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연구 설치류와 함께 안전하고 편안하게 일하는 것은 처리 및 규제 방법의 핵심 역량이 필요합니다. 이 문서는 안전하게 처리하고 효과적으로 마우스 및 쥐에 화합물을 관리하는 데 필요한 기본 원칙을 제시합니다.
안전하고 효과적으로 마우스 및 쥐를 제지 할 수 있다는 것은 연구의 중요한 부분입니다. 마우스 및 쥐와 함께 자신과 편안하게 작업하면 처리 및 규제 방법의 기본 역량이 필요합니다. 이 문서는 안전하게 동물을 처리하는 데 필요한 기본 원칙을 제시합니다. 특별히 고안된 구속 개체 한 손, 두 손, 그리고 구속이 설명됩니다. 종종, 동물의 연구 또는 시험 사용의 또 다른 부분은 마우스 및 쥐에 대한 화합물의 효과적인 관리이다. 가능한 관리 노선의 큰 번호 (만 동물의 크기와 기관에 의해 제한)가 있지만, 대부분은 연구에 정기적으로 사용되지 않습니다. 이 동영상은 정맥 주사, 근육, 피하, 그리고 구두 gavage 등의보다 일반적인 경로, 여러을 설명합니다. 이 문서의 목적은 기본 구속 및 약물 관리 노선에 이러한 기술에 익숙 뷰어를 노출하는 것입니다. 이 동영상은귀하의 시설에서 교육에 - 손 필수를 대체하지 않습니다,하지만 그건 교육을 보강하고 보완하기위한 것입니다.
1. 안전 규제 및 동물의 부드러운 처리를 실험 절차의 핵심
2. 수동 구속
3. 복합 관리 방법
4. 대표 결과
동물이 제대로 처리하면, 동물과 핸들러 모두에게 스트레스가 최소가 있습니다. 처리기가 물이나 긁힌, 동물이 편안하고 competently 처리되지 않습니다. 화합물은 조직에 최소한의 손상과 가능한 동물에 거의 불편 함과 올바른 경로를 통해 관리됩니다.
조사는 작은 동물 인형과 협력, 동물을 취급에 새로하는 경우 도움이 될 수 있습니다. 예를 Koken 쥐와 같은 일부 기술을 사용할 수 동물 시뮬레이터도 있습니다. 많은 조사를 들어, 동물과 작업하기 전에 바늘과 주사기와 친숙를 얻을 수있는 약간의 기회가 있습니다. 바늘과 주사기의 대표 부분은 그림 1A와 1B에 설명되어 있습니다. 처음으로 동물을 주입하기 전에동물들과 작업하기 전에 주입을 연습하는 데 유용 할 수 있습니다. 등 28 30g로 매우 고급 바늘은 손상 용이합니다. 다중 이용 병의 물질을 인출하는 경우, 분사에 대한 작은 게이지 바늘로 교체 한 후 그 목적을 위해 더 큰 바늘을 사용합니다. burred 바늘이 그림 1C에서 볼 수 있습니다. 이러한 손으로 사용하는 바늘을 recapping하지는 않습니다 바늘과 작업 할 때 기본 안전 조치를 취한다. 그림 1D 사용에 바늘 recapper을 보여줍니다. 이 혈액은 바늘을 통해 푸시 할 때 볼 수있는 용혈없이 주사기에서 예를 들어,로 고속 혈액을 주사 바늘을 제거해야 수사에 도움이 될 수 있습니다.
도 2 및도 3은 분사에 대한 목표를 설명, intraabdominal 주입 및 꼬리의 전형적인 구조 랜드 마크를 보여줍니다. 그림 4는 gavage 바늘의 적절한 크기 조정의 예를 제공합니다. Gavage 바늘이의 입에서 도달해야합니다마지막 늑골 아래 오른쪽에 nimal.
그림 1. A) 니들 및 B) 주사기 부품이 표시. C) 다중 사용 약병에 바늘의 반복 배치로 인한 바늘에 버. 사용 D) 니들 recapper.
그림 2. 복부 복부의 당장 자리. 만 우선적으로 하단이 당장 자리, 오른쪽 하단 사분면에 주입.
그림 3. 크로스 섹션의 꼬리 도식, 뼈 및 tendenous 구조에 동맥과 정맥의 관계를 설명.
그림 4. Gavage 바늘은 쥐 크기 조절. A) Gavage 바늘이 너무 경도g. B) 적절히 크기 gavage 바늘. C) 너무 짧 Gavage 바늘 측정, D)은 적절한 gavage 바늘 크기를 결정하는 마지막 갈비 촉진.
마우스 | 쥐 | |||
길 | 추천 볼륨 | 바늘의 추천 게이지 및 길이 | 추천 볼륨 | 바늘의 추천 게이지 및 길이 |
비강 1 | 5-25 μl | N / A | 5-25 μl | N / A |
근육의 1,2 | 0.00005 ML / g | <23g에서 0.5-0.75 | 0.1 ML / kg | <21g, 0.5 0.75에의 |
Intraperitoneal 1,2 | 0.02 ML / g | <21g, 0.75-1에서 | 10 ML / kg | <21g, 0.75-1에서 |
피하 1,2 | 0.01 ML / g | <22g에서 0.5-1 | 5 ML / kg | <22g에서 0.5-1 |
Intradermal 1 | 0.05-0.1 ML | 의 <26g, 0.5 | 0.05-0.1 ML | 의 <26g, 0.5 |
정맥 1,2 | 0.005 ML / g -0.025 ML / g * | 의 <25g, 0.75-1 | 5 ml/kg-20 ML / kg * | <23g에서 0.75-1 |
구강 gavage 1,2 | 0.01 ML / g | 20~22g 먹이 바늘 | 5-10 ML / kg | 16-20g 먹이 바늘 |
* 첫 번째 숫자는 약 일분 이상의 정맥 bolus로 주어진 볼륨입니다. 두 번째 볼륨 5-10 분 동안 천천히 주입으로 제공 될 수 있습니다 볼륨입니다.
표 1. 권장 복용량과 쥐와 쥐의 화합물 관리의 다양한 경로를 바늘 크기.
이 프로토콜은 연구원의 시설에서 제공 교육 실습을 보완하기위한 동물 처리 및 약물 관리에 대한 소개로 볼 수 있습니다. 사용되며 물질 관리의 노선이 연구 프로토콜이나 윤리위원회 프로토콜이 작성 될 때 실험 설계에 고려하고해야 덮개의 의미합니다.
동물 관련 절차에 교육 연구의 성공에 매우 중요합니다. 대부분의 실험을 수행하려면, 동물 연구 직원이 처리해야하며, 더 나은 동물 취급, 적은 동물 3 강조했다. 부드러운 인간의 연락처로 동물을 Accustoming은 스트레스를 줄이고 동물보다 다루기 쉬운 연구 과목 4,5 할 수 있습니다. 취급 스트레스는 연구 6 몇 가지 유형에 영향을 표시하고이뿐만 아니라 다른 사람에 영향을 미칠 수 있습니다 수 있습니다되었습니다. 설치류의 규제는 (예정주의를 달성하지만, 회사 처리해야그립은 쥐와 핸들러에 부상을 초래할 가능성이)와 실제 짧은 기간 동안해야합니다. 구속 방법은 일반적으로 동물의 크기에 따라 선택하거나 접근을 모색하고 있습니다. 예를 들어, 가능하지만, 안녕하세요,이 성인 쥐를 취급, 자주 처리기가 미숙 특히 경우, 쥐에 의해 강한 저항을 만났 있습니다. 손으로 마우스 또는 쥐를 개최하는 것은 꼬리 정맥에 액세스 어렵고 구속 장치가 자주 여전히 가능한 동물을 유지하기로 선택되어 있는지 확인 할 수 있습니다.
연구자들이 동물을 처리 할 때, 그들은 종종 더 연구를위한 화합물이나 생물학을 관리하기 위해 찾고 있습니다. 물질 관리의 경로는 특정 실험을 흡수, 생체 이용률, 그리고 적합성에 영향을 미칠 수 있습니다. 다양한 노선과 친숙 함은 연구 최선의 방법으로 자신의 물질을 관리 할 수있는 능력을 가진 연구자를 제공해야합니다. 물질의 빠른 흡수를 촉진 예를 들어, 경로연구자가 느린 - 연기 방식으로 물질을 관리하기를 원하는 경우, 이러한 정맥 주사 또는 intraperitoneal으로 사용할 수 없습니다. 볼륨, 장비 및 용질에 대해 이러한 기술과 고려 사항 중 일부 최근 리뷰가 터너 외하여 두 논문에서 찾을 수 있습니다. 1,7는
물질이 실험실 동물에 투여 할 때마다, 고려는 장비와 물질 (표 1에서 설명)의 볼륨의 적절한 크기로 제공해야합니다. 잘못 크기의 장비 나 대형 볼륨 불편, 부상, 또는 동물의 죽음에 발생할 수 있습니다. 일반적으로, parenterally 실시 물질 연구 목표 (즉, 세균 연구)이 불가능 할 곳을 제외하고 무균 수 있습니다. 화합물 및 생체은 동물에 최소 영향을 미칩니다 용질 또는 차량에 있어야합니다. physiologic 산도 (7.3 -7.4)은 특히 피하, 근육, 그리고 intrape를 들어, 일반적으로 잘 인정합니다ritoneal 노선. 이 노선에서 관리 물질의 비 physiologic pH의 수준은 통증이나 괴사 및 조직 손상 될 수 있습니다. 산도의 넓은 범위는 intragastric와 정맥 주사 경로를 7 용납되어 있습니다. 작은 설치류에서 또 다른 중요한 고려 사항은 룸 온도 유체의 대량이 주어진 경우 냉각의 가능성입니다. 유체 특히 병 동물의 지원에 intravenously 또는 intraperitoneally 관리되는 경우는 체온 (37 ° C)로 예열해야합니다.
이 프로토콜에서 설명하는 관리의 노선 마스터 간단하고, 일반적으로 마취를 필요로하지 않는, 일반적으로 많은 연구 프로그램에 사용되는 것들입니다. 행정의 노선의 거의 무한한 다양성 intracranial, intrathecal, 경막 외, intratracheal, intraosseous, 그리고 이름 intraarticular하지만 몇을 포함하지만, 가능합니다. 행정 이러한 전문 노선의 교육 사람들 대체에서 추구되어야한다O는 경로 좋은 결과와 다양한 경험을 보유하고 있습니다.
intratracheal 기지보다 방법, 동물에서 비강 경로는 일반적으로 더 "자연"을 통해 폐에 도입 물질을 연구하는 데 사용됩니다. 마우스 및 쥐도 의식 동물에 어렵지 않습니다 그래서 그들이 유체의 매우 작은 양을 흡입하는 유도, 고맙게 여기게 코 - breathers 있습니다. 코 점막은 혈관, 일부 물질의 비강 관리를 잘 공급되어 있기 때문에 정맥 주사 관리와 유사 할 수 있습니다. 그 흡수를 손상 할 수 있으므로이 경로는하지만, 비염과 동물에 권장하지 않습니다. 비강 경로에서 큰 볼륨을 관리하려고 시도 dyspnea 또는 동물의 구조 될 수 있습니다.
근육 주사는 물질의 빠른 흡수를 제공합니다. 근육 주사는 쥐와 작은 크기와 상응 작은 근육으로 인해 마우스에 도전 할 수 있습니다. 그들은 뒷다리로 진행됩니다s입니다. 좌골 신경의 손상의 가능성으로 인해, quadriceps femoris의 선택의 근육이다.
피하와 intradermal 노선 모두 피부를 포함하지만, subcutis 대 피부에 배치 물질의 생체 이용률의 차이가 있습니다. 피하 관리는 종종 이러한 정맥 주사 또는 intraperitoneal 등 다른 노선보다 느린 흡수와 함께 "증착"루트로 간주됩니다. Intradermal 관리는 일반적으로 물질 등 도움이되는 - 항원 혼합물로 immunostimulatory 물질의 아주 작은 볼륨에 사용됩니다. 두 경우 모두, 관리 물질 physiologic pH의 비 자극을해야합니다. 이 쥐을 억제를위한 일반적으로 사용되는 사이트이기 때문에 Intradermal 또는 피하 주사는, 안녕하세요,에 수행 할 수 없습니다.
정맥 주사와 intraperitoneal 관리는 종종 동물의 상응하는 것으로 간주됩니다. 주입의 정맥 주사 경로를 더 연구를 제공합니다화합물의 apid 이해하지만, intraperitoneal 관리가 구강 관리 8 대략적으로 비슷 고려되어야하는 동안. 부적절한 버퍼 경우는 통증의 원인이 될 수 있습니다으로 케어 화합물 관리 intraperitoneally로 촬영해야합니다. 설치류의 정맥 bolus 관리의 일반적인 경로는 꼬리 정맥을 통해 수 있습니다. 물질의 만성 정맥 주사 관리가 필요하다면, 정맥 또는 동맥 캐 뉼러의 주입이 고려되어야한다. intravenously 관리 물질 무균 전달해야하며 intravenously 관리하는 안전 표시 될 것입니다. 예를 들어, 용혈, 혈전증, 또는 vasculitis을 유도 할 수 있습니다 물질 정맥 주사 관리에 적합하지 않습니다.
intragastric 또는 구두 gavage 경로는 종종 인간의 일반적인 주입 경로를 모방하는 데 사용됩니다. 음식이나 물을 통해 구두 관리에 비해 또한 물질의 정확한 주입 할 수 있습니다. 화합물의 생체 이용율gavage를 통해 관리 동물의 먹이 / 공복 상태뿐만 아니라 화합물 또는 생물학적의 용질 또는 차량에 따라 달라집니다. Gavage 또는 수유 바늘이 사용되는 동물에 대한 적절한 크기이어야하고, 일회용 gavage 바늘이 실제하지 않은 경우, 동물 사이에 청소해야합니다. gavage로 인한 부상은 드문 일이 아니에요 있으며, 폐 또는 위 또는 식도의 파열에 물질의 증착이 포함되어 있습니다. 교육은 경험이 풍부한 자에 의해 감독과 깨어있는 동물 gavage 전에 anesthetized 동물 (euthanized 될 것이다)를 먼저 euthanized 동물에 수행되어야한다이 시도됩니다. 깨어있는 동물 최초의 gavage 시도는 프로 시저가 틀려서되면 부상을 입을되지 않는 생리 등의 평균 크기의 동물과 물질의 작은 볼륨을, 포함한다. 동물 밀접하게 gavage와 euthanized 필요한 경우 이후, 파랑, 출혈, 또는 초과 타액의 분비를 돌려 같은 웃음과 같은 고통의 흔적에 대한 평가해야합니다. 만약 euthanasia은 동물이 gavage 절차가 실패 이유를 확인 necropsied해야 필요합니다.
저자는 찰스 강 (Charles River)의 직원입니다.
여기에 제시된 연구는 찰스 강 (Charles River)에 의해 지원되었다.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
시약의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 코멘트 |
바늘 | 여러 | 여러 | 바늘이 게이지 및 길이 모두에서 판매하고 있습니다. 주문하기 전에 모두 확인하십시오. |
주사기 | 여러 | 여러 | 항상 관리 할 볼륨에 대해 적절한 크기를 선택합니다. |
DecapiCones | Braintree 과학 | DC-200, DCL-120, MDC-200 | 마우스 및 쥐 크기 사용할 수 있습니다. |
쥐 restrainer | 하버드 장치, Braintree 과학, Plas-랩, 다른 | 맑은 Plexiglas, 조정 플라스틱, 및 마우스 및 쥐에 대한 크기에서 사용할 수 있습니다. | |
50 ML 원뿔 관 | 여러 | 및주의SP; | |
수유 바늘 | VWR, Popper와 아들 | 여러 | 바늘 게이지하고 위에 설명 된대로 동물 길이를 맞추기. 모두 일회용과 재사용 먹이 바늘을 사용할 수 있습니다. |
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