Başlamak için, yumurtadan yeni çıkmış 200 yetişkin drosophila'yı plastik silindir şeklindeki bir kafese yerleştirin. Kafesin bir tarafını havalandırma için gözenekli metal ağla, diğer tarafını meyve suyu ve maya macunu agar plakasıyla kapatın. Enjeksiyon gününde, kafesin agar plakasını minimum maya ezmesi içeren bir meyve suyu plakası ile değiştirin.
Embriyoları toplamak için plakayı bir saat boyunca 25 santigrat derecede inkübe edin. Daha sonra yumurtlamayı durdurmak için plakayı kafesten çıkarın ve iki ila üç saatlik embriyolar elde etmek için iki saat daha 25 santigrat derecede inkübe edin. Yumurta kabuğunu embriyolardan çıkarmak için, meyve suyu tabağına iki mililitre% 50 ağartıcı solüsyon ekleyin.
Bir boya fırçası kullanarak, embriyoları plakadan nazikçe çıkarın ve yumurta kabuğu çıkarma verimliliğini artırmak için her 30 saniyede bir döndürürken plakayı iki dakika inkübe edin. Daha sonra embriyo ve ağartıcı karışımını 70 mikrometrelik bir naylon hücre süzgecine dökün. Kalan ağartıcı ve maya macununu ortadan kaldırmak için embriyoları bir su şişesiyle kapsamlı bir şekilde durulayın.
Temiz bir tıraş bıçağı kullanarak dikdörtgen bir agaroz bloğu kesin ve bloğu bir cam slayt üzerine yerleştirin. Bir boya fırçası ile embriyoları süzgeçten jel bloğa aktarın ve nazikçe fırçalayarak bloğun orta çizgisi boyunca eşit olarak dağıtın. Şimdi, tek bir keskin nokta oluşturmak için iki bacağı güvenli bir şekilde bantlanmış bir cımbız hazırlayın.
Diseksiyon mikroskobu altında, cımbız kullanarak tek tek embriyoları seçin ve bunları jel bloğunun uzatılmış kenarı boyunca hizalayın. 24 x 50 milimetrelik bir kapak kaymasının orta noktasına 10 mikrolitre heptan yapıştırıcı pipetleyin. Yapıştırıcıyı 0,5 x üç santimetre dikdörtgen bir alana yaymak için bir pipet ucu kullanın.
Düz uçlu bir cımbız kullanarak, tutkal kaplı kapak kızağını kaldırın ve tutkal tarafının embriyolara yaklaşık 45 derecede bakmasını sağlayarak embriyoların üzerinde sabit bir şekilde tutun. Kapak fişini jel bloğa hafifçe bastırarak embriyoların yapıştırıcıya dokunmasına izin verin. Basıncı hızla boşaltın ve kapak kızağını yükseltin.
Ardından taze bir cam slaydın ortasına 10 mikrolitre su dağıtın. Embriyo taşıyan kapak kızağını, embriyo tarafının yukarı bakmasını sağlayacak şekilde üzerine yerleştirin. Daha sonra, embriyo şeridinin bir ucuna 40 mikrolitre halo karbon yağı uygulayın.
Halo karbon yağı embriyonun yüzeyini kaplayana kadar slaytı açın.
