Yazarlar, muntjac kolonisinin yönetimi için Jeanette Hayes-Klug ve Kelly Anderson'a, bizi muntjac ile tanıştırdıktan dolayı Dr. Alan Young'a ve cervid Solutions Inc.'den Bay Cleve Tedford'a bu proje için tohum muntjac'ı sağladıkları için teşekkür etmek istiyor. Bu çalışma NIH hibe R01AI093634 tarafından desteklendi.

1. Prosedürel Hazırlık
Açıklanan tüm hayvan prosedürleri, Intl. akredite bir kurum olan Laboratuvar Hayvan Bakımı Değerlendirme ve Akreditasyon Derneği (AAALAC) colorado Eyalet Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır.
<ol><li>Muayeneden önce, rahatlama sağlamak ve uygun konumlandırmaya izin vermek için uygun sedasyon veya anestezi protokollerini kullanarak hayvanları hareketsiz hale getirin. Bir işleyici geyiğini dizginlerken, ikinci bir kişi hayvana sedasyon uygular. Not: Yazarlar bu türlerde etkili sedasyon sağlamak için aşağıdaki kombinasyonu bulmuşlardır: gluteal kaslarda kas içi olarak uygulanan butorphanol (0.45 mg/kg), azaperone (0.035 mg/kg) ve medetomidin (0.04 mg/kg).</li>
	<li>Doe uyumlu işlemeye izin veren bir sedasyon düzlemine ulaştığında, onu bir muayene masasında veya bir V oluğunda dorsal veya yanal reumbency olarak konumlandırın. Rumenal içeriğin kusma ve aspirasyon riskini azaltmak ve işlem sırasında uygun havalandırmayı kolaylaştırmak için baş, boyun ve toraksı hafifçe (yaklaşık 20-30 °) yükseltin. Not: Çoğu serviid veya diğer geviş getiren türlerde, ayakta duran hayvanlarda abdominal ultrason yapılır; bununla birlikte, bu türün küçük boyutu ve davranışsal hususları muayene için ağır sedasyon gerektirir ve sternal konumlandırma bu nedenle daha zordur ve etkili görüntüleme tekniğinin önüne geçebilir. Hayvanın sternal ve lateral rekumbens arasında orta sırada konumlandırılması, kusma ve hipoventilasyon riskini azaltmak için ideal olabilir ve mümkünse düşünülmelidir. Herhangi bir recumbent pozisyonda, hayvanların nefeslerini dikkatlice izlemek ve muayeneyi derhal durdurmak ve regurgitasyon veya hipoventilasyon dikkateilirse hayvanı sternal rekumbense yerleştirmek önemlidir.</li>
	<li>Gerekirse, dönüştürücünün ayak izi ile cilt arasında yeterli teması sağlamak için incelenecek karın bölgesinden saç kırpın. Not: Erken gebelikte, meme bezlerinin yakınındaki kaudal karın bölgesinde gebelik kanıtı tespit edilebilir. Muntjac'ın bu bölgesi tipik olarak tüysüzdür ve bu nedenle tıraş şu anda belirtilmeyebilir. Fetüs büyüdükçe ve rahim karında daha kraniyal bir pozisyon işgal etmek için şişildikçe, görüntülemeden önce saçın kırpılması gerekecektir. Jiletlerden kaynaklanan yırtılmalar veya elektrikli makaslardan kaynaklanan termal yaralanmalar da dahil olmak üzere ciltte herhangi bir mekanik travmaya neden olmamak için dikkatli olunmalıdır.</li>
	<li>Ultrason ünitesini, teknisyenin muayeneyi baskın eliyle yaparken monitörü kolayca görselleştirmesini sağlayan bir konuma yerleştirin. Kaydedilen görüntüleri ve video döngülerini otomatik olarak etiketlemek için sisteme hayvan tanımlama bilgilerini (ad, kimlik numarası vb.)girin.</li>
</ol>2. Transabdominal Üreme Ultrason Muayenesi
<ol><li>Kaudal karın bölgesine bol miktarda akustik kavrama jeli uygulayın.</li>
	<li>Kaudal karın derisine 5-10 MHz kavisli doğrusal dönüştürücü yerleştirin, hemen pubis'e kranial ve pelvik boşluk içindeki yapıları değerlendirmek için yavaşça kraniyal yönde hareket ettirın. Muntjac'ın iki boynuzlu rahminin her iki boynuzu değerlendirmek için kaudal karın sol ve sağ kadranlarını tarayın. Not: Kapsamlı abdominal ultrason karaciğer, böbrekler, dalak, gastrointestinal sistem, idrar kesesi ve üreme sistemi de dahil olmak üzere tüm abdominal visseranın değerlendirilmesini içerir. Bu protokolün amaçları doğrultusunda, sadece gebeliğin incelenmesi ayrıntılı olarak tartışılacaktır; ancak çalışma süresince bu yapılarla karşılaşılması muhtemel olduğu için diğer kaudal karın organlarının normal görünümü tanınmalıdır. Bu konumda en sık görülen organlar arasında gastrointestinal sistem, idrar kesesi ve üreme yolu segmentleri bulunur. Büyük ve ince bağırsaklar, bağırsak duvarının karakteristik katmanlı görünümü ile tanımlanır. Lümen, sıvı, gaz, mukoza veya gıda parçacıklarını içerebilecek içeriğin türüne ve miktarına bağlı olarak telaffuz edilebilir veya telaffuz edilmeyebilir. İdrarla şişmediği sürece idrar kesesinin tanımlanması zor olabilir ve mesane duvarının katmanları bağırsakların katmanlarından önemli ölçüde daha az farklıdır. Rahim dışında, yumurtalıklar dişi muntjac'ın üreme sisteminin ultrasonunda da bulunabilir. Yumurtalıklar böbreklerin kaudal kutbuna yakın ovoid yapılar olarak görünecektir ve görünümleri östrous döngüsü boyunca değişebilir. Korteks içinde birden fazla olgun, sıvı dolu folikülün varlığı östrus düşündürücüdür. Not: Dönüştürücünün tarama başlığını döndürerek ve/veya "fanning" yaparak, yapılar enine veya sagittal düzlemlerde değerlendirilebilir.<ol>
<li>Gravid uterusu idrar kesesinden ayırt etmek için gerekirse, kaudal karına hafif basınç uygulayarak veya idrar kateteri yerleştirerek ve taramayı tekrarlayarak mesaneyi manuel olarak boşaltın. Not: Mesanenin manuel olarak ifade edilmesi sadece hayvan sternal veya dik pozisyonda olduğunda denenmelidir, bu da karın iç organlarının daha doğal bir yönelimini kolaylaştırır ve diğer yapılara travma riskini azaltır. Rahim, organın duvarının kalınlığı değerlendirilerek idrar kesesinden de ayırt edilebilir. Orta derecede şişmiş bir mesanenin tipik kalınlığı yaklaşık 1,4 mm24, yazarlar ise muntjac'taki gravid uterusun daha kaslı duvarının genellikle 7-8 mm arasında ölçtüğünü bulmuşlardır. Not: Erken gebelik, tanımlanabilir fetal yapıların eksikliği nedeniyle kesin olarak teşhis edilmesi zordur ve aslında hamileliğin ilk belirtisi kaudal karında küçük bir sıvı cebi olabilir. Şu anda görülürse, gelişmekte olan embriyo rahim içindeki amorf yapıya hiperekoik, ovoid olarak görünecektir (Şekil 1).</li>
	</ol></li>
	<li>Kontrastı ve görüntü ayrıntısını iyileştirmek için derinlik, sıklık ve kazançta gerektiği gibi ayarlamalar yapın. Not:Daha yüksek frekanslar, gelişmiş görüntü çözünürlüğü için gerekli olan daha kısa dalga boylarıyla ilişkilidir. Çoğu dönüştürücü, bir frekans aralığında (örneğin, 6-10 MHz)24. Frekans ultrason ünitesindeki tarayıcı kontrolleri kullanılarak ayarlanabilir ve artan frekans daha net bir görüntüye neden olur. Artan frekans aynı anda ses dalgası penetrasyonunun derinliğini azaltır; bu nedenle, daha derin yapıları görselleştirmek için frekansı azaltmak gerekebilir, ancak çözünürlük tehlikeye atılabilir24. Bu nedenle istenilen doku derinliğine ulaşmak için mümkün olan en yüksek frekansı seçmek önemlidir. Kazanç kontrollerindeki ayarlamalar, dokulardan dönüştürücüye dönen ses dalgalarının amplifikasyonu değiştirecek ve görüntüdeki kontrast derecesinietkileyecektir 24. Kazanç, hiperekoik ve hipoekoik dokular arasında optimal kontrastın sağlandığı bir noktaya ayarlanmalıdır ve bu ayarların görüntülenen yapılara bağlı olarak ayarlanması gerekebilir.</li>
</ol>3. Fetal Ölçümlerin Eldei
Not: Ultrason muayenesinden elde edilen fetal ölçümler için belirlenen referans aralıkları kullanılarak birçok evcil hayvan türünde gebelik yaşı tahmin edilebilir. En sık kullanılan ölçümler düz taç-rump uzunluğu (SCRL), göğüs derinliği (CD) ve baş uzunluğu (HL)17'dir. Reeves'in muntjac geyiği içinde güvenilir gebelik yaşı kılavuzları geliştirmek için henüz yeterli veri toplanmasa da, bu referansları oluşturmaya başlamak için ölçümler toplanabilir. Fetal kalp hızı (FHR), diğer serviid ve ruminant türlerinde, gebelik belirli bir noktaya ilerledikçe doğrusal olarak artmaktadır (tipik olarak gebelik 60. gün civarında), bu sırada kalp hızı17azalmaya başlar. FHR, diğer ultrason gözlemleri ile birlikte gebelik yaşını tahmin etmek için kullanılabilir, ancak daha yaygın olarak fetal canlılık ölçüsü olarak kullanılır17,24. FHR, Reeves'in muntjac'ında gözlemlenen çiftleşmeden 35 gün sonra hesaplanmıştır.
<ol><li>SCRL'yi ölçmek için, uterusu monitörde bulun ve tüm fetüsün sagittal görünümü elde edilene kadar dönüştürücünün konumunda ince ayarlamalar yapın (Şekil 2 ve 3). Görüntüyü dondurun ve kafatasının en dorsal yönü ile sakrum tabanı arasındaki mesafeyi ölçün (Şekil 2 ve 3).</li>
	<li>CD'yi ölçmek için, fetüsün sagittal bir görünümünü elde edin (aynı görüntü SCRL'yi ölçmek için kullanılabilir) ve toraksın dorsal ve ventral yönleri arasındaki mesafeyi ölçmek için kullanılabilir (Şekil 2 ve 3).</li>
	<li>HL'yi ölçmek için, SCRL ve CD ölçümleri için açıklandığı gibi fetüsün sagittal görünümünü kullanarak, oksipital tepe ile burun tabanına olan mesafeyi ölçün (Şekil 2 ve 3).</li>
	<li>Fetal kalp atış hızını hesaplamak için ritmik kasılmalarını görselleştirerek fetüsün torasik boşluğu içindeki kalbi tanımlayın. 1 dakika içinde meydana gelen kasılmaların (kalp atışları) sayısını sayarak kalp atış hızını hesaplayın. Not: Kullanılan ultrason ünitesi Doppler yeteneklerine sahipse, bu özellik kalbi diğer spesifik olmayan fetal hareketlerden ayırt etmeye yardımcı olmak için kullanılabilir.</li>
	<li>Kaydedilen tüm görüntülerin ve video döngülerinin hayvan adı veya numarası, tarih, ölçümler ve uygun yapı etiketleri de dahil olmak üzere gerekli tüm tanımlayıcı bilgileri içerdiğini doğrulayın.</li>
</ol>4. Prosedürel Sonuçlar ve İyileşme
<ol><li>Yumuşak bir bez veya kağıt havlu kullanarak hayvanın karnındaki tüm ultrason temas jelini çıkarın. Depolamadan önce jeli dönüştürücüden temizleyin.</li>
	<li>Adım 1.1'de açıklanan sedasyon protokolünü kullanıyorsanız, medetomidinin etkilerini tersine çevirmek için atipamezole deri altından 0.25 mg/ kg dozda verin. Bir antagonistin mevcut olduğu farklı bir sedasyon protokolü kullanıyorsanız, iyileşmeyi hızlandırmak için prosedürün sonunda yayınlanan dozajlara göre bu ajanı hayvana uygulayın.</li>
	<li>Muntjac'ı sternal rekumbency yumuşak yataklı bir yüzeye yerleştirin, rumenal içeriğin kusma ve aspirasyon riskini azaltmak için kafa hafifçe yükselmiş. Hayvanı tamamen iyileşene ve yardım almadan muhafazanın etrafında ambüle olana kadar yakından izleyin.</li>
</ol>

<ol>
	<li>White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonic+scanning+in+the+diagnosis+of+pregnancy+and+the+estimation+of+gestational+age+in+cattle.">Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle.</a> Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).</li><li>Sergeev, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasound+imaging+for+predicting+ovine+fetal+age.">Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age.</a> Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).</li><li>Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonography+for+determining+the+gestational+age+of+ewes.">Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes.</a> Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).</li><li>Lee, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+measurement+of+fetal+parameters+for+estimation+of+gestational+age+in+Korean+black+goats.">Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats.</a> J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).</li><li>Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+equine+fetal+growth+from+day+100+of+gestation+to+parturition+by+ultrasonography.">Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography.</a> J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).</li><li>Lopate, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+gestational+age+and+assessment+of+canine+fetal+maturation+using+radiology+and+ultrasonography:+a+review.">Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review.</a> Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).</li><li>Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+fetal+biometry,+maternal+factors+and+birth+weight+of+purebred+domestic+cat+kittens.">Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens.</a> Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).</li><li>Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+diagnosis+of+fallow+deer+by+ultrasonography.">Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography.</a> Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).</li><li>Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+pregnancy+detection+and+the+hormonal+characterization+of+embryonic-fetal+mortality+in+fallow+deer+(Dama+dama).">Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama).</a> Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).</li><li>Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+detection+and+the+effects+of+age,+body+weight,+and+previous+reproductive+performance+on+pregnancy+status+and+weaning+rates+of+farmed+fallow+deer+(Dama+dama).">Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama).</a> J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).</li><li>Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonography+for+pregnancy+diagnosis+and+foetal+ageing+in+fallow+deer.">Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer.</a> Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).</li><li>White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+pregnancy+and+prediction+of+fetal+age+in+red+deer+by+real-time+ultrasonic+scanning.">Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning.</a> Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).</li><li>Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonography+for+pregnancy+diagnosis+and+estimation+of+fetal+age+in+farmed+red+deer.">Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer.</a> Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).</li><li>Wilson, P. R., Bingham, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accuracy+of+pregnancy+diagnosis+and+prediction+of+calving+date+in+red+deer+using+real-time+ultrasound+scanning.">Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning.</a> Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).</li><li>Revol, B., Wilson, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+of+the+reproductive+tract+and+early+pregnancy+in+red+deer.">Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer.</a> Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).</li><li>Revol, B., Wilson, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foetal+ageing+in+farmed+red+deer+using+real-time+ultrasonography.">Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography.</a> Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).</li><li>Yanagawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+age+estimation+of+Hokkaido+sika+deer+(Cervus+nippon+yesoensis)+using+ultrasonography+during+early+pregnancy.">Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy.</a> J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).</li><li>Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+accuracy+of+ultrasonography,+progesterone,+and+pregnancy-associated+glycoprotein+tests+for+pregnancy+diagnosis+in+semidomesticated+reindeer.">Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer.</a> Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).</li><li>Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+in+early+pregnancy+diagnosis+and+measurements+of+fetal+size+in+reindeer+(Rangifer+tarandus+tarandus).">Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus).</a> Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).</li><li>Chapman, N. G., Harris, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+that+the+seasonal+antler+cycle+of+adult+Reeves'+muntjac+(Muntiacus+reevesi)+is+not+associated+with+reproductive+quiescence.">Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence.</a> J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).</li><li>Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+periods+of+conception+and+parturition+in+feral+Reeves'+muntjac+(Muntiacus+reevesi)+in+southern+England,+based+upon+age+of+juvenile+animals.">The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals.</a> J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).</li><li>Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproductive+strategies+and+the+influence+of+date+of+birth+on+growth+and+sexual+development+of+an+aseasonally-breeding+ungulate:+Reeves'+muntjac+(Muntiacus+reevesi).">Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi).</a> J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).</li><li>Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+cytogenetic+studies+on+the+red+muntjac,+Chinese+muntjac,+and+their+F1+hybrids.">Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids.</a> Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).</li><li>Nyland, T. G., Mattoon, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 19-29 (2002).</li><li>Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+serum+pregnancy+test+with+a+specific+radioimmunoassay+for+moose+and+elk+pregnancy-specific+protein+B.">A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B.</a> J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu protokol, Reeves'in muntjac geyisinde gebelik tanısı için transabdominal ultrasonografi uygulamasını açıklar. Diğer ultrason çalışmaları ile tutarlı olarak, uygun ekipman ve teknik yeterlilik, muntjac doe'nun başarılı bir üreme muayenesi için zorunludur. Temel memeli anatomisinin dikkatli bir şekilde gözden geçirilmesi, tanısal ultrasonun fiziksel ilkeleri ve abdominal visseranın tipik ultrasonografik görünümü yanlış tanıların azaltılmasına yardımcı olacaktır. Ayrıca, uygun dönü?...

Ultrasonografik inceleme, sığır 1, koyun2,3,keçi4,at5,refakatçi hayvanlar6,7ve diğer evcil hayvan türlerinde iyi tanımlanmış bir gebelik teşhisi yöntemidir. Bu görüntüleme yöntemi ayrıca, fallow geyiği 8-11 , kızıl geyik12-16, Hokkaido sika geyiği 17 ve ren geyiği18,19dahilolmak üzere çeşitli esir serviid türlerinde gebelik tespiti ve fetal yaş tahmini için değerli bir araç olarak tanımlanmıştır. Birçok durumda, ultrasonografi serum progesteron veya gebelikle ilişkili glikoprotein analizi9,18gibi diğer gebelik algılama mekanizmalarına göre daha yüksek doğruluk oranları üretmektedir. Ayrıca, üreme sisteminin ultrasonografik görselleştirmesi fetal canlılık, gebelik yaşı ve aksi takdirde değerlendirilmesi zor olan gelişimsel anormalliklerin tanımlanması hakkında ek bilgi sağlayabilir. Üreme durumunu değerlendirmek için ultrasonografinin faydası, bu metodolojinin aktif üreme programlarının kullanıldığı diğer türlere uyarlanmalıdır.
Reeves'in muntjac geyiliği (Muntiacus reevesi) Güneydoğu Asya'ya özgü küçük bir serviid türüdür20. Bu hayvanların üreme döngüsü kendi bölgelerinde iyi karakterize olmasa da, güney İngiltere'nin bazı bölgelerindeki yabani popülasyonların çalışmaları üreme düzenlerinin anlaşılmasını geliştirmiş20. Çoğu cervid'in aksine, Reeves'in muntjac'ı yıl boyunca ürer, belirgin mevsimsel yaltaklanma zirveleri20-22. Dişi muntjac tipik olarak 210 günlük bir gebelik dönemini takiben tek bir açık kahverengi doğurur ve 24 saat20-22içinde doğum sonrası östrusa güvenilir bir şekilde girer. Bu doğum sonrası dönemde gebe kalmaz mı yaklaşık 24-25 gün sonra östrusa geri dönecektir20. Esir durumlarda, üreme tipik olarak bir veya daha fazla bozulmamış erkek ile yapılan konutlarla elde edilir. Bu sistem tatmin edici gebe kalma oranları üretir ve personel için çok az teknik beceri gerektirir, ancak kesin üreme tarihlerinin belirlenmesi imkansız olmasa da zordur.
Muntjac, çok çeşitli diploid kromozom sayıları ve farklı türler arasında yüksek karyotipik çeşitlendirme oranı nedeniyle sitogenetik çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır23. Bu hayvanlar şu anda prion hastalığı patogenez ve bulaşma modeli olarak da araştırılmaktadır, özellikle serviidlerde kronik israf hastalığının (CWD) dikey olarak bulaşmasının incelenmesine önem verilmektedir. Bir dizi farklı araştırma uygulamasında muntjac'ın önemi, mevcut araştırma prosedürlerini tamamlamak için geliştirilmiş üreme teknolojilerinin oluşturulması gerektiğini göstermektedir. Spesifik olarak, gebelik dönemini değerlendirmek için noninvaziv mekanizmalar, farklı deneysel koşullar altında üreme performansı ve fetal büyüme ve gelişmede kritik varyasyonları potansiyel olarak aydınlatabilir. Ayrıca, üreme tarihlerinin belirlenemediği durumlarda gebelik yaşının tahmininde gerçek zamanlı fetal ölçüm referanslarının geliştirilmesi potansiyel olarak değerli olacaktır. Önceki çalışmalar, serviid türlerinde gebe kalmanın yaklaşık aşamasını tahmin etmek için taç-rump uzunluğu (CRL), göğüs derinliği (CD) ve baş uzunluğu (HL) gibi fetal ölçümlerin kullanılmasına yönelik mekanizmalarıtanımlamıştır 11-14, 16,17. Ek olarak, bu çalışmalardan bazıları, iskelet mineralizasyonu veya fetal kalp atışı gibi belirli gelişimsel kilometre taşlarının ne zaman tanımlanabileceğini açıklayan kılavuzlar da oluşturmuştur8-19. Bu veriler muntjac'ta üreme ultrason analizine rehberlik etmek için yararlı olsa da, incelenen diğer serviid türlerinin çoğu çok daha büyük vücut büyüklüğüne ve daha uzun gebelik dönemlerine sahiptir ve bu çalışmaların muntjac uygulamaları için çevirisel değerini azaltır.
Burada özetlenen protokol, gebeliğin teşhis edilmesi ve izlenmesi amacıyla kadın muntjac'ın transabdominal ultrasonografisini açıklar. Bu protokolün başarılı bir şekilde yürütülmesi erken gebelik tespitini ve fetal büyüme ve gelişmenin değerlendirilmeini kolaylaştırabilir. Bu teknik, küçük bir serviid modelinde bulaşıcı hastalıkların üremesini, rahim gelişimini veya dikey geçişini araştıran çalışmaların yürütülmesinde değerli uygulamalara sahiptir ve esir üreme operasyonlarında klinik amaçlar için de yararlı olabilir.

<table><tbody><tr><td>Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)</td><td>Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa</td><td>NADA 135-780</td><td></td></tr><tr><td>Azaperone tartrate (0.035 mg/kg)</td><td>ZooPharm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medetomidine HCl (0.04 mg/kg)</td><td>ZooPharm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound contact gel</td><td>Medline, Mundelein, Illinois</td><td>MDS092005</td><td></td></tr><tr><td>Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg)</td><td>Orion Corporation, Espoo, Finland</td><td>NADA 141-033</td><td></td></tr><tr><td>V-trough (optional)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough</td></tr><tr><td>Electrical clippers or razor blades for hair removal</td><td>Oster, McMinnville, Tennessee</td><td>78005-140</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound</td><td>E.I. Medical Imaging, Loveland, CO</td><td>Ibex Pro</td><td></td></tr><tr><td>5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array</td><td>E.I. Medical Imaging, Loveland, CO</td><td>290420</td><td></td></tr><tr><td>3 ml syringes</td><td>Covidien</td><td>1.18E+09</td><td></td></tr><tr><td>22 G needles</td><td>Covidien</td><td>8.88E+09</td><td></td></tr></tbody></table>

transabdominal ultrasound for pregnancy diagnosis in reeves' muntjac deer

Reeves'in muntjac geyiği (Muntiacus reevesi) güneydoğu Asya'ya özgü küçük bir serviid türüdür ve şu anda prion hastalığı bulaşma ve patogenezinin potansiyel bir modeli olarak araştırılmaktadır. Dikey bulaşma, prion hastalığı da dahil olmak üzere bulaşıcı hastalıkları inceleyen araştırmacılar arasında ilgi çekici bir alandır ve bu araştırmalar anne enfeksiyonunun üreme performansı üzerindeki etkilerini değerlendirmek için etkili yöntemler gerektirir. Ultrasonografik inceleme, hamileliği teşhis etmek ve birçok hayvan türünde fetal sağlığı değerlendirmek için iyi kurulmuş bir araçtır1-7, çiftlik rahim ağzı8-19'unbirkaç türü de dahil olmak üzere , ancak bu teknik Reeves'in muntjac geyiğinde tanımlanmadı. Burada muntjac'ta gebeliği tespit etmek ve gebelik dönemi boyunca fetal büyüme ve gelişmeyi değerlendirmek için transabdominal ultrason uygulamasını açıklıyoruz. Bu prosedür kullanılarak, hamile hayvanlar doe-buck eşleştirmesini takip eden 35 gün kadar erken olarak tanımlandı ve bu, hamileliği düzenli aralıklarla güvenli bir şekilde izlemek için etkili bir araçtı. Bu çalışmanın gelecekteki hedefleri arasında gebelik yaşının tahmini için normal fetal ölçüm referanslarının oluşturulması, gebeliğin çeşitli aşamalarında gebeliğin teşhis edilmesine yönelik tekniğin duyarlılığının ve özgüllüğünün belirlenmesi ve fetal büyüme ve gelişimdeki varyasyonların farklı deneysel koşullar altında belirlenmesi yer alacaktır.

Burada açıklanan protokol kullanılarak, Reeve'in muntjac geyiğinde minimal invaziv tekniklerle gebelik teşhis edilebilir ve izlenebilir. Gebeliğin yazarlar tarafından tespit edilebileceği en erken zaman noktası, gözlenen çiftleşme davranışından yaklaşık 35 gün sonraydı.
Gebeliğin erken evrelerinde kaudal karın bölgesinde anekoik alan olarak tanımlanan sıvı dolu bir rahim görselleştirilerek gebelik tanısı konuldu. Rahim içinde, gelişmekte olan embriyo az tanımlan...

Watch this Scientific Journal Video about Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer at JoVE.com

Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer

Transabdominal ultrason, Reeves'in muntjac geyiğindeki üreme durumunu değerlendirmek için etkili, noninvaziv bir araç olarak tanımlanır. Bu yöntemler erken gebelik tanısı almak ve fetal canlılığı değerlendirmek için kullanılabilir. Bu tekniğin gelecekteki uygulamaları gebelik yaşının tahminini ve anne hastalığının fetal gelişim üzerindeki etkilerini içerir.

Reeves'in Muntjac Geyisinde Gebelik Tanısı için Transabdominal Ultrason

Reeves' muntjac deer (Muntiacus reevesi) are a small cervid species native to southeast Asia, and are currently being investigated as a potential model of ...

transabdominal-ultrasound-for-pregnancy-diagnosis-reeves-muntjac

Research

JoVE Journal

Medicine

10.3K Görüntüleme.  Colorado State University. Transabdominal ultrason, Reeves'in muntjac geyiğindeki üreme durumunu değerlendirmek için etkili, noninvaziv bir araç olarak tanımlanır. Bu yöntemler erken gebelik tanısı almak ve fetal canlılığı değerlendirmek için kullanılabilir. Bu tekniğin gelecekteki uygulamaları gebelik yaşının tahminini ve anne hastalığının fetal gelişim üzerindeki etkilerini içerir.

Video: Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer

Murine Fetal Echocardiography

Transgenic mice displaying abnormalities in cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding the molecular mechanisms underlying both normal cardiovascular function and the pathophysiological basis of human cardiovascular disease. Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development 1-3. In order to study the role of genetic or pharmacologic alterations in the early development of cardiac function, ultrasound imaging of the live fetus has become an important tool for early recognition of abnormalities and longitudinal follow-up. Noninvasive ultrasound imaging is an ideal method for detecting and studying congenital malformations and the impact on cardiac function prior to death 4. It allows early recognition of abnormalities in the living fetus and the progression of disease can be followed in utero with longitudinal studies 5,6. Until recently, imaging of fetal mouse hearts frequently involved invasive methods. The fetus had to be sacrificed to perform magnetic resonance microscopy and electron microscopy or surgically delivered for transillumination microscopy. An application of high-frequency probes with conventional 2-D and pulsed-wave Doppler imaging has been shown to provide measurements of cardiac contraction and heart rates during embryonic development with databases of normal developmental changes now available 6-10. M-mode imaging further provides important functional data, although, the proper imaging planes are often difficult to obtain. High-frequency ultrasound imaging of the fetus has improved 2-D resolution and can provide excellent information on the early development of cardiac structures 11.

Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development. High-frequency ultrasound imaging has improved 2-D resolution and can provide excellent information on early cardiac development and is an ideal method to detect the impact on cardiac structure and function prior to death.

Mürin Fetal Ekokardiyografi

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

Tıp

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is routinely used as an in vivo model to study embryo implantation and pregnancy progression. Unfortunately, such murine studies require pregnancy interruption to enable follow-up phenotypic analysis. To address this issue, we used three-dimensional (3-D) reconstruction of HFUS imaging data for early detection and characterization of murine embryo implantation sites and their individual developmental progression in utero. Combining HFUS imaging with 3-D reconstruction and modeling, we were able to accurately quantify embryo implantation site number as well as monitor developmental progression in pregnant C57BL6J/129S mice from 5.5 days post coitus (d.p.c.) through to 9.5 d.p.c. with the use of a transducer. Measurements included: number, location, and volume of implantation sites as well as inter-implantation site spacing; embryo viability was assessed by cardiac activity monitoring. In the immediate post-implantation period (5.5 to 8.5 d.p.c.), 3-D reconstruction of the gravid uterus in both mesh and solid overlay format enabled visual representation of the developing pregnancies within each uterine horn. As genetically engineered mice continue to be used to characterize female reproductive phenotypes derived from uterine dysfunction, this method offers a new approach to detect, quantify, and characterize early implantation events in vivo. This novel use of 3-D HFUS imaging demonstrates the ability to successfully detect, visualize, and characterize embryo-implantation sites during early murine pregnancy in a non-invasive manner. The technology offers a significant improvement over current methods, which rely on the interruption of pregnancies for gross tissue and histopathologic characterization. Here we use a video and text format to describe how to successfully perform ultrasounds of early murine pregnancy to generate reliable and reproducible data with reconstruction of the uterine form in mesh and solid 3-D images.

Mice are widely used to study gestational biology. However, pregnancy termination is required for such studies which precludes longitudinal investigations and necessitates the use of large numbers of animals. Therefore, we describe a non-invasive technique of high-frequency ultrasonography for early detection and monitoring of post-implantation events in the pregnant mouse.

Üç boyutlu yüksek frekanslı Ultrasonografi romanı kullanımı için fare erken gebelik karakterizasyonu

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Gelişim Biyolojisi

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ultrasound and fetal echocardiography. Increasingly, these imaging modalities are being employed clinically to examine cardiac function and assess wellbeing in utero, thereby guiding timing of birth decisions. Here, we used a rabbit model of IUGR that allows analysis of cardiac function in a clinically relevant way. Using isoflurane induced anesthesia, IUGR is surgically created at gestational age day 25 by performing a laparotomy, exposing the bicornuate uterus and then ligating 40-50% of uteroplacental vessels supplying each gestational sac in a single uterine horn. The other horn in the rabbit bicornuate uterus serves as internal control fetuses. Then, after recovery at gestational age day 30 (full term), the same rabbit undergoes examination of fetal cardiac function. Anesthesia is induced with ketamine and xylazine intramuscularly, then maintained by a continuous intravenous infusion of ketamine and xylazine to minimize iatrogenic effects on fetal cardiac function. A repeat laparotomy is performed to expose each gestational sac and a microultrasound examination (VisualSonics VEVO 2100) of fetal cardiac function is performed. Placental insufficiency is evident by a raised pulsatility index or an absent or reversed end diastolic flow of the umbilical artery Doppler waveform. The ductus venosus and middle cerebral artery Doppler is then examined. Fetal echocardiography is performed by recording B mode, M mode and flow velocity waveforms in lateral and apical views. Offline calculations determine standard M-mode cardiac variables, tricuspid and mitral annular plane systolic excursion, speckle tracking and strain analysis, modified myocardial performance index and vascular flow velocity waveforms of interest. This small animal model of IUGR therefore affords examination of in utero cardiac function that is consistent with current clinical practice and is therefore useful in a translational research setting.

We describe examination of fetal cardiac function with contemporary functional fetal echocardiography and fetoplacental Doppler ultrasound using the VisualSonics VEVO 2100 microultrasound in a surgically induced model of intrauterine fetal growth restriction in a rabbit.

Rahim içi Büyüme Kısıtlama bir Tavşan Modelinde Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and painless, and the application is easy, fast, and can be done anywhere, even with mobile devices. During pregnancy, ultrasound imaging is standardly used to closely monitor fetal development. The technique is important to assess intrauterine growth restriction (IUGR), a pregnancy complication with short- and long-term health consequences for both the mother and fetus. Understanding the process of IUGR is indispensable for developing effective therapeutic strategies. 
The ultrasound system used in this manuscript is an ultrasound device produced for the analysis of small animals and can be used in various research fields, including pregnancy research. Here we describe the usage of the system for in vivo analysis of fetuses from natural killer (NK) cell/mast cell (MC)-deficient mothers that give birth to growth-restricted pups. The protocol includes preparation of the system, handling of the mice before and during measurements, and the usage of the B-mode, color doppler mode, and pulse-wave doppler mode. Fetal size, placental size, and blood supply to the fetus were analyzed. We found reduced implantation sizes and smaller placentas in NK/MC-deficient mice from mid-gestation onwards. In addition, MC/NK-deficiency was associated with absent and reversed end diastolic flow in the fetal Arteria umbilicalis(UmA) and an elevated resistance index. The methods described in the protocol can easily be used for related and non-related research topics.

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Here we describe the technique of high frequency ultrasound for in vivo analysis of fetuses in mice. This method allows the follow-up of fetuses and the analysis of placental parameters as well as maternal and fetal blood flow throughout pregnancy.

Yüksek frekans ultrason Fetal ve plasental geliştirme Vivo içinde analizi için

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to assessing pathology post-mortem in animals euthanized at multiple time points in different cohorts, which increases the number of mice needed for a study. Imaging mice in longitudinal studies can track the progression of disease in individual animals, reducing the number of mice needed. Advances in ultrasound technology have allowed for the detection of micrometer-level changes in tissues. Ultrasound has been used to study follicle maturation in ovaries and xenograft growth but has not been applied to morphological changes in the mouse uterus. This protocol examines the juxtaposition of pathology with in vivo imaging comparisons in an induced endometrial cancer mouse model. The features observed by ultrasound were consistent with the degree of change seen by gross pathology and histology. Ultrasound was found to be highly predictive of the observed pathology, supporting the incorporation of ultrasonography into longitudinal studies of uterine diseases such as cancer in mice.

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

This protocol describes a method for monitoring the progression of morphological changes over time in the uterus in an inducible mouse model of endometrial cancer using ultrasound imaging with correlation to gross and histological changes.

Farelerde Tümör Baskılayıcıları Arid1a ve Pten'in Pax8'e Yönelik Delesyonunda Endometriyal Kanser Progresyonunun Non-İnvaziv Ultrason Değerlendirmesi

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to ...

Kanser Araştırmaları

Is My Mouse Pregnant? High-Frequency Ultrasound Assessment

The mouse is the mammalian animal model of choice for many human diseases and biological processes. Developmental biology often requires staged-pregnant mice to determine evolving processes at various timepoints. Moreover, optimal and efficient breeding of model mice requires an assessment of timed pregnancies. Most commonly, mice are mated overnight, and the presence of a vaginal plug is determined; however, the positive predictive value of this technique is suboptimal, and one needs to wait to know if the mouse is truly pregnant. High-resolution ultrasound biomicroscopy is an effective and efficient tool for imaging: 1) Whether a mouse is pregnant; 2) What gestational stage the mouse has reached; and 3) Whether there are intrauterine losses. In addition to the embryos and fetuses, the investigator must also recognize common artifacts in the abdominal cavity so as not to mistake these for a gravid uterus. This article provides a protocol for imaging along with illustrative examples.

High-resolution ultrasound can help streamline experiments requiring timed-pregnant mice by determining the state of pregnancy, gestational age, and pregnancy losses. Presented here is a protocol to illustrate methods to assess mouse pregnancies as well as potential pitfalls (image artifacts) that may mimic pregnancy.

Farem Hamile mi? Yüksek Frekanslı Ultrason Değerlendirmesi

The mouse is the mammalian animal model of choice for many human diseases and biological processes. Developmental biology often requires staged-pregnant ...

Murine Neural Plate Targeting by In Utero Nano-Injection (NEPTUNE) at Embryonic Day 7.5

Manipulating gene expression in the developing mouse brain in utero holds great potential for functional genetics studies. However, it has previously largely been restricted to the manipulation of embryonic stages post-neurulation. A protocol was developed to inject the amniotic cavity at embryonic day (E)7.5 and deliver lentivirus, encoding cDNA or shRNA, targeting &gt;95% of the neural plate and neural crest cells, contributing to the future brain, spinal cord, and peripheral nervous system. This protocol describes the steps necessary to achieve successful transduction, including grinding of the glass capillary needles, pregnancy verification, developmental staging using ultrasound imaging, and optimal injection volumes matched to embryonic stages. 
Following this protocol, it is possible to achieve transduction of &gt;95% of the developing brain with high-titer lentivirus and thus perform whole-brain genetic manipulation. In contrast, it is possible to achieve mosaic transduction using lower viral titers, allowing for genetic screening or lineage tracing. Injection at E7.5 also targets ectoderm and neural crest contributing to distinct compartments of the eye, tongue, and peripheral nervous system. This technique thus offers the possibility to manipulate gene expression in mouse neural-plate- and ectoderm-derived tissues from preneurulation stages, with the benefit of reducing the number of mice used in experiments.

Murine Neural Plate Targeting by In Utero Nano-Injection NEPTUNE at Embryonic Day 7.5

In this protocol, we describe how to inject the mouse amniotic cavity at E7.5 with lentivirus, leading to uniform transduction of the entire neural plate, with minimal detrimental effects on survival or embryonic development.

Embriyonik Gün 7.5'te In Utero Nano-Enjeksiyon (NEPTÜN) ile Murin Nöral Plaka Hedefleme

Manipulating gene expression in the developing mouse brain in utero holds great potential for functional genetics studies. However, it has previously ...

Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats

With the development of assisted reproductive technology and the ethical limitations of research on humans, rat animal models have been widely used in reproductive medicine. In the past, the study of reproductive system development in rodents has been based on one-time histological examination of excised tissues. Recently, with the development of high-resolution transabdominal ultrasound, high-quality sonography can now be performed to evaluate the reproductive organs of rats, allowing a new method for studying the reproductive system. Images were obtained using a high-resolution ultrasonographic system. Gynecological ultrasonography was performed on 28 eight-week-old non-pregnant rats and 5 pregnant Sprague-Dawley rats. We describe how to recognize organs of the reproductive system and associated structures in typical views during different phases of the estrus cycle. Color flow Doppler was used to measure uterine artery blood flow and evaluate uterine blood flow pattern changes during different stages of pregnancy. We have demonstrated that ultrasound exploration is a useful method for evaluating changes in internal reproductive organs. Its use raises the possibility of conducting additional experiments, including medical or surgical procedures, and provides the ability to monitor sonographic changes to internal organs without sacrificing animals.

This manuscript describes the utility of ultrasound performed on female rats to design experimental models for reproductive and gynecological investigation. A step-by-step explanation of how to perform ultrasonographic evaluation is shown.

Fareler üzerinde deneysel üreme araştırmalarda Ultrasonografi

With the development of assisted reproductive technology and the ethical limitations of research on humans, rat animal models have been widely used in ...

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

Fareler ve Reeves &#39;munçağı Deer için Süt Toplama Yöntemleri

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

Biyoloji

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive behaviors and the acquisition of gametes and embryos for physiological or molecular research. Amphibians contribute to one-quarter to one-third of vertebrate research, and of interest in this context is their contribution to the scientific community&#39;s knowledge of reproductive processes and embryological development. However, most of this knowledge is derived from a small number of species. In recent times, the decimation of amphibians across the globe has required increasing intervention by conservationists. The captive recovery and assurance colonies that continue to emerge in response to the extinction risk make existing research and clinical applications invaluable to the survival and reproduction of amphibians held under human care. The success of any captive population is founded on its health and reproduction and the ability to develop viable offspring that carry forward the most diverse genetic representation of their species. For researchers and veterinarians, the ability to monitor and control ovarian development and health is, therefore, imperative. The focus of this article is to highlight the different assisted reproductive techniques that can be used to monitor and, where appropriate or necessary, control ovarian function in amphibians. Ideally, any reproductive and health issues should be reduced through proper captive husbandry, but, as with any animal, issues of health and reproductive pathologies are inevitable. Non-invasive techniques include behavioral assessments, visual inspection and palpation and morphometric measurements for the calculation of body condition indices and ultrasound. Invasive techniques include hormonal injections, blood sampling, and surgery. Ovarian control can be exercised in a number of ways depending on the application required and species of interest.

The study of amphibian biology provides valuable information on the reproductive, physiological, embryological and developmental processes that drive organisms of many taxonomic groups. Here, we present a comprehensive guide on different methodologies that can be used to study ovarian control and monitoring in amphibians.

Anbürlerde Ovaryalı Izleme ve kontrol için üreme teknikleri

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...