Başlamak için, 2A sınıfı bir biyogüvenlik kabini içinde %70 izopropil alkol içeren monomorfik gram negatif organizmalara sahip otomatik bir kan kültürü şişesinin septumunu temizleyin. Beş mililitre kan suyu karışımını 21 gauge iğne ile donatılmış steril bir şırıngaya çekin. Ardından, bir kauçuk ayırıcı tüpün kauçuk septumunu dezenfekte edin.
Kan suyu karışımını tüpe aktarın. Numuneyi 160 G'de 10 dakika santrifüjleyin. Şimdi, süpernatanı bir biyogüvenlik kabininin içine dikkatlice pipetleyin.
Süpernatanı yeni bir düz kan alma şişesine aktarın. Kapaklı şişeyi 10 dakika boyunca 2000 G'lik bir santrifüje koyun. Şimdi, süpernatanı steril bir pipetle aspire edin.
Daha sonra üç mililitre steril salini bir dispenser şişesi ile bir aMIAST tüpüne dağıtın. Steril bir aşılama halkası kullanarak, bakteri peletini şişenin altından alın ve aMIAST tüpüne aşılayın. Süspansiyonun bulanıklığını 0,47 ile 0,63 arasında ayarlamak için steril salin ve bir dansitometre kullanın.
Ardından, gram negatif aMIAST kimlik kartının kılcal ekini ilk tüpe yerleştirin. Seçilen kartları kaset üzerinde uygun şekilde konumlandırın. Şimdi, kaseti, numune barkodu içe bakacak şekilde doldurma haznesindeki konumuna yükleyin.
Kapıyı kapatın ve kullanıcı arayüzü ekranında doldur düğmesine basın. Doldurma döngüsü tamamlandığında, sistemdeki mavi gösterge ışığı yanıp sönecektir. Şimdi, kaseti doldurma haznesinden yükleme haznesine aktarın.
Yükleme tamamlandığında kaset atıklarını çıkarın. İzolatların saflığını kontrol etmek için tüplerde kalan süspansiyonu CLED agar üzerinde alt kültüre alın. Doğrudan inokülum protokolü kullanılarak tanımlanan yedi pozitif kan kültürü şişesinin sonuçları, tür seviyesine kadar uyumsuzdu.
Standart inokulum protokolü ile tanımlanan 105 RAST raporlanabilir gram negatifinden 98'i doğrudan inokulum protokolü ile doğru bir şekilde tanımlandı. RAST olmayan 99 raporlanabilir gram negatif arasında, dört pozitif kan kültürü şişesinde bir RAST raporlanabilir gram negatif tespit edildi.
