Bu çalışma, RWTH Aachen Üniversitesi, Almanya (: START 690753 &quot;arteriyel venöser Gefäße Die&quot; Başlık) tıp fakültesi araştırma tanıtım programı &quot;START&quot; tarafından finanse edildi. Biz onu mükemmel düzenleme yardım için Bayan Mary-Joan Blümich teşekkür etmek istiyorum.

1. Deney Hayvanları <ol><li> Hayvan koruma FELASA yönergelere uygun olarak yapılacaktır tüm deneyler için bir Yerel Etik Kurul onayı edinin. </li><li> Herhangi bir ticari yetiştirici (örn. Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld, Almanya) satın almak için mevcut dişi Sprague-Dawley sıçan kullanın. Biz 7 hayvanlar postoperatif 3, 6 ve 12. haftalarda sakrifiye edildi her üç grupta 21 hayvan kullanılmıştır. Satın zamanda, hayvanların yaşı 12 hafta olacak ve 250-300 g tartmak gerekir. </li><li> 21 arasında bir ortam sıcaklığında olan iklim kontrollü odalarda hayvanların tutun ° C, yiyecek ve su ücretsiz erişim ile% 60 bağıl nem ve 12 saat ışık-karanlık döngüsü. </li></ol> 2. Anestezi ve Operatif Hazırlama <ol><li> 1 L / dk oksijen akış hızı ayarlanır, anestezi makineye bağlı bir Pleksiglas kutu kullanarak genel anestezi neden, ve bir isofluorane buharlaştırıcı wITH% 5 anestezik gaz. </li><li> Kısa sürede hayvanların derin duyu refleks olarak bastırılır% 1.5 isofluorane buharlaştırıcı ile anestezi koruyun. </li><li> Bir vücut ısınma plaka üzerine sırtüstü pozisyonda sıçan Fix. </li><li> Ağız sapı sternumun 2 cm altına çene açısı, bir epilasyon kremi ile kürk aşağı kaldırarak her hayvan Operasyon bölgesini hazırlayın. </li><li> Cerrahi alanda, hayvan ve cerrahın önünde hazırlanan alana dikkat ederek steril bir cerrahi alan hazırlayın: </li><ul><li> Bir dezenfektan ile benchtop temizleyin. </li><li> Cerrahi fırçalayın çözüm çoklu uygulamalar (örneğin Klorheksidin ve% 70 izopropil alkol) kullanılarak kesi yeri hazırlayın. Ilk alkol ikinci ve nihayet, fırçalama çözüm Klorheksidin uygulayın. </li><li> Önceden w yıkanmış bir tek kullanımlık cerrahi önlük ve cerrahi eldiven, veya alternatif olarak, sınav eldiven giyinITH cerrahi bir dezenfektandır. </li></ul><li> Ameliyatınızla steril mikrocerrahi aletleri kullanın. </li><li> 10-20-kat büyütme bir operasyon mikroskobu (Wild Heerbrugg M650, Gais, İsviçre) kullanın. </li></ol> 3. Anatomi Şekil 1 sıçan boyun anatomisi gösteriyor: Sağ sternokleidomastoid kasının transeksiyonu önce 1a) Situs. 1b) sağ SKM kasın transeksiyonu sonrası situs. 4. Manşet Hazırlık Bir plastik boru (portex, iç çapı 0.75 mm, dış çapı 0.94 mm, Smiths Medical, UK) adlı el ile 3 mm arasında bir uzunluk olarak manşet kesin. Kelepçeler plastik tüp tam miktarı dahil olmak üzere, bir boru şeklinde manşet gövde, ve manşon hacminin yarısına oluşan bir manşon sap oluşur. Manşet vücut ve manşet kolu iki eşit lon olmalıdırg. Manşet kolu cerrahi prosedür sırasında manşon işlemek için gereklidir. Manşet geminin üzerinde süzüldü sonra, bir mini Bulldog kelepçe, kanama önlemek pozisyonda manşet tutmak ve istikrarı sağlamak amacıyla, manşet kolu ve gemi aynı anda yerleştirilir. 5. Manşet Tekniği <ol><li> Geminin üzerinde manşet Kayma. </li><li> Hemen ardından, geminin tersyüz manşet vücudun dışında üzerinden çekin ve 7-0 ipek ligatür ile sabitleyin. Bu şekilde, manşet lümeninde endotel ile kaplıdır. Bundan sonra, manşet vücut üzerinde venöz greft kayma ve yeni 7-0 ipek ligatür ile sabitleyin. Trombüs oluşumunu önlemek için, o yerde arter tutan kravat temas kan önlemek için manşet marjı çok yakın ven grefti kravat bağlamak için gereklidir. Bu kan akış yönünü nedeniyle distal anastomoz için çok önemlidir. Bununla birlikte yazarlara göre, kabul edilmezaynı nedenle proksimal anastomoz için gereklidir. </li></ol> 6. Cerrahi Prosedür Sağ eksternal juguler venin 6.1 hazırlanması <ol><li> Doğrudan ağız sapı sternumun üzerinde yaklaşık 2,5 cm uzunluğunda median servikal kesi olun. </li><li> Tamamen çevre dokulardan sağ eksternal juguler venin 1 cm-uzun segment ayırmak </li><li> 7-0 ipek sütür ile venöz kolları Arter. </li></ol> Sağ ana karotis arter 6.2 hazırlanması <ol><li> SKM kas hazırlayın ve ortasına transeksiyonu. </li><li> Arter veya Vagus siniri sıkıştırmak için değil, emin, dikkatli sağ ana karotis arter hazırlayın. Brakiyosefalik gövde aşağı karotid bifurkasyon onu harekete geçmek. </li><li> Akabinde, transeksiyonu önce 7-0 ipek dikişlerle ortasında iki kez Arter. </li><li> Bir naylon manşet consisti Kaymabir gövde ng ve bu manşon sap kap (Şekil 2b) arkasında olduğundan emin olmak için önemli olan vasıtasıyla ortak karotid arteri distal ucu üzerinde bir tutamak (Şekil 2a). </li><li> Tam stabilite (Şekil 2c) sağlamak için manşet tanıtıcı bir mini Bulldog kelepçe ile distal karotis arter kaflı sonunda kelepçe. </li><li> Daha sonra ortaya çıkan arteriyel güdük manşet vücut gibi uzun olmalıdır sayede ligatür, arkasında doğrudan arter kesti. </li><li> Heparin-tuzlu su çözeltisi (20 IU heparin / ml% 0.9 NaCl) ile arteryel lümen durulayın. Daha sonra kullanmak için uygun konumda bir kenara ligasyon döngü ayarlayın. </li><li> Arteriyel güdük yukarı çekin ve manşet vücut üzerinde bir kol gibi kayma. </li><li> Daha sonra, ligasyon döngü ve sıkıca düğüm çekin. </li><li> Onun kolunun dışına kaymasını arter önlemek için, bir hile uygulamaya koyabilir: sağ s ile arteriyel duvar ve sütür hem kavramakimultaneously ve sol forseps ile (Şekil 2d) düğüm (Şekil 2e) yapmak. </li><li> Proksimal arteryel güdük (Şekil 2f) için aynı işlemi tekrarlayın. </li></ol> 6.3 Venöz greft konumlandırma <ol><li> Ve Özel Tüketim 1 cm-uzun segment eksternal juguler venin kenetlenir </li><li> İki kaflı arter ven interpozisyonu birbirinden çok uzak olduğu için, yaklaşık bu işlem için doğru mesafe 3-0 Vicryl-sütür kullanarak hangi sen-meli her mini Bulldog kelepçe etrafında döngü. </li><li> Criss-cross hem dikişler. </li><li> Daha sonra, kaflı arteriyel kütükleri doğru konumlandırma (Şekil 2g) etkinleştirerek, zıt yönlerde sütür çekin </li><li> Heparin-serum fizyolojik ile ven segmenti durulayın. </li><li> Manşonlu karotid arterin distal üzerinde önceden tersine damar kademeli bir ucunda kayma ve doğru konumda içinde sabitlemekipek 7-0 ligatür ile tion. </li><li> Bu damarın çevresi tamamen ve eşit kavramış olması gerektiğini burada not etmek önemlidir. </li><li> Heparin-serum fizyolojik ile damar kademeli durulayın, proksimal karotis güdük fazla damar parçasının diğer ucunda kayma. </li><li> Ligasyon (Şekil 2h) tamamlayın; </li><li> Böylece engelsiz kan akımı ve venöz greft (Şekil 2i) arasında arterleştirilmelerine sağlayan mini Bulldog kelepçeler proksimal biri sonra diğeri, distal karotis arter kütüğünün üzerine ilk ve sonra tek tek çıkarın. Kan akımı ve nabız greft ve karotis arter (görsel olarak değerlendirilir) içinde gözlenen eğer ameliyat başarılı kabul edilir. </li></ol> 6.4. Yara kapatılması Subkutan devamlı sütür için 4-0 Vicryl kullanın. Bir deri devamlı sütür için 3-0 Vicryl kullanın. 7. Kurtarma ve Postoperatif Yönetimi &lt;/ P&gt; <ol><li> Hayvanlar kızılötesi ısınma lamba altında düz bir kağıt yatak üzerinde anestezi kurtarmak edelim. Bütün hayvanların normal görünüyor kadar hayvan tutma alanına çalışan hayvanlar iade etmeyin. </li><li> Ameliyat sonrası 0,03-0,05 mg / kg vücut ağırlığı sc 2 gün boyunca her 8-12 saatte bir konsantrasyon içinde Buprenorfin (Temgesic) yönetmek. Buprenorfin sadece isofluorane indüksiyonundan önce uygulanan olabilir. </li><li> Onların genel durumu ve hastalık ya da enfeksiyon belirtileri için postoperatif hayvanları izleyin. </li></ol> 8. Kan Akış Ölçümü Bir perivasküler flowprobe (3 mm, MA3PSB) ile: greftinin postoperatif açıklığının bir araştırma Transonik kan akımı ölçüm sistemi (TS420, Transonik Systems Europe BV, Maastricht, Hollanda Modeli) kullanılarak, kan akış ölçümü ile ispatlandı. Sistem Doppler prensibine dayanır. 9. Temsilcisi Sonuçlar Faithfully talimatları yukarıda tutarak, cerrahi operasyon süresi ortalama 65 dk idi. Hayvanların mükemmel fiziksel durumu sundu ve tüm deney boyunca beklenildiği gibi ağırlık kazandı: operasyonun başlangıç ​​noktasında hayvanlar 312 tartılır ± 20.39 gr. 3 hafta kurban zamanı noktada operasyon sonrası hayvanların 6 hafta, 325.2 ± 28.7 g tartılarak 333 ± 39.9 g ve 12 haftada 362,22 ± 29 g. Hayır enfeksiyonları operasyon sahasının ve geliştirilen hiçbir yaralar gözlendi. Ameliyat yaraları beklenen anda tamamen iyileşti. Nörolojik kontrolü beyin enfarktüsü veya motorik eksikliği belirtisi gösterdi. Hayvanlar karotis arter ameliyat edildi ve iki harici damarlarından biri kaldırıldı ve otomatik nakli olarak kullanılan bu yana daha önemli bir nokta oldu. Postoperatif ağrı azaltılması tedaviye herhangi bir alerjik reaksiyon gözlendi. &gt; Bütün hayvanlar, bütün deney boyunca uyanık ve sosyal edildi. Gıda ve su alma konusundaki alışkanlıkları bütün zaman boyunca değişmemiştir. Tüm deneyler hayatta kalma oranı, kurban zaman noktasında% 100 idi. Greft kalma oranı, ilk 10 işletilen hayvanlar için% 60 ve geriye kalan 11 hayvan için buna uygun olarak% 82 idi. Toplam greft açıklığı% 71 idi. Arterialized venöz greft içinde kan akışı kurban bir zaman noktasında ölçülmüş ve 8 oldu ± üç kurban zaman noktaları arasında önemli bir fark olmaksızın, 3 ml / dakika. <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. Sıçan boyun anatomisi. Sağ sternokleidomastoid kasının transeksiyonu önce 1a) Situs. 1b) sağ SKM kasın transeksiyonu sonrası situs. e_content &quot;fo: keep-together.within-page =&quot; always &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig2.jpg" alt="Şekil 2," /> . Şekil 2 İntraoperatif mikroskobik fotoğrafları: kaf-beden ve kaf-kolu oluşan) manşet; kelepçeli distal karotis arter güdük sıkılmasına) c, b) Kolluk karotis arter distal ucuna kaymış d) eversiyon manşet üzerinde karotis arter güdük, e) Bir ligatür ile dışa çekik karotis arter güdük güvence; f) kaflı distal ve proksimal karotis arter kütükleri hem eversiyon sonrası situs; iki kelepçeli yaklaştırmaya yönelik g) çapraz tekniği karotis arter kütükleri; h) venöz interpozisyonu sonrası situs; ven greft interpozisyonu reperfüzyon sonrasında i) situs. <img src="/files/ftp_upload/4124/4124fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3. Situs şematik olarak gösterilmesiven greft interpozisyonu reperfüzyon. sonra <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4124/4124fig3large.jpg" target="_blank">büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın</a> .

<ol>
	<li>Motwani, J. G., Topol, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortocoronary+saphenous+vein+graft+disease:+Pathogenesis,+Predisposition,+and+Prevention.">Aortocoronary saphenous vein graft disease: Pathogenesis, Predisposition, and Prevention.</a> Circulation. 97, 916-931 (1998).</li><li>Bonatti, J., Oberhuber, A., Schachner, T., Zou, Y., Hammerer-Lercher, A., Mittermair, R., Laufer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neointimal+hyperplasia+in+coronary+vein+grafts:+Pathophysiology+and+prevention+of+a+significant+clinical+problem.">Neointimal hyperplasia in coronary vein grafts: Pathophysiology and prevention of a significant clinical problem.</a> The Heart Surg. , E72-E87 (2004).</li><li>Roy-Chaudhury, P., Kelly, B. S., Zhang, J., Narayana, A., Desai, P., Melhem, M., Duncan, H., Heffelfinger, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodialysis+Vascular+Access+Dysfunction:+From+Pathophysiology+to+Novel+Therapies.">Hemodialysis Vascular Access Dysfunction: From Pathophysiology to Novel Therapies.</a> Blood Purif. 21, 99-110 (2003).</li><li>Dixon, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+don't+fistulas+mature.">Why don't fistulas mature.</a> Kidney Int. 70, 1413-1422 (2006).</li><li>Newby, A. C., Zaltsman, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+in+intimal+hyperplasia.">Molecular mechanisms in intimal hyperplasia.</a> J. Pathol. 190, 300-309 (2000).</li><li>Schachner, T., Heiss, S., Zipponi, D., Tzankov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+treatment+with+azathioprine+reduces+neointimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts.">Perivascular treatment with azathioprine reduces neointimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Heart Surg. 9, E515-E517 (2006).</li><li>Zhang, L., Sivashanmugam, P., Wu, J. H., Brian, L., Exum, S. T., Freedman, N. J., Peppel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+necrosis+factor+receptor-2+signaling+attenuates+vein+graft+neointima+formation+by+promoting+endothelial+recovery.">Tumor necrosis factor receptor-2 signaling attenuates vein graft neointima formation by promoting endothelial recovery.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 28, 284-289 (2008).</li><li>Tzankov, A., Mairinger, T., Laufer, G., Bonatti, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+application+of+rapamycin+inhibits+neointimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts.">Local application of rapamycin inhibits neointimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Ann. Thorac. Surg. 77, 1580-1585 (2004).</li><li>Zou, Y., Dietrich, H., Hu, Y., Metzler, B., Wick, G., Xu, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Model+of+Venous+bypass+graft+arteriosclerosis.">Mouse Model of Venous bypass graft arteriosclerosis.</a> A.J.P. 153, 1301-1310 (1998).</li><li>Schachner, T., Oberhuber, A., Zou, Y., Tzankov, A., Ott, H., Laufer, G., Bonatti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapamycin+treatment+is+associated+with+an+increased+apoptosis+rate+in+experimental+vein+grafts.">Rapamycin treatment is associated with an increased apoptosis rate in experimental vein grafts.</a> Eur. J. Cardiothorac. Surg. 27, 302-306 (2005).</li><li>Ali, Z., Bursill, C., Hu, Y., Choudhury, R. P., Xu, Q., Greaves, D. R., Channon, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+of+a+broad+spectrum+CC-chemokine+inhibitor+reduces+vein+graft+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-knockout+mice.">Gene transfer of a broad spectrum CC-chemokine inhibitor reduces vein graft atherosclerosis in apolipoprotein E-knockout mice.</a> Circulation. 30, 1235-1241 (2005).</li><li>Zou, J., Zhang, X., Yang, H., Zhu, Y., Ma, H., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapamycin-loaded+nanoparticles+for+inhibition+of+neointimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts.">Rapamycin-loaded nanoparticles for inhibition of neointimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Ann. Vasc. Surg. 25, 538-546 (2011).</li><li>Wang, J., Liu, K., Shen, L., Wu, H., Jing, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+interfering+RNA+to+c-myc+inhibits+vein+graft+restenosis+in+a+rat+vein+graft+model.">Small interfering RNA to c-myc inhibits vein graft restenosis in a rat vein graft model.</a> J. Surg. Res. 169, e85-e91 (2011).</li><li>Schachner, T., Zou, Y., Oberhuber, A., Mairinger, T., Tzankov, A., Laufer, G., Ott, H., Bonatti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+application+of+C-type+natriuretic+peptide+attenuates+neointimal+hyperplasia+in+experimental+vein+grafts.">Perivascular application of C-type natriuretic peptide attenuates neointimal hyperplasia in experimental vein grafts.</a> Eur. J. Cardiothorac. Surg. 25, 585-590 (2004).</li><li>Thomas, A. C., Newby, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+matrix+metalloproteinase-9+knockout+on+vein+graft+remodelling+in+mice.">Effect of matrix metalloproteinase-9 knockout on vein graft remodelling in mice.</a> J. Vasc. Res. 47, 299-308 (2010).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Karotis arter bir eksternal juguler ven grefti interposing gelişmiş mikrocerrahi tekniktir. Bu video acemi cerrah deney hayvanları daha düşük bir atık olan en kısa sürede bu tekniği ana yardımcı olur. Bu, aşırı derin anestezi aşamasında önler iyi kontrol edilebilir ve cerrahın yeterli zaman çalışmasına izin beri Solunum anestezi, bu işlem için en iyi seçenektir. Ayrıca sıçan, fare ile karşılaştırıldığında, çok daha kolay gibi karmaşık cerrahi teknikler...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Örgülü İpek siyah 7-0 </td><td> Ethicon Ürünler </td><td> 892100 </td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 3-0 </td><td> Ethicon Ürünler </td><td> J285G </td><td></td></tr><tr><td> 4-0 Vicryl </td><td> Ethicon Ürünler </td><td> J284G </td><td></td></tr><tr><td> Portex steril olmayan naylon tüp 0,75 mm, 0,94 mm İnce Delik Polietilen (Polietilen) Boru </td><td> Portex İngiltere </td><td> 800/200/175/100 </td><td></td></tr><tr><td> Isofluorane% 5 </td><td></td><td></td><td> Herhangi bir genericon </td></tr><tr><td> Heparin </td><td></td><td></td><td> Herhangi bir genericon </td></tr><tr><td> % 0.9 salin </td><td></td><td&gt; </td><td> Herhangi bir genericon </td></tr><tr><td> Buprenorfin </td><td></td><td></td><td> Herhangi bir genericon </td></tr></tbody></table>

training a sophisticated microsurgical technique: interposition of external jugular vein graft in the common carotid artery in rats

Neointimal hiperplazi biridir periferik arter bypass cerrahisi yanı sıra arteriyovenöz fistüllerde arter koroner bypass cerrahisinde büyük önem taşımaktadır arterialized damarlarında darlık başlıca nedenleri. 1-5 karotis arter ven greft interpozisyonu deneysel prosedür kaf-tekniği kullanılarak neointimal hiperplazi ve çözmemiz için tedavi seçeneklerinin etiyolojisi incelemek için çeşitli araştırma projeleri tatbik edilmiştir. 6-8 manşet neointimal hiperplazi gelişimi böylece damar anastomoz biçimlenme önler ve greft içindeki türbülansı neden ve. Üstün kaval ven grefti kullanma venöz arterleştirilmelerine deney için kurulmuş bir küçük hayvan modelidir. 9-11 Bu akım protokolü kurulmuş bir jugular ven greft interpozisyonu ilk Zou ve arkadaşları tarafından tanımlanmıştır tekniği., 9 yanı sıra başkalarına ifade eder. 12-14 </sup&gt; Bununla birlikte, bu anılan küçük hayvan protokolleri karmaşıktır. Prosedürü kolaylaştırmak ve gerektiğinde deney hayvanlarının sayısını en aza indirmek için, video eğitim bir detaylı çalışma protokolü sunulmaktadır. Bu video manşet-teknik ve ven greft interpozisyonu hem öğrenmek acemi cerrah yardımcı olacaktır. Bu vesile ile, sağ eksternal juguler ven ise günde 21, 42 ve 84, sakrifiye edildi üç eşit gruba kategorize 21 dişi Sprague Dawley cinsi rat karotis arter kaf-tekniğinde aşılanmıştır. Oto-transplantasyon yapıldı çünkü Özellikle, bir donör hayvanlar, ihtiyaç vardı. Hayatta kalma oranı, kurban zaman noktasında% 100 idi. Buna ek olarak, greft kalma oranı, ilk 10 işletilen hayvanlar için% 60 ve geriye kalan 11 hayvan için% 82 idi. Hayvanlar öldürüldükten hemen sonra da kan akışı 8 ± 3 ml / dak idi. Sonuç olarak, bu cerrahi protokol ölçüde basitleştirir, optimize eder ve bu comp standartlaştırırprosedürü Licated. Bu böylece onları hızlı bir uzmanlık kazanmak ve deney hayvanlarının gereksiz kurban engellemek için yardım, olası tehlikelerini anlatan, acemi cerrahlar kolay, adım-adım talimat verir.

Watch this Scientific Journal Video about Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats at JoVE.com

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal hiperplazi arterialized damarlarında darlık birincil nedenidir. Biz sağ eksternal juguler ven Sprague Dawley sıçan karotis arter manşet tekniği kullanılarak aşılı sayede yeni bir protokol öneriyorum. Hayatta kalma oranı, kurban zaman noktasında% 100 idi.

Sıçanlarda Common Karotid Arter interpozisyon Harici Juguler Ven Greft: Gelişmiş Mikrocerrahi Tekniği Eğitimi

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

training-sophisticated-microsurgical-technique-interposition-external

Research

JoVE Journal

Medicine

20.3K Görüntüleme.  University Hospital RWTH Aachen. Neointimal hiperplazi arterialized damarlarında darlık birincil nedenidir. Biz sağ eksternal juguler ven Sprague Dawley sıçan karotis arter manşet tekniği kullanılarak aşılı sayede yeni bir protokol öneriyorum. Hayatta kalma oranı, kurban zaman noktasında% 100 idi.

Video: Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model creating an artificial fistula between the common carotid artery (CCA) and the external jugular vein (EJV) has been widely described and proved technically feasible. This construct provokes a consistent cerebral venous hypertension (CVH), and therefore has helped studying the contribution of venous hypertension to formation, clinical symptoms, and prognosis of brain AVMs and dural AVFs. Equivalent mice models have been only scarcely described and have shown trouble with stenosis of the fistula. An established murine model would allow the study of not only pathophysiology but also potential genetic therapies for these cerebrovascular diseases.
We present a model of arteriovenous fistula that produces a durable intracranial venous hypertension in the mouse. Microsurgical anastomosis of the murine CCA and EJV can be difficult due to diminutive anatomy and frequently result in a non-patent fistula. In this step-by-step protocol we address all the important challenges encountered during this procedure. Avoiding excessive retraction of the vein during the exposure, using 11-0 sutures instead of 10-0, and making a carefully planned end-to-side anastomosis are some of the critical steps. Although this method requires advanced microsurgical skills and a longer learning curve that the equivalent in the rat, it can be consistently developed.
This novel model has been designed to integrate transgenic mouse techniques with a previously well-established experimental system that has proved useful to study brain AVMs and dural AVFs. By opening the possibility of using transgenic mice, a broader spectrum of valid models can be achieved and genetic treatments can also be tested. The experimental construct could also be further adapted to the study of other cerebrovascular diseases related with venous hypertension such as migraine, transient global amnesia, transient monocular blindness, etc.

We describe a method for creating a reliable model of cerebral venous hypertension in the adult mouse. This model has been widely described and tested in the rat. This new counterpart in the mice opens the possibility of using genetic modified animals and thereby broadens the applications of the model.

Yetişkin Fare Venöz Hipertansiyon Modeli: Dış Boyun Ven Anastomoza Ortak Karotis Arter.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Tıp

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Vein Interposition Model: A Suitable Model to Study Bypass Graft Patency

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.

This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.

Ven interpozisyonu Model: baypas açıklığının Eğitim için uygun bir model

Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves focal endothelial-selective transgenesis, thereby allowing an investigator to determine the biological roles of endothelial-expressed transgenes and to quantify the in vivo transcriptional activity of DNA sequences in large artery endothelial cells. The method uses surgical isolation of rabbit common carotid arteries and an arteriotomy to deliver a transgene-expressing viral vector into the arterial lumen. A short incubation period of the vector in the lumen, with subsequent aspiration of the lumen contents, is sufficient to achieve efficient and durable expression of the transgene in the endothelium, with no detectable transduction or expression outside of the isolated arterial segment. The method allows assessment of the biological activities of transgene products both in normal arteries and in models of human vascular disease, while avoiding systemic effects that could be caused either by targeting gene delivery to other sites (e.g. the liver) or by the alternative approach of delivering genetic constructs to the endothelium by germ line transgenesis. Application of the method is limited by the need for a skilled surgeon and anesthetist, a well-equipped operating room, the costs of purchasing and housing rabbits, and the need for expertise in gene-transfer vector construction and use. Results obtained with this method include: transgene-related alterations in arterial structure, cellularity, extracellular matrix, or vasomotor function; increases or reductions in arterial inflammation; alterations in vascular cell apoptosis; and progression, retardation, or regression of diseases such as intimal hyperplasia or atherosclerosis. The method also allows measurement of the ability of native and synthetic DNA regulatory sequences to alter transgene expression in endothelial cells, providing results that include: levels of transgene mRNA, levels of transgene protein, and levels of transgene enzymatic activity.

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

This method is to introduce a transgene into the endothelium of rabbit carotid arteries. Introduction of the transgene allows the assessment of the biological role of the transgene product either in normal arteries or disease models. The method is also useful for measuring activity of DNA regulatory sequences.

Vivo Gen transferi için tavşan ortak Karotid arter endotel

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

Tavşan manken dayanıklı Transgene ifade juguler ven ortak karotid arter interpozisyonu Greftler için

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Phase Contrast Magnetic Resonance Imaging in the Rat Common Carotid Artery

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous studies have shown that abnormal blood flow may be associated with systemic vascular risk. Thus, PC-MRI can facilitate the translation of data obtained from animal models of cardiovascular diseases to pertinent clinical investigations. In this report, we describe the procedure for measuring blood flow in the common carotid artery (CCA) of rats using cine-gated PC-MRI and discuss relevant analysis methods. This procedure can be performed in a live, anesthetized animal and does not require euthanasia after the procedure. The proposed scanning parameters yield repeatable measurements for blood flow, indicating excellent reproducibility of the results. The PC-MRI procedure described in this article can be used for pharmacological testing, pathophysiological assessment, and cerebral hemodynamics evaluation.

The overall goal of this procedure is to measure the blood flow in the rat common carotid artery by using noninvasive phase contrast magnetic resonance imaging.

Faz kontrast manyetik rezonans görüntüleme sıçan ortak karotis arter

Phase contrast magnetic resonance imaging (PC-MRI) is a noninvasive approach that can quantify flow-related parameters such as blood flow. Previous ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue plasminogen activator (tPA) as an approved drug treatment to target ischemic strokes. Current research in the field of ischemic stroke focuses on better understanding the pathophysiology of stroke, to develop and investigate novel pharmaceutical targets. Reliable experimental stroke models are crucial for the progression of potential treatments. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is clinically relevant and the most frequently used surgical model of ischemic stroke in rodents. However, the outcomes of this model, such as lesion volume, are associated with high levels of variability, particularly in mice. The alternative MCAO model described here allows the reperfusion of the common carotid artery (CCA) and the increased perfusion of the middle cerebral artery (MCA) territory, using a tissue pad with fibrinogen-based sealant to repair the vessel, and the improved welfare of the mice by avoiding external carotid artery (ECA) ligation. This reduces the reliance on the Circle of Willis, which is known to be highly anatomically variable in mice. Representative data show that using this alternative surgical approach decreases the variability in lesion volumes between the traditional MCAO approach and the alternative approach described here.

Intraluminal filament occlusion of the middle cerebral artery is the most frequently used in vivo model of experimental stroke in rodents. An alternative surgical approach to allow common carotid artery repair is performed here, which allows the reperfusion of the common carotid artery and a full reperfusion to the middle cerebral artery territory.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the luminal surface area in arteries thereby reducing adequate blood flow to organs and distal tissues. Clinically, revascularization procedures such as balloon angioplasty with or without stent placement aim to restore blood flow. Although these procedures reestablish blood flow by reducing plaque burden, they damage the vessel wall, which initiates the arterial healing response. The prolonged healing response causes arterial restenosis, or re-narrowing, ultimately limiting the long-term success of these revascularization procedures. Therefore, preclinical animal models are integral for analyzing the pathophysiological mechanisms driving restenosis, and provide the opportunity to test novel therapeutic strategies. Murine models are cheaper and easier to operate on than large animal models. Balloon or wire injury are the two commonly accepted injury modalities used in murine models. Balloon injury models in particular mimic the clinical angioplasty procedure and cause adequate damage to the artery for the development of restenosis. Herein we describe the surgical details for performing and histologically analyzing the modified, pressure-controlled rat carotid artery balloon injury model. Additionally, this protocol highlights how local periadventitial application of therapeutics can be used to inhibit neointimal hyperplasia. Lastly, we present light sheet fluorescence microscopy as a novel approach for imaging and visualizing the arterial injury in three-dimensions.

The rat carotid artery balloon injury mimics the clinical angioplasty procedure performed to restore blood flow in atherosclerotic vessels. This model induces the arterial injury response by distending the arterial wall, and denuding the intimal layer of endothelial cells, ultimately causing remodeling and an intimal hyperplastic response.

Periadventitial Terapötik Uygulama ile Sıçan Karotis Arter Basınç Kontrollü Segmental Balon Yaralanması

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...