Başlamak için, bir saat boyunca ötenazi çözeltisine batırılmış kurbağayı alın ve ağrı tepkisi olup olmadığını kontrol etmek için ayağını sıkın. Xenopus'u tartın ve burundan havalandırmaya kadar olan uzunluk gibi ek ölçümler yapın. Kurbağayı sırt üstü yatırın ve uzuvlarını vücuda yakın bir yere sabitleyin.
Diseksiyon makası kullanarak, orta hat boyunca deriden bir kesi yapın ve ardından iki cilt flebi oluşturmak için yanal olarak uzatın. Sonra linea alba'yı bulun ve forseps ile kavrayın. Yavaşça sölomik boşluktan çekin ve makas kullanarak alttaki kas sistemini kesin.
Boşluk duvarından iki kanat oluşturun. Hala atan kalbi tanımlayın ve daha iyi erişim için korakoid kemikleri kesmek için diseksiyon makası kullanın. Şimdi ince perikardları tanımlamak ve germek için doku forsepsleri kullanın.
İridektomi makasının ucunu kullanarak perikardı dikkatlice delin. Sonra perikardımı kalbin üç odasından uzaklaştırın. Bu protokolde kalp ventrikülü, karaciğerin sol lobu, pankreas, yağ cisim, eşleştirilmiş böbreklerin örneklemesi gösterilir.
Kalp ventrikülünü örneklemek için, ventrikülü apeksten forseps ile kavrayın, kulak kepçeleri ve arter gövdesi ile bağlantısını bulun ve bu noktaların altından kesin. Sonra, karaciğerin üç lobunu gözlemleyin. Hepatik ve kistik kanalları ortaya çıkarmak için sol lobu hafifçe kaldırın ve bu lobun üçte birini kanalların altından örnekleyin.
Kurbağa dişi ise, germinal epitel ile kaplı yumurtalığı bulun. Bağlantı alanını ortaya çıkarmak için lobları her iki tarafa nazikçe yeniden konumlandırın. Yumurtalıkları böbreklere zarar vermeden mümkün olduğunca yakın çıkarmak için makas kullanın.
Daha sonra karaciğerin medial lobunu ve mezenter ve hepatopankreatik kanal yoluyla mide ve duodenum ile olan bağlantılarını inceleyin. İridektomi makası kullanarak duodenumun yakınındaki mezenter, hepatoduodenal ligament ve hepatopankreatik kanalı kesin. Koyu karaciğer dokusunu bağlı bırakmadan pankreas ve kanalı karaciğerin medial lobundan ayırın.
Daha sonra, mideyi dişli forseps yardımıyla tutun, ardından pankreasın üst ucunu tutmak için doku forsepslerini kullanın. 5X büyütme altında, pankreası mideden dikkatlice ayırın. Şimdi idrar kesesini bulun ve eksize edin, kloaka mümkün olduğunca yakın kesin ve ardından dokuyu atın.
Bundan sonra, kalın bağırsağı tanımlayın ve gerin, kloaka yakınında kesin. Daha sonra, yağ cisimlerini her iki tarafa ayırın, sol yağ gövdesinin tabanını kavrayın ve peritondan kesin. Dişi kurbağalarda veya görünür körelmiş yumurta kanallarına sahip erkeklerde, bir yumurta kanalı tutun ve onu böbrek ve kloakadan ayırın.
Kloaka bileşkesinde kesin ve şeffaf peritoneal ekleri çıkararak böbrekten ayırmaya devam edin. Şimdi böbrekleri tutmak için forseps kullanın ve peritonu alt uçlarından kesin. Makas kullanarak böbrekleri sölomik boşluktan kaldırın.
Peritonu zarar vermeden böbreklere mümkün olduğunca yakın bir şekilde ayırın. 5X büyütme altında, fazla periton ve testis, yağ cisimleri veya dalak gibi kalıntı dokuları çıkarın. Hayvanı serbest bıraktıktan sonra, karnına yerleştirin ve uzuvlarını sabitleyin.
Örnekleme için bir arka bacak seçin ve ayağını sabitleyin. Badem şeklindeki bir deri flebini gastroknemius veya tibiofibula bölgesinden çıkarın. Daha sonra, tüm numuneleri PBS'de durulayın, fazla doku olup olmadığını kontrol edin ve gerekirse kullanmadan önce kesin.
Kalp ventrikülü, karaciğerin sol lobu, pankreas, sol yağ cisimleri, eşleştirilmiş böbrekler ve bir deri flebi ötenaziden sonraki bir saat içinde temiz bir şekilde çıkarıldı.
