GHK NIH / NHLBI K08-HL098565 ve Chicago Üniversitesi Kardiyovasküler Araştırma Enstitüsü tarafından desteklenmektedir. Açıklanan tüm deneysel yöntemler Chicago Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır.

1. Görüntüleme için Fare hazırlanması <ol><li> Görüntüleme çalışma öncesinde, indüksiyon odasında baraj (% 2-3 izofluran) anestetize. Indüksiyon odasına gelen hayvan çıkarın ve hemen anestezi sistemine bağlı bir burun konisi içinde burun yerleştirin. Saç kesme makineleri ile orta göğüs seviyesine bacaklarda (Bakınız Şekil 1) için kürk çıkarın. Tüy dökücü krem ​​ile kalan vücut saç çıkarın. Tüy dökücü krem ​​da saç kesme yapılmadan kullanılabilir, ve iyice tahriş olmasını önlemek için kullanıldıktan sonra cildin kapalı durulanmalıdır. </li><li> ECG ile gömülü bir ısıtma pedi üzerinde supin pozisyonunda anestezi uygulanmış fare yerleştirin vücut sıcaklığında (Şekil 1) korumak için yol açar. Dört pençeleri ve EKG elektrotları bant onlara elektrot jeli uygulayın. </li><li> Prosedürü boyunca kararlı durum sedasyon düzeyi (% 100 O 2 ile karıştırılarak% 1,0 ila% 1,5 izofluran) edinin. Anestezi seviyesi ayarlanabilir m450 hedef kalp hızı ± Dakikada 50 vuruş (bpm) AINTAIN. Dikkat dikkat az bir saat sedasyon izofluran ve süresi dozu en aza indirmek için ödenmesi gerekmektedir. </li><li> Yavaşça ısıtma yastığı ile vücut sıcaklığını izlemek için bir rektal prob (yağlama sonra) takın. Bu dar bir aralık içinde vücut sıcaklığını muhafaza etmek önemlidir (37.0 ° C ± 0.5 ° C). Kontrollü anestezi ve sabit vücut sıcaklığı anne ve fetus hemodinamik stabilite esastır. </li></ol> Teknik Hususlar Fetal ekokardiyografi edinimi zor olabilir. Bu çalışmalardan elde edilen veriler, baraj ve fetus hem stres yanıtı nedeniyle eleştirilmiştir olabilir. İdeal olarak, hayvan sıcaklık lambaları veya autoregulated ısıtma battaniye ısıtma, ısınma pedi dolaşan, ısıtmalı bir görüntüleme platformu kullanılarak sağlanmalıdır. Buna ek olarak, ısıtılmış bir akustik jel rutin olarak kullanılması tavsiye edilir. Alvücut sıcaklığı kontrolüne ilişkin baskın endişe hipotermi önlemek için olsa da, hipertermi gelişimine eşit endişe olmalıdır. Böyle basit bir ısıtma pedi ya da halojen aydınlatma yakın bir yerde bulunması olarak izlenmeyen bir ısıtma cihazı vücut sıcaklığında hızlı ve tehlikeli yükselmesine neden olabilir. Her iki yönde önemli vücut sıcaklık değişimi riski hayvan yerleştirdiğinden, her girişim normal vücut sıcaklığı korumak için yapılmalıdır. Görüntüleri elde sonografırın yalnız transdüktörün ağırlık değişmiş kardiyak fonksiyon neden olabilir bu yana, dönüştürücü ile kavite aşırı basınç yerleştirerek kaçınmak gerekiyor. Görüntü elde etme süresi de uzamış sedasyon kaynaklanan fizyolojik ve hemodinamik değişiklikleri azaltmak için asgari (ideal bir saatten az) tutulmalıdır. Ayrıca, zamanı ve her bir çalışma için izofluran maruz kalma uzunluğu bir minimu tutulmalıdırizofluran 12 potansiyel teratojenik etkileri nedeniyle m. 2. Embriyolar tanımlanması <ol><li> Görüntüleme (Şekil L1, 2,3, ve saire (sol taraf) ve R1, 2,3, ve saire (sağ taraf) olarak etiketlenmiş sağ ve sol uterin boynuzları üzerinde fetuslarda, bir dönüm noktası olarak annenin mesane ile başlatıldığı 1C). Fetusun konumu Notasyon görüntüleme sonrası numunelerin alımı için yararlıdır. </li><li> Karın içinde çok derin alan örnekler varlıklarını belgelemek için taranır, ancak verilerin analizinden, çünkü yoksul çözünürlük hariç tutulmuştur. Komşu embriyoların tarama yeteneği izleme fetus (Şekil 2A) yardımcı olabilir. </li><li> Tarama düzlemleri tarama düzleme göre fare yönünü değiştirerek değiştirilir. Görüntüler her fetus için 2 ortogonal düzlemde (Şekil 2) elde edilir. Bir çaba transvers, frontal veya sagital planlarda yaklaşıldığıdır görüşlerini almak için yapılan ancak s,ometimes karın içinde uterus pozisyon ile eğik düzlemler ile sınırlıdır. Tarama başının dönmesi de baraj hareket ettirmeden yönelim değiştirilmesi için izin verecektir. </li></ol> Teknik Hususlar Probun el operasyon erişkin fare ekokardiyografi uygulanabilir iken, fetal görüntüleme el operasyonu önerilmez. Fetusların tespiti uterin konumu, eğrilik, ve hareket değişken doğası gereği karmaşıktır. Fetüs lokalizasyonu ile zorlukları en aza indirmek için, barajın yatay düzleminin ötesine minimum hareket ile sabit dönüştürücü kullanımı (Şekil 1) esastır. 3. Yapısı ve İşlevi Değerlendirilmesi <ol><li> Tarama b-mod görüntüleri, kulakçıklar, interventriküler septum, ventriküllerden, ve sol ve sağ çıkış yolları (Şekil 2) gibi temel kardiyak yapıları tanımlamak için kullanılır. </li><li> M-mod görüntüs kısa eksenden elde edilir ve ventriküler duvar kalınlığı ve boşluk boyutları (Şekil 3) ölçmek için kullanılmıştır. Doğru hizalama fetal yalan dolayı elde edilebilir değilse, B-mod görüntü ölçümleri,% fraksiyonel kısalma (FS) ölçmek için kullanılabilir. Aşağıdaki gibi LV sistol sonu boyutu (SVSSÇ) ve kalp döngüsü boyunca LV diyastol sonu boyutu (KTO) arasındaki zamansal değişimleri, kısalma fraksiyonu (FS) hesaplanması için kullanılır: % FS = [(LVEDD - SVSSÇ) / LVEDD] x 100 </li><li> Sağ ve sol ventriküller başından kuyruk tarama ile tanımlanır. Sol ve sağ taraf açıklamalı olmalı. Ekojen fetal kan tarafından oluşturulan Görünür akım akışı mitral orifis içinde Doppler örnekleme hacmi doğru yerleştirilmesini kolaylaştırır. Sol ventrikül giriş hızı Apikal dört boşluk ve LV uzun eksen görüntülerden (Şekil 4, C) mitral kapağı da elde edilir. Aort çıkış ölçümleri sistolik ölçmek için kullanılabilirlic ejeksiyon zamanı (Şekil 4, D). Kalp atım hızı bir akış döngüsünün ölçüm şu akış döngüsü (Şekil 4, C ve D) ile hesaplanabilir. Bakım Doppler açısı en aza indirmek için kan akımı ve Doppler ışını hizalamak için alınmalıdır. 60 derecelik bir açı dışında alınan değerler yanlıştır ve kaçınılmalıdır. </li><li> Tarama b-mod görüntüleri, ventriküler septal defekt (Şekil 5) gibi ortak yapısal konjenital anomaliler tespit etmek için kullanılmaktadır. Ventriküller içinde Doppler örnekleme hacmi ventriküler septum boyunca akışını tanımlamak için kullanılabilir. Kolayca izlenir Ek parametreler fetal boyut, kalp hızı, akım hızları, perikardiyal efüzyon, ve fetal hidrops vardır. Spesifik kardiyak defektlerin kesin tanısı otopsi ve histopatolojik tarafından ek olarak değerlendirilmesi gereklidir. </li></ol> Teknik Hususlar Sol ve sağ cham tanımlanmasıyle geliştirme sırasında ventriküllerden benzer boyutları nedeniyle fetal kardiyak görüntülemede zor olabilir. Bir strateji, yatay düzlemde görüntüleme hareketli platform göre, gerçek zamanlı olarak sağa sola ve fetal yönlendirme oluşturmaktır. Burun, ekstremite tomurcukları ve omurga tanımlanması fetusun let / sağ yön belirlemenize yardımcı olacaktır. Eğer mümkünse, kemer ya da pulmoner arterin ana çatallanma görselleştirme için çıkış parça izleme sol ventrikül çıkış yolu veya sırasıyla sağ çıkış yolunun belirlenmesi için izin verecektir. Her bir fetus okudu için, kaydedilmiş görüntüler üzerinde kararlı sol-sağ yön dikkat etmek önemlidir. Post-görüntüleme Hayvan İzleme ve Bakım Görüntüleme tamamlanmasının ardından, baraj standart kurumsal işlem sonrası protokolüne göre uygun konut döndü ve izlenir.Bu görüntüleme prosedürü izleyerek Analjezi gerekli değildir. Normal aktivite Tam başlaması beş dakika içinde tahmin edilebilir. 4. Fetal Ekokardiyografi Temsilcisi Sonuçlar Yüksek frekans probları (8 MHz üstü), gelişimi görüntü yakınlaştırılmış ve 1 cm derinlikte elde edildiğinde 0,3 mm lateral çözünürlük ile yaklaşık 0.2 mm eksenel bir çözünürlüğe sahip ticari ekokardiyografik ekipmanı sağladı. Son yıllarda geliştirilen dönüştürücülerin çoğu alanında eserler yakınlarındaki kaçınarak avantajına sahip oldukları lineer vardır. Yüksek frekans (30-50 MHz) son zamanlarda mekanik probları 5-12 mm arasında bir derinliğe yaklaşık olarak 50 um arasında eksenel bir çözünürlük sağlayan, fare göğüs ve kalp atış hızı için yeterli olan geliştirilmiştir. En son, bu yüksek frekanslı mekanik problar ventrikül ve kapak fonksiyonları ve s belirlenmesi tam bir değerlendirme sağlayarak renkli Doppler yetenekleri ekledikavı fetal kalp lezyonlarının. Burada anlatılan yöntemler bir VisualSonics Vevo 770 sistem üzerinde gerçekleştirilir ve hemen hemen tüm eşdeğer sistemlere de uygulanabilir. Mevcut piyasada bulunan ultra-yüksek frekanslı ultrason sistemi yatay 60 mm ve 50 ila 100 mm aksiyal çözünürlük (Vevo770, VisualSonics, Inc) ile birlikte, 7 ila 14 mm maksimum görüntüleme derinliği ile 40 Hz&#39;de çalışabilir. Bu 50 ila 100 mm eksenel ve klinik Acuson Sequoia ultrason sistemi ile 200 ila 500 mm lateral çözünürlük, 60 Hz ve 20 mm görüntüleme derinliği ile karşılaştırır. Fetal fare kalp küçük boyutu göz önüne alındığında, farelerde fetal ekokardiyografi çalışmaları teknik meydan okuyorlar. Erişkin farelerde ekokardiyografi aksine, sonografırın fetüsün vücut eksenler tarafından tanımlanan geleneksel olmayan ultrason görüntüleme uçaklar kullanmanız gerekir. Rahim kıvrımlarında da fetusun yönünü etkileyen ve dikkate alınmalıdır. Ultr arasında Ayrıca, penetrasyon derinliği doğal sınırlamaBir yüksek frekanslı ultrason fetusların çok sayıda zor gebeliklerde tüm numuneler görüntüye yapabilirsiniz. Bir ultrason görüntüleme strateji doğuştan kusurlar, kardiyovasküler ve dışı 7 için yüksek verimli tarama teknikleri sağlar. Genetik değişikliklerin çalışma ötesinde, bu yöntem, farmakolojik ve toksikolojik çalışmalarda kusurları tespit etmek amacıyla kullanılabilir. Bu yöntem, aynı zamanda, enjeksiyon ile veya ventrikül basınçları 13 ölçü olarak müdahale prosedürler için bir kılavuz araç olarak kullanılabilir. Fetal ultrason invazif olmayan doğası, gerçek zamanlı olarak bu kritik fenotipik bilgi sağlar, çünkü aynı zamanda kardiyovasküler işlev fizyolojik koşullar altında değerlendirilir izin verir, çünkü ancak, sadece avantajlıdır. Ama teknik olarak mümkün embriyonik kalpler, Boyuna incelenmesi çeşitli nedenlerden dolayı zor kalır. Aynı fetus ve ide Seri muayeneHer bir muayene aynı fetus ntification belirgin bir yapısal kusur yokluğunda zordur. Uterus ve fetus hareketi tamamen numunenin yönünü değiştirmek ve böylece uzunlamasına izleme yapmak ve takip ölçümleri 14 zor olabilir. Ekokardiyografi kalp anomalilerinin belirlenmesi için güçlü bir tekniktir rağmen, yapısal kalp defektlerinin spesifik tanısı otopsi ve histopatolojik 15 tarafından ayrıntılı fenotipleme gerektirir. Genotip ve belirli bir fetusun Korelasyon tercihen hemen yankı çalışma sonrasında ve sırasında baraj yönelim ve embriyo yer değişiklikleri en aza indirmek için hala anestezi, histerotomi tarafından hasat fetuslarda gerektirir. Odasının boyutları ve fonksiyonu için normal değerler bu değerler 6-10 için anılan referansları gözden geçirmek için tavsiye edilir, bu tekniğin embriyonik fare ve kullanıcılar için rapor edilmiştir. Değerlendirmekapak morfolojisi görüntü çözünürlüğü ile sınırlıdır, ancak, büyük damarlar yoluyla halka boyut ölçümleri ve hız ölçümleri hatta gibi erken ED 9,5 olarak mümkündür. Bakım kan akımı ve dönüştürücü 10, 16 ile yeterli uyum elde etmek için alınmalıdır. Bu kalp boyutları fare suşları, cinsiyet ve yaşa göre değişir ve hızla farklı embriyonik zaman noktalarında ve kalp hızlarında değişiklik olduğu vurgulanmalıdır. Bu farelerin grupları bu parametreler için uyumlu olduğunu doğrulamak için önemlidir. Fetal görüntüleme yanı sıra fare zorlanma göre değişir. Örneğin, hamile CD-1 Baraj rutin C57/BL6 zorlanma ve böylece tüm numuneler görselleştirmek için daha zor olabilir kıyasla daha embriyo içerir. Bu nedenlerden dolayı, yaş kullanılması ve her bir deney için uyumlu kontrol gerginlik referans değerlerinin yerine kullanılabilir. Buna ek olarak, sol ventrikül diyastol sonu boyutu ve arka gibi bireysel parametrelerin ölçümleriduvar kalınlığı% 25 8 normal farelerde değişebilir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/4416/4416fig1.jpg" /> Şekil 1. Fizyolojik izleme ünitesi ile VisualSonics Vevo 770 sistemi kullanılarak set-up bakış. (A) VisualSonics entegre raylı sistem. (B) fare ısıtma gemide emniyet düzgün bir şekilde yerleştirilmiş ve. Dört bacağı EKG elektrotları içine bantlanmış. Gebe fare ve embriyoların düzeni (C) Şematik. Uterusun her horn içerisinde embriyo sayısı fetusun yönüne ek olarak önemli ölçüde değişebilir. (D) taşımak için manipülasyon uçakları (X ekseni ve Y ekseni) belirterek okları ile görüntüleme platformu A konumlandırılmış baraj görüntüleme için baraj. Z ekseni (panel B olarak da okla gösterilmiştir) yukarı ve aşağı doğru transdüktörün hareketini ifade eder. B, mesane, L, Sol, R, riGHT. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/4416/4416fig2.jpg" /> Şekil 2. Örnek b-mod görüntüler. Bu rakam embriyonik gün 14.5 fetüsün temsili b-mod görüntüler içerir. İki komşu fetusların (A) Görselleştirme. Kutular fetal kalbin yerini gösterir. (B) bir fetusta anatomik yerlerinden oryantasyon rehberlik etmek. Sağ ve sol ventrikül (D), sağ ventrikül çıkış yolu ve pulmoner arter (PA) (E), ve sol ventrikül çıkış inceliğini bir dört odacıklı görünümü (C), kısa eksen görünümde Embriyonik günlük 14.5 kalp (SVÇY) ve aort (F). <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/4416/4416fig3.jpg" /> Şekil 3,. Ventriküler fonksiyon Temsilcisi değerlendirilmesi. Bu rakam temsilcisi içerir2D embriyonik günde 14.5 de kalbin uzun eksen görünümü (A) ekokardiyografi ve dört odacıklı görünümü (B). (C) M-mod diastole sol ve sağ ventrikül iç çapı belirten çizgiler ile izleme (R görüntüleri / LVIDd) ve dört odacık görüntüsü uçaktan sistol (R / LVIDs). Interventriküler septum (IVS) de görüntülenmiştir. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/4416/4416fig4.jpg" /> Şekil 4. Örnek Doppler değerlendirmesi. Bu rakam bir apikal dört boşluk görüntüde (A) embriyonik günde 14.5 kalbin 2D ekokardiyografi temsili görüntülerini içerir. Sol atriyum ve sol ventrikül kavite hatlarıyla oylandı. Mitral giriş kaydı için Nabız dalga Doppler örnekleme hacmi (B) Örnek yerleştirme. (C) Mitral girişi Doppler desenleri erken diyastolik velocity ve atriyal kasılma (&quot;A&quot; gösterilen) gömlek hızlar ölçülür. (D) Örnek aortik Doppler dalga biçimi (&quot;E&quot; belirtilmiştir). Aort Doppler jet (EZ) ölçmek için kullanılabilir. Kalp atım hızı (KAH) Aşağıdaki akış döngüsü bir akış döngüsü ölçüm hesaplanabilir. <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4416/4416fig4large.jpg" target="_blank">büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın</a> . <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/4416/4416fig5.jpg" /> Şekil 5,. Ventriküler septal defekt Temsilcisi algılama. Bu rakam, (B) ana hatlarıyla sağ ve sol ventrikül boşlukları ile apikal dört boşluk görüntüde (A) embriyonik günde 14.5 kalp temsili b-mod görüntüler içerir. Interventriküler septum varlığı unutmayın. Hematoksilen ve eozin ile boyanmış görüntülü kalp (C) Enine kesit.Bir ventriküler sepal defekt (VSD) ile embriyonik gün 14.5 kalp (D) B-mod görüntü okla gösterilir. (E) Sağ ve sol ventrikül kavite boyunca akış kaydı için Nabız dalga Doppler örnekleme hacmi üst üste yerleştirilmesi ile özetlenen interventriküler septum. (F) numune alma sonrasında görüntülü kalp hematoksilen ve eosin ile boyandı enine kesit. (G) interventriküler septum boyunca akış kaydı için Nabız dalga Doppler örnekleme hacmi yerleştirme Superimposed. (H) Temsilcisi Doppler izleme (G) den Soldan sağ ventriküle akışını gösteren. <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4416/4416fig5large.jpg" target="_blank">büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın</a> .

<ol>
	<li>Wessels, A., Sedmera, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+anatomy+of+the+heart:+a+tale+of+mice+and+man.">Developmental anatomy of the heart: a tale of mice and man.</a> Physiol. Genomics. 15, 165 (2003).</li><li>Snider, P., Conway, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+human+cardiovascular+congenital+disease+using+transgenic+mouse+models.">Probing human cardiovascular congenital disease using transgenic mouse models.</a> Prog. Mol. Biol. Transl. Sci. 100, 83 (2011).</li><li>Clark, K. L., Yutzey, K. E., Benson, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcription+factors+and+congenital+heart+defects.">Transcription factors and congenital heart defects.</a> Annu. Rev. Physiol. 68, 97 (2006).</li><li>Leatherbury, L., Yu, Q., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+phenotypic+analysis+of+cardiovascular+structure+and+function+in+fetal+mice+using+ultrasound.">Noninvasive phenotypic analysis of cardiovascular structure and function in fetal mice using ultrasound.</a> Birth Defects Res C Embryo Today. 69, 83 (2003).</li><li>Spurney, C. F., Lo, C. W., Leatherbury, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+mouse+imaging+using+echocardiography:+a+review+of+current+technology.">Fetal mouse imaging using echocardiography: a review of current technology.</a> Echocardiography. 23, 891 (2006).</li><li>Spurney, C. F., Leatherbury, L., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+ultrasound+database+profiling+growth,+development,+and+cardiovascular+function+in+C57BL/6J+mouse+fetuses.">High-frequency ultrasound database profiling growth, development, and cardiovascular function in C57BL/6J mouse fetuses.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 17, 893 (2004).</li><li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+phenotyping+of+fetal+mice+by+noninvasive+high-frequency+ultrasound+facilitates+recovery+of+ENU-induced+mutations+causing+congenital+cardiac+and+extracardiac+defects.">Cardiovascular phenotyping of fetal mice by noninvasive high-frequency ultrasound facilitates recovery of ENU-induced mutations causing congenital cardiac and extracardiac defects.</a> Physiol. Genomics. 24, 23 (2005).</li><li>Yu, Q., Leatherbury, L., Tian, X., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+assessment+of+fetal+mice+by+in+utero+echocardiography.">Cardiovascular assessment of fetal mice by in utero echocardiography.</a> Ultrasound Med. Biol. 34, 741 (2008).</li><li>Linask, K. K., Huhta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Doppler+echocardiography+to+monitor+embryonic+mouse+heart+function.">Use of Doppler echocardiography to monitor embryonic mouse heart function.</a> Methods Mol. Biol. 135, 245 (2000).</li><li>Hinton, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+heart+valve+structure+and+function:+echocardiographic+and+morphometric+analyses+from+the+fetus+through+the+aged+adult.">Mouse heart valve structure and function: echocardiographic and morphometric analyses from the fetus through the aged adult.</a> Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 294, H2480 (2008).</li><li>Gui, Y. H., Linask, K. K., Khowsathit, P., Huhta, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doppler+echocardiography+of+normal+and+abnormal+embryonic+mouse+heart.">Doppler echocardiography of normal and abnormal embryonic mouse heart.</a> Pediatr. Res. 40, 633 (1996).</li><li>Purssell, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+high-resolution+ultrasound+reveals+structural+and+functional+deficits+in+dimethadione-exposed+fetal+rat+hearts+in+utero.">Noninvasive high-resolution ultrasound reveals structural and functional deficits in dimethadione-exposed fetal rat hearts in utero.</a> Birth Defects Res. B Dev. Reprod. Toxicol. , (2011).</li><li>Le, V. P., Kovacs, A., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Left+Ventricular+Pressure+in+Late+Embryonic+and+Neonatal+Mice.">Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice.</a> J. Vis. Exp. (60), e3756 (2012).</li><li>Ji, R. P., Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+localization+of+nuclear+factor+of+activated+T+cells+c1-/-+mouse+embryos+by+ultrasound+biomicroscopy-Doppler+allows+genotype-phenotype+correlation.">Noninvasive localization of nuclear factor of activated T cells c1-/- mouse embryos by ultrasound biomicroscopy-Doppler allows genotype-phenotype correlation.</a> J. Am. Soc. Echocardiogr. 18, 1415 (2005).</li><li>Kim, G. H., Samant, S. A., Earley, J. U., Svensson, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+control+of+FOG-2+expression+in+cardiomyocytes+by+microRNA-130a.">Translational control of FOG-2 expression in cardiomyocytes by microRNA-130a.</a> PLoS One. 4, e6161 (2009).</li><li>Momoi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modest+maternal+caffeine+exposure+affects+developing+embryonic+cardiovascular+function+and+growth.">Modest maternal caffeine exposure affects developing embryonic cardiovascular function and growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 294, H2248 (2008).</li><li>Tobita, K., Liu, X., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+modalities+to+assess+structural+birth+defects+in+mutant+mouse+models.">Imaging modalities to assess structural birth defects in mutant mouse models.</a> Birth Defects Res. C Embryo Today. 90, 176 (2010).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Seri ölçümler yapmak ve kardiyak defektler ile mutant fetuslarda tespit yeteneği normal ve anormal kardiyovasküler gelişimini araştırmak için ekokardiyografi yararlılığını vurgulamaktadır. In vivo kardiyak yapı ve fonksiyon analizi Normal fetal gelişim için genetik ve genetik olmayan değişikliklerin açıklamasını ayrılmaz bir parçası haline gelmiştir. 2D-güdümlü Doppler durumu gerçek zamanlı görüntüler elde ederken olası kalp hızı ve kan akım paternleri izlemek için yapar...

<table border="1"><tbody><tr><td> Vevo 770 Görüntüleme Sistemi </td><td> VisualSonics </td><td></td><td> (Toronto, Kanada) </td></tr><tr><td> RMV707B.15-45 MHz&#39;lik transdüser </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Tec 3 İzofluran Buharlaştırıcı </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Izofluran (2-kloro-2-(diflorometoksi) -1,1,1-trifloro-etan) </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

murine fetal echocardiography

Kalp gelişimi ve işlevinde anormallikler gösteren Transgenik farelerin anlamak için güçlü bir araç temsil Normal kardiyovasküler fonksiyon ve insan kardiyovasküler hastalık patofizyolojik temeli hem yatan moleküler mekanizmaları. Kardiyak gelişimi 1-3 etkileyen genetik değişiklikler incelenirken Fetal ve perinatal ölüm ortak bir özelliktir. Kalp fonksiyonunun erken gelişim genetik veya farmakolojik değişikliklerin rolü incelemek için, canlı fetusun ultrason görüntüleme anormallikleri ve uzunlamasına izlem erken tanınması için önemli bir araç haline gelmiştir. Noninvaziv ultrason görüntüleme konjenital malformasyonlar ve ölüm 4 öncesinde kardiyak fonksiyonlar üzerine etkisini tespit etmek ve eğitim için ideal bir yöntemdir. Bu canlı fetus ve hastalığın ilerlemesinde anomalilerin erken tanınması uzunlamasına çalışmalarda 5,6 ile uterus içinde takip edilebilir sağlar.Yakın zamana kadar, fetal fare kalpleri görüntüleme sıklıkla invazif yöntemler dahil. Fetus manyetik rezonans ve elektron mikroskopi gerçekleştirmek veya cerrahi transillüminasyon mikroskopi için teslim kurban gerekiyordu. Geleneksel 2-D ve pulsed-wave Doppler görüntüleme ile yüksek frekanslı probların bir uygulama 6-10 mevcut şimdi normal gelişimsel değişiklikler veritabanları ile embriyonik gelişim sırasında kalp kasılması ve kalp hızı ölçümleri sağlamak için gösterilmiştir. , Uygun görüntüleme uçaklar genellikle elde etmek zor olsa da M-mod görüntüleme daha da önemli fonksiyonel verileri sağlar. Fetusun Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme 2-D çözünürlüğü artmıştır ve kardiyak yapıların 11 erken gelişimi mükemmel bilgi sağlayabilir.

Watch this Scientific Journal Video about Murine Fetal Echocardiography at JoVE.com

Murine Fetal Echocardiography

Kalp gelişimini etkileyen genetik değişiklikler incelenirken Fetal ve perinatal ölüm ortak bir özelliktir. Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme 2-D çözünürlüğü artmıştır ve erken kardiyak gelişimi mükemmel bilgi sağlayabilir ve önceden ölüm kalp yapısı ve fonksiyonu üzerine etkisini tespit etmek için ideal bir yöntemdir.

Mürin Fetal Ekokardiyografi

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

Research

JoVE Journal

Medicine

17.1K Görüntüleme.  University of Chicago. Kalp gelişimini etkileyen genetik değişiklikler incelenirken Fetal ve perinatal ölüm ortak bir özelliktir. Yüksek frekanslı ultrason görüntüleme 2-D çözünürlüğü artmıştır ve erken kardiyak gelişimi mükemmel bilgi sağlayabilir ve önceden ölüm kalp yapısı ve fonksiyonu üzerine etkisini tespit etmek için ideal bir yöntemdir.

Video: Murine Fetal Echocardiography

Transthoracic Echocardiography in Mice

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene expression. Transgenic and gene targeting methods can be used to generate mice with altered cardiac size and function,1-3 and as a result, in vivo techniques are needed to evaluate their cardiac phenotype. Transthoracic echocardiography, pulse wave Doppler (PWD), and tissue Doppler imaging (TDI) can be used to provide dimensional measurements of the mouse heart and to quantify the degree of cardiac systolic and diastolic performance. Two-dimensional imaging is used to detect abnormal anatomy or movements of the left ventricle, whereas M-mode echo is used for quantification of cardiac dimensions and contractility.4,5 In addition, PWD is used to quantify localized velocity of turbulent flow,6 whereas TDI is used to measure the velocity of myocardial motion.7 Thus, transthoracic echocardiography offers a comprehensive method for the noninvasive evaluation of cardiac function in mice.

Transthoracic echocardiography offers a noninvasive method for the evaluation of cardiac function in mice. A combination of ultrasound and Doppler imaging modalities can be used to obtain dimensional measurements of the heart and intracardiac blood flow, which together provide an assessment of cardiac systolic and diastolic performance.

Fareler de Transtorasik Ekokardiyografi

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Tıp

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in functional parameters of key clinical significance. Two-dimensional movies were acquired at high frame rate (8 kHz) and were utilized to estimate high-quality myocardial strain. Two-dimensional elastograms (strain images), as well as strain profiles, were visualized. Results were powerful in quantitatively assessing IR-induced changes in cardiac events including left-ventricular (LV) contraction, LV relaxation and isovolumetric phases of both pre-IR and post-IR beating hearts in intact mice. In addition, compromised sector-wise wall motion and anatomical deformation in the infarcted myocardium were visualized.  The elastograms were uniquely able to provide information on the following parameters in addition to standard physiological indices that are known to be affected by myocardial infarction in the mouse: internal diameters of mitral valve orifice and aorta, effective regurgitant orifice, myocardial strain (circumferential as well as radial), turbulence in blood flow pattern as revealed by the color Doppler movies and velocity profiles, asynchrony in LV sector, and changes in the length and direction of vectors demonstrating slower and asymmetrical wall movement. This work emphasizes on the visual demonstration of how such analyses are performed. 

High-frequency High-resolution Echocardiography: First Evidence on Non-invasive Repeated Measure of Myocardial Strain, Contractility, and Mitral Regurgitation in the Ischemia-reperfused Murine Heart 

High frequency Doppler ultrasound is a novel technology for assessing regional myocardial function. This work presents first evidence demonstrating applicability of this versatile imaging platform for the repeated measure of myocardial strain, dp/dt, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused (IR) murine heart.

Yüksek frekanslı Yüksek çözünürlüklü Ekokardiyografi: İskemi-Reperfüze murin Kalp Miyokard Strain, kontraktilite ve Mitral Yetmezliğinde Non-invaziv Tekrarlanan Ölçüm İlk Kanıt

Ischemia-reperfusion (IR) was surgically performed in murine hearts which were then subjected to repeated imaging to monitor temporal changes in ...

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1 Echocardiography provides a powerful, non-invasive tool to serially assess cardiac morphometry and function in a living animal.2 However, using this technique on mice poses unique challenges owing to the small size and rapid heart rate of these animals.3 Until recently, few ultrasound systems were capable of performing quality echocardiography on mice, and those generally lacked the image resolution and frame rate necessary to obtain truly quantitative measurements. Newly released systems such as the VisualSonics Vevo2100 provide new tools for researchers to carefully and non-invasively investigate cardiac function in mice. This system generates high resolution images and provides analysis capabilities similar to those used with human patients. Although color Doppler has been available for over 30 years in humans, this valuable technology has only recently been possible in rodent ultrasound.4,5 Color Doppler has broad applications for echocardiography, including the ability to quickly assess flow directionality in vessels and through valves, and to rapidly identify valve regurgitation. Strain analysis is a critical advance that is utilized to quantitatively measure regional myocardial function.6 This technique has the potential to detect changes in pathology, or resolution of pathology, earlier than conventional techniques. Coupled with the addition of three-dimensional image reconstruction, volumetric assessment of whole-organs is possible, including visualization and assessment of cardiac and vascular structures. Murine-compatible contrast imaging can also allow for volumetric measurements and tissue perfusion assessment.

This video demonstrates use of a rail-mounted high-frequency ultrasound probe to perform echocardiography on an anesthetized mouse. The methods describe both conventional two-dimensional and M-mode measurements of cardiac function in addition to newer, more powerful tools such as color Doppler, strain analysis, as well as general and targeted contrast imaging.

Murin Ekokardiyografi ve Ultrasonik Görüntüleme

Rodent models of cardiac pathophysiology represent a valuable research tool to investigate mechanism of disease as well as test new therapeutics.1  ...

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, including mental retardation due to disordered and damaged brain development. Fetal alcohol spectrum disorder (FASD) is a term used to cover a continuum of birth defects that occur due to maternal alcohol consumption, and occurs in approximately 4% of children born in the United States. With 50% of child-bearing age women reporting consumption of alcohol, and half of all pregnancies being unplanned, unintentional exposure is a continuing issue2. In order to best understand the damage produced by ethanol, plus produce a model with which to test potential interventions, we developed a model of developmental ethanol exposure using the zebrafish embryo. Zebrafish are ideal for this kind of teratogen study3-8. Each pair lays hundreds of eggs, which can then be collected without harming the adult fish. The zebrafish embryo is transparent and can be readily imaged with any number of stains. Analysis of these embryos after exposure to ethanol at different doses and times of duration and application shows that the gross developmental defects produced by ethanol are consistent with the human birth defect. Described here are the basic techniques used to study and manipulate the zebrafish FAS model.

In order to understand the molecular mechanisms of the ethanol-induced developmental damage, we have developed a zebrafish model of ethanol exposure and are exploring the physical, cellular, and genetic alterations that occur after ethanol exposure1. We then seek to find potential interventions and rapidly test them in this animal model.

Fetal Alkol Pozlama bir Zebra balığı Modelinde teratojenik değişiklikler değerlendirilmesi

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ultrasound and fetal echocardiography. Increasingly, these imaging modalities are being employed clinically to examine cardiac function and assess wellbeing in utero, thereby guiding timing of birth decisions. Here, we used a rabbit model of IUGR that allows analysis of cardiac function in a clinically relevant way. Using isoflurane induced anesthesia, IUGR is surgically created at gestational age day 25 by performing a laparotomy, exposing the bicornuate uterus and then ligating 40-50% of uteroplacental vessels supplying each gestational sac in a single uterine horn. The other horn in the rabbit bicornuate uterus serves as internal control fetuses. Then, after recovery at gestational age day 30 (full term), the same rabbit undergoes examination of fetal cardiac function. Anesthesia is induced with ketamine and xylazine intramuscularly, then maintained by a continuous intravenous infusion of ketamine and xylazine to minimize iatrogenic effects on fetal cardiac function. A repeat laparotomy is performed to expose each gestational sac and a microultrasound examination (VisualSonics VEVO 2100) of fetal cardiac function is performed. Placental insufficiency is evident by a raised pulsatility index or an absent or reversed end diastolic flow of the umbilical artery Doppler waveform. The ductus venosus and middle cerebral artery Doppler is then examined. Fetal echocardiography is performed by recording B mode, M mode and flow velocity waveforms in lateral and apical views. Offline calculations determine standard M-mode cardiac variables, tricuspid and mitral annular plane systolic excursion, speckle tracking and strain analysis, modified myocardial performance index and vascular flow velocity waveforms of interest. This small animal model of IUGR therefore affords examination of in utero cardiac function that is consistent with current clinical practice and is therefore useful in a translational research setting.

We describe examination of fetal cardiac function with contemporary functional fetal echocardiography and fetoplacental Doppler ultrasound using the VisualSonics VEVO 2100 microultrasound in a surgically induced model of intrauterine fetal growth restriction in a rabbit.

Rahim içi Büyüme Kısıtlama bir Tavşan Modelinde Fetal Ekokardiyografi ve Pulsed-wave Doppler Ultrason

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

Isolation, Culture, and Imaging of Human Fetal Pancreatic Cell Clusters

For almost 30 years, scientists have demonstrated that human fetal ICCs transplanted under the kidney capsule of nude mice matured into functioning endocrine cells, as evidenced by a significant increase in circulating human C-peptide following glucose stimulation1-9. However in vitro, genesis of insulin producing cells from human fetal ICCs is low10; results reminiscent of recent experiments performed with human embryonic stem cells (hESC), a renewable source of cells that hold great promise as a potential therapeutic treatment for type 1 diabetes. Like ICCs, transplantation of partially differentiated hESC generate glucose responsive, insulin producing cells, but in vitro genesis of insulin producing cells from hESC is much less robust11-17. A complete understanding of the factors that influence the growth and differentiation of endocrine precursor cells will likely require data generated from both ICCs and hESC. While a number of protocols exist to generate insulin producing cells from hESC in vitro11-22, far fewer exist for ICCs10,23,24. Part of that discrepancy likely comes from the difficulty of working with human fetal pancreas. Towards that end, we have continued to build upon existing methods to isolate fetal islets from human pancreases with gestational ages ranging from 12 to 23 weeks, grow the cells as a monolayer or in suspension, and image for cell proliferation, pancreatic markers and human hormones including glucagon and C-peptide. ICCs generated by the protocol described below result in C-peptide release after transplantation under the kidney capsule of nude mice that are similar to C-peptide levels obtained by transplantation of fresh tissue6. Although the examples presented here focus upon the pancreatic endoderm proliferation and &#946;&#160;cell genesis, the protocol can be employed to study other aspects of pancreatic development, including exocrine, ductal, and other hormone producing cells.

A protocol to isolate, culture, and image islet cell clusters (ICCs) derived from human fetal pancreatic cells is described.&#160; The method details the steps necessary to generate ICCs from tissue, culture as monolayers or in suspension as aggregates, and image for markers of proliferation and pancreatic cell fate decisions.

İnsan Fetal Pankreas Hücre Kümeleri İzolasyon, Kültür ve Görüntüleme

For almost 30 years, scientists have demonstrated that human fetal ICCs transplanted under the kidney capsule of nude mice matured into functioning ...

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease and injury regional estimates, World Health Organization, 2004). Surgeries that often compromise the quality of life are required to correct heart defects, reminding us of the importance of finding the causes of CHD. Mutant mouse models and live imaging technology have become essential tools to study the etiology of this disease. Although advanced methods allow live imaging of abnormal hearts in embryos, the physiological and hemodynamic states of the latter are often compromised due to surgical and/or lengthy procedures. Noninvasive ultrasound imaging, however, can be used without surgically exposing the embryos, thereby maintaining their physiology. Herein, we use simple M-mode ultrasound to assess heart rates of embryos at E18.5 in utero. The detection of abnormal heart rates is indeed a good indicator of dysfunction of the heart and thus constitutes a first step in the identification of developmental defects that may lead to heart failure.

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Ultra-high frequency ultrasound is a powerful live imaging tool to examine cardiac abnormalities in small animals. Its noninvasiveness allows maintaining the physiologic state of embryos. Herein, we show the use of M-mode ultrasound to measure the heart rates of embryos at E18.5 in utero.

Noninvaziv M-mod ekokardiyografi ile Fare Kalp Puan utero Ölçümünde

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs across species but is age dependent. The transition from a scarless to scarring phenotype occurs in the third trimester of pregnancy in humans and around embryonic day 18 (E18) in mice. However, this varies with the size of the wound with larger defects generating a scar at an earlier gestational age. The emergence of lineage tracing and other genetic tools in the mouse has opened promising new avenues for investigation of fetal scarless wound healing. However, given the inherently high rates of morbidity and premature uterine contraction associated with fetal surgery, investigations of fetal scarless wound healing in vivo require a precise and reproducible surgical model. Here we detail a reliable model of fetal scarless wound healing in the dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

During mammalian development, early gestational skin wounds heal without a scar. Here we detail a reliable and reproducible model of fetal scarless wound healing in the cutaneous dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

Scarless Yara Repair Fare Fetal Cilt Modeli

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic pressure through echocardiography, as well as to obtain measurements of the Aorta and PA diameter in mice.
Mice older than 10 d of age can be analyzed using the present technique. The technique is composed of 3 main steps: set-up, image acquisition, and image analysis. The set-up step consists of getting the mouse anesthetized with 1% isoflurane, shaving it, and taping it in a supine position to a heated EKG board where the image acquisition will take place. The image acquisition step consists of learning to identify the cardiac structures and obtaining all the required images with its correspondent probe and axis in order to be able to calculate volumes and diameters. The image analysis step consists of measuring the previously acquired images with the aid of computer software.
Advantages of the proposed technique include a fast (15 min) procedure that would allow the researcher to evaluate interventions in a non-invasive, non-terminal approach and therefore follow the same mouse over time; each mouse can be used as its own control. This fact plus having the same operator perform all the acquisition and analysis for the entire experiment minimizes the limitation of operator-dependency. The present methodology is useful for mouse researchers in cardiovascular and pulmonary medicine.

The following protocol describes the methodology for the acquisition and analysis of echocardiographic images used to obtain the Left Atrial Volume (LAV), Aorta (Ao) diameter, and Pulmonary Artery (PA) diameter in mice. This technique is a non-invasive, non-terminal procedure that allows assessment of the cardiopulmonary function.

Sol Atrium, Aort ve Pulmoner Arter Murin Ekokardiyografi

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

2D and 3D Echocardiography in the Axolotl (Ambystoma Mexicanum)

Cardiac malfunction as a result of ischemic heart disease is a major challenge, and regenerative therapies to the heart are in high demand. A few model species such as zebrafish and salamanders that are capable of intrinsic heart regeneration hold promise for future regenerative therapies for human patients. To evaluate the outcome of cardioregenerative experiments it is imperative that heart function can be monitored. The axolotl salamander (A. mexicanum) represents a well-established model species in regenerative biology attaining sizes that allows for evaluation of cardiac function. The purpose of this protocol is to establish methods to reproducibly measure cardiac function in the axolotl using echocardiography. The application of different anesthetics (benzocaine, MS-222, and propofol) is demonstrated, and the acquisition of two-dimensional (2D) echocardiographic data in both anesthetized and unanesthetized axolotls is described. 2D echocardiography of the three-dimensional (3D) heart can suffer from imprecision and subjectivity of measurements, and to alleviate this phenomenon a solid method, namely intra/inter-operator/observer analysis, to measure and minimize this bias is demonstrated. Finally, a method to acquire 3D echocardiographic data of the beating axolotl heart at a very high spatiotemporal resolution and with pronounced blood-to-tissue contrast is described. Overall, this protocol should provide the necessary methods to evaluate cardiac function and model anatomy, and flow dynamics in the axolotl using ultrasound imaging with applications in both regenerative biology and general physiological experiments.

2D and 3D Echocardiography in the Axolotl Ambystoma Mexicanum

Here we present echocardiography protocols for two-dimensional and three-dimensional image acquisition of the beating heart of the axolotl salamander (Ambystoma mexicanum), a model species in heart regeneration. These methods allow for longitudinal evaluation of cardiac function at a high spatiotemporal resolution.

Amfibi (Ambystoma Mexicanum) 2D ve 3D ekokardiyografinin yeri

Cardiac malfunction as a result of ischemic heart disease is a major challenge, and regenerative therapies to the heart are in high demand. A few model ...