Method Article
Ultrason görüntüleme torasik ve abdominal Aort Anevrizmalarının farelerde luminal boyutlarını belirlemek için ortak bir yöntem haline gelmiştir. Bu iletişim kuralı güvenilir ve tekrarlanabilir iki boyutlu ultrason görüntüleri farelerde artan ve abdominal aort ile ilgili yordamı açıklamaktadır.
Çağdaş yüksek çözünürlüklü ultrason aletleri fare aortas ölçümü kolaylaştırmak için yeterli çözünürlüğe sahip. Bu aletlerin yaygın olarak Aort Anevrizmalarının fare modellerinde aort boyutları ölçmek için kullanılmaktadır. Aort Anevrizmalarının en sık olarak artan ve karın bölgelerinde ortaya çıkan aort, kalıcı dilations olarak tanımlanır. Aort boyutları ultrason ile sıralı ölçümleri gelişme ve ilerleme Aort Anevrizmalarının içinde vivo değerlendirmek için temel yaklaşım vardır. Her ne kadar birçok bildirilen çalışma aort çapları birincil bir bitiş noktası olarak ölçmek için Imaging ultrason kullanılır, sonda konum ve veri toplama, analiz ve yorumunu doğruluğunu etkileyen kalp döngüsü gibi karıştırıcı faktörler vardır. Bu iletişim kuralının amacı aort çapı güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde ölçmek için ultrason kullanımı pratik bir rehber sağlamaktır. Bu protokol tanıttı fareler ve aletleri hazırlanması, uygun ultrason ve veri analizi edinimi.
Aort Anevrizmalarının torasik ve/veya abdominal aort1,2,3,4bir kalıcı luminal dilatasyon tarafından karakterize yaygın damar hastalıkları vardır. Hiçbir farmakolojik terapiler dilatasyon ve patojenik mekanizmaların anlayışlar ihtiyacını vurgulayan yırtık Aort Anevrizmalarının önlemek için kurulmuştur. Aort Anevrizmalarının mekanizmaları aydınlatmak için genetik veya kimyasal işlemler tarafından üretilen fare modelleri yaygın olarak kullanılan4,5,6,7,8, olmuştur 9 , 10 , 11 , 12. aort çapı farelerde doğru miktar aort anevrizması araştırma temelidir.
Yüksek frekanslı ultrason gelişimi aort boyutları13,14,15dakika sonra küçük farklılıkları algılamak için kayma ve zamansal çözünürlük görüntülerin artmıştır. Bu farelerde aort çapları sıralı ölçümü sağlamıştır ve böylece, Aort Anevrizmalarının fare çalışmalarda aort çapları ölçme için tercih edilen yöntem haline gelmiştir. Ultrason görüntüleme basit bir teknik olmasına rağmen aort anatomi ve Fizyoloji bilgisi doğru ölçümler, veri analizi ve yorumu için uygun görüntüler elde etmek için gereklidir. Aort ile proksimal göğüs bölgesi16değişken eğrilikleri zonklayan silindirik bir organdır. Bu potansiyel yaygın olarak alınan iki boyutlu (2D) görüntülerde aort boyutları hatalı bir tespiti için katkıda bulunur. Aort ölçümleri doğruluğunu tehlikeye aort tortuosity aneurysmal devlet17tarafından daha fazla. Aort dilations güvenilir ve tekrarlanabilir ölçümler elde etmek için bu iletişim kuralı proksimal torasik ve abdominal aort çapları farelerde ölçmek için bir yüksek çözünürlüklü ultrason sistem kullanımı için pratik bir kılavuz sağlar.
Ultrason görüntüleme farelerde University of Kentucky kurumsal hayvan bakım ve kullanım kurulu onayı ile yapılır (IACUC protokol numarası: 2018-2967). Görüntüleme sırasında fareler isoflurane % 1-%3 vol/vol kullanarak ve yordam stresi azaltmak ve hipotermi önlemek için Isıtma platformda yer anestezi. Göz yağ anestezi sırasında yanıp sönme refleks kaybı nedeniyle kornea hasarı önlemek için uygulanır.
1. ekipman kurulumu
2. fare hazırlanması
3. torasik aortada görüntüleme
4. karın aortu görüntüleme
5. postscanning fare bakım ve Temizleme
6. analiz
Nonaneurysmal proksimal torasik ve abdominal aort temsilcisi ultrason şekil 3A ve şekil 3C, sırasıyla gösterilir. Artan aorta pulmoner arter yanında yer almaktadır ve kavisli bir tüp kemer bölgesinde üç şube ile formlar: innominate arter, sol ortak Karotid arter ve sol subklavyan arter (şekil 3A). Abdominal aort dorsally inferior vena kava (şekil 3D) tespit edilmiştir. Şekil 3A ve şekil 3D, normal çapları ile karşılaştırıldığında derin dilations ile torasik ve abdominal Aort Anevrizmalarının temsilcisi görüntüleri şekil 3B ve şekil 3 gösterilir H, anılan sıraya göre. Tüm ultrason görüntüleri son-diastole ele geçirildi.
Temsilcisi torasik ve abdominal aort ultrason resimleri midsystole ve sonunda-diastole (şekil 4A, C, E, G) ele geçirildi. Temsili resim ölçümleri gösterilen şekil 4B, D, F, Hsunulmaktadır. Artan aort merkezinde yeşil hat aort sinüs standartlaştırılması ve aort çapı (şekil 4B, D) artan için kullanıldı. Satırları dik Lümen aort Sinüs (Sarı Hat) adlı iki iç kenarları ve maksimal artan aort çapı (kırmızı çizgi) arasında yeşil çizgi çizildi. Göğüs ve karın aortas luminal çapları Sistol ve diastole (şekil 4A-H) arasında farklı. Karın aortu, maksimal aort çapı (kırmızı) için ve luminal alan (yeşil) idi (şekil 4F, H) ölçülür. Monitör Elektrokardiyogram temsilcisi bir görüntüsünü şekil 4beniçinde gösterilir. Kalp döngüsü için doğru ölçümler dikkate alınması gerekiyor. Son diastole ve Sistol beyaz noktalı ve pembe çizgiler tarafından sırasıyla belirtilmiştir.
Hassasiyet ve tekrarlanabilirlik bu protokol doğrulamak için bir pilot çalışma yapılır. Temsilcisi Torasik aort ultrason ve ex vivo görüntüleri şekil 5içindeAgösterilir. Artan aort çapı için bu görüntüler arasında ölçülen çaplarda büyük bir fark yoktu (ultrason: ex vivo 1,67 mm vs: 1.65 mm). Aort sinüs içinde eski görmek zor olduğu için vivo görüntü, aort sinüs çapı değil ex vivo ölçülen. Bu protokol Inter - ve intraobserver tekrarlanabilirlik şekil 5B, Cgösterilir. Potansiyel variabilities belirlemek için ultrason görüntüleme iki gözlemci ile bağımsız olarak, yani deneyimli bir kardiyolog ve nonexperienced bir lisans öğrencisi bu tekniği kullanarak aynı fare (iki farklı günlerde öğrenme tarafından gerçekleştirildi n = 5). Bütün noktalar arasında ortalama ± 1,96 SD büyük Inter gösteren şekil 5B, C, yer-ya da bu iletişim kuralı için intraobserver variabilities.
Resim 1 : İş istasyonu kurulumu. İş istasyonu indüksiyon odası anestezi, anestezik atma filtreler, ısıtmalı platformu, ultrason jeli ve sıcak jel içerir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : Sonda yerleşim proksimal torasik ve abdominal aort görüntüleme için örnekleri. (A) hakkı için yerleşim ve (B) araştırma aortik kökü, artan ve kemer bölgeler ve (C) kısa eksen görünümü abdominal aort sol parasternal uzun ekseni görünümünü. (D) A temsilcisi monitör görüntü ultrason sistemi. Siyah oklar sonda üzerinde başvuru işareti gösterir. Sarı ok başvuru işaretçisi tarafında gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 : Temsilcisi ultrason resimleri torasik ve abdominal aort. (A)Nonaneurysmal ve (B) aneurysmal artan aort, doğru parasternal uzun eksen görünümü. Aort, sol parasternal uzun eksen görünümünden artan (C) Nonaneurysmal. (D) Nonaneurysmal ve (E) aneurysmal abdominal aort. ASC Ao artan aort, IA = innominate arter, LCA = sol ortak Karotid arter, LSA = sol subklavyan arter, PA = pulmoner arter, sinüs = aort sinüs, IVC = = inferior vena kava ve Abd Ao abdominal aort =. Sarı üçgenler Aort Anevrizma belirtir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 : Ölçümler aort görüntülerin. Yakalanan(Atorasik aortada görüntülerini) midsystole ve (C) son diastole. Aort çapları ölçümleri proksimal Torasik aort bölgede (Bsırasında) midsystole gösterilen resimler ve (D) diastole. Yeşil hat artan aort ortasına gösterir. Sarı ve kırmızı çizgiler aort sinüs ve artan aort çapları sırasıyla gösterir. Basamak sarı ve kırmızı renklerde aort sinüs ve artan aort, gerçek çapları sırasıyla gösterir. Abdominal aort görüntülerini (E) midsystole ve (G) son diastole ele geçirdi. Suprarenal aorta ölçümleri (Fsırasında) midsystole gösterilen resimler ve (H) sonu-diastole. Kırmızı ve yeşil çizgiler çapı ve abdominal aort luminal alan sırasıyla gösterir. Kırmızı ve yeşil renklerde basamak gerçek çapı belirtmek ve abdominal aorta sırasıyla vardır. Elektrokardiyogram (EKG) (ben) monitör görüntü alımları sırasında kaydedildi. Yeşil ve sarı çizgiler EKG ve solunum döngüsü, sırasıyla gösterir. Beyaz noktalı çizgi sonu-diastole ve Sistol mor çizgi gösterir. P = P dalgası ve R R dalga =. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 : Hassasiyet ve tekrarlanabilirlik ultrason görüntüleme. (A)temsilcisi görüntüleri Torasik aort ultrason ve ex vivo görüntüleri C57BL/6J erkek farelerde (10-12 hafta yaşlı). Bland Altman araziler Haritayı (B) Inter- ve (C) intraobserver variabilities bu protokol. ASC Ao artan aort, IA = innominate arter, LCA = sol ortak Karotid arter, LSA = sol subklavyan arter, PA = = pulmoner arter ve sinüs aort sinüs =. Yeşil hat artan aort ortasına gösterir. Sarı ve kırmızı çizgiler aort sinüs ve artan aort çapları sırasıyla gösterir. Basamak kırmızı renklerde ultrason ve ex vivo görüntüler ölçülen artan aort gerçek çapları göstermek. Siyah noktalı çizgiler gösterir 1,96 ortalama ve ortalama ± SD Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Tamamlayıcı şekil 1: örnek görüntü ultrason analiz yazılımı. Ultrason veri analizi(a)ölçüm modunda gerçekleştirilmelidir. Bir aort ultrason görüntü analizi (B) kaydırıcıyı cine döngüsü kullanarak cine döngüden için seçilir. Merkezi hattı (C) izlenen mesafe işlevini kullanarak çizilir. Aort Boyut (D) doğrusal mesafe işlevi tarafından ölçülür. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Bu iletişim kuralı bir yüksek frekans ultrason sistemi kullanan farelerde torasik ve abdominal aort görüntü edinimi için teknik bir kılavuz sağlar. Ultrason aort görüntüleme aort ölçümleri doğruluğunu tehlikeye atabilir, sonda konumu ve kalp döngüsü gibi potansiyel confounders özellikle proksimal Torasik aort var. Bu iletişim kuralı doğru aort boyutları ölçmek için ayrıntılı talimatlar ve görüntü edinme, ölçüm ve veri analizi için stratejileri açıklar.
Proksimal Torasik aort görüntüleme için yerleşim soruşturma için birkaç yaklaşım vardır. Şekil 2içindeA doğru parasternal uzun eksen görünümünün bu protokol için Imaging ultrason için kullanıldı. Bu görünümde aort sinüs yüksek kaliteli görüntüleri aort bölümüne edinimi kolaylaştırır. Ultrasonik dalgalar girişim nedeniyle azalan aort için en uygun değil. Ağırlıklı olarak artan aortaya aortik kök içinde luminal dilatasyon sergilemek çünkü bu iletişim kuralı Torasik Aort Anevrizmalarının çoğu fare modelleri için geçerlidir. Bu fareler18,19,20,21,22,23artan Aort Anevrizma oluşumuna neden olan kronik Anjiyotensin II infüzyon içerir. Fare modelleri Marfan sendromu (fibrillin 1C1041G / + ve fibrillin 1mgR/mgR fareler) aortik kök ve aort dilatasyon23,24,25artan görüntülemek. Loeys-Dietz Sendromu fare modelleri (TGF-β reseptör 1 veya 2 düz kas hücrelerindeki postnatal silme) da anevrizma aortik kökü ve aort18,26,27,28 artan geliştirmek . Bu nedenle, doğru parasternal uzun eksen görünümü bu fare modelleri Torasik Aort Anevrizmalarının aort görüntüleme için uygundur. Öte yandan, doğru parasternal kısa eksen görünümü anevrizmalar genellikle hangi bir tahmindi çapları neden olabilir aort tortuosity tarafından karışık çünkü aortik çapraz olarak çekim potansiyeline sahiptir. Torasik aortada kısa eksen görünümü bu protokolü abdominal aort görüntüleme için kullanıldı. Aort kavisi ve tortuosity torasik aortada karşılaştırıldığında abdominal aort mütevazı olduğundan, kısa eksen görünümü Albümdeki edinimi underestimations aort çapı matlaşmış. O farklı sonda Not pozisyonları farklı görüş açıları sağlamak ve aort çapı her görüntü açısı farklı olabilir önemlidir. Bu nedenle, güvenilir aort çapı ölçümleri bir çalışma içinde tüm görüntüleri aynı prob pozisyonunun uygulayarak geliştirilmiştir. İlginçtir, üç boyutlu (3D) ultrason görüntüleri kalp ve aort edilmiştir geçtiğimiz29,30,31,32bildirdi. Buna ek olarak, mevcut ultrason sistemleri dört boyutlu görüntüleri33olarak zaman içinde 3D görüntü elde edebilirsiniz. Böylece, bu 3D görüntüleme teknolojileri sonda konumlandırma sorunu çözebilir daha doğrusu, aort yapısını göstermek için potansiyel var.
Ultrason 2D parlaklık modu (B-mod) veya tek boyutlu hareket modu (M-modu) yakalanabilir. Her ne kadar bazı makaleler M-modu aort çapı ölçüm için kullanılan, B-tercih15,34,35,36modudur. M-modu zamansal ve mekansal çözünürlüğünü artırmak için iki boyutlu olarak görüntüye kapasitelidir. Ancak, bu modu aort dik ultrasonik dalgaların yansıması eşmerkezli silindir varsayımına dayanır. Bu varsayım aneurysmal bir durumda doğru tutamayabilir ve artan aort kavisi bu zor, hatta nonaneurysmal Birleşik Devletleri yapar. Buna ek olarak, aort kalp döngüsü37boyunca sabit bir pozisyonda kalmaz. Bu nedenle, M-modu over - ve underestimations de dahil olmak üzere ölçüm hatalarına neden olabilir.
Aort ile luminal çap kalp döngüsü etkileyen unutmamak önemlidir. Beklendiği gibi Sistol aort çapı aort duvar elastikiyet ve zorlanma ile ilişkili olduğu diastole (şekil 4A-H), büyüktür. Aort duvar esneklik ve zorlanma aort çapları Sistol ve diastole arasındaki fark üzerinden hesaplanır. Esneklik ve soy aneurysmal aortas normal aortas31,34,35,38,39,40' a göre azalmıştır. Aortik sertlik doğrudan ultrason ile ölçülemez. Nabız dalga hızı ölçüm (PWV) onun sertlik aneurysmal aortas31,35,41,42yılında artış bildirilmiştir bir proxy olarak değerlendirebilir. PWV nabız dalga Doppler görüntüleri ve karşılık gelen uzak kullanarak iki Arteryel siteler arasında geçiş süresi hesaplanır. Klinik muayene, aksine aort çapları karşılaştırmak için farelerde aort ölçümler için kardiyak faz açısından sıkı yok standardizasyon yoktur. Bu nedenle, hangi kalp aşamasıdır aort ölçülerini uygun hala belli değil. Ancak, güvenilir ve tekrarlanabilir karşılaştırmalar emin olmak için aort çapları tanımlanmış bir kalp döngüsü aşamasında ölçülmelidir.
Bu iletişim kuralı aort boyutları doğru ölçmek amacıyla aort görüntüleme ve veri analizi için ayrıntılı yönergeler sağlar. Bu iletişim kuralını kullanan aort ölçüm gerçek ex vivo aort çapı (şekil 5A) ile tutarlı. Biz de bakımınıza Inter doğruladı- ve intraobserver tekrarlanabilirlik (şekil 5B, C). Bu iletişim kuralı, özellikle sonda konumu ve kardiyak döngüsü, tüm adımları doğru ölçümler için gereklidir. Ancak, uygun prosedürler kullanırken bile eserler ultrason görüntüleme sırasında kaçınılmaz. Kaburga ve akciğer, hem de solunum ve kardiyak nabız, konumunu torasik aortada görüntü kalitesini etkileyebilir. Bağırsak gazı da karın görüntüleme eserler neden olabilir. Böylece, biz ne zaman zavallı aort görüntüleri durumunda bu protokol sonrası dışlama ölçütü tanımlayarak öneririz.
Yüksek çözünürlüklü ultrason sistemleri çıkışıyla, fareler aort yapısını nefis ayrıntılı olarak seri olarak hem de geleneksel, böylece önemli ölçüde katkıda Aort Anevrizmalarının anlamak için incelenebilir. Ultrason görüntüleme, yukarıda açıklandığı gibi protokol ile Aort Anevrizmalarının farelerde miktarının için bir güvenilir ve tekrarlanabilir invaziv olmayan bir yaklaşımdır.
Yazarlar açığa çıkmasına gerek yok.
Yazarın araştırma çalışmaları Ulusal kalp, akciğer, tarafından desteklenen ve kan Enstitüsü Ulusal Sağlık Enstitüleri Ödülü altında numaraları R01HL133723 ve R01HL139748 ve Amerikan Kalp Derneği SFRN damar hastalığı (18SFRN33960001). HS bir AHA doktora sonrası bursu (18POST33990468) tarafından desteklenmektedir. J.C. NCATS UL1TR001998 tarafından desteklenir. Bu yazının içeriğinde sadece yazarlar sorumludur ve mutlaka Ulusal Sağlık Enstitüleri resmi görüşlerini temsil etmiyor.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Name of Reagent | |||
Isothesia (Isoflurane) | Henry Schin | NDC11695-6776-2 | Anesthetic Agent |
Omnicon F/Air Anesthesia Gas Filter Canister | A.M. Bickford Inc. | 80120 | Scavenging System for Anesthesia |
Puralube Vet Ointment | Dechra | NDC17033-211-38 | Lubricating Eye Drops |
Aquasonic | Parker Laboratories | 01-08 | Ultrasound Gel |
Nair | Nair | Depilliating Cream | |
Transeptic Transducer Cleaning Solution | Parker Laboratories | 341-09-25 | Cleaning spray for probes |
Name of Equipment | |||
Vevo 2100 | VisualSonics | Vevo 2100 | Ultrasound Machine |
Vevo LAB 3.0.0 | VisualSonics | Vevo LAB 3.0.0 | Ultrasound Analysis Software |
MS-550D | VisualSonics | MS-550D | Ultrasound Probe |
EX3 Vaporizer | Patterson Veterinary | EX 3 | Analogue Anestheic Vaporizer |
Heating Pad | Sunbeam | E12107 | Heating Pad |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır