Method Article
Araştırma kemirgenler ile güvenli ve insanca çalışma taşıma ve bağlama yöntemleri bir temel yetkinlik gerektirir. Bu makalede, güvenli işlemek ve etkili fare ve sıçanlara bileşikler yönetmek için gerekli temel ilkeleri sunacak.
Güvenli ve etkili fare ve sıçanlarda dizginlemek için güçlü olmak araştırma yapmanın önemli bir parçasıdır. Fareler ve sıçanlar ile güvenle ve insanca çalışma taşıma ve bağlama yöntemleri temel bir yetkinlik gerektirir. Bu makalede, güvenli hayvanların işlemek için gerekli temel ilkeleri sunacak. Özel olarak tasarlanmış emniyet nesneleri Tek elle, iki elle, ve kısıtlama izah edilecektir. Genellikle, hayvanlar araştırma ya da kullanım içindir bir başka kısmı farelerde ve sıçanlarda için bileşiklerin etkili uygulanmasıdır. Muhtemel uygulama yollarının çok sayıda (sadece hayvanın boyutu ve organlar ile sınırlandırılmıştır) olmasına rağmen, pek çok araştırma içinde düzenli olarak kullanılmaz. Bu video, damar içi, kas içi, deri altından, ağızdan sonda ile dahil olmak üzere, daha çok yaygın yolları, çeşitli gösterecektir. Bu makalenin amacı, temel emniyet ve madde uygulama yolları için bu teknikleri ile yabancı bir izleyicinin ortaya koymaktır. Bu videoSizin tesiste eğitim-eller gerekli yerine gelmez, ama bu eğitimi güçlendirmek ve desteklemek içindir.
1. Güvenli Tutma ve Hayvanların Nazik Taşıma Deneysel Prosedürler önemli bir parçasıdır
2. Manuel Restraint
3. Bileşik İdaresi Yöntemleri
4. Temsilcisi Sonuçlar
Hayvanların doğru ele alındığında, hayvan ve işleyicisi hem de minimum stresle vardır. Eylemciler ısırıldı veya çizilmiş ve hayvanların insanca ve yetkin işlenir alamadım. Bileşikler dokuya en az zarar ile ve mümkün olduğu kadar küçük hayvan için rahatsızlık gibi uygun yolla uygulanır.
Araştırmacılar küçük bir doldurulmuş hayvan ile çalışan, hayvanlar taşıma için yeni iseniz yararlı olabilir. Bu tür Koken sıçan gibi bazı teknikler kullanılabilir hayvan simülatörler da vardır. Birçok araştırmacı için, hayvanlar üzerinde çalışmaya başlamadan önce iğne ve şırınga ile aşinalık kazanmak için küçük bir şans var. Bir iğne ve şırınga Temsilcisi parçaları Şekil 1A ve 1B gösterilmektedir. İlk kez hayvanlara enjekte etmeden önce,hayvanları ile çalışmaya başlamadan önce enjekte uygulamaya yararlı olabilir. Örneğin 28 ve 30 g kadar çok ince iğneler, hasar kolaydır. Çok kullanımlı şişelerden maddelerin çekilmesi halinde, enjeksiyon için daha küçük çaplı bir iğne ile değiştirmek sonra bu amaç için daha büyük bir iğne kullanımı ile. Bir burred iğne Şekil 1C görülür. Bu tür elle kullanılan iğneler recapping olarak değil iğne ile çalışırken Temel güvenlik önlemleri alınmalıdır. Şekil 1D kullanımda bir iğne recapper gösterir. Bu kan bir iğne aracılığıyla basıldığında görülen hemoliz olmadan bir şırınga, örneğin, ekspres kan iğneleri kaldırmak gerekir araştırmacılar için değerli olabilir.
Şekil 2 ve 3 enjeksiyon için hedef gösteren, karın içi enjeksiyon ve kuyruk yapısı için tipik görülecek göstermektedir. Şekil 4, gavaj iğnelerin uygun boyutlandırma örnekleri sağlar. Gavaj iğneler bir ağzından ulaşmalıdırson kaburga altında sağa nimal.
Şekil 1. A) İğne ve B) şırınga parçalar etiketli. C) bir çoklu kullanım şişeye iğnenin tekrar yerleştirilmesi nedeniyle iğne üzerinde Burr. Kullanımı D) İğne recapper.
Şekil 2. Ventral karın Çeyrekte. Sadece tercihen alt iki kadran, sağ alt kadranda enjekte.
Şekil 3. Kesitinde kuyruk şematik, kemikli ve tendenous yapılara arter ve venler arasındaki ilişkiyi gösteren.
Şekil 4,. Gavaj iğne sıçanlarda boyutlandırma. A) Gavaj iğne çok long. B) Uygun boyutlarda gavaj iğnesi. C) çok kısa Gavaj iğne ölçümü, D) uygun gavaj iğne boyutunu belirlemek için son kaburga için palpasyonunu.
Fare | Sıçan | |||
Rota | Tavsiye edilen hacim | Iğne Önerilen kalınlığı ve uzunluğu | Tavsiye edilen hacim | Iğne Önerilen kalınlığı ve uzunluğu |
İntranazal 1 | 5-25 ul | N / A | 5-25 ul | N / A |
İntramüsküler 1,2 | 0.00005 ml / g | <23 g, 0,5-0,75 | 0.1 ml / kg ' | <21 g, 0.5 içinde 0.75 |
Intraperitoneal 1,2 | 0.02 ml / g | <21 g, 0,75 ile 1 | 10 ml / kg ' | <21 g, 0,75 ile 1 |
Subkutan 1,2 | 0.01 ml / g | <22 g, 0,5 ile 1 | 5 ml / kg ' | <22 g, 0,5 ile 1 |
İntradermal 1 | 0.05-0.1 ml | De <26 g, 0.5 | 0.05-0.1 ml | De <26 g, 0.5 |
İntravenöz 1,2 | 0.005 ml / g -0.025 ml / g * | <25 g, 0,75-1 | 5 ml/kg-20 ml / kg * | <23 g, 0,75-1 |
Oral gavaj 1,2 | 0.01 ml / g | 20-22 g besleme iğnesi | 5-10 ml / kg ' | 16-20 g besleme iğnesi |
* İlk sayısı yaklaşık 1 dakika içinde intravenöz bolus olarak verilen hacmidir. İkinci hacmi 5-10 dakika içinde yavaş infüzyon şeklinde verilebilir hacmidir.
Tablo 1. Önerilen doz ve farelerde ve sıçanlarda bileşik yönetiminin çeşitli rotalar için iğne boyutları.
Bu protokol araştırmacı imkan sağlanan eğitim eller tamamlayacak yapısındaki hayvan işleme ve madde yönetimine bir giriş olarak görülmelidir. Kullanılacak ve maddenin uygulama yolları araştırma protokolü veya etik kurul protokolü yazılırken deney tasarımında dikkate alınması gereken kısıtlama anlamına gelir.
Hayvan ilgili prosedürler Eğitim araştırma başarısı için hayati önem taşımaktadır. En deneyleri gerçekleştirmek için, hayvanlar araştırma personeli tarafından ele alınması gerekir ve daha iyi hayvan taşıma, daha az hayvansal 3 vurguladı. Nazik insan temas için hayvanların Accustoming stresi azaltmak ve hayvanların daha uysal araştırma konuları 4,5 yapabilirsiniz. Taşıma stres araştırmaları 6 bazı türleri etkilediği gösterilmiştir ve bu da diğerleri etkileyen mümkün olmuştur. Kemirgenler Restraint (geçici bir dikkatli ile gerçekleştirilebilir, ama hakimiyet olmalıdırkavrama kemirgen ve işleyicisi yaralanmasına neden muhtemeldir) ve pratik olan en kısa süre olmalıdır. Tutucu yöntemler genellikle hayvanın boyutuna bağlı olarak seçilir ya da erişim talep edilmektedir. Örneğin, mümkün olmasına rağmen, berduş tarafından erişkin sıçanlarda işleme, genellikle işleyicisi deneyimsiz, özellikle sıçan güçlü direnç ile karşılanır. Elle bir fare veya sıçan Holding kuyruk damarları erişimi zor ve bir emniyet cihazı sık hala mümkün olduğu kadar hayvan tutmak için seçilir yapabilirsiniz.
Araştırmacılar hayvanların ele alındığında, genellikle daha fazla çalışma için bir bileşik veya biyolojik yönetmek için arıyorlar. Maddelerin Tatbikat yolu, belirli bir deney için emme, biyoyararlılık ve uygunluk etkileyebilir. Çeşitli yolları ile aşinalık araştırma için mümkün olan en iyi şekilde kendi madde yönetmek yeteneği ile araştırmacılar vermelidir. Bir maddenin hızlı emilim teşvik Örneğin, bir rotaAraştırmacı yavaş etkili şekilde madde yönetmek istiyorsa, böyle bir intravenöz veya intraperitoneal olarak kullanılmamalıdır. Hacim, ekipman, ve çözünen için bu teknikler ve bazı hususlar arasında Yeni incelemeler Turner ve diğerleri tarafından iki belge de bulunabilir. 1.7
Maddelerin laboratuar fareleri uygulanacaksa zaman, dikkate ekipman ve maddenin (Tablo 1'de) hacmi uygun büyüklükte verilmelidir. Uygun büyüklükte olmayan ekipman ya da büyük hacimli rahatsızlık, yaralanma ya da hayvan ölümüne neden olabilir. Genellikle, parenteral madde araştırma hedefleri (yani, bakteriyel çalışmaları) bu imkansız kılacak durumlar dışında, sterildir. Bileşikler ve biyolojik hayvan üzerinde en az etkiye sahip olan bir çözünmüş madde ya da araç içinde olmalıdır. Bir fizyolojik pH (7.3 -7.4), özellikle deri altı, kas içi, ve intrape için, genellikle iyi kabul görmüş birritoneal yolları. Bu yoldan uygulanan maddeler Non-fizyolojik pH seviyeleri ağrı veya nekroz ve doku hasarına neden olabilir. PH daha geniş aralıkları intragastrik ve intravenöz yolları 7 ile tolere edilir. Küçük Kemirgenlerde başka bir önemli husus oda sıcaklığında sıvılarının büyük miktarlar verildiği takdirde soğuk olasılığıdır. Sıvıların, özellikle bir hasta destek hayvan, intravenöz veya intraperitonal edilmektedir, bunlar vücut sıcaklığında (37 ° C) kadar ısıtıldı olmalıdır.
Bu protokol tartışılan uygulama yolları usta basit ve genel anestezi gerektirmeyen, genellikle birçok araştırma programlarında kullanılan olanlardır. Kullanım yolları neredeyse sonsuz bir çeşitlilik intrakranial, intratekal, epidural, intratrakeal, intraosseöz ve adına intraartiküler ama birkaç dahil olmak üzere, ancak mümkündür. İdarenin bu özel rotalar Eğitim insanların wh aranmalıdıro rota ve iyi sonuçlar ile geniş deneyime sahip.
Intratrakeal damlatma göre yöntem; Kemirgenlerde, intranazal yol genellikle daha fazla "doğal" yoluyla akciğerlere ortaya maddeleri incelemek için kullanılır. Fare ve sıçanlar hatta bilinçli hayvanlarda, zor değil bu yüzden onları sıvı çok az miktarda nefes inducing, zorunlu burun solunumu vardır. Burun mukozası kan damarları, bazı maddelerin burun içi uygulama ile iyi beslenmesi nedeniyle intravenöz benzer olabilir. O emilimini tehlikeye atabilir gibi bu güzergah, ancak rinitli hayvanlarda tavsiye edilmez. Intranazal yoldan büyük miktarlarda yönetmek için girişimler nefes darlığı ya da hayvan boğulması neden olabilir.
Kas içine enjeksiyon maddelerin hızlı emilim sağlar. İntramüsküler enjeksiyonlar fareler ve küçük boyutu ve buna bağlı küçük kaslar nedeniyle farelerde zor olabilir. Bunlar, arka bacak gerçekleştirilirs. Siyatik sinirin hasar potansiyeli nedeniyle, kuadriseps femoris seçim kastır.
Subkütan, intradermal deri yollarının her ikisi de dahil olsa da, subkutan vs deri yerleştirilen maddelerin biyo-sağlanabilirlik arasındaki farklılıklar vardır. Subkutan uygulama genellikle intravenöz veya intraperitoneal gibi diğer rotaları, daha yavaş emilimini, bir "biriktirme" rota olarak kabul edilir. Intradermal uygulama maddeler tipik olarak, bu gibi adjuvant antijen karışımları gibi imüno-uyarıcı maddenin çok küçük miktarlarda kullanılmaktadır. Her iki durumda da, uygulanan maddenin fizyolojik pH ve tahriş edici olmayan olmalıdır. Bu kemirgen kısıtlayıcı için yaygın olarak kullanılan bir yer olduğu için, intradermal ya da deri altı enjeksiyonlar, ense da yapılmamalıdır.
İntravenöz ve intraperitoneal genellikle kemirgenlerde eşdeğer olarak kabul edilir. Doz İntravenöz yolları daha r verinBileşiklerin apid alımı, ancak, periton içi uygulama oral uygulama için yaklaşık 8 eşdeğer olarak kabul edilmelidir ise. Yanlış tamponlu eğer ağrıya neden olabilir gibi Bakımı bileşikler uygulanan intraperitoneal ile alınmalıdır. Kemirgenlerde intravenöz bolus uygulama ortak yol kuyruk damarlar üzerinden gerçekleşir. Bir maddenin kronik intravenöz olarak arzu edilirse, venöz veya arteriyel kanül implantasyonu dikkate alınmalıdır. Intravenöz maddeler aseptik teslim edilmeli ve intravenöz yönetmek için güvenli olduğu gösterilmelidir. Örneğin, hemoliz, tromboz veya vaskülit indükleyebilir maddelerin intravenöz için uygun değildir.
Mide içi ya da oral gavaj yol, genellikle insanlarda bir ortak yol dozaj taklit etmek için kullanılır. Yiyecek veya su ve oral uygulama ile karşılaştırıldığında, aynı zamanda maddelerin tam doz için izin verir. Bileşikleriningavaj yoluyla uygulanmıştır hayvanın beslenen / aç karnına yanı sıra, bileşik ya da biyolojik çözünen ya da araca göre değişir. Gavaj veya besleme iğneleri kullanılan hayvan için uygun büyüklükte olmalıdır, ve gavaj yoluyla tek kullanımlık iğneler pratik olmadığı takdirde, hayvanlar arasında temizlenmesi gerekir. Gavaj kaynaklanan yaralanmalar nadir değildir ve akciğer veya mide veya yemek borusu yırtılması halinde madde birikimi bulunmaktadır. Eğitim tecrübeli bir parti tarafından denetlenir ve uyanık hayvanlara gavaj önce anestezi altındaki hayvanlarda (ötenazi olacaktır), sonra ilk ötenazi hayvanlar üzerinde yapılmalıdır çalışılır. Uyanık hayvanlar üzerinde ilk gavaj girişimleri prosedürü ters giderse yaralanmasına neden olmaz gibi tuzlu gibi ortalama büyüklükte hayvan ve bir maddenin küçük miktarlarda, içermelidir. Hayvan yakından gavaj ve ötenazi gerekirse sonra, mavi, kanama veya aşırı salivasyon dönüm gibi nefes nefese gibi sıkıntı belirtileri, değerlendirilmesi gerekir. Eğer euthanasia hayvan gavaj prosedürün neden başarısız olduğunu belirlemek için necropsied olmalıdır, gereklidir.
Yazarlar Charles Nehri çalışanlarıdır.
Burada sunulan araştırma Charles River tarafından desteklenmiştir.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Reaktif Adı | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
Iğneler | Çeşitli | Çeşitli | İğneler kalınlığı ve uzunluğu hem de satılmaktadır. Sipariş vermeden önce iki kontrol edin. |
Şırınga | Çeşitli | Çeşitli | Her zaman tatbik edilecek hacmi için uygun boyutu seçin. |
DecapiCones | Braintree Bilimsel | DC-200, DCL-120, MDC-200 | Fare ve sıçan boyutlarda mevcuttur. |
Kemirgen süzgeç | Harvard Apparatus, Braintree Bilimsel, Plas-Labs, diğerleri | Net pleksiglas, ayarlanabilir plastik, ve fareler ve sıçanlar için ölçekli mevcuttur. | |
50 ml konik bir tüp | Çeşitli | & Nbsp; | |
Besleme iğneleri | VWR, Popper ve Oğullar | Çeşitli | Iğne ve yukarıda tarif edildiği gibi hayvanlar için uzunluk sığdır. Her ikisi de tek ve yeniden besleme iğneler vardır. |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır