JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Protokol
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Bu makale, modifiye İlizarov yimi uygulamaya dayanır uzun kemik kırığı stabilize edilmesi için bir yöntemi açıklar 1-3. Sabitleyiciler ve kemiğin zarar oluşturulması uygulamasından sonra, iyileştirici değerlendirilebilir, distraksiyon osteogenezisi yapılabilir veya birleşik-olmayan veya kritik ölçekli kusurun oluşturulur ve tedavi edici müdahaleler incelemek için kullanılabilir.

Özet

Iskelet tamir modları değerlendirmek kırıkların tedavisi için klinik olarak kullanılmak üzere terapiler geliştirmek için gereklidir. Mekanik stabilite kemik yaralanmaları iyileşmesinde büyük bir rol oynar. En kötü durum senaryosunda mekanik istikrarsızlık gecikmiş veya sendika üyesi olmayan insanlara yol açabilir. Ancak, hareket de iyileşme sürecini uyarabilir. Kırık kemik uçlarının stabilize etmek için hareket kıkırdak formları var ve bu kıkırdak yavaş yavaş yon gelişim sürecinin rekapitülasyon yoluyla kemik ile değiştirilir kırıklarda. Bir kemik kırığı katı stabilize Buna zıt olarak, kemik intramembranous kemikleşme yoluyla doğrudan oluşturur. Klinik olarak, hem endokondral ve intramembranous ossifikasyon aynı anda gerçekleşir. Etkili bir şekilde bu süreci araştırmacılar Bonnarens 4 tarafından açıklandığı gibi kırık kemiğin medüller kanal içine bir iğne eklemek çoğaltmak için. Rotatio sağlarken Bu deneysel yöntem mükemmel yanal stabilite sağlarnal istikrarsızlık devam etmek. Ancak, bu iki farklı süreçlerini düzenleyen mekanizmaların anlaşılmasında deneysel olarak da bu süreçlerin her biri izole tarafından geliştirilmiş olabilir. Biz rotasyonel ve yanal denge sağlar istikrar protokolü geliştirdi. Bu modelde, intramembranous ossifikasyon görülür iyileşme tek mod ve şifa parametrelerin iyileşmesi 10 fizyolojik parametreleri değiştirmeden sonra biyoaktif moleküller 8,9 uygulamasından sonra 5-7 genetiği değiştirilmiş farelerde farklı suşları,,, arasında mukayese edilebilir distraksiyon osteogenezisi 12 sonrasında, stabilizasyon 11 miktarı veya zaman değiştirdikten sonra, bir sendika üyesi olmayan 13 oluşturulduktan sonra, ya da kritik bir boyutta defekt oluşturulduktan sonra. Burada, farelerde tibial kırık iyileşmesi ve distraksiyon osteogenezisi çalışmak için modifiye İlizarov fiksatör nasıl uygulanacağını göstermektedir.

Protokol

Tüm Prosedürler UCSF Kurumsal Hayvan Bakımı tarafından onaylanmış ve Komite kullanın ve ulusal kurallara uygun yapıldı.

1. Cerrahi öncesinde Fiksatörleri hazırlanması

  1. Stabilize kırık oluşturmadan önce, bir özel-tasarım eksternal fiksatör cihazı monte etmek gerekiyor. Özel tasarlanmış eksternal fiksatör kare üç paslanmaz çelik # 0/56 dişli çubuklar, 8 # 2/56 altıgen somun ve cıvata 17 eşleştirme (Küçük Parça Inc, Miami, FL 3) ile stabilize iki alüminyum halkalar oluşuyordu.
  2. İki alüminyum halkaları kırık başına ihtiyaç vardır. Bir halka # 2/56 altıgen somunlar (Küçük Parça Inc, Miami, FL) ve eşleme cıvataları uygun deliklere 4 birleştirmek için, bu gevşek kalmalıdır. Bu proksimal halkası olacaktır. Distal halka 3 somun ve cıvata birleştirmek için tekrar tam sıkmayın.

2. Anestezi, Kırılma Yaratılış ve Fiksatör Uygulaması

  1. Fare (yaş, cinsiyet ve vücutkilo 50mg/ml Ketamin, 0.5 intraperitoneal enjeksiyonu ile anestezi) kullanıcı tarafından edilir belirlenir mg / ml medetomidin (0.03 ml / fare).
  2. Farelerin gözlerine göz yağlayıcı işlem sırasında gözlerini korumak için kendi başının üzerinden bant parçası koyun.
  3. Hayvan prosedür kalanı için bir ısıtma yüzeyi üzerine yerleştirilir.
  4. Mıhlamak dört 0,25 mm steril böcek iğneli (Anticorro: Güzel Bilim Aracı, Foster City, CA) kullanılarak sol tibia proksimal ve distal metafiz bir Dremel Aracı pin ekleyerek ve kemik yoluyla delerek.
  5. Pimler yönelimli kaval kemiğinin uzun eksenine dik ve birbirine 90 ° vardır. En az 10 proksimal ve distal pin arasında mm.
  6. Pimleri yönünde dönük fındık ile proksimal pin üzeri ilk halkası yerleştirin. Alüminyum halka içinde merkezi olarak konumlandırılmış tibia tutarak halka pimlerini emniyete alın.
  7. Di aşağıda ikinci halka konumlandırmakstal pimleri ve daha önce olduğu gibi altıgen somunları kullanarak halka pimleri sabitleyin. Distal fiksatöre dördüncü somun-cıvata kombinasyonu ekleyin.
  8. Uygun bir cihaz ile bükme üç nokta ile transvers kırık oluşturun. Biz Bonnarens ve Einhorn 4 yerçekimi sistemi kullanınız. Bloklar arasında tibia posterolateral yüzeyi dinlendirin, açılan kol boyunca önceden belirlenmiş bir yüksekliğe ağırlığı artırmak ve ağırlık düşmesi temas künt kırık üretmek için tibianın anterolateral yönü böylece. Boy kilo tibianın sadece tek bir kırık sağlamak için fare her bir suş için belirlenecek ihtiyaçlar dışında bırakılmıştır.
  9. Kırılma X-ray ile teyit edilir.
  10. Kırık onayladıktan sonra, üç paslanmaz çelik # 0/56 dişli çubuklar halkaları eklenir. Distal ucundan başlayarak çubuk takın ve çubuk sabitlemek üzere distal halkası üzerine bir somun geçiriniz. Sonra çubuk üzerine başka bir somun koymak, proksimal halka bu n üstüne oturacağımut. Iki halka eşit aralıklarla yapılacak ve pimleri zorlayarak değil emin olun. Üçüncü bir somunu ile çubukların proksimal halka sabitleyin.
  11. Analjezi Buprenorfinin Subkutan enjeksiyonu (1.0 mg / kg) ameliyat sonrası hemen verilir ve gerektiği gibi hayvanlara acı ve verilen buprenorfin için izlenir.
  12. Anestezi Atipamezole idare tarafından iptal edilir ve bunlar duyarlı ve yürüyebilen kadar hayvanlar izlenir.

3. Distraksiyon Osteogenezi (ayrıca bkz: 12,13)

Karşılamak için bu yordamı değiştirmek için distraksiyon osteogenezisi basittir. Halkaları dişli çubuklarla konumda tutulur ve yerine çubuklar tutan fındık çevirerek halkaları ayrı hareket ettirilebilir.

  1. Gecikme: Bu model kullanılarak standart distraksiyon osteogenezisi için fiksatör tibia üzerine yerleştirilir ve 5 günlük bir gecikme süre yalnız bıraktı.
  2. Distraksiyon: Distraksiyon osteogenesis dengeleyici çubuk ¼ dönüş (0,25 mm), her gün 7 gün üzerindeki somun çevrilerek gerçekleştirilebilir.
  3. Olgunlaşma: Kemikli köprü 10 gün gözlenir ve tam konsolidasyon distraksiyon tamamlanmasından sonra 27 gün görülmektedir.

4. Bir Kritik Ölçekli Hata oluşturulması

Daha önce aşağıdaki değişiklik ile tarif edildiği gibi kritik bir büyüklükte kusurun oluşturmak için dış sabitleyicilerin uygulanır.

  1. Prosedürü başlamadan önce cilt% 70 etanol ile temizlenir.
  2. Fiksatörler defekt oluşturarak önce tamamen uygulanır.
  3. Fare daha sonra medial tibia görselleştirmek için diseksiyon mikroskobu altında koyun, ve bir kesi (5-7 mm) bir neşter bir # 10 bıçak ile yapılır.
  4. Kas hafifçe transeksiyon ve tibianın orta diafiz maruz ayrılır.
  5. Kemiğin bir 3 mm segment daha sonra orta diyafiz kullanılarak makas kaldırılır. T kullanmadiye makas işaret, kemik yavaş yavaş snipped ve kemik parçaları gerekirse forseps ile çıkarılır. Bakım büyük bir mekanik kuvvet ile tibia yerinden önlemek için makas uçları ile alınmalıdır.
  6. Bu iyileşmesine katkıda olabilir diye bir kemik parçası, orada olduğundan emin olmak için cerrahi sitesini inceleyin.
  7. Tibia künt ucu çevresindeki kas değiştirin.
  8. 6-0 Poliamin Monofilament 2-3 sütürler ile cilt kesisi kapatın.
  9. Anestezi tersine çevrilir ve hayvanlar için izlenir ağrısı ve daha önce tarif edildiği gibi analjezikler verilmiştir.

5.. Temsilcisi Sonuçlar

Doğru uygulandığında, eksternal fiksatör mükemmel bir azalma (Şekil 1, 2) kapalı tibia kırığı daha sert istikrar sağlamak. Ancak, bazı durumlarda yetersiz azalma (kemik uçlarının veya birden fazla kırıklar arasında belirgin ve büyük bir boşluk (Şekil 3 meydana ), Ve bu farelerde analizlerin dışında tutulmuştur. Kırıkları, öncelikle intramembranous kemikleşme (Şekil 4) aracılığıyla iyileşmesi, bu yöntem kullanılarak stabilize. Kırık stabilize değilse Bunun aksine, geniş bir kıkırdak kallus kırık boşluğu (Şekil 5) içinde oluşturulmuş olup, bu intramembranous kemikleşme işlemi boyunca kemik ile değiştirilir.

figure-protocol-6164
Şekil 1. Tibia kırığı sabitlemek için kullanılan bir harici fiksasyon cihazı gösteren radyografileri. Grafisinde iyi hizalanmış kemik segmentleri (ok) gösteren kırık sonrası alınmıştır.

figure-protocol-6465
Şekil 2. Fiksatör sonra bir fare resmi uygulanmıştır.

figure-protocol-6634
Şekil 3. Radyografi f sonra alınanracture hizalanmış ve parçalanmış kemik segmentleri (ok) göstermektedir.

figure-protocol-6856
Şekil 4. Stabilize kırık intramembranous ossifikasyon ile iyileşir. Stabilize kırık trikrom kırık bölgesinde bazı yeni kemik (b) gösterir. Ölçek çubuğu = 500 mikron.

figure-protocol-7137
Şekil 5. Sigara stabilize kırık yon ile iyileşir. Non-stabilize kırık trikrom (b) kırık yerinde kıkırdak (c) ve kemik gösterir. Ölçek çubuğu = 500 mikron.

Tartışmalar

Bones mekanik stabilite (: 14 Yorumlar) bağlı olarak iki farklı modaliteleri ile iyileşir. Kırık kemiğin iki ucu köprü kemik ile değiştirilir kırık boşluğu kararsız büyük bir kıkırdak şablon formları ayrıldığımda. Proksimal ve distal mola için, kemik, periost ve endosteum içinde intramembranous ossifikasyon doğrudan oluşturur. Bunun aksine, kararlı bir kırık iyileşmesi intramembranous kemikleşmesi 3 vasıtasıyla yalnızca oluşur. Ancak, bu iki süreç arasındak...

Açıklamalar

Biz ifşa hiçbir şey yok.

Teşekkürler

Bu çalışma NIAMS gelen R01-AR053645 tarafından finanse edildi.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Reaktif Adı Şirket Katalog numarası Yorumlar
0.25mm böcek pin Güzel Bilim Aracı 26000-25 Blacked Eloksal Çelik, 0.25mm çubuk çapı, 4 cm uzunluk
Paslanmaz Çelik Hex Nut Küçük Parçalar # 2.56 1/8 "uzunluğu, inç başına 56 Konu
Paslanmaz Çelik Hex Nut Küçük Parçalar # 0-80 1/8 "uzunluğu, inç başına 80 Konu
Paslanmaz Çelik Makina Vida Küçük Parçalar # 0-80 1/8 "uzunluğu, inç başına 80 Konu
Paslanmaz Çelik Makina Dişli Çubuk Kesme Küçük Parçalar # 0-80 6 "uzunluğunda, inç başına 80 Konu
18-8 Paslanmaz Çelik Baş Makinası Screw McMaster-Carr 2-56 konu, 3/6 "uzunluk
Dış Fiksasyon Cihazı Atölye Özel tasarlanmış

Referanslar

  1. Ilizarov, G. A., Lediaev, V. I., Shitin, V. P. The course of compact bone reparative regeneration in distraction osteosynthesis under different conditions of bone fragment fixation (experimental study). Eksperimentalnaia Khirurgiia i Anesteziologiia. 14, 3-12 (1969).
  2. Ilizarov, G. A., Deviatov, A. A. Surgical elongation of the leg. Ortopediia Travmatologiia i Protezirovanie. 32, (1971).
  3. Thompson, Z., Miclau, T., Hu, D., Helms, J. A. A model for intramembranous ossification during fracture healing. J. Orthop. Res. 20, 1091-1098 (2002).
  4. Bonnarens, F., Einhorn, T. A. Production of a standard closed fracture in laboratory animal. J. Orthop. Res. 2, 97-101 (1984).
  5. Colnot, C., Thompson, Z., Miclau, T., Werb, Z., Helms, J. A. Altered fracture repair in the absence of MMP9. Development. 130, 4123-4133 (2003).
  6. Lange, J. Action of IL-1beta during fracture healing. J. Orthop. Res. 28, 778-784 (2010).
  7. Xing, Z. Multiple roles for CCR2 during fracture healing. Dis. Model Mech. 3, 451-458 (2010).
  8. Lu, C. Recombinant human bone morphogenetic protein-7 enhances fracture healing in an ischemic environment. J. Orthop. Res. , (2009).
  9. Yu, Y. Y., Lieu, S., Lu, C., Colnot, C. Bone morphogenetic protein 2 stimulates endochondral ossification by regulating periosteal cell fate during bone repair. Bone. 47, 65-73 (2010).
  10. Lu, C., Miclau, T., Hu, D., Marcucio, R. S. Ischemia leads to delayed union during fracture healing: a mouse model. J. Orthop. Res. 25, 51-61 (2007).
  11. Miclau, T. Effects of delayed stabilization on fracture healing. J. Orthop. Res. 25, 1552-1558 (2007).
  12. Tay, B. K., Le, A. X., Gould, S. E., Helms, J. A. Histochemical and molecular analyses of distraction osteogenesis in a mouse model. Journal of Orthopaedic Research. 16, 636-642 (1998).
  13. Choi, P., Ogilvie, C., Thompson, Z., Miclau, T., Helms, J. A. Cellular and molecular characterization of a murine non-union model. J. Orthop. Res. 22, 1100-1107 (2004).
  14. Buckwalter, J. A., Marsh, E. T., J, L., Heckman, J. D., Bucholz, R. W. . Rockwood and Green's fractures in adults. , 245-271 (2001).
  15. Garcia, P. The LockingMouseNail-A New Implant for Standardized Stable Osteosynthesis in Mice. J. Surg. Res. , (2009).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 62Kemik k rintramembranous ossifikasyondistraksiyon osteogenezisikemik iyile mesi

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır