JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Bu el yazması fare basınç-volüm verilerinin toplanması için ayrıntılı bir protokol açıklar.

Özet

nedenleri ve kalp hastalığının ilerlemesini anlamak biyomedikal topluma önemli bir meydan okuma sunuyor. Fare genetik esneklik moleküler düzeyde kardiyak fonksiyonu keşfetmek için büyük bir potansiyel sağlar. Farenin küçük boyutlu detaylı kardiyak fenotiplendirilmesini performans açısından bazı zorluklar yok. Minyatürleşme ve teknolojideki diğer gelişmeler fare olası kardiyak değerlendirme pek çok yöntem yaptık. Bunlardan, basınç ve hacim verileri eşzamanlı toplama başka yöntemi ile mevcut değildir kalp fonksiyonu ayrıntılı bir resmini sunar. Burada basınç-volüm halkası verilerin toplanması için detaylı bir prosedür açıklanmıştır. ölçümleri ve olası hata kaynakları altında yatan ilkelerin bir tartışma dahil. Onlar elde yüksek kalitede hemodinamik ölçüm kritik hem de olduğu gibi anestezi uygulaması ve cerrahi yaklaşımlar ayrıntılı olarak ele alınmıştırs. hemodinamik protokol geliştirme ve veri analizi ilgili yönlerini ilkeleri de ele alınmaktadır.

Giriş

Kardiyovasküler hastalık dünyada 1 genelinde mortalite ve morbidite önemli bir nedeni olmaya devam etmektedir. kalp hastalıkları yeni tedavilerin geliştirilmesinde özellikle zor zorluklar. Genetik alanındaki gelişmeler kalp hastalığı gelişiminde potansiyel genetik katkıda çok sayıda tanımlamak için imkanı sağlamaktadır. kardiyovasküler sistem bütünleştirici yapısı bu genetik hedefler sağlam hayvan modellerinde valide gerektirir. Fare genetik esneklik ve düşük konut maliyetleri belirli bir genin fizyolojik rolünün değerlendirilmesi için ön plana getirmiş. Farenin küçük boyutlu kalp fonksiyonu değerlendirmek için benzersiz bazı zorluklar sunar. Orada kalp fonksiyonu ile ilgili bilgi verebilir çeşitli yöntemler vardır, ancak ventriküler basınç ve hacminin sadece eşzamanlı ölçüm basınç hacim ventrikül fonksiyonunun (PV) döngü analizi sağlar. PV tüm döngülerow kardiyak fonksiyon damarsal ile bağlantısı bağımsız analiz edilecek; Belirli bir genetik eleman işlevsel rolünü belirlenmesinde önemli bir faktördür.

Basınç-volüm eğrileri değerlendirilmesi yıllardır hem deneysel hem de klinik olarak kullanılmaya başlanmıştır ve geniş bir literatür bu verilerin analizi 2,3 setleri ile ilgili Varlığından. Fare PV döngü teknolojisinin adaptasyonu fare kalp fizyolojisi 4-6 anlaşılması için önemli bir gelişme olmuştur. Kateter esaslı PV döngü teknolojileri çift basınç dönüştürücü ve ventrikül hacmini tahmin etmek iletkenlik kullanımı. ventriküler hacimli bir kateter tarafından üretilen bir elektrik alanı değişiklikleri incelenerek belirlenir. Silindir şeklinde ventrikül, yüksekliği kateter ve yarıçapı elektrotlar arasındaki mesafe ile tanımlanan bu yöntem modelleri kandaki bir elektrik alanının iletiminin hesaplanırventrikül 7-9. kateter ile ölçülen iletkenlik sinyali iki bileşeni vardır. İlk kan yoluyla iletim olduğu; Bu ventrikül hacmi ile değişir ve ventrikül hacmini belirlemek için kullanılan birincil sinyal oluşturmaktadır. İkinci bileşen aracılığıyla ve ventrikül duvar boyunca iletim kaynaklanır. Bu paralel iletkenlik olarak adlandırılan ve mutlak ventrikül hacmini belirlemek amacıyla kaldırılması gerekir. Araştırma laboratuvarında basınç-hacim veri toplama ve hesaplamak ve paralel iletkenlik kaldırmak için kullanılan yöntem için iki piyasada mevcut sistem onları 6,10,11 arasındaki temel fark Orada vardır. İletkenlik kateterler paralel iletkenlik hesaplanması için hipertonik tuzlu su enjeksiyonu gerektirir. duvar iletkenliği sabit kalmaktadır enjeksiyonu, geçici olarak, ventrikül kan iletkenlik değişir. Bu verilerden yola çıkarak tespit etmek mümkündürkandan kaynaklanan ve hangi iletkenlik sinyal bileşeni ventriküler duvara geliyor. Bu yaklaşım paralel iletkenlik kalp döngüsü sırasında değişiklik olmadığını varsayar. giriş yöntemi, genel hacim sinyaline ventriküler duvarın katkısını değerlendirmek için elektrik alanında faz değişikliklerine dayanmaktadır. Bu yöntem kan ve son hacim belirleme miyokardın iletkenlik önceden belirlenmiş sabitleri çeşitli dayanıyor, ama kalp döngüsü boyunca paralel iletkenlik sürekli önlemler yapar. Bu sistemlerin her ikisi de sol ventrikül hacminin iyi tahminleri sağlamak ve aralarındaki farklar fizyolojik olarak önemli olması muhtemel değildir. ventrikül ve diğer varsayımların silindirik modeli diğer yöntemlerle olarak doğru değil, bu kateter bazlı yaklaşımlar hale, ancak bu veriler kalp fonksiyonu yük bağımsız önlemlerin değerlendirilmesi için gerekli bir beat-by-beat bazında verilmektedir.

Burada özetlenen prosedür benim laboratuvarda kullanılan ve distrofik kardiyomiyopati 12-18 temel patofizyolojik mekanizmaları inceleyen çalışmaların çok sayıda veri sağlamıştır. aşağıda belirtilen prosedürü PV köprüsü veri elde etmek için kullanılabilecek iki biridir. ilkelerin birçoğu ya yaklaşım için geçerli olsa da, bu protokol açık göğüs apikal yaklaşımla ele alınacak; Kapalı göğüs protokolü başka bir yerde 19,20 detaylı edilmiştir. Prosedür detaylı bir şekilde tarif edilecek olmasına rağmen, önemli bir ana prensip kalp veya akciğer ya da en az zararla kalp maruz bulunmaktadır. protokol boyunca bir hayatta olmayan prosedür olduğunu ve kalbin iyi bir pozlama sahip kateterin doğru yerleştirilmesi için kritik önemli olduğunu hatırlamak önemlidir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Bu protokol açıklanan işlemleri gerçekleştirmeden önce, yerel kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komitesi tarafından onay almalıdır.

1. Deneysel Rig Kurma

Not: Bu prosedür, anestezi uygulanmış hayvanlar üzerinde gerçekleştirilmiştir ve veriler kalite hayvana sunulan anestezi destek kalitesi ile orantılıdır. Bu protokolü yaparken bu ilk bölümü olacak detay gerekli ekipman ve prosedürler fare anestezi sağlamak.

  1. Bir anestezi protokolü seçin. Bazı enjektabl protokoller de kullanılmış olmasına rağmen Uçucu madde anestezikler, PV-döngü analizi yapmak için pek çok yararlı özelliklere sahiptir. bir anestezik rejimi seçme hakkında daha fazla bilgi için tartışma bakın.
  2. cerrahi bölgeye yakın cerrahi masaya veya duvara sıkıştırılmış oksijen tankları sabitleyin.
  3. Uçucu madde anestezi kullanıyorsanız, sigorta bir buharlaştırıcı kullanmakUygun dozlama. Onlar anestezik gaz uygun dozu sağlayan emin olmak için her yıl vaporizerler kalibre. Gaz anestezi devresine girer hangi oranda kontrolünü sağlayan bir akış ölçere vaporizerler bağlayın. / Dk 1,0 L - 0,5 olarak belirlenmiştir.
  4. yönlendirilmiş 1 anestezik gaz akışını) indüksiyon odasını, 2) bir maske, ve 3) ventilatör izin vermek için bir manifoldu kullanın. anestezik gaz atma kritik önem taşımaktadır ve aktif sistem tarafından gerçekleştirilmesi gerektiğini davlumbaz (ya da diğer benzer yapı altyapı) içine veya anestezik gazları çıkarmak için tasarlanmış bir teneke kutu aracılığıyla ya da delikleri.
    Not: Tüm yerel yönetmeliklere uyum sağlamak için yerel iş sağlığı yetkilileri ile kontrol edin.
  5. ısıtma pedleri ve / veya ısınma lambaları kullanarak çekirdek vücut ısısını korumak. Sürekli bir rektal termometre ile vücut ısısını izlemek. Bu (bir fizyolojik vücut sıcaklığını sağlamak için proaktif artar izin veya ısıtma azalır olacak ͭ6; hemodinamik verilerin toplanması sırasında 37 ° C).
  6. Kan kaybı ve bilinçsiz hacim kaybı ortadan kaldırmak için sıvı desteği sağla.
    1. % 25 albümin 1 ml alarak ve bir şırınga içinde% 0.9 NaCl, 1.5 ml ilave edilerek% 0.9 NaCl içinde albumin% 10 çözelti hazırlayın.
    2. Düşük rezidüel hacim intravasküler kateter hazırlayın.
      1. 0.5 inçlik 30 gauge iğne plastik hub ezmek için pense kullanın. İğne tutucular kullanarak, iğne kavramak ve göbek çıkarın. Bir hemostat kullanarak iğne kalan yapışkan kazıyın. mikrobor bir boru uzunluğunu içine iğne kör uç yerleştirin. boru uzunluk en az 20 inç kullanın.
    3. doğru hacimler teslim izin vermek için, bir şırınga pompası kullanın.
  7. Yüksek kaliteli PV verilerinin toplanması için uygun havalandırma sağlayın. satın alınabilir fare vantilatörler bir çeşitlilik vardır. Basınç kontrollü fanlar uçucu a için gerekli kapalı ortam sağlamaknesthetic gazlar işlem sırasında havalandırma iyi kontrol sağlamak ve.
    1. Inspiratuar basınçlar barotravma önlemek için 15 cm H 2 O 2 O büyük ölçüde akciğer atelektazi önlenmesi ve gaz alışverişini destekleyerek, fare havalandırma artıracaktır.
    2. solunum devresinde Y-eklem ölü boşluk distalinden sınırlayın. Farenin tidal volüm çok küçük ve herhangi bir ölü boşluk taze solunan havadaki teslim çıkarır, çünkü bu önemlidir.
    3. 20 gauge kalıcı damar içi kateter kapalı ucu kesilerek bir fare büyüklüğünde endotrakeal (ET) tüp oluşturun. Bu kolay yerleştirilmesi için bir konik noktası sağlar. anestezik devrenin Y-eklem içine kesilmiş ucunu yerleştirin.
    4. solunum esnek boru kullanındevre. Hortumun herhangi bir yapısal bellek fare havayolu dışarı endotrakeal tüpü çekme potansiyeline sahip dış kuvvetler yaratacaktır.
    5. Fare endojen solunum sürücü bastırır en düşük oran kullanılarak solunum oranını tespit edelim. dakikada yaklaşık 60 nefes nispeten yavaş solunum hızında başlayın.
      Not: Uygun havalandırma ile fare nefes için çok az çaba göstermelidir. Havalandırma yetersiz Ancak, kanda CO 2 birikimi fare ile solunum çaba başlatacaktır. Bu görülürse, solunum hızını artırarak alveoler ventilasyon artırmak için bir düz-İleri yoludur. Beta-adrenerjik reseptör uyarılması ile bağlantılı kalp yükünü yükselmeye tepki olarak, solunum hızı artırmak çoğunlukla gereken bir durumdur.
    6. Solunum devresi hazırlandıktan sonra, basınç endotrakeal ucu (ET) tüp takarak sistem testBir parmak ile. ≈10 cmH 2 O. bir hava yolu basıncı sağlamak Bu test, her bir işlemden önce yapılmalıdır.

2. Cerrahi Yaklaşım

  1. Tablo 1'den küçük forseps ve makas ve diğer ekipman kullanmak. Tüm enstrümanlar büyütülmüş cerrahi alanda kolay kullanım sağlamak için oldukça küçük. cerrahi prosedür çeşitli yönleri için yeterli büyütme sağlamak için cerrahi stereomikroskopta kullanın.
  2. İşlem sırasında hemostaz üst düzeye çıkarmak için bir koter kullanın.
    Not: koter geniş sınıfların bir çift vardır. Termokoterle kas dokusunda kesti ve kanama durur ince bir metal eleman ısıtır. Bu sistemler başlangıçta nispeten ucuzdur; ancak tel uçları kırılgan ve nispeten pahalı hem de unutmayın önemlidir. Elektrokoter sistemleri başlangıçta satın almak için daha pahalı, ama ipuçları çok sağlam ve yerine olması gerek kalmayacakd.
  3. İndüksiyon ve Cerrahi Hazırlık
    1. farenin vücut ağırlığı elde.
    2. % 5 izofluran ile dolu olan bir indüksiyon odasına fare yerleştirin.
      Not: Fare bu ortamda bir kaç dakikadan fazla yaşayamaz. Sadece 45 - 60 sn onun düzeltilmesi refleks (kendi arkasında veya yanında yerleştirildiğinde çevirmek için çaba) kaybetmek fare için gereklidir.
    3. doğrulma refleksi kaybolur sonra,% 2 izofluran konsantrasyonunu azaltmak ve maskeye anestezik gaz açın.
    4. Hızla ameliyat masasına fare aktarmak ve maske içindeki burnu sırt yatma yerleştirin.
    5. elektrokoter kullanıyorsanız, elektrokoter sistemi topraklama pedi elektriksel çift fare tuzlu batırılmış gazlı bez kullanın.
    6. ameliyat bandı ile bacaklarda sabitleyin. Bu kaset bile ıslak yapışkan özellikleri sağlar.
    7. izleme çekirdek vücut için bir rektal thermoprobe takınSıcaklık. bant ile sabitleyin.
    8. fare boyun ve göğsüne bir depilasyon uygulayın. Tüy dökücü çalışması için 3 dakika, ve daha sonra bu bir pamuk uçlu aplikatör kullanarak alanlar ve / veya laboratuar mendil kürk çıkarmak - 2 bekleyin.
      Not: Cerrahi alan Drapaj gerekli değildir, bu bir hayatta olmayan bir işlemdir, ancak kullanılması halinde, koter topraklama pedi cerrahın maruz kalma sınırı arzu edilebilir.
    9. Fare ameliyat için hazırlanıyor sonra, bir ayak-tutam yaparak fare cerrahi uçağı değerlendirmek. Uygun bir anestezi derinliği güvence kez fare ilk kesi hazırdır.
  4. Oral entübasyon veya trakeotomi yoluyla hava yolu kontrolünü elde. Trakeotomi gerçekleştirmek için nispeten basit uygun bir yaklaşımdır.
    Not: Bu prosedür açıklaması boyunca her yöne ve yönelimleri cerraha bağlı olacaktır.
    1. le bir kesi yapmakorta çizginin ≈ 5 mm sağ uzanan sternal çentik vel orta hat sol 5 mm ≈ için.
    2. bir düzeye rostrally uzanan, birinci kesi sağ kenarı boyunca uzanan ikinci bir kesi yapmak ≈ mandibula sonuna kadar 2 mm kaudal.
    3. orta çizgisinin soluna ≈ 5 mm üzerindeki ikinci bir insizyon rostral ucundan uzanan üçüncü bir insizyon yapın. altta yatan dokuları ortaya çıkarmak için sol elde edilen flep geri çekin.
    4. künt diseksiyon ile orta hatta parotis ve submandibular tükürük bezleri ayırın. Bu trakea örten yatan kas gösterecektir.
    5. Açık açık trakea maruz sağ ve sol sternohyoideus kasları ayırın.
    6. özofagus içermez özen, trakea altında 3-0 ipek sütür bir ≈10 cm parçası geçirin.
    7. trakeotomi konumunu belirlemek: larinks sadece kaudal ilk trakea halkası önce bir boşluk var, bu bir fikirl konumu trakeotomi gerçekleştirmek için.
    8. ventilatör anestezi gazı sağlamak ve ventilatöre açmak için manifoldu ayarlayın.
    9. Bir parmak ile endotrakeal (ET) tüp ucu takarak sızıntı olup olmadığını kontrol edin. ≈10 cmH2O bir hava yolu basıncı sağlamak.
    10. Bir neşter olarak 20 iğne kullanarak, trakea insizyon. ET tüp trakea lümeni çok dolduracak kadar, kesi nispeten geniş olun.
    11. hızlı hareket, maskeyi çıkarın ve dikkatlice trakea içine ET tüpü yerleştirin. dokular çok kırılgan ve trakea duvarı kırarak bir pnömotoraks neden olabilir gibi zorlamayın.
      Not: Hemen sokulması üzerine, göğüs geziler belirgin hale gelmelidir.
    12. dışarı çekilmesini ET tüp önlemek için bant ile solunum devresi sabitleyin.
    13. ET tüpün etrafında bir mühür formu 3-0 sütür tek bir yukarıdan aşağı düğüm.
      Not: Bu nokta göğüs excursi Atons açıkça belirgin olmalıdır. Değilse genellikle sorun olduğunu trakea içinde ET tüp konumlandırma. ET tüpü geri çekin ve bir rehber olarak trakea yönelim odaklanarak, yeniden konumlandırmak için deneyin.
  5. Juguler Ven Sitesi Hazırlanması
    1. rostral-yanal dış juguler ven açığa sol tükürük bezleri geri çekin.
    2. künt diseksiyon ile damar kaplayan ince kas (sternomastoideus) ikiye bölmek. Bu şahdamarından dış yüzeyini gösterecektir.
    3. ven duvarları çok ince olarak dikkatli kullanılması gerekir, ancak dikkatli bir şekilde, doku herhangi bir büyük parçalarını temizlemek. Bu görevi tamamlandıktan sonra, daha sonra kanülasyon için onu korumak için tükürük bezlerinin ile juguler ven kapağı.
  6. torakotomi; kalp veya akciğerler zarar vermeden plevra alana giren
    1. sağ kenarını uzanan göğüs kaplayan derinin çok kaldırorta hat sol ≈ 1,5 cm sonra orta hatta karşısında kılıç şeklinde bir süreç düzeyine kadar orijinal deri insizyonu.
      Not: kanama önemli bir kaynak olabilir harici meme damarları aracılığıyla keserken dikkatli olunmalıdır. Onları kesmeden önce bu gemiler dağlama büyük ölçüde bu kanamayı önlemek olacaktır.
    2. Künt diseksiyon kullanarak, altta yatan kas maruz yanal flep geri çekin.
    3. damar genişletici forseps kullanarak sternum kaudal yakın sağ tarafında pektoralis majör sokulmasını izole edin. Dağlamak ve kas kesti.
    4. sternum onun eki boyunca pektoralis majör kesti. hemostaz sağlamak için kesilmiş kenarları dağlamak.
    5. Sonraki fare yanal yönünü kapsayan kas büyük bir tabakadır aynı tarafta latissimus dorsi, zayıflatmak. Dağlamak ve bu kası kesmek ve daha sonra kraniyal kesik ucunu çekin. Bu, bazı künt gerektirebilirdiseksiyon.
      Not: kaburga artık açıkça ortadadır ve kalp de bazı fare suşları görülebilir. En farelerde, dördüncü interkostal aralıktan kaudal yarısında göğüs giren kalbe iyi erişim sağlayacak. Dördüncü interkostal boşluk ikinci en kaudal alandır.
    6. göğüs girmek için dikkatle interkostal kas tabakaları aşağı incelemek için keskin forseps bir çift kullanın.
    7. Plevra boşluğu açıldıktan sonra, dikkatlice künt uçlu gemi dilatörlerden yerleştirin. damar Dilators kullanma, göğüs duvarında yukarı doğru nazik kuvvet sağlamak dikkatle interkostal kasların kalanını kesilirken künt uç yaylı makas kullanın.
    8. İlk akciğer lobu altında kesmek için dikkatli olmak, yanal kesti. Sonraki mediale kesi uzatmak, ama 3 kalmak - iç meme arteri önlemek için orta hat 4 mm yanal.
      Not: iç meme damarları sternum paralelyanlışlıkla kesersem ve önemli kan kaybına neden olabilir.
    9. Dikkatle akciğer veya kalp ile temas etmeden kesim dokusu ile koter temas sağlamak için yukarı doku rulo için küçük bir pamuk uçlu aplikatör kullanarak, interkostal kasların kesme kenarı dağlamak.
    10. Bir tuzlu batırılmış küçük pamuk orta hatta doğru bakacak kesikten uçlu bir aplikatör yerleştirin. altta yatan yapılardan uzak göğüs duvarı çekmek için nazik bir yukarı çekiş sağlar. kesinin medial kenarında göğüs duvarı dağlama ve sol tarafta orta hatta ≈ 1 cm yanal biten başlayın.
    11. o koter ucu altında sürekli böylece sola aplikatör ilerlemek.
    12. Doku iyice dağlanmış sonra, dikkatlice sternum kesmek için makas kullanın. Kalbin tepe bu noktada açıkça görünür olmalıdır.
    13. Künt diseksiyon kullanarak, perikard bozabilir ve kaudal vena kava tespit.
    14. Herhangi bir kanama kanıt olup olmadığını kontrol edin ve şimdi dağlamak. Tüm kanama ele edildikten sonra, dikkatlice dökümlü, koter topraklama pedi, ve tuzlu batırılmış gazlı bez çıkarın.
  7. Juguler Ven Kateter yerleştirilmesi
    1. dikkatli bir şekilde 30 numara iğne üzerinden boru kayması ile% 10 albümin içeren bir şırıngaya aşama 1.6.2 yapılan kateter bağlayın.
    2. kateter ile albümin beslerken başlayın.
    3. İğne yukarı konik iğne, kendi juguler ven üzerine yatıyor öyle ki kateter yönlendirmek. Gerekirse, doğru şekilde konik hareket ettirmek için boru iğne döndürmek için bir iğne tutucu kullanın.
    4. Kateter tamamen temizlendi olduğunda infüzyonu durdurun.
    5. Bir forseps ile kateter iğne kavrayın. Diğer elinizle, juguler ven görselleştirme izin tükürük bezi geri çekilmesi için bir doku forseps kullanabilir. Distal şahdamarını çevre dokulara hafifçe çekindamar duvarında gerginlik yaratma damar. yaklaşım sığ bir açı kullanarak, dikkatli bir şekilde damar içine iğne takın. kabına 4 mm - İğne 3 ucu ilerlemek.
    6. Kateter iğne bant parçası ile kateter tüp emniyete bırakmadan önce, bu iğnenin herhangi bir hareket kez yayımlanan sınırlayacaktır.
    7. İğneyi bırakın ve yavaşça kateter hattında kan görselleştirerek, damarın lümeninde olduğunu onaylamak için şırınga pistonu geri çekin.
    8. Bir kez düzgün altta yatan tükürük bezlerinin iğne bağlamak için cerrahi yapıştırıcı ile kateter sabitleyin konumlandırılmış.
    9. toplam hacmi hesaplayın infüze edilecek. önemli kan kaybı olmasaydı 5 ul / g vücut ağırlığı hacmi yeterli olacaktır. 6 beslerken önemli kan kaybı varsa - 6.5 ul / g gerekebilir. 15 dakika - tüm infüzyon 10 tam olacak şekilde akış hızını ayarlayın.
  8. PV Kateter YerleştirmeSol ventrikül
    1. Yukarıda tarif edilen cerrahi işlem sırasında, denge sağlamak için bir tuzlu su çözeltisini ihtiva eden bir şınngaya PV kateter yerleştirmek.
    2. yerleşime hemen önce fare yanında şırınga ve kateter hareket ettirin. kalbi olarak kabaca aynı yükseklikte kateter ucu ile, basınç okuma sıfır.
    3. Bir tuzlu batırılmış küçük pamuk kullanarak apeks görselleştirme izin kalbi manevra, aplikatör uçlu.
    4. 25 gauge iğne kullanarak, mümkün olduğunca apeks merkezine bıçak kesi yakın olun.
    5. iğne ayrılmasından sonra, hızlı bir şekilde kesikten kateter yerleştirin. Bu kateter eklemek için fazla kuvvet almak, böylece ventrikül içine kateter ilerleyen zaman kısıtlama görünmüyor. Bazen ek bir bıçak kesisi gereklidir. Bu gerekirse, kalp hasarı en aza indirmek için ilk yerin yakınındaki bir sonraki kesi gerçekleştirmek deneyin.
      değilE: Kateter ventrikül içine ilerletilir kez son yerleşim önem taşımaktadır. Ventriküler basınç izleme <(bu noktada 80 mmHg), düşük diastolik basınç (10 mm Hg) ve yüksek sistolik basınç> ile daha anlaşılır olacaktır. İdeal olarak, kateter sadece ventrikül içindeki dış elektrotlar ile ventrikül merkezli olacaktır. Kateter pozisyonunda ince ayar taraf arasında ≈ 90 ° açılarla bir kutu şeklinde izleme arıyor, PV-döngü verilerini gözlemleyerek yapılabilir.

3. Usul Detaylar

Not: Kateter kısa bir stabilizasyon dönemi yerleştirildikten sonra (10-15 dakika) hayvan akut cerrahi stres bazı kurtarmak ve sıvıların infüzyon için zaman tanımak için izin gereklidir. Bu stabilizasyon döneminden sonra gerçek protokol başlayabilir.

  1. PV kateter yerleştirilir ve cerrahi manipülasyon durduktan sonra,anestezi derin cerrahi düzlemde ihtiyacı azaltılabilir olarak% 1 ≈ için izofluran kısın.
    1. Bu süre içinde dikkatli bir şekilde anestezi uygun bir seviyesi muhafaza edilir sağlamak için fare izleyin. Dikkatle herhangi bir hareket değerlendirmek; solunum kaslarının hareketi hipoventilasyon seviyesini göstermektedir ve ventilatör solunum hızını artırarak ele alınabilir. bacaklarda ya da sakalların seğirmesi fare hareketi çok hafif alma ve daha fazla anestezik gerektirir işaretler.
      Not: Bu protokol ile kombinasyon halinde kullanılabilecek tedavi permütasyon çeşitli vardır. Bu tedavilerin çoğu ilaçların infüzyon gerektirir. Etkili ölü boşluk hacmini yönetmek için esastır. Çözelti anahtarları diğer bir şırınga pompası iğne kateter tüp kaydırarak gerçekleştirilebilmektedir. kısa bir süre önce infüzyon bitmeden kateter tüp bu olanak yapıyor yüklü olmasıBir sonraki ilaç. Çözüm anahtarının zamanlamasını belirlemek için kateter tüp içinde hacmini bilmek gerekir. doğrultusunda küçük bir hava kabarcığı besleme infüzyon anahtarının kesin zamanlama saptanmasına olanak sağlamaktadır; venöz dolaşımda infüze bu kabarcık iyi tolere edilir.
  2. ön yük düşürücü ve ardyükü artırarak kalbin yükleme koşulları Alter.
    1. kalbe venöz dönüşü engelleyerek ön yükünü azaltın. Bu hazırlıkta, görselleştirmek ve kalbe diyaframdan geçerken kaudal vena kava tıkamak. 3 sn - en fazla 2 ömürlü, sorunsuz ve nispeten hızlı bir şekilde bu oklüzyonu gerçekleştirin. 2 sn - 1 süren hafif bir karın sıkıştırma yaparak geçici sol ventrikül ardyükünü artırın.
    2. kalp yüklenmesi bu değişiklikler sırasında, ventilatör tarafından tanıtılan herhangi bir objeyi ortadan kaldırmak için solunumda duraklatmak.
  3. th kullanarak ses sinyalini kalibree iletkenlik kateterler. Bu prosedürler giriş teknolojisini kullanarak kateter ile gerekli değildir.
    1. Paralel iletkenlik hesaplamak için hipertonik salin (% 20 NaCl) 10 ul - deney protokolünde sonra 5 enjekte.
    2. kateterin çıkarılması ve bir heparinize şırınga içine sol karıncıktan kan çizerek kan toplayın. Bilinen hacim küvetler içine bu kanı yerleştirin ve iletkenlik ölçmek için kateter kullanın.
    3. birime iletkenlik sinyali dönüştürmek için küvet iletkenlik önlemler ve paralel iletkenlik kateter ile ölçülen mutlak hacmini tanımlamak gereklidir.
  4. protokol tamamlandığında, vena kava ve aort ekleri kesisi sonrası kalbi kaldırarak fare euthanize.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

Kongre tarafından, hacim Şekil 1'de görüldüğü gibi Y ekseni üzerinde X ekseni ve basınca çizilir. Bir dikdörtgen gibi olmalıdır hacme karşı komplo basınç kaynaklanan basınç-hacim döngüleri, yani basınç izovolümik değişiklikler (temsil dikey kenarlar, mitral ve aort kapakları her ikisi de) kapalı olduğunda. mitral kapak ve üst yatay kısmı boyunca dolgu aort kapaktan boşaltma ventriküler temsil ventrikül alt yatay te...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Bu prosedürde üç kritik adımlar vardır: 1) endotrakeal tüp ve uygun havalandırma, boyun IV kateter 2) yerleştirme ve sol ventrikül PV kateterin 3) uygun yerleştirme yerleştirme. uygun solunum oranının belirlenmesinde ventilasyon desteği sağlayan önemli bir parçasıdır. Bilinçli fareler genellikle hızlı sığ nefes ile alveoler ventilasyonu sağlamak. Genel olarak, havalandırmalı fareler çok daha büyük tidal hacimleri vardır. Dolayısıyla daha yavaş bir solunum hızı gereklidir. çok az hava...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Açıklamalar

The author has nothing to disclose.

Teşekkürler

Yazar NHLBI (K08 HL102066 ve R01 HL114832) fon kabul etmek istiyorum.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Dumont 5/45 (2)Fine Science Tools11251-33
Vessel Dilating ForcepsFine Science Tools18153-11
Castroviejo Micro Dissecting Spring ScissorRoboz InstrumentsRS-5668
Octogon Forceps - Serrated/CurvedFine Science Tools11041-08
Octogon Forceps - Serrated/StraightFine Science Tools11040-08
Dissector Scissors- Heavy BladeFine Science Tools14082-09
Transpore Surgical Tape3M1527-1
3-0 Silk SutureFine Science Tools18020-30
TOPO VentilatorKent ScientificTOPO
Martin ME 102 Electrosurgical UnitHarvard ApparatusPY2 72-2484
Syringe PumpLucca TechnologiesGenieTouch
Stereomicroscope with boom standNikonSMZ-800N
Thermocouple ThermometerCole ParmerEW-91100-40
T/Pump Warm Water RecirculatorKent ScientificTP-700
ADVantage Pressure-Volume SystemTransonicADV500
Data Acquision and AnalysisDSIPonemah ACQ-16

Referanslar

  1. Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131 (4), e29-e322 (2015).
  2. Katz, A. M. Influence of altered inotropy and lusitropy on ventricular pressure-volume loops. J Am Coll Cardiol. 11 (2), 438-445 (1988).
  3. Kass, D. A., Maughan, W. L. From "Emax" to pressure-volume relations: a broader view. Circulation. 77 (6), 1203-1212 (1988).
  4. Georgakopoulos, D., et al. In vivo murine left ventricular pressure-volume relations by miniaturized conductance micromanometry. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 274 (4 Pt 2), H1416-H1422 (1998).
  5. Kass, D. A., Hare, J. M., Georgakopoulos, D. Murine cardiac function: a cautionary tail. Circ Res. 82 (4), 519-522 (1998).
  6. Feldman, M. D., et al. Validation of a mouse conductance system to determine LV volume: comparison to echocardiography and crystals. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 279 (4), H1698-H1707 (2000).
  7. Baan, J., et al. Continuous measurement of left ventricular volume in animals and humans by conductance catheter. Circulation. 70 (5), 812-823 (1984).
  8. Salo, R. W., Wallner, T. G., Pederson, B. D. Measurement of ventricular volume by intracardiac impedance: theoretical and empirical approaches. IEEE Trans Biomed Eng. 33 (2), 189-195 (1986).
  9. Wei, C. L., et al. Volume catheter parallel conductance varies between end-systole and end-diastole. IEEE Trans Biomed Eng. 54 (8), 1480-1489 (2007).
  10. Kutty, S., et al. Validation of admittance computed left ventricular volumes against real-time three-dimensional echocardiography in the porcine heart. Exp Physiol. 98 (6), 1092-1101 (2013).
  11. Kottam, A., Dubois, J., McElligott, A., Henderson, K. K. Novel approach to admittance to volume conversion for ventricular volume measurement. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 2514-2517 (2011).
  12. Meyers, T. A., Townsend, D. Early right ventricular fibrosis and reduction in biventricular cardiac reserve in the dystrophin-deficient mdx heart. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 308 (4), H303-H315 (2015).
  13. Townsend, D., Yasuda, S., Li, S., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. Emergent dilated cardiomyopathy caused by targeted repair of dystrophic skeletal muscle. Mol Ther. 16 (5), 832-835 (2008).
  14. Townsend, D., et al. Systemic administration of micro-dystrophin restores cardiac geometry and prevents dobutamine-induced cardiac pump failure. Mol Ther. 15 (6), 1086-1092 (2007).
  15. Strakova, J., et al. Dystrobrevin increases dystrophin's binding to the dystrophin-glycoprotein complex and provides protection during cardiac stress. J Mol Cell Cardiol. 76, 106-115 (2014).
  16. Yasuda, S., et al. Dystrophic heart failure blocked by membrane sealant poloxamer. Nature. 436 (7053), 1025-1029 (2005).
  17. Townsend, D., Daly, M., Chamberlain, J. S., Metzger, J. M. Age-dependent dystrophin loss and genetic reconstitution establish a molecular link between dystrophin and heart performance during aging. Mol Ther. 19 (10), 1821-1825 (2011).
  18. Townsend, D., Yasuda, S., McNally, E., Metzger, J. M. Distinct pathophysiological mechanisms of cardiomyopathy in hearts lacking dystrophin or the sarcoglycan complex. FASEB J. 25 (9), 3106-3114 (2011).
  19. Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Bátkai, S., Kass, D. A. Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats. Nat Protoc. 3 (9), 1422-1434 (2008).
  20. Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect. J Vis Exp. (100), e52618-e52618 (2015).
  21. Barnabei, M. S., Palpant, N. J., Metzger, J. M. Influence of genetic background on ex vivo and in vivo cardiac function in several commonly used inbred mouse strains. Physiol Genomics. 42A (2), 103-113 (2010).
  22. Guo, X., Kono, Y., Mattrey, R., Kassab, G. S. Morphometry and strain distribution of the C57BL/6 mouse aorta. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283 (5), H1829-H1837 (2002).
  23. Weiss, R. M., Ohashi, M., Miller, J. D., Young, S. G., Heistad, D. D. Calcific aortic valve stenosis in old hypercholesterolemic mice. Circulation. 114 (19), 2065-2069 (2006).
  24. Palpant, N. J., Day, S. M., Herron, T. J., Converso, K. L., Metzger, J. M. Single histidine-substituted cardiac troponin I confers protection from age-related systolic and diastolic dysfunction. Cardiovasc Res. 80 (2), 209-218 (2008).
  25. Palpant, N. J., D'Alecy, L. G., Metzger, J. M. Single histidine button in cardiac troponin I sustains heart performance in response to severe hypercapnic respiratory acidosis in vivo. FASEB J. 23 (5), 1529-1540 (2009).
  26. Palpant, N. J., et al. Cardiac disease in mucopolysaccharidosis type I attributed to catecholaminergic and hemodynamic deficiencies. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 300 (1), H356-H365 (2011).
  27. Townsend, D. Diastolic dysfunction precedes hypoxia-induced mortality in dystrophic mice. Physiol Rep. 3 (8), e12513(2015).
  28. Schmähl, D., Port, R., Wahrendorf, J. A dose-response study on urethane carcinogenesis in rats and mice. Int J Cancer. 19 (1), 77-80 (1977).
  29. Freeman, G. L., Little, W. C., O'Rourke, R. A. The effect of vasoactive agents on the left ventricular end-systolic pressure-volume relation in closed-chest dogs. Circulation. 74 (5), 1107-1113 (1986).
  30. Reyes, M., et al. Enhancement of contractility with sustained afterload in the intact murine heart: blunting of length-dependent activation. Circulation. 107 (23), 2962-2968 (2003).
  31. Segers, P., et al. Conductance catheter-based assessment of arterial input impedance, arterial function, and ventricular-vascular interaction in mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 288 (3), H1157-H1164 (2005).
  32. Townsend, D., et al. Chronic administration of membrane sealant prevents severe cardiac injury and ventricular dilatation in dystrophic dogs. J Clin Invest. 120 (4), 1140-1150 (2010).
  33. Sato, T., Shishido, T., et al. ESPVR of in situ rat left ventricle shows contractility-dependent curvilinearity. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 274 (5 Pt 2), H1429-H1434 (1998).
  34. Sunagawa, K., et al. Effects of coronary arterial pressure on left ventricular end-systolic pressure-volume relation of isolated canine heart. Circ Res. 50 (5), 727-734 (1982).
  35. Cingolani, H. E., Pérez, N. G., Cingolani, O. H., Ennis, I. L. The Anrep effect: 100 years later. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304 (2), H175-H182 (2013).
  36. Baan, J., van der Velde, E. T. Sensitivity of left ventricular end-systolic pressure-volume relation to type of loading intervention in dogs. Circ Res. 62 (6), 1247-1258 (1988).
  37. Rankin, J. S., Olsen, C. O., et al. The effects of airway pressure on cardiac function in intact dogs. Circulation. 66 (1), 108-120 (1982).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

FizyolojiSay 111Bas n hacim D ng lerIn vivo HemodinamikFareKardiyak FizyolojiKas lmaVentrik ler Y kleme

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır