Fotokimyasal Bağlı Posterior İskemik Optik Nöropati Rat Modeli

Özet

Bu protokolün amacı, fotokimyasal sıçan posterior optik sinir iskemik hasara yol etmektir. Bu model arka iskemik optik nöropati patofizyolojisi çalışmaları ve bunun için tedavi yaklaşımları ve diğer optik nöropatiler kritik yanı sıra diğer MSS iskemik hastalıklar.

Özet

Posterior İskemik optik nöropati (PION) klinik pratikte görme-yıkıcı bir hastalıktır. Ancak, patogenezi ve doğal seyri tam olarak anlaşılamamıştır kalmıştır. Son zamanlarda, plON güvenilir, yeniden üretilebilir bir hayvan modelinin geliştirilmesi ve bu modelde ¹ bazı nörotrofik faktörlerin tedavi etkisini test ettik. Bu videonun amacı posterior iskemik optik nöropati bizim fotokimyasal kaynaklı modeli göstermek için, ve retina ganglion hücrelerinin retrograd etiketleme ile etkilerini değerlendirmektir. Posterior optik sinir bir ışığa boya, eritrosin B cerrahi maruz bırakılmasının ardından, damar içine enjekte edilir ve bir lazer ışını optik sinir yüzeyi üzerine odaklanmıştır. Trombosit tromboz ve ödemli sıkıştırma aracılık mikrovasküler oklüzyon isteyen ışınlama zararlardan damar endotel sırasında eritrosin B ve lazer fotokimyasal etkileşim. Ortaya çıkan iskemik yaralanma kademeli ama pronounc verimleriBir uzaktan kumanda, hasar kaynaklı ve klinik olarak önemli bir sonuç - aksonal girdi bir kaybına bağlı retinal ganglion hücre tepe kurumalarına ed. Bu nedenle, bu model plON patofizyolojik ders çalışma için yeni bir platform sağlar ve ayrıca optik nöropati gibi diğer merkezi sinir sistemi işemik hastalıklar için terapötik yaklaşımları test etmek için optimize edilebilir.

Giriş

50 yaş üzeri hastalarda, iskemik optik nöropati (ION) Akut optik nöropati ² en yaygın türüdür. Anterior (AION) ya da posterior ^(PION) 3: durum belirli etkilenen kan temini ve klinik sunum kaynağına göre olarak bir veya iki alt tiplerinin sunabilirim. AION patogenezi ve ders yoğun ^4-7 olarak çalışılırken, PION kötü nedeniyle düşük yaygınlık, değişken sunum, kötü tanımlanmış tanı ölçütlerine ve hayvan modelinin eksikliği anlaşılmaktadır kalmıştır etti. Ayrıca, hiçbir tedavi etkili bir şekilde engellemek veya AION veya PION gelen görme kaybının tersine kanıtlanmıştır. Bu nedenle, pion bir tekrarlanabilir ve güvenilir bir hayvan model

Protokol

Bütün hayvan prosedürleri Kaliforniya San Diego ve Miami kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komiteleri (IACUC) Üniversitesi Üniversitesi tarafından onaylanmış ve Oftalmik ve Görsel Araştırma Hayvanların Kullanım ARVO Beyanı doğrultusunda yapıldı. Tüm reaktifler ve cerrahi işlemlerde kullanılan enstrümanlar sterildir.

1. anestezisi ve Cerrahisi Rat hazırlayın

1. Prosedüre önce sıçanlara, vücut ağırlığına göre ketamin (60 mg / kg) ve ksilazin (8 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonu ile anestezi uygulanır. Anestezi yeterli derinliği ayak parmağı sıkıştırma uyansına negatif tepki ile belirlenmelidir.
2. Anestezi sonra, asfiksi önlemek ve ameliyat

Sonuçlar

Bu teknikle tarafından uyarılan ortaya çıkan iskemik hasar iskemik akson yaralanma sonrası retina ganglion hücrelerinin yavaş yavaş ama belirgin ölümü verir. Bu, insan hastalığında gözlenen benzer klinik olarak anlamlı bir sonuçtur. FG retrograd etiketleme PION sonra RGH hayatta kalma ölçmek için kullanılır. Aynı yöntem başarılı bir model oluşturma doğrulamak yanı sıra farklı tedavi rejimlerinin etkilerini değerlendirmek için kullanılır. 1 kontrolünde retina düz ba?...

Tartışmalar

Here we describe in detail a method for inducing PION in a rat model. The most critical part of the protocol is the exposure and irradiation of the optic nerve – to expose the nerve as long as possible while avoiding damage caused by the sharp fine tip forceps or from stretching. In rats, the ophthalmic artery enters the optic nerve ≤1 mm from the optic nerve head. Therefore, irradiation of the optic nerve 3-4 mm away from the optic nerve head should only result in ischemia of the capillaries feeding the nerv...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
532-nm Nd:YAG laser	Laser glow	LRS-532-KM-200-3
Beam chopper	custom-made	custom-made
Mechanical shutter and corresponding shutter drive timer	AAM Vincent Associates	SD-10
25-cm focal length spherical lens	CVI/Mellles-Griot	01 LPX 293	plano-convexBK7 glass lens with HEBBARTM antireflection coating
Erythrosin B	MP Biomedicals	190449
Fluorogold	Fluorochrome,LLC
Gelfoam	Cardinal Health	CAH1203421
Polyethylene tubing (PE10)	BD Intramedic	427400
No. 10 Blade	Miltex	4-110
Fine Forceps	F.S.T.	91150-20	DUMONT #5 RUSTLESS NON-MAGNETIC
Forceps with Teeth	F.S.T.	11153-10	Germany stainless
Forceps	F.S.T.	18025-10	Germany stainless
Vannas spring scissors	F.S.T.	2-220	JJECK Stainless
Polyglactin suture	Ethicon	J488G	7-0 suture
hemostat	F.S.T.	12075-12	Germany stainless