kontralateral bacaklarda, ipsilateral bacaklarda daha tahrik başlatılması ve sürdürülmesi daha katıldı. Bu bulgular, sadece tek taraflı DA tükenmesi ikincil yeni açıkları ortaya çıkarmak değil, aynı zamanda rotorod hareketin nitel analiz için güçlü bir araç sağlayabilir olduğunu göstermektedir.

Protokol

Rotorod yürüme aparatı

Rotorod dönen bir silindir, 4 cm, çapı 35 cm yerden sabit ve şeffaf pleksiglas çevrili idi. Rotorod silindir çekiş kolaylaştırır dokulu kauçuk kaplama, kaplıydı. Cihazların katında hayvanların düştü sırasında yaralanmaları önlemek için köpük tabakası ile kaplıydı. Küçük bir elektrikli motor, lastik bir bant ile rotorod açmak için güç sağladı. Rotorod her 5 saniyede bir kez döndürmek için kuruldu

Video kayıtları ve kinematik

1000 ikinci bir deklanşör hızı kullanarak yüksek hızlı bir dijital video kamera, hayvanlar film kullanıldı. Hayvan rotorod yürürken ön, yan ve arka görünümleri çekildi. Iki kol Nikon, MII soğuk ışık kaynağı ve fiber optik ışıkların bir set kayıt sırasında yeterli ışık sağlamak için kullanılmıştır. Sony DSR 20 DV CAM güverte bantlar kullanarak kare kare incelendi. Video kareleri bir frame grabber ve Macintosh bilgisayar kullanarak ele geçirildi.

Test prosedürü ve analiz

6 OHDA ve kontrolü sıçanlarda yürüme hareketleri arasındaki farklılıkları değerlendirmek için, ameliyat sonrası gün 15 video kayıtları - 30 (lezyon herhangi bir kurtarma büyük ölçüde tamamlanmış olması beklenebilir sonra), iki bağımsız tarafından incelenmiştir deneysel koşullara kör gözlemciler. 6-OHDA nigrostriatal lezyon, sol ön ve arka bacaklarda kalıcı bozuklukları sağ hemisfer sağlandı. Bir derecelendirme ölçeği oranı sıçan 'duruş ve ön ayakları atlama hareketleri için geliştirilmiştir (Whishaw ve ark, 2003). Step beş bileşen değerlendirildi:

1. duruş, duruş derece tambur üzerinde sıçan konumunu inceleyerek tarafından yapıldı;
2. asansör ve açıklaması, pençe davul kaldırıldı adım döngüsünün kısmı;
3. sıçan ileriye taşındı uzuv tambur üzerinde gerçekleştirildi adım döngüsü kısmını taşımak;
4. avans, uzuv tambur ile temas yeniden uzatıldı erişemeyeceği bir kısmını;
5. yerleştirme, pençe davul yerleştirilmiş olduğu.

Aşağıdaki kriterlere normal bir hareketi tanımlamak için kullanılmıştır:

• Postür: sıçan vücut kaldırdı kafa ile davul üzerine odaklı.
• Asansör ve sürüm: davul yüzeyinden pençe yükselterek omuz, dirsek ve el bileği fleksiyonda.
• Carry: pençe yüzeyi üzerinde davul düzenlenen basamak gevşek fleksiyonda, haneli ipuçları vücut orta hat üzerinde yoğunlaşmış. Avans: ekstremite semiflexed bir pozisyondan basamak uzun ve açık pozisyon hareketli ileri uzatılır.
• Yerleştirme: bacak, omuz, dirsek, ve bilek uzatılmış olan ve rakamları farenin yaklaşık merkezinde bulunan haneli 2 (orta hat haneli ikinci), ileri ve tambur yüzeyine pençe yerleştirmek için açıldı . gövde.

Her hareketi 3-noktalı bir ölçekte Oy: 1 = / hareket / hareketi biraz anormal ortaya çıkan bir kontrol sıçan, 0.5 benziyordu ve 0 = / hareketi açıkça anormal (Whishaw ve ark, 2003). Bu derecelendirme ölçeği, sonra beş adım postoperatif günlerde her sıçan hareketleri 1, 3, 5, 7, 9, ve 15 değerlendirmek için kullanılmıştır. Beş önlemler puanlar, her gün her bir sıçan için ortalama gün tekrarlanan bir tedbir olarak bir ANOVA sonuçlar tabi.

6-OHDA ve kontrolü sıçanlarda yürüme rotorod Genel Bakış

Niteliksel hareket analizi için postoperatif test oturumları için hareket derecelendirme ölçeği uygulandı. Test oturumları sırasında, 6-OHDA lezyon grubu F (1,8) = 33.2, p <0.001 kontrol grubuna göre anlamlı ölçüde daha düşük puanlar aldı, ama Test Günü anlamlı bir etkisi vardı, ne de önemli bir Grubu Test Gün etkileşim. Step puanlar daha sonra bir değişken (kontrol sıçanlar için, sol, sağ pençe vs pençe 6-OHDA sıçanlarda lezyona ipsilateral ön ayakları karşısında lezyona kontralateral ön ayakları) olarak ön ayakları ile ayrı ayrı analiz edildi. Ön ayakları, F (1,40) = 15.8, p <0.01 önemli bir etkisi vardı ve ön ayakları Grup, F (1,40) = 15.0, p <0.01 önemli bir etkileşim vardı. Takip t-testi, 6-OHDA grubunun kontralateral-lezyon ön ayakları ipsilateral lezyon ön ayakları veya farklı değildi kontrol sıçanlarda, ön ayakları göre anlamlı derecede düşük puanlar aldığını göstermiştir. Hareketin bileşenleri, 6-OHDA grup tarafından elde edilen yoksul puanları, duruş önlemler katkıda belirlemek için6-OHDA grup ipsilateral ve kontralateral ön ayakları adım döngüsü bileşenleri tek tek kontrol sıçanların elde edilen değerler ile karşılaştırılmıştır. 6-OHDA grup duruş ve kontralateral bacak tarafından yapılan atlama bileşenleri tüm farklıydı, ama ipsilateral ekstremite bileşenlerinin hiçbiri (p <0.05).

Niteliksel ve tanımlayıcı farklılıklar kontrolü ve 6-OHDA sıçanlarda duruş

Bir kontrol sıçan, baş yatay konumda düzenlenen ve destekleyici ön ayakları ve arka bacaklarda, destekleyici bir kemer oluşturan davul binme. 6-OHDA sıçanlar genellikle kontrol sıçanların ipsilateral bacaklarda veya kol ve bacaklarda meydana gelen daha drum yüzeyine daha yukarıda engelli birbirlerine daha yakın konumlandırılmış ön ayakları (izleyici bakan) ve (bkz. kontrol sıçan video ile baş aşağı yürüdü Skor duruş için "1" ve "0" puan ile 6-OHDA lezyon hayvan). Tipik olarak, duruş anormallik, bir fare kafası göreli konumunu bir bakışta görülebilir.

Ön ayakları step

Kontrol dizisi, adım ön ayakları omuz, dirsek ve el bileği esneme kaldırdı. Bacak kaldırdı olduğu gibi, rakamlar gevşek fleksiyonda ve uzuv tambur yüzeyi üzerinde kaldırdı. Ekstremite gelişmiş, omuz, dirsek ve el bileği uzatılır ve yerleştirilir rakam genişletilmiş ve açık. Kontrol sıçanlara kıyasla, lezyon uzuv kontralateral DA-tükenmiş sıçanlarda tüm bileşenlerinin genlik zayıflatılmış. Uzuv, daha sonra davul bültenleri az kaldırdı ve daha kısa bir mesafe kontrolü ön ayakları daha ileri düzeydedir. Buna ek olarak, bacak kaldırıldığında, basamak daha fleksiyonda ve bacak yerleştirilir, kontrol sıçan göre daha az basamak genişletilmiş ve açılır. Davul üst ulaştığında kontrolü ön ayakları kaldırdı, bilek pençe ileri yukarı kaldırın ve fleksiyonda ve bilek, bacak gelişmeler olarak genişletilmiştir. Buna karşılık, 6-OHDA sıçan lezyon ön ayakları kontralateral tambur hareketi ile daha kaudal yapılan ve bu nedenle hala uzatılmış bilek ile daha sonraki sürümlerde. Bilek fleksiyon pasif olarak görünür ve tambur hareketi ile basamak geriye doğru yapılır ve ön ayakları öne çıkarılıyor, pençe ve önkol drum yüzeyine kapalı açıkça kaldırdı değildir oluşur. Bir kontrol sıçan ön ayakları iyice ileriye doğru uzatır ve rakamları ekstremite ilerledikçe açık. Bacak yerleştirilir, 4, 3, ve 2 basamak art arda takip, tambur ilk yüzey ile iletişime rakam 5, arpej hareketi ile konur. Buna karşılık, 6-OHDA sıçan bacak kaldırdı ve uzun süreli, daha az basamak daha genişletilmiş ve bir 'tokat' ile hemen hemen aynı anda davul yüzey teması. Video "1" puan, ağırlıklı olarak "0" olarak skorlandı 6-OHDA lezyon hayvan ön ayakları adım hareketleri kontrol hayvan ön ayakları adım hareketleri gösterir.

Adım Hind ekstremite

6-OHDA sıçanların kontralateral-lezyon arka bacaklarda engelli de vardı. Kontrolü arka bacak geriye doğru hareket ettikçe, dönüm davul karşı itmek için görünür ve öyle olduğu gibi, ayak parmakları dışa doğru döndürün. Bacak ileriye doğru hareket ettikçe, ayağı dışa doğru salladı. 6-OHDA sıçan arka bacak davul rotasyon ile doğrudan geriye doğru hareket eder ve eğer bir şey, biraz içe döner. Bacak ileriye doğru hareket ettikçe, ayak doğrudan ileriye yapılır. Kontrol sıçan salıncaklar dışa ve gelişmiş olarak, ayak, ayak bileği daha yüksek tutulur, ayak ve ayak uzatmak. Ilk davul ve kilo kontrolü sıçan yerleştirme, ayak 5 temaslarında yüzey, avuç içi ve ayak parmakları arasında dağıtılır. Buna karşılık, taşıma sırasında 6-OHDA sıçan ayak parmakları fleksiyonda ve yerleştirme arpej bir hareket olmadan yapılır. Kontrol sıçan ayak parmakları, ayak 5 ilk kaldırdı ve ayak 1 son kaldırdı ters arpej desen serbest bırakılır. Bu hareket, ayak bileği, taşıma hareketi sırasında duruş fleksiyondayken devam ederken, 6-OHDA lezyon rat eksikti. Yine 6-OHDA sıçan önceden hareketleri, az exorotated uzuv, zayıflatılmış az kaldırdı ve kontrol sıçan daha az gelişmiş. Kontrolü sıçan, ayak parmakları yer olarak, onlar sıçan vücut için 5 puan yanal göreceli gibi ayak genişletilmiş ve açılır. Toe 5 kontak ilk olarak, sıçan, ayak uçları ağırlık desteklediği gibi kalan ayak parmakları ardından davul. Ayak taşınan 6-OHDA sıçan, ayak parmakları biraz fleksiyonda, ayak parmakları, ayak bileğine kadar yatay düşük, ayak ayak tambur üzerine yerleştirilir az açılışı var. Adım uzunluğu da kontrol sıçanların biraz daha kısadır. Devam arasındaki farklılıkları ölçmek içinrol ve 6-OHDA arka bacak hareketleri, asansör ve serbest bileşenleri, terfi taşıma ve yerleştirme 3-noktalı bir ölçekte değerlendirildi, ön ayakları. Bu önlemler, cerrahi sonrası 20 günde yapılan video kayıtları yapılmış, ve üç adım döngüsü, her bir sıçan için değerlendirildi. Önemli Grup farklılıkları, F (1,8) = 47.6, p <0.001 vardı. Bileşenleri takip t-testi, 6-OHDA sıçanların bileşenleri daha kontrol sıçanların tüm bileşenlerinin önemli ölçüde daha yüksek puan aldıklarını gösterdi. Video "1" olarak skorlandı kontrol hayvan arka bacak adım hareketleri gösterir. Video gösterilen 6-OHDA hareketleri adım Hind bacak ağırlıklı olarak "0" puan ile değerlendirildi.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Bu çalışmanın amacı, kemirgen lokomosyon beceri rotorod testi duruş niteliksel inceleme, ön ayakları adımlama ve sinir sistemi yaralı sıçanlarda arka bacak adım için kullanılabilir olup olmadığını incelemektir. Analizi için, tek taraflı DA tükenişleri ve kontrol sıçanlarda fareler, ön, yan ve arka görünümleri kaydedilen video. Duruş ve ön ayakları hareketleri bir derecelendirme ölçeği adım hareketleri kronik cerrahi sonrası engelli olduğunu belirtti. Bacak hareketlerinin incelenmesi DA-tükenmiş sıça...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.