Kompozisyon ve Aquafaba özellikleri: su kurtarılan ticari olarak konserve nohut

Özet

Aquafaba konserve nohut viskoz bir suyu olan, şiddetle karıştırdı, nispeten istikrarlı beyaz köpük veya köpük üretir. Nükleer manyetik rezonans (NMR), Ultrafiltrasyon, Elektroforez ve peptid kullanarak viscosifying/kalınlaşma özellikleri katkıda aquafaba bileşenlerini belirlemek için birincil araştırma hedeftir kitle parmakizi.

Özet

Nohut ve diğer bakliyat genellikle kalın bir çözüm ya da bir tuzlu su dolu konserve ürünler olarak satılmaktadır. Bu çözüm son zamanlarda istikrarlı köpükler ve emülsiyonlar üretmek için gösterilmiştir ve bir kıvam hareket edebilir. Nerede bu önerilmiştir şimdi büyüyen bir topluluk tarafından aquafaba olarak adlandırılan bu çözüm olabilir internet üzerinden bu ürün ilgi son zamanlarda geliştirilmiştir a yenisiyle değiştirme için yumurta ve süt protein kullanılır. Aquafaba hem yeni ve küçük bir internet tabanlı toplum tarafından geliştirilmekte olan kompozisyon veya özellikleri ile bilinir gibi. Aquafaba 10 ticari konserve nohut Urun kurtarıldı ve aquafaba kompozisyon, yoğunluk, viskozite ve köpük özellikleri arasında korelasyonlar incelenmiş. Proton NMR aquafaba kompozisyon öncesi ve sonrası Ultrafiltrasyon membranları farklı molekül ağırlığı kesim ile aracılığıyla karakterize için kullanılan off (MWCOs 3, 10 ve 50 kDa). Bir iletişim kuralı Elektroforez ve peptid kitle parmak izi de sunulmaktadır. Bu yöntemleri fonksiyonel özellikleri aquafaba için sorumlu bileşenleriyle ilgili değerli bilgiler sağladı. Bu bilgileri Standart ticari aquafaba ürünler üretmek için yöntemler geliştirilmesi ve tüketici ürünleri üstün veya tutarlı yardımcı programı seçin yardımcı olabilir olacak.

Giriş

Giderek vejetaryen ürünleri et, süt ve yumurta özelliklerini taklit geliştirilmektedir. Bakliyat fonksiyonel özelliklerini geçerli kullanımları gıda uygulamaları önemlidir ve bunların özelliklerini geliştirme yerine hayvansal protein için incelenmiştir. Örneğin, süt alternatifleri satış 2015 yılında 8,80 milyar ABD Doları olduğunu ve bu pazarın hızla büyüyor. Bu Pazar 35.06 milyar dolara 2024 tarafından büyümek öngörülmektedir. Ayrıca, bitkisel kökenli süt yerine talep artış eğilimi, kısmen, bir tüketici sağlık sorunları ile ilgili kolesterol, antibiyotik ve büyüme hormonları süt üretim¹' de sık kullanılan sonucudur. Benzer şekilde, bitkisel protein ve hydrocolloid yumurta replacer piyasaları hızla genişleyen ve Bileşik yıllık büyüme oranı % 5.8 satış $1.5 milyar USD 2026²' de beklendiği ile önümüzdeki 8 yıl içinde bu malzemeler için bekleniyor. Tüketicilerin giderek artan sayıda vegan protein kaynağı tercih, alerjen diyetler azaltılmış ve gıda ürünleri için karbon ayak izi azalttı. Mercimek, nohut ve faba fasulye başta nabız tabanlı ürünler için giderek artan talebi yüksek protein içeriği, diyet lifi ve Bakliyat³düşük doymuş yağ içeriği nedeniyle. Bakliyat da potansiyel olarak yararlı biyolojik etkinlik⁴fitokimyasallar içerir.

Ticari kuruluşlar, bilim adamları ve özel kişiler yumurta ve süt yerine nohut kalite özelliklerine göre iletişim kurmak için farklı yaklaşımlar almış. Gugger ve ark. ⁵ yüksek nişasta taneleri adzuki fasulye ve nohut gibi süt benzeri üründen üretti. Onların açıklanan yöntemleri savunucuları kendi ürün benzersiz ve "aquafaba"⁶farklı olduğunu göstermek çalıştı. Tetrick ve ark. tarafından aydınlatılmamıştır başka bir ticari yaklaşımda ⁷ bitkisel kökenli yumurta yerine geliştirilmiştir. Patent başvurularının darbe un yumurta akı pişmiş malzeme fonksiyonu taklit bilinen esaslı viskozite arttırıcılar birleştirme yöntemleri açıklar. Tipik formüller % 80-90 darbe un ve % 10-20 kalınlaşma katkı maddeleri içerir.

Hakemli edebiyat Ayrıca Nohut ile mümkün işlevselliği gösterir ve albümin protein kesirler kabuli ve desi nohut unundan elde iyi emülsifikasyon özelliklere sahip olduğunu göstermiştir. Albümin verim ve performans⁸üzerinde önemli bir etkisi nohut kaynağının de bulduk.

Fransız Şef Joël Roessel tarafından "aquafaba" açıklayan ilk Internet rapor sonra bir açık kaynak hareketinin aquafaba yardımcı programı yerine beyaz yumurta ve süt proteini çok gıda uygulamada gösteriyor. Orada birçok son derece görüntülenen Web sayfalarını ve YouTube videolarını aquafaba birleşmesiyle buz nitelikleri taklit gıdalarda gösterilen krem, beze, sahanda yumurta, peynir, mayonez ve krem şanti. Açık kaynak aquafaba uygulamaları (tarifleri) sağlayan en öncü konserve nohut zorlayarak tarafından kendi malzemesi elde etmek ve onların tariflerde sıvı kullanarak. Bu kişiler çoğunlukla değil eğitimli bilim adamları vardır. Video yorum bölümleri katılımcıların Tarifler kopyalamış ve bazı başarılar aquafaba savunucuları çoğaltmak başarısız gösterir.

Yumurta ve süt yerine geliştirmek için tüm üç yaklaşımlar (şirket, bilimsel ve açık kaynak) hak var ama önemli bir boyutu eksik. Uygulamalı bilim adamları, temel bilim adamları ve nabız bazlı ürünler ilan bireyler eksik olarak karakterize ve onların giriş malzeme standart. Belirli bir kullanım için bir ürün standardizasyonu normal bir endüstriyel uygulamadır. Nohut çeşitlerin aquafaba kalitesi için standartlaştırılmış değil ve endüstriyel konserve uygulamaları tutarlı nohut değil aquafaba üretmek için standardize edilmiştir.

Başka ürünler derslerine dayanarak, genotip ve çevre nabız aquafaba kalitesine katkıda bulunacak tahmin edilebilir. Genotip ve çevre özellikleri⁹konserve kabuli nohut etkiler bilinmektedir. Normal genotypic etkileri akraba türler arasında büyük ve küçük bir türlerin içinde uygulanır. Fiziksel ve kimyasal özellikleri varyasyon istenen özelliklere sahip çeşitlerin seçimi sağlar kimlik koruma aracılığıyla minimize edilebilir. Çevresel etkileri de büyük olabilir ve kalite değerlendirme tarafından yönetilir ve özel Standart performans için karıştırma¹⁰sınar.

Nohut ticari üretimde birçok genetik olarak farklı çeşitlerin vardır. Örnekler için Saskatchewan Üniversitesi ürün geliştirme Merkezi, ticari nohut Pangenez, önemli bir kaynağı olan 6 şu anda Kanada'da ekimi için önerilen 1980'den beri 23 nohut çeşitlerin yayımladı. Bilimsel el yazmaları, genellikle bir çalışmada kullanılan çeşidinde tarif ederken, patent ve incelenmiştir internet sayfalarının kullanılan çeşidinde veya nohut kaynak işaret vermedi. Çeşitlerin ve işleme standardizasyon kullanıcılar nohut kullanarak başarılarının artırmak yardımcı olabilir ama bu bilgileri konserve nohut ürünlerde kullanılabilir değil.

Bu araştırmanın amacı köpük özellikleri katkıda aquafaba bileşenleri tespit etmektir. Burada, aquafaba ticari nohut markalardan rheological özellikleri karşılaştırıldı ve kimyasal özellikleri NMR, Elektroforez ve peptid tarafından incelenmiştir kitle parmakizi. Bilgimizi, kimyasal bileşimi ve aquafaba viscosifier bileşenleri fonksiyonel özelliklerini açıklayan ilk araştırma bu.

Protokol

Ayrılık Aquafaba, nohut

1. Elde etmek nohut yerel marketleri ve açık bir el ile bir konserve açacağı.
2. J. a etiket kutular
3. Aquafaba paslanmaz çelik kullanarak üzerinden ayrı nohut mutfak süzgeç meshed ve ayrılmış nohut ve aquafaba ağırlığında.

Nohut ve Aquafaba bir temsilcisi örnek kimyasal analiz için edinin.

4. Rastgele 10 nohut nem içeriği belirlemek için aquafaba boşaltma sonra seçin.
5. Seçili nohut bir kurutma kalay ve 100 ± 2 ° C 16-18 h kurutma fırın için ısıda yerleştirin.
6. Kuruduktan sonra nohut bir toz için daha fazla kullanılmasını (örneğin protein ve karbon içerik analizi) için eziyet.
7. Dondurma aquafaba ve her aquafaba köpük-20 ° C-kaynak ve bir donma Kurutma Makinası. Kurutulmuş aquafaba azot ve karbon içerik belirlenmesi için kullanılır.

Aquafaba fonksiyonel özellikleri

8. Aquafaba viskozite 25 ° c No 2 kabuk fincan kullanarak belirleyin.
   1. Aquafaba kabuk kadehte bırakın.
   2. Kupası¹¹drenaj için gereken süreyi kaydetmek. Bir zamanlayıcı Kupası aquafaba kaldırdı ve Kupası bırakarak akışı durduğunda durdu başladı.
   3. Aquafaba viskozite viskozite ve drenaj zaman ilgilidir Kupası ile sağlanan bir grafik tarafından tespit edilebilir.
9. Köpük kapasitesi
   1. Aquafaba çözüm (100 mL) 2 min için hız ayarı 10, bir el mikseri ile bir paslanmaz çelik kase karışımı.
   2. Kaydı hemen 100 mL aquafaba çözeltisi içinde mezun bir ölçme fincan köpük yerleştirerek V_f100 karıştırma sonra köpük birim.
   3. Köpük köpük istikrar gözlemlemek ve Kuru köpük örneği elde etmek için zaman içinde kuru ve stand izin.

Renk parametreleri nohut tohumu

10. Rastgele nohut tohumu her yapabilirsiniz renk tayini için seçin.
11. Ölçümleri öncesinde beyaz, siyah ve referans Standartlar kullanılarak avcı laboratuvar Kolorimetre kalibre.
12. Renk koordinat değerlerini CIE Lab tarafından belirlenir sistem¹² L (pozitif temsil beyaz ve 0 temsil karanlık) dahil olmak üzere, bir (pozitif kırmızı ve negatif yeşildir) ve b (pozitif sarı ve negatif mavidir) içinde gün ışığı ile 65 ° onaylatılacak.

Protein ve karbon içeriği

13. Protein ve karbon içeriği bir elemental analyzer¹³kullanarak yanma tarafından belirler. Protein içeriği 6.25¹⁴tarafından çarpılan azot içerik olarak tahmin edilmektedir.

Nem oranı

14. Tohum ve aquafaba nem içeriği örnekleri, 100 ± 2 ° C bir kurutma fırın¹⁵16-18 h için Isıtma tarafından belirler.

NMR spektrometresi

15. Numune hazırlama
    1. Önce spektrometresi, aquafaba örnekleri, 9200 × g 10 dk santrifüj kapasitesi. Santrifüjü sonra süpernatant 0,45 µm şırınga filtre (25 mm şırınga filtre politetrafloroetilin (PTFE) membran ile) geçişi. Aquafaba örnek (0.4 mL) NMR tüp wuth 50 mg eklendi aktarmak döteryum oksit içinde ve konu NMR analizi için örnek.
    2. Daha önce açıklanan Kuru köpük örnek için örnek (25 mg) döteryum oksit (500 mg) ve çözüm NMR analize tabi.
    3. ¹³C-NMR ve ¹H-NMR için tüm örnekleri kaplama 5 mm NMR tüplerde yerleştirin. Döteryum oksit ve 3-(trimethylsilyl) eklemek için bir çözücü kilit sinyal sağlamak ve bir iç standart olarak anılan sıraya göre hareket her NMR tüp propiyonik-2,2,3,3-d₄ asit sodyum tuzu (TMSP).
16. NMR koşulları
    1. Proton NMR spectra 500 MHz NMR veya benzer yüksek alan NMR spektrometresi Edinimli) en az 16 tarama / bir su kullanarak spektrum ile bastırma programı öyle aynı derecede çift darbe alan degrade spin Eko proton NMR (DPFGSE-NMR) nabız dizisi¹⁶.
    2. 0 ppm TMSP en yüksek yeri sonra Tümleştirme yazılım mevcut bileşiklerin göreli tutarlarının belirlemek için kullanın için spektral shift ayarlayın.

Elektroforez

Not: Bu adımda, en istikrarlı köpük (marka H) vermiştir aquafaba seçildi. Bu marka tuz içermiyordu.

17. Numune hazırlama
    1. Yeniden aquafaba santrifüj üç üst rezervuarı için selüloz Ultrafiltrasyon cihazları her farklı molekül ağırlığı kesim ile tanıtmak off (MWCOs) 3, 10 ve 50 kDa.
    2. Santrifüj filtre cihazları 4 ° C'de uygun bir santrifüj ve 2 h 3900 × g, santrifüj süpernatant ve retentate kesirler elde etmek için yerleştirin. Süpernatant kesirler ¹H-NMR analizi yüksek molekül ağırlıklı (MW) türler yokluğunda daha küçük moleküllerin için kullanılmıştır. Bu zar çoğu proteinleri korumak inanılıyordu gibi 3 kDa membran retentate kesir elektroforetik ayrımı için kullanıldı.
    3. Her iki süpernatant protein içeriğini tahmin ve sığır serum albümin standart¹⁷olarak kullanarak değiştirilmiş bir Bradford yöntemini kullanarak retenate.
    4. 25-s (10 dakika) bir frekansta uygun shaker¹⁸' sallayarak için bu kesirler konu ve süpernatant ve retentate kesirler örnekleri Eppendorf tüpleri yerleştirin. Bir köpük sallayarak gelen kurdu belirlemek için sarsılmış çözüm gözlemlemek.
    5. Retentate için diafilteration elde etmek ikinci bir Santrifüjü tedavi Ultrafiltrasyon cihaza 2.0 mL distile su ekleyerek geçiyoruz. Ultrafiltrasyon aygıt ikinci Santrifüjü 4 ° C ve 2 h 3900 × g tabi.
    6. Retentate (0.025 g) 0,02 M Tris-HCl pH 7.4 veya fosfat tamponlu tuz (PBS) pH 7.4 protein çözülmeye 1 mL ile karıştırın.
    7. 21000 x g 1 dk. için karisimin santrifüj kapasitesi.
    8. Süpernatant protein içeriği değiştirilmiş Bradford daha önce belirtildiği gibi kullanarak belirlemek için kullanın.
18. Elektroforetik ayrımı
    Not: Sodyum Lauryl Sülfat-polyacrylamide Jel Elektroforez (SDS-sayfa) kullanarak elektroforetik ayrımı (yukarıda açıklanmıştır) 3 kDa MWCO membran retentate tabi tutulur.
    1. Polyacrylamide % 15 polyacrylamide çözme jel ve % 5 polyacrylamide yığın jel kullanarak jelleri hazırlayın.
    2. 20 µg protein örneği 10-170 kDa ayrı polyacrylamide jel Lane bir dizi jel ve PageRuler Prestained Protein merdiveni tek şeritli uygulanır.
    3. Jelleri bir elektrik akımı için bir mini Protein Tetra hücre sisteminde Laemmli (1970)¹⁹değiştirilmiş olarak tabi. Jel Elektroforez için çalışma koşulları, boyama ve destaining takip Ratanapariyanuch vd. (2012) ²⁰.

Peptid kitle parmakizi

Not: SDS-sayfa jel grup 3 kDa retentate (MWs, yaklaşık 8, 10, 13, 14, 15, 20, 22, 31, 37, 55 ve 100 kDa) tripsin sindirim Ratanapariyanuch ve arkgöre için kes. (2012) ²⁰ ve kitle spektral analizi gerçekleştirin.

19. Jel sindirim
    1. Bantları çeker tarafından iki kez 100 µL % 50 Asetonitril (ACN) 200 mM amonyum bikarbonat (NH₄HCO₃) içinde de-leke ve 20 dk 30 ° C'de kuluçkaya.
    2. ACN jel örnekleriyle de-boyama tamamlanmasından sonra tedavi (100 µL) 10 min ve o zaman kuru vakum altında oda sıcaklığında 15 dakika santrifüj vakum Evaporatör kullanarak.
    3. 10 mM dithiothreitol (DTT) 100 mM NH₄HCO₃ çözüm içinde 100 µL kurutulmuş jel örneklerinde bırakın ve 1 h için 56 ° C'de kuluçkaya.
    4. Tampon Kaldır aşırı azaltılması ve eski yerine koymak o ile 100 µL arabellek [100 mM iodoacetamide kütle spektrometresi (MS) sınıf suda] alkylating.
    5. Jel örnekleri, oda sıcaklığında 30 dakika karanlıkta kuluçkaya.
    6. Yıkama jeli örnekleri iki kez 200 mM NH₄HCO₃ (100 µL), ile çekmek jelleri ACN içinde çeker tarafından (100 µL), 200 mM NH₄HCO₃ (100 µL) ile jelleri yeniden şişmeye ve tekrar ACN ile davranarak shrink (100 µL).
    7. ACN drenaj ve jel örnekleri 15 dakika santrifüj vakum Evaporatör vakum altında kuru.
    8. Kurutulmuş jel örnekleri 20 µL tripsin arabellek kullanarak yeniden şişmeye (50 ng/µL tripsin 1:1,200 mm NH₄HCO₃: tripsin hisse senedi çözüm) her örnek için buna ek olarak 200 mM NH₄HCO₃ 30 µL tarafından takip.
    9. Örnekleri ile 300 devir / dakikada sallayarak Thermomixer gecede 30 ° C'de üzerinde kuluçkaya.
    10. 1/10 son hacim (miktar adım 8 sonra karışımı) % 1 trifluoracetic asitin ekleyerek tripsin sindirim reaksiyonu durdurmak ve 100 µL % 0,1 trifluoracetic asit %60 ACN ve kuru vakum altında bir santrifüj kullanarak kullanarak jel örnekleri tryptic peptidler ayıklamak Vakum Evaporatör.
    11. Tryptic peptidler kitle spektrometrik analiz önce-80 ° C'de depolayın.
20. Kütle spektrometresi
    1. Tryptic peptidler 12 µL MS sınıf su ekleyerek yeniden oluşturma: Afrika Kupası: formik asit (97:3:0.1, v/v) ve sonra 1-2 dk peptidler çözülmeye için girdap.
    2. 4 ° C'de 10 dakika santrifüj 18.000 g de elde edilen çözüm
    3. Çözüm aliquots (10 µL) MS şişeleri sıvı Kromatografi-tandem kütle spektrometresi (LC-MS/MS) analiz için bir quadrupole saat uçuş (QTOF) Kütle Spektrometre sıvı Kromatografi ve LC-MS arayüzü ile donatılmıştır aktarmak.
    4. Kromatografik peptid ayrılık bir yüksek kapasiteli HPLC-Chip kullanarak gerçekleştirmek: 360 nL zenginleştirme sütun ve bir 75 µm × 150 mm analitik sütun oluşan, her ikisi ile Paketli C18-A, 180 Å, 3 µm durağan faz.
    5. Örnekleri %0,1 formik asit 2.0 µL/dk akış oranında su ile zenginleştirme sütuna yerleştirin.
    6. Örnekleri analitik kolona zenginleştirme sütundan aktarın.
    7. Peptid ayrılık koşullar vardır: doğrusal bir degrade çözücü sistemi solvent (%0,1 formik asit) su ve solvent B oluşan (ACN %0,1 formik asit). Doğrusal gradyan % 3 çözücü % 25 çözücü B 50 dk artar B ile başlar. Daha sonra çözücü B 25 dan %90 10 dk 0.3 µL/dk akış hızında artırır.
    8. 1900 V adlı ayarla kılcal bir gerilim, 360 V ayarla parçası iyon ve 12.0 L/dak bir Debi ile 225 ° C'de ayarla kurutma gaz (azot) kullanarak pozitif iyon electrospray kitle spektral verileri elde etmek.
    9. 250-1700 (kütle/ücret; kitle bir dizi üzerinde spektral sonuçlarını toplamak m/z) 8 spectra/s. toplamak MS/MS veri aralığı 50-1700 m/z ve 1.3 atomik kütle birimi küme yalıtım genişliğini üzerinde tarama oranında. Top 20 en yoğun habercisi iyonları için 0,25 dk etkin dışlama ile tandem MS her MS tarama için seçin.
21. Protein tanımlama
    1. Spektral verileri AGILENT MassHunter kalitatif analiz yazılımı kullanarak bir kütle/şarj veri biçimine dönüştürmek.
    2. Işlem veri SpectrumMill veritabanı arama motoru olarak kullanarak UniProt Cicer arietinum (nohut) veritabanı karşı.
    3. Arama parametreleri bir parça yığın hata 50 ppm, bir üst kitle hata 20 ppm, tripsin bölünme özgüllük ve carbamidomethyl gibi sistein sabit bir değişiklik içerir.

Sonuçlar

Nohut her kutu konserve sırasında eklenen maddeler belirtmek için etiketlenir. Maddeler su, nohut, tuz ve disodyum ethylenediamine tetraacetic asit (EDTA) dahil. Buna ek olarak, iki kutu "Kalsiyum klorür içeriyor olabilir gibi" etiketli. Üç ayrı astar renk gözlendi; Beyaz, açık sarı ve metalik (Tablo 1).

Marka kodu

Tuz

Disodyum...

Tartışmalar

Bu araştırma, farklı ticari kaynaklardan o nohut aquafaba özellikleri (Cilt ve istikrar köpük) ve kimyasal bileşimi değişir üretir köpükler bulduk. Aquafaba viskozite ve nem oranı arasında pozitif bir korelasyon vardı. Köpük birim artış (V_f100) Bu parametreler için ilgili değildi. Katkı maddeleri tuz ve disodyum EDTA viskozite bastırmak ve köpük istikrar ile aquafaba nohut dan konserve olabilir gibi bu katkı maddeleri daha düşük viskozite vardı ve köpükler alt köpük istikrar i...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Freeze Dryer
Stoppering Tray Dryer	Labconco Inc.	7948040
Mixer
Stainless steel hand mixer	Loblaws	PC2200MR
Viscosity Measurement
Shell cup No. 2	Norcross Corp.
Color Measurement
Colorflex HunterLab spectrophotometer	Hunter Associates Laboratory Inc.
Protein and Carbon Contents
Elemental analyzer	LECO Corp.	CN628
NMR Spectrometry
Spectrafuge 24D	Labnet International Inc.
Syringe filters	VWR International	CA28145-497	25 mm, with 0.45 µm PTFE membrane
Deuterium oxide	Cambridge Isotope Laboratories Inc.	7789-20-0
3-(trimethylsilyl)propionic-2,2,3,3-d4 acid sodium salt	Sigma-Aldrich	169913-1G
Bruker Avance 500 MHz NMR spectrometer	Bruker BioSpin
TopSpin 3.2 software	Bruker BioSpin GmbH
Electrophoresis
Regenerated cellulose membrane	Millipore Corp.		3, 10, 50 kDa (MWCO)
Centrifugal filter unit	Millipore Corp.
Benchtop centrifuge	Allegra X-22R, Beckman Coulter Canada Inc.
Mixer Mill MM 300  bead mill	F. Kurt Retsch GmbH & Co. KG
Eppendorf centrifuge 5417C	Eppendorf
Phosphate buffered saline, pH 7.4	Sigma-Aldrich	P3813-10PAK
Tris-HCl buffer pH 7.4	Sigma-Aldrich	T6789-10PAK
PageRuler Prestained Protein Ladder	Fisher Scientific
Mini-Protein Tetra Cell system	BioRad
Peptide Mass Fingerprinting
Thermo-Savant SpeedVac	BioSurplus		Centrifugal vacuum evaporator
Trypsin buffer			20 µL trypsin in 1 mM hydrochloric acid and 200 mM NH4HCO3
Iodoacetamide	Sigma-Aldrich	I1149-5 g
Trifluoroacetic acid	Fluka	BB360P050
Acetonitrile	Fisher Scientific	L14734
Formic acid	Sigma-Aldrich	33015-500mL
Mass spectrometry vial	Agilent Technologies Canada Ltd.
Agilent 6550 iFunnel quadrupole time-of-flight mass spectrometer	Agilent Technologies Canada Ltd.		Agilent 1260 series LC instrument and Agilent Chip Cube LC-MS interface
HPLC-Chip II: G4240-62030 Polaris-HR-Chip_3C18			360 nL enrichment column and 75 µm × 150 mm analytical column, both packed with Polaris C18-A, 180Å, 3 µm stationary phase.
Agilent MassHunter Qualitative Analysis Software	Agilent Technologies Canada Ltd.
SpectrumMill data extractors	Agilent Technologies Canada Ltd.