Otomatik Mikrobiyal Tanımlama ve Antimikrobiyal Duyarlılık Test Sistemi (aMIAST) Kullanarak Bakteri Tanımlaması için Standart İnokulum Protokolü (SIP)

Başlamak için, %70 izopropil alkol ile monomorfik gram negatif organizmalar içeren otomatik bir kan kültürü şişesinin septumunu Sınıf II A biyogüvenlik kabini içinde temizleyin. Ardından, 21 gauge iğne ile donatılmış steril bir şırıngaya bir mililitre kan suyu karışımı çekin. Karışımdan büyük bir damla kaplanmış bir ortamın yüzeyine dağıtın.

Plakaları çizdikten sonra, kültürleri 18 ila 24 saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin. Biyogüvenlik kabini içindeki izole koloniler için plakaları inceleyin. Daha sonra, üç mililitre steril salini bir dağıtıcı şişesi olan bir aMIAST tüpüne dağıtın.

Şimdi steril bir düz aşılama teli ile morfolojik olarak benzer üç ila beş koloni toplayın. İnokulumu ilk tüpe aktarın. Süspansiyonun bulanıklığını 0,47 ile 0,63 McFarland arasında ayarlamak için salin ve dansitometre kullanın.

Ardından, ilk tüpe gram negatif aMIAST kimlik kartına bir kılcal bağlantı yerleştirin. Seçilen kartları kasete yerleştirin. Şimdi, kaseti, numune barkodu içe bakacak şekilde doldurma haznesindeki konumuna yükleyin.

Kapıyı kapatın ve kullanıcı arayüzü ekranında Doldur'a basın. Doldurma döngüsü tamamlandığında, sistemdeki mavi gösterge ışığı yanıp sönecektir. Şimdi, kaseti doldurma haznesinden yükleme haznesine aktarın.

Yükleme tamamlandığında kaset atıklarını çıkarın. İzolatların saflığını kontrol etmek için tüplerde kalan süspansiyonu CLED agar üzerinde alt kültüre alın. Standart aşılama protokolü, test edilen 204 izolattan 105'ini RAST raporlanabilir gram negatifler olarak tanımladı ve Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa ve Acinetobacter baumannii kompleksi tanımlanan birincil organizmalardı.