Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Burada, sanal gerçeklik (VR) kullanarak fare uzamsal öğrenimini araştırmak için basitleştirilmiş bir açık kaynaklı donanım ve yazılım kurulumu sunuyoruz. Bu sistem, bir mikrodenetleyici ağı ve kullanımı kolay bir Python grafik yazılım paketi çalıştıran tek kartlı bir bilgisayar kullanarak bir tekerlek üzerinde çalışan kafası kısıtlanmış bir fareye sanal bir doğrusal iz görüntüler.
Farelerde kafa kısıtlı davranışsal deneyler, sinirbilimcilerin yüksek çözünürlüklü elektrofizyolojik ve optik görüntüleme araçlarıyla sinir devresi aktivitesini gözlemlemelerini sağlarken, davranan bir hayvana hassas duyusal uyaranlar sağlar. Son zamanlarda, sanal gerçeklik (VR) ortamlarını kullanan insan ve kemirgen çalışmaları, VR'nin, mekansal ve bağlamsal ipuçları gibi parametreler üzerinde son derece hassas kontrol nedeniyle, hipokampus ve kortekste mekansal öğrenmenin altında yatan nöral mekanizmaları ortaya çıkarmak için önemli bir araç olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, kemirgen mekansal davranışları için sanal ortamlar kurmak maliyetli olabilir ve mühendislik ve bilgisayar programlamada kapsamlı bir arka plan gerektirir. Burada, araştırmacıların bir VR ortamı kullanarak kafası kısıtlanmış farelerde mekansal öğrenmeyi incelemelerini sağlayan ucuz, modüler, açık kaynaklı donanım ve yazılıma dayanan basit ama güçlü bir sistem sunuyoruz. Bu sistem, hareketi ölçmek ve davranışsal uyaranlar vermek için birleştirilmiş mikrodenetleyiciler kullanırken, kafası kısıtlanmış fareler, tek kartlı bir bilgisayarda çalışan bir grafik yazılım paketi tarafından oluşturulan sanal bir doğrusal iz ortamıyla uyum içinde bir tekerlek üzerinde çalışır. Dağıtılmış işlemeye yapılan vurgu, araştırmacıların memeli beynindeki nöral devre aktivitesi ile mekansal öğrenme arasındaki bağlantıyı belirlemek için farelerde karmaşık mekansal davranışları ortaya çıkarmak ve ölçmek için esnek, modüler sistemler tasarlamalarına olanak tanır.
Mekansal navigasyon, hayvanların yeni yerlerin özelliklerini olası ödül alanlarını bulmak ve potansiyel tehlike alanlarından kaçınmak için kullanılan bilişsel bir haritaya kodladığı etolojik olarak önemli bir davranıştır. Hafıza ile ayrılmaz bir şekilde bağlantılı olan uzamsal navigasyonun altında yatan bilişsel süreçler, hipokampus1 ve kortekste bir nöral substratı paylaşır; burada bu alanlardaki nöral devreler gelen bilgileri bütünleştirir ve daha sonra hatırlamak için ortamların ve olayların bilişsel haritalarını oluşturur2. Hipokampus 3,4'teki yer hücrelerinin
Bu protokoldeki tüm prosedürler New York Eyalet Psikiyatri Enstitüsü Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.
NOT: Tek kartlı bir bilgisayar, kafası kısıtlanmış bir farenin tekerlek üzerinde çalışmasıyla koordine edilmiş bir VR görsel ortamını görüntülemek için kullanılır. Hareket bilgileri, tekerlek aksına bağlı döner bir kodlayıcıyı okuyan bir ESP32 mikrodenetleyicisinden seri giriş olarak alınır. VR ortamı, Raspberry Pi için pi3d Python 3D paketini kullanan Raspberry Pi GPU'daki OpenGL donanım hızlandırma kullanılarak oluşturulur. İşlenen ortam daha sonra bir projektör aracılığıyla, kafası kısıtlanm....
Bu açık kaynaklı sanal gerçeklik davranış kurulumu, yalama davranışını, kafası kısıtlanmış fareler sanal bir doğrusal iz ortamında gezinirken mekansal öğrenmenin bir okuması olarak ölçmemize izin verdi. 4 aylıkken her iki cinsiyetten yedi C57BL / 6 fare, sınırlı bir su programına yerleştirildi ve ilk önce VR olmadan rastgele mekansal ödüller ("rastgele yiyecek arama") için direksiyonda koşarken düşük seviyelerde sürekli yalamak üzere eğitildi. Performansları başlangıçta 2 m rast.......
Fareler için bu açık kaynaklı VR sistemi, yalnızca döner ve davranışlı ESP32 mikrodenetleyicileri ile IDE seri monitörü (adım 2.4.5) kullanılarak doğrulanabilen tek kartlı bilgisayar (adım 2) arasında seri bağlantılar düzgün bir şekilde yapılırsa çalışacaktır. Bu protokolden başarılı davranışsal sonuçlar elde etmek için (adım 4), fareler cihaza alışmalı ve sıvı ödüller için direksiyonda rahatça çalışmalıdır (adım 4.3-4.5). Bu, yeterli (ancak aşırı olmayan) su kısıtl.......
Clay Lacefield, bu protokolde kullanılan OMwSmall PCB için ücretsiz tasarımlar sağlayan OpenMaze.org'in kurucusu ve geliştiricisidir.
Harvey laboratuvarından Noah Pettit'e bu yazıdaki protokolü geliştirirken tartışma ve önerileri için teşekkür ederiz. Bu çalışma, NINDS R56NS128177 (R.H., C.L.) ve NIMH R01MH068542 (R.H.) 'ye ek olarak BBRF Genç Araştırmacı Ödülü ve NIMH 1R21MH122965 (G.F.T.) tarafından desteklenmiştir.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
1/4 " diam aluminum rod | McMaster-Carr | 9062K26 | 3" in length for wheel axle |
1/4"-20 cap screws, 3/4" long (x2) | Amazon.com | B09ZNMR41V | for affixing head post holders to optical posts |
2"x7" T-slotted aluminum bar (x2) | 8020.net | 1020 | wheel/animal mounting frame |
6" diam, 3" wide acrylic cylinder (1/8" thick) | Canal Plastics | 33210090702 | Running wheel (custom width cut at canalplastics.com) |
8-32 x 1/2" socket head screws | McMaster-Carr | 92196A194 | fastening head post holder to optical post |
Adjustable arm (14") | Amazon.com | B087BZGKSL | to hold/adjust lick spout |
Analysis code (MATLAB) | custom written | file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Analysis code | |
Axle mounting flange, 1/4" ID | Pololu | 1993 | for mounting wheel to axle |
Ball bearing (5/8" OD, 1/4" ID, x2) | McMaster-Carr | 57155K324 | for mounting wheel axle to frame |
Behavior ESP32 code | custom written | file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Arduino code/Behavior board | |
Black opaque matte acrylic sheets (1/4" thick) | Canal Plastics | 32918353422 | laser cut file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR screen assembly |
Clear acrylic sheet (1/4" thick) | Canal Plastics | 32920770574 | laser cut file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR wheel assembly |
ESP32 devKitC v4 (x2) | Amazon.com | B086YS4Z3F | microcontroller for behavior and rotary encoder |
ESP32 shield | OpenMaze.org | OMwSmall | description at www.openmaze.org (https://claylacefield.wixsite.com/openmazehome/copy-of-om2shield). ZIP gerber files at: https://github.com/claylacefield/OpenMaze/tree/master/OM_PCBs |
Fasteners and brackets | 8020.net | 4138, 3382,3280 | for wheel frame mounts |
goniometers | Edmund Optics | 66-526, 66-527 | optional for behavior. Fine tuning head for imaging |
HallPassVR python code | custom written | file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/HallPassVR | |
Head post holder | custom design | 3D design file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR head mount/Headpost Clamp | |
LED projector | Texas Instruments | DLPDLCR230NPEVM | or other small LED projector |
Lick spout | VWR | 20068-638 | (or ~16 G metal hypodermic tubing) |
M 2.5 x 6 set screws | McMaster-Carr | 92015A097 | securing head post |
Matte white diffusion paper | Amazon.com | screen material | |
Metal headposts | custom design | 3D design file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR head mount/head post designs | |
Miscellenous tubing and tubing adapters (1/16" ID) | for constructing the water line | ||
Optical breadboard | Thorlabs | as per user's requirements | |
Optical posts, 1/2" diam (2x) | Thorlabs | TR4 | for head fixation setup |
Processing code | custom written | file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Processing code | |
Raspberry Pi 4B | raspberry.com, adafruit.com | Single-board computer for rendering of HallPassVR envir. | |
Right angle clamp | Thorlabs | RA90 | for head fixation setup |
Rotary encoder (quadrature, 256 step) | DigiKey | ENS1J-B28-L00256L | to measure wheel rotation |
Rotary encoder ESP32 code | custom written | file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/software/Arduino code/Rotary encoder | |
SCIGRIP 10315 acrylic cement | Amazon.com | ||
Shaft coupler | McMaster-Carr | 9861T426 | to couple rotary encoder shaft with axle |
Silver mirror acrylic sheets | Canal Plastics | 32913817934 | laser cut file at github.com/GergelyTuri/HallPassVR/hardware/VR screen assembly |
Solenoid valve | Parker | 003-0137-900 | to administer water rewards |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır