Wharton Kanalı üzerinden Fare Submandibular Tükürük Bezi kanülasyonu

Özet

Wharton kanalı üzerinden fare submandibular tükürük bezi kanülasyonu için bir protokol açıklanmıştır. Bu deneme için, tripan mavi çözümü, bu tekniği etkin bir şekilde hedeflenen bezine infüzyonları dağıtımını nasıl göstermek için, bu yeni yaklaşımın güvenilirliğini ve tükürük bezlerinin rejenerasyonu için potansiyel bir klinik ilaç / hücre tedavisi olarak önermek için bir boyacı olarak kullanılır.

Özet

Şiddetli tükürük bezi hipofonksiyon Sjögren sendromu ve kanser tedavisi için baş ve boyun bölgelerinde tedavi ışınlama kim bu hastalarda sık görülür. Kserostomi (ağız kuruluğu), disfaji (çiğneme ve yutma engelliler için) gibi hastaların semptomları yaşıyor Her iki grup da, şiddetli diş çürükleri, değiştirilemez tat, oro-farengeal enfeksiyonlar (kandidiyazis), mukozit, ağrı ve rahatsızlık.

Rejeneratif tıp tükürük bezi hipo-fonksiyon tedavisi için yenilikçi bir yaklaşım RS Redman, E Mezey ve ark 2009 speküle: kök hücre fonksiyonları bozulmuş canlandırılması bezinin güçlü bir yöntem olarak doğrudan kanülasyonu tarafından yatırılır. organ. Muhtemelen, konak tükürük bezinin bir parçası olarak işlev glandüler hücrelerin içine geçirilen yabancı kök hücreler ayırt edecektir. Ayrıca, bu kanülasyon tekniği klinik gen transferi uygulaması için bir çare ve etkin bir dağıtım yöntemi.

Burada fare submandibular tükürük bezi, Wharton kanalı (Şekil 1) ile kanülasyon işlemi gerçekleştirmeden yer alan adımları göstermektedir. Bu deneyde, McGill Üniversitesinden hayvan kaynak merkezi temiz geleneksel koşullar altında tutulmuştur C3H fareler (Charles River, Montreal, QC, Kanada) kullanılmaktadır. Tüm deneyler Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmış ve Hayvan Bakım Kanada Konseyi kurallarına uygun olarak da ortaya konulmuştur.

Bu deneme için bir tripan mavi çözüm polietilen tüp içinde kaplı 29-gauge iğne ile insülin şırınga kullanarak Wharton kanalı açıklıktan bezi içine doluyor. Daha sonra, fare infüzyonları başarıyla bezi içine göç ettiğini göstermek için disseke edilir.

Protokol

1. Usul Açıklama

1. Subkutan enfüzyon hareket kesintiye tükürük salgıları önlemek için her fare ul 1, 0.5 mg / ml atropin sülfat monohidrat g / vücut ağırlığı (Kedi # 11330, Fluka, USA) enjekte edilir.
2. 100 mg / ml ketamin ve 20 mg / ml ksilizin (Phoenix Bilimsel, AR, Amerika Birleşik Devletleri) çözümü 1 g / ml vücut ağırlığının her fare narkoz enjekte periton içi (IP)
3. Ventral pozisyonda özel bir plastikten yapılmış platform üzerinde fare Yeri: Maksiller kesici diş, bir metal tel kilitli ve çene kesici dişler, ağzı açık tutmak için için elastik bir dize bağımlısı.
4. 0.58 mm çapında polietilen boru (Şekil 2 Kedi # 427.410, Becton Dickinson, MD, ABD) içine yerleştirilen 29-gauge iğne (Kedi # 600.145, Tyco Healthcare, MA, ABD) ile bir İnsülin şırınga kullanın. Polietilen tüp, 29-gauge iğne ucu üzerinde 5mm eklenir. Iğne Wharton kanalı içine polietilen tüp taşımak için katı bir kılavuz olarak kullanılır. Polietilen tüp kanal içinde 3-5 mm batırılır. Iğne kanal dışında kalırken, sadece polietilen tüp tükürük bezi kanalı girdiği unutmayın. 50ul süzülmüş% 0.4 tripan mavi boya solüsyonu (Cat # 15250 Gibco, ABD), Wharton kanalı, dil altında yer ile submandibular bezin içine enjekte edilir. Infüzyon şırınga piston üzerine pozitif basınç ile giderek teslim edilir, parmak içi sözlü infüzyon sonra infüzyon geri akışı önlemek için, bezi teslim edilmiştir bile piston üzerine kalır. Tripan mavi çözümü video tekniği göstermek için bir boya maddesi olarak kullanılır.
5. ürkiye'de tripan mavi çözüm enjeksiyonu, fare diseksiyonu önce ötenazi edildi. Tükürük bezi ameliyatla infüzyonlarının ne kadar aslında bezinde kalmıştır belirlemek amacıyla maruz kalmaktadır.

2. Temsilcisi Sonuçlar:

Infüzyonları enjekte edildikten sonra, fare, cerrahi sonrası kanüllü tükürük bezi ortaya çıkarmak için diseke edildi. Resim-2 gösterildiği gibi, Wharton kanalı koyu renklenme tripan mavi çözümü başarıyla aşılanmış olduğunu kanıtlar sağlar.

Şekil 1 fare submandibular bezin kanülasyonu.

Şekil 2, polietilen tüp, 29-gauge iğne ucu etrafında kaplı. Şırınga iğnesi Wharton kanalı içine polietilen tüp taşımak için katı bir kılavuz olarak kullanılır. Polietilen boru, kanal içinde 3-5 mm (kanüle) eklenir. Iğne kanal dışında kalırken, sadece polietilen tüp tükürük bezi kanalı girdiği unutmayın.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Bu kanülasyon yöntemi kullanarak bir zorluk enjekte çözüm geri akışı önlemek için. Tripan mavi çözüm geçici olarak başarıyla tükürük bezi göç olsa bile, tükürük salgısını infüzyonları ile müdahale ve bezinin tripan mavi çözüm backflow neden olabilir. Bir önlem olarak, tükürük salgılanmasını inhibe etmek için atropin kullanarak ek olarak, polietilen kanül Wharton kanalı ve infüzyonları tevdi edildikten sonra 60 saniye boyunca düzenlenen şırınga piston kalmalıdır. Bu inf?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reaktifin Adı	Tip	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar (isteğe bağlı)
Atropin	Ilaç	Fluka	11330	Tükürük salgılanması inhibe etmek
Ketamin	Ilaç	Phoenix Bilimsel		Sedasyon
Xylazine	Ilaç	Phoenix Bilimsel
Polietilen boru (0.58 mm çapında)	Tüp	Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems	427410	Wharton kanal içine yerleştirilmesi sırasında doku hasarı önlemek için iğne ucu üzerine yerleştirin.
Ultra Comfort İnsülin şırınga (29G iğne ile)	Şırınga	Tyco Healthcare	600145
% 4 tripan mavisi	Leke	Gibco	15250