This work was supported by Interdisciplinary Centre for Clinical Research IZKF Aachen (junior research group to E.A.L.) within the faculty of Medicine at RWTH Aachen University. We are grateful Dr. Rusu and Ashley Christina Vourakis for critical review of the manuscript and Mrs. Roya Soltan for the professional help with immunohistochemistry staining.

NOT: Bu yazıda sunulan deneyler Alman düşüğe ve Avrupa hayvan bakımı kurallarına uygun şekilde yapılmaktadır. hayvanlar Dr. R. Tolba ve Dr A. Teubner (hayvan refahı memuru) gözetiminde, Laboratuar Hayvan Bilimi Enstitüsü, Universiy hastane Aachen, Almanya Hayvan tesisinde yetiştirilmektedir. 1. Hayvan Bakımı <ol><li> Gıda ve uzman veteriner kontrol ve tedaviye uygun erişimi sağlama uzmanlaşmış bakım ünitesinde fareler tutun. Hayvanlar taşınmış veya dışarıdan satın alınması halinde, prosedür girmeden önce bir haftalık konaklama temin edebilirsiniz. </li></ol> 2. Entübasyon <ol><li> , 8-10 haftalık erkek C57BL / 6 vahşi tip fareler anestezi 100 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile 25-27 gr. Ayak tutam refleksleri ile anestezi düzeyini izleyin. İşlem sırasında kuruluğunu önlemek için gözleri veteriner merhem yerleştirin. </li><li&gt; kurumun hayvan bakımı yönergeleri izleyerek, cerrahi prosedür başlamadan önce buprenophine 0.1 mg / kg vücut ağırlığı subkutan ile ağrı tedavisi yönetin. </li><li> Steril malzeme ve araçları kullanarak ameliyat sırasında enfeksiyonları önlemek için steril koşullarda korunmasını sağlamak. </li><li> Isıtılmış ameliyat masasında sırtüstü pozisyonda anestezi fare yerleştirin. Küçük bir jilet kullanarak ventral boyun bölgesinde ve göğüs kafesinin sol yarısında hem saç kaldırmak ve kesi öncesinde% 70 alkol ile dezenfekte edin. <ol><li> Boyun merkezinde cerrahi makas kullanılarak 0.5 sm&#39;lik bir küçük ortalama kesisi. Deri altında, steril kavisli forseps ile 2 yağlı organları geçmesi ve kaplama kas açıklık yoluyla stereomicroscope altında trakea görselleştirmek. </li></ol></li><li> Stereomikroskopta (Şekil 1A) kullanarak sözlü görünüme altında trakea içine entübasyon kanül tanıtın. Bir uçtan bir uca, metal kanül ayırtşeffaf doku ugh. Ve her an (Şekil 1B) çalışma sırasında, konumunu ve yerini. </li><li> Küçük hayvan ventilatöre kanül bağlayın ve havalandırma ayarları Kullanıma göre ayarlamak ilkelerine uygun (100-150 ul ve min başına 100-150 arasında bir solunum hızı arasındaki tidal hacim) üretmektedir. </li></ol> 3. Miyokard Enfarktüsü İndüksiyon <ol><li> Xiphoid sol axila arasındaki çizginin ortasında bir cilt kesisi az 0,5 cm gerçekleştirin. Altta yatan kaburga kas tabakası ayırmak için forseps kullanabilir. </li><li> Göğüs boşluğu 17 açılana kadar küçük bir makas kullanarak kaburgalar arasında küçük bir kesi yapın. Kronik enfarktüs, 4. interkostal alana (Şekil 1D) &#39;de, 5. interkostal alana (Şekil 1C) ve / veya iskemi / reperfüzyon modeli için kesi gerçekleştirmek: daha kolay bir yöntem numarası 2 inci ve aşağıdan 3 th </sup&gt; interkostal boşluk, sırasıyla). </li><li> Göğüs boşluğu açmak ve kalp görselleştirmek için kesi içine Ekartörleri yerleştirin. </li><li> Dikkatle aşırı fibrotik süreçleri engellemek için perikard çıkarın. </li><li> Derin konumlandırılmış açık kırmızı gemisi olarak sol inen koroner arter (LAD) gözünüzde canlandırın. LAD görüntülenmiştir edilemezse, tekrarlanabilir artırmak için bazı referans noktaları göz önünde bulundurun. <ol><li> Kronik enfarktüs modeli için, Şekil 1C gösterildiği gibi referans olarak ven sahip (kulak kepçesi ve apeks arasında) kalbin ventral tarafında ortasında bitişik harfleri yerleştirin. Bir transmural anterior ve posterior enfarktüsü elde etmek için 0/7 ipek sütür kullanılarak arter hem dallarını Bind. Gri renkli ligature konumunu gösterir (Şekil 1 C) eğer ihtiyaç duyulursa tekrarlanabilir. </li><li> Iskemi / reperfüzyon modelinde, LAD ana gövdenin (Şekil 1D) üzerinden, kulak kepçesi altında bitişik harfleri yerleştirin. ligçalıçtırdıgınızda kap bütünlüğünü korumak için, bir silikon tüpe yer almaktadır. gri renk Enfarktüslü alanı gösterir ve tüm kalp (Şekil 1D) görünmelidir. Iskemi döneminde kaburga temporal sütür koyun ve doku kurumasını önlemek için bir kompres kullanarak nemlendirin. Iskemi sonrasında silikon tüp kaldırmak ve reperfüzyon görselleştirmek için küçük makas ile dikiş kesti. </li></ol></li><li> Prosedürün başında kullanılan anestezik ve analjezik (2.1 ve 2.2 adımları) yanında, hayvanın uygun konfor sağlamak ya da kurumun hayvan bakım kurallara uymayı ameliyat sırasında% 0.5 izofluran kullanın. </li></ol> 4. Sütür ve Kurtarma <ol><li> Sıcak izotonik tuz çözeltisi ile doldurularak toraks kalan havayı ortadan kaldırın. </li><li> 3 dikiş 0/6 (Şekil 2A ve 2B&#39;de gösterildiği gibi) ile boğaz kapatın. Olarak sağlamak için, 90 ° &#39;lik bir açı ile medial dikiş yerleştirinŞekil 2&#39;de gösterildiği gibi, kaburgaların kapatma ealed (Şekil 2A, B). </li><li> 2 dikiş (Şekil 2C) ve 3-4 sütür 0/6 (Şekil 2D) ile deri ile kas tabakası kapatın. Daha fazla ekokardiyografik ölçüm için uygun bir pencere elde etmek için ayrı ayrı bu sütürler gerçekleştirin. </li><li> Ventilatörden entübasyon kanül ayırın ve spontan bir nefes sağlar. Daha sonra kimlik, yerel sistem (Kurumunuzdan hayvan refahı memuru sor) kullanarak fare işaretleyin. </li><li> O uyanana kadar kırmızı lamba altında sol tarafta fare yattı. Yeterli bilinci yerine kadar gözetimsiz bir hayvan bırakmayın. Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların şirket olmak için ameliyat geçirmiş bir hayvan izin vermeyin. </li><li> Kurumunuzun hayvan bakımı yönergeleri izleyerek, önümüzdeki 3 gün boyunca buprenophine 0.1 mg / kg vücut ağırlığı, deri altından ile ağrı tedavisi yönetin. </li&gt; </ol> Miyokard İnfarktüsü 5. Analizi <ol><li> Ejeksiyon fraksiyonu, fraksiyonel kısalma, kalp debisi ve kalp boyutları: Düzenli ekokardiyografi (Şekil 3A) vasıtasıyla kalp fonksiyonlarının izlenmesi. </li><li> 100 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile hayvanlar anestezisi. Refleksleri eksikliği tarafından ameliyat öncesi uygun anesthetization onaylayın. </li><li> Göğüs boşluğu açın ve yoğun steril PBS solüsyonu yıkama kalan kanda yerleştirerek, kalp tüketim. </li><li> Gerekirse, göğüs boşluğundan, ya da kalbin çıkarıldıktan sonra infracted bölgelerin yaralanma kaçınarak kalp doğrudan kan toplamak. </li><li> Yıkandıktan sonra, doymuş KCl çözeltisi içinde Diastola kalp stop (steril PBS içinde 3M KCl süzülmüş). Histolojik analiz için% 10 formalin içinde kalbi düzeltmek ve Adım 5.7 ile devam edin. </li><li> Gerekirse, arabayı canlılığını ölçmekEvans-Mavi / Triphenyl tetrazolyum klorür (TTC) boyama ile kardiyak hücreleri. Yıkamadan ilk yerde bitişik harfleri yeniden sonra, aort kanülü kullanılarak 200 ul% 1 Evans mavi solüsyonla kalp serpmek ve -20 ° C&#39;de küçük bir plastik torba içinde kalp dondurma. <ol><li> 2 saat sonra, keskin bir bıçak kullanılarak 5 enine kaydırmaları ve imal tarafından tarif edildiği gibi, 37 ° C&#39;de TTC çözeltisi 10-15 dakika boyunca inkübe. % 10 formalin içinde 10 dakika süreyle slaytlar saptamak ve daha fazla analiz için mikroskopik slaytlar arasında koydu. </li><li> Enine bölümlendirilmeleri gerçekleştirmek için, ucunda kalbi konumlandırarak, parafin kalp dokusu gömün. 5 um&#39;lik bir seri bölümüne gerçekleştirin. İlk 20 bölümden toplayın ve bir sonraki 300 mikron atın. Mitral kapak seviyesi ulaşılıncaya kadar bölüm protokolü devam (Şekil 3A, B). Seri kesitler dışında tüm kalp boyunca 400 mikron toplanır ve f lekeli olabilirveya kalitatif ve kantitatif analiz. </li></ol></li><li> Gomori en tek-adım 6-8 boyama kullanarak enfarktüs boyutunu ölçün. </li><li> Her zamanki immünohistolojik boyama kullanarak seri bölümde anjiogenezisi, kollajen içeriği veya iltihap hücreleri işe analiz edin. </li></ol>

<ol>
	<li>Liehn, E. A., Postea, O., Curaj, A., Marx, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+after+myocardial+infarction,+between+fantasy+and+reality:+the+role+of+chemokines.">Repair after myocardial infarction, between fantasy and reality: the role of chemokines.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2357-2362 (2011).</li><li>Liehn, E. A., Radu, E., Schuh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+contribution+in+stem+cell+engraftment+into+the+infarcted+myocardium.">Chemokine contribution in stem cell engraftment into the infarcted myocardium.</a> Curr Stem Cell Res Ther. 8 (4), 278-283 (2013).</li><li>Alexander, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repetitive+transplantation+of+different+cell+types+sequentially+improves+heart+function+after+infarction.">Repetitive transplantation of different cell types sequentially improves heart function after infarction.</a> J Cell Mol Med. 16 (7), 1640-1647 (2012).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentalized+protective+and+detrimental+effects+of+endogenous+macrophage+migration-inhibitory+factor+mediated+by+CXCR2+in+a+mouse+model+of+myocardial+ischemia/reperfusion.">Compartmentalized protective and detrimental effects of endogenous macrophage migration-inhibitory factor mediated by CXCR2 in a mouse model of myocardial ischemia/reperfusion.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (9), 2180-2186 (2013).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ccr1+deficiency+reduces+inflammatory+remodelling+and+preserves+left+ventricular+function+after+myocardial+infarction.">Ccr1 deficiency reduces inflammatory remodelling and preserves left ventricular function after myocardial infarction.</a> J Cell Mol Med. 12 (2), 496-506 (2008).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+monocyte+chemotactic+protein-1/chemokine+CC+motif+ligand-2+competitor+limiting+neointima+formation+and+myocardial+ischemia/reperfusion+injury+in+mice.">A new monocyte chemotactic protein-1/chemokine CC motif ligand-2 competitor limiting neointima formation and myocardial ischemia/reperfusion injury in mice.</a> J Am Coll Cardiol. 56 (22), 1847-1857 (2010).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double-edged+role+of+the+CXCL12/CXCR4+axis+in+experimental+myocardial+infarction.">Double-edged role of the CXCL12/CXCR4 axis in experimental myocardial infarction.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2415-2423 (2011).</li><li>Oral, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXC+chemokine+KC+fails+to+induce+neutrophil+infiltration+and+neoangiogenesis+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">CXC chemokine KC fails to induce neutrophil infiltration and neoangiogenesis in a mouse model of myocardial infarction.</a> J Mol Cell Cardiol. 60, 1-7 (2013).</li><li>Projahn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+intramyocardial+release+of+engineered+chemokines+by+biodegradable+hydrogels+as+a+treatment+approach+of+myocardial+infarction.">Controlled intramyocardial release of engineered chemokines by biodegradable hydrogels as a treatment approach of myocardial infarction.</a> J Cell Mol Med. 18 (5), 790-800 (2014).</li><li>Schuh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+into+the+mechanism+of+cell-based+therapy+after+chronic+myocardial+infarction.">Novel insights into the mechanism of cell-based therapy after chronic myocardial infarction.</a> Discoveries. 1 (2), e9 (2014).</li><li>Schuh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+SDF-1+alpha+on+Endogenous+Mobilized+and+Transplanted+Stem+Cells+in+Regeneration+after+Myocardial+Infarction.">Effect of SDF-1 alpha on Endogenous Mobilized and Transplanted Stem Cells in Regeneration after Myocardial Infarction.</a> Curr Pharm Des. 20 (12), 1964-1970 (2013).</li><li>Zaragoza, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiovascular+diseases.">Animal models of cardiovascular diseases.</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 497841 (2011).</li><li>Kanzler, I., Liehn, E. A., Koenen, R. R., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+therapeutic+approaches+to+reduce+acute+atherosclerotic+complications.">Anti-inflammatory therapeutic approaches to reduce acute atherosclerotic complications.</a> Curr Pharm Biotechnol. 13 (1), 37-45 (2012).</li><li>Liehn, E. A., Zernecke, A., Postea, O., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines:+inflammatory+mediators+of+atherosclerosis.">Chemokines: inflammatory mediators of atherosclerosis.</a> Arch Physiol Biochem. 112 (4-5), 229-238 (2006).</li><li>Kolk, M. V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-Ligation:+A+Murine+Model+of+Myocardial+Infarction.">LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction.</a> J. Vis. Exp. (32), 1438 (2009).</li><li>Ryu, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+bone+marrow+mononuclear+cells+using+injectable+fibrin+matrix+enhances+neovascularization+in+infarcted+myocardium.">Implantation of bone marrow mononuclear cells using injectable fibrin matrix enhances neovascularization in infarcted myocardium.</a> Biomaterials. 26 (3), 319-326 (2005).</li><li>Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-based+Therapy+for+Heart+Failure+in+Rat:+Double+Thoracotomy+for+Myocardial+Infarction+and+Epicardial+Implantation+of+Cells+and+Biomatrix.">Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix.</a> J. Vis. Exp. (91), e51390 (2014).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Murine+Model+of+Myocardial+Ischemia-reperfusion+Injury+through+Ligation+of+the+Left+Anterior+Descending+Artery.">A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery.</a> J. Vis. Exp. (86), e51329 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

İşlem sırasında, bazı kritik noktalara dikkat edilmesi vardır: entübasyon, açılış göğüs boşluğu ve LAD bağ. ilk kritik adım denemelerinde önce hayvanın entübasyon olduğunu. Birçok grup trakea içine doğrudan kanül eklemek için fare ve ışık kaynağı sabitleme için dikey destek kullanıyorsunuz. Bu yöntem, belirsizlik trakea içine kanül doğru takılmasını ilişkin vardır ve acemiler tarafından en başarısız eğilimli. Küçük bir kesi yapmak, kanül konumu dolayısıyla varsayılan oranını azaltarak, tüm manevra sırasında kontrol edilebilir. Ayrıca, trakeotomi böylece komplikasyonların azaltılmasında ve çalışma süresini azaltarak, aştı. Bir sonraki adım, kritik göğüs boşluğunun açılması olduğunu. median sternotomi hayvanların kurtarma geciktirerek yüksek risk manevrasını temsil eder. 2-3 kaburgaların 15 kesim ima yanal sol kesi </sup&gt;, eksik toparlanma ve artmış mortalite yol açar. Biz asgari yükü sunan kaburga arasındaki modeli küçük, ayrık kesi kullanılan. Hayvanlar ameliyattan sonra çok hızlı bir şekilde kurtarmak ve mevcut kusurları veya rahatsız şifa yapamaz. Alt arası costal alan bir referans noktası olarak alınır. Bu göz önüne alındığında, kronik ve iskemi / reperfüzyon modeli için bağ yere doğru ve farklılaştırılmış erişim, ciddi sorunlar yükseltmek değil. bağ kendisi en kritik adımı temsil etmektedir. sol inen koroner arter görüntülenmiştir zordur ve genellikle olmadan görünümü bağlı olması gerekir. Bu nedenle, bazı anatomik referans noktaları doğru ligasyonu gerçekleştirmek için cerrah yardımcı işaret edilmektedir. Kronik enfarktüs modeli için, bağ majör ön ven (Şekil 2B) biten üstünde, kulak kepçesi ve apeks arasında, kalbin ventral tarafında ortasında yer alıyor. verim contro edilebiliretkilenen bölgelerde gri renk görünümünü görselleştirme ile lled. Enfarktüslü alan anterior görünür ve arka duvarı içermiyorsa, yeni bir dikiş ilk dikiş soluna yerleştirilebilir. LAD ana kök bu bölümünü tespitinde ciddi sorunlar söz konusu değildir, bu nedenle kulak kepçesi 18 altında her zaman görülebilir ve. Ancak, kulak kepçesi kanama riskini önemli sunar ve dikkatle ele alınması gerekir. prosedür uygun ekipman varlığı ile sınırlıdır. Küçük hayvanlar için bir vantilatör ve uygun anestezi sistemi pahalı ve oda gaz ve havalandırma sistemine bağlantı gerektirir. Dahası, hayvanların yakın bir gözetim prosedürü olası klinik tespit etmek sonra ilk hafta içinde gereklidir. Deney sırasında kalp fonksiyonunu incelemek için, yüksek çözünürlüklü ultrason, karmaşık Langendorf perfüzyon sistemi, ya da küçük intraventriküler kateter ölçümleri gereklidir, invyüksek maliyetler ve ek uzmanlık SORUN. Miyokard infarktüsü göz önüne alındığında, in vitro olayların karmaşıklığını yeniden kullanılabilir hiçbir alternatif yöntemler var. Ilgi alanına bağlı olarak, Langendorff sisteminde izole kalp ex vivo perfüzyon farklı uyaranlara veya ilaçlara yanıt kontraktilite, kalp fonksiyonlarının ve miyokard canlılığı hakkında bilgi sağlar. Bununla birlikte, kan bileşiklerinin ve bağışıklık sisteminin tüm müdahaleler hariç ve miyokardiyal enfarktüs sonrası yeniden modellendirme ve iyileştirme uzun çalışmalar için endike değildir. Miyokard enfarktüsü işlemini gerçekleştirdikten sonra, diğer tüm fonksiyonel analiz intraventriküler basınç ölçümlerinde, ultrason (küçük hayvan ultrason sistemleri) veya izole kalp Langendorff-perfüzyon gibi yapılabilir. Ayrıca, tüm biyolojik ve moleküler analizi, ge hücreleri, proteinler, mRNA&#39;lar, microRNA tespit etmek gerçekleştirilebilirnes veya miyokard enfarktüsü için yeni tedavi stratejileri geliştirmek için terapötik hedefler olarak kullanılabilecek diğer biyobelirteçler.

Miyokard infarktüsü sanayileşmiş ülkelerde başlıca ölüm nedenlerinden biridir. Tanı ve tedavi yaklaşımlarının yadsınamaz gelişmelere rağmen, kalp damar hastalıkları hala mortalitenin en önemli nedenidir. Geliştirilmiş yaşam beklentisi ve yaşam ile ilgili riskleri göz önüne alındığında, kardiyovasküler hastalıkların görülme sıklığında sürekli bir artış gelecekte bekleniyor. Bu nedenle, kardiyovasküler hastalığın tedavisi için yeni yaklaşımlar kurmak ve doğrulamak için bir ihtiyaç vardır. İnsan çalışmaların bilgi sınırlamalar muzdarip, bu çalışmalar genellikle açıklamak ve bu önemli sağlık problemlerine çözümler sunmak yerine getiremediğini, moleküler düzeyde mekanizmaları anlamak için yeterli değildir. Ayrıca, temel araştırma laboratuarda kardiyovasküler hastalık mekanizmalarını üretmek için karmaşıklığı ve zorluk nedeniyle sınırlıdır. Bu nedenle, kardiyo patofizyolojisi hakkındaki bilgilerimizi artırmak içindamar hastalıkları, bu hayvan modelleri 1,2 doğrulamak için gereklidir. Bununla birlikte, hayvan deneylerinde, çok sayıda neden gerekli olan farklı zaman noktalarında, miyokardiyal enfarktüs, analizden sonra iyileşmesinde rol oynayan moleküler olayların her kaskadlar tespit etmek. Miyokard infarktüsü deneyleri genelde hayvan modelleri kullanılarak yapılmaktadır. Küçük hayvanlarda 3-11 miyokard infarktüsü uyaran büyük hayvan modellerinde daha hücresel ve moleküler olayları incelemek için kullanılan en uygun ve verimli bir modeldir. Dahası, hiçbir diğer türler fareler 12 olarak transgenik ya da nakavt suşları kullanılabilirliğini sunuyor. Bu fare modelleri 13,14 (stent restenozu, ateroskleroz gibi) kalp damar rahatsızlıkları da dahil olmak üzere diğer hastalıklar, son derece yararlıdır. Buna ek olarak, düşük gebelik dönemi ve yavru sayısının yüksek miyokard INFA moleküler mekanizmaları incelemek için en cazip sistem olarak fare modelleri nitelemekrction 12. Bununla birlikte, farelerde kalp boyutu mikrocerrahi sırasında manipülasyon yüksek hassasiyet bekliyor. Böyle nitelikli ve vasıflı personel cerrahi öğretmek bir zaman tüketen ve iş yoğun bir süreçtir. Bu nedenle, biz burada böyle farelerde karmaşık miyokard infarktüsü modeli gerçekleştirmek için öğrenci veya teknisyen olarak bile ortalama niteliklere sahip işbirlikçileri, rehberlik ipuçları ve püf noktaları da dahil olmak üzere ayrıntılı bir mikrocerrahi prosedürü sunuyoruz. Başlangıçta, entübasyon trakeotomi kullanmadan kısa bir kanül vasıtası ile gerçekleştirilir. Torasik kesi kaburga ve / veya çevre dokulara yaralanması kaçınarak, interkostal bölgede yer almaktadır. Bu alt-adım hızlı toparlanma ve iyileşme 15 sağlamak için büyük önem taşımaktadır. hala önemli bir enfarktüs büyüklüğünü korurken bağ, yüksek hayatta kalma oranı, kronik iskemi ve iskemi / reperfüzyon modelleri için diferansiyeli yapılır. Deneyimlerimiz tha gösteriyoripek sütür kullanılarak t kriyo-yaralanmalar 16 kıyasla daha yüksek bir tekrarlanabilirlik sağlar. Sonuç olarak, burada tarif edilen yöntem, küçük hayvanlarda hem kronik iskemi ve iskemi / reperfüzyon modellerinde uygulanabilir. Bu prosedürde sunulan ipuçları ve püf noktaları, küçük hayvan modellerinde uygulamak bile düşük ya da ortalama yeterlilik ile personel sağlamak içindir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:71px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:71px;">Olympus</td>
			<td style="width:119px;">SZ/X9</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Mouse ventilator</td>
			<td style="width:71px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">730043</td>
			<td style="width:167px;">Model Minient 845</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:216px;">Dual Anesthesia System (Tabletop Version)</td>
			<td style="width:71px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">Selfcontained isofluranebased anesthesia unit for use on lab tables, with a compact 8&#34; x 11&#34; footprint.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Intubation cannula</td>
			<td style="width:71px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">732737</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Forceps</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9119700</td>
			<td style="width:167px;">standard tip curved 0.17 mm x 0.1 mm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9146011</td>
			<td style="width:167px;">straight</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Vannas scissor</td>
			<td style="width:71px;">Aesculap, Germany</td>
			<td style="width:119px;">OC 498 R</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Retractors</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820010</td>
			<td>2.5mm wide</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Retractors</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820011</td>
			<td>5mm wide</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Wire handles</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820005</td>
			<td>&#160;10cm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Wire handles</td>
			<td style="width:71px;">FST, Germany</td>
			<td>1820006</td>
			<td>&#160;14cm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ketamine 10%</td>
			<td style="width:71px;">CEVA, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Xylazine 2%</td>
			<td style="width:71px;">Medistar, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bepanthene eye and nose cream</td>
			<td style="width:71px;">Bayer, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="105" rowspan="3" style="height:105px;width:216px;">Silicon tube</td>
			<td rowspan="3" style="width:71px;">IFK Isofluor, Germany</td>
			<td rowspan="3" style="width:119px;">custommade&#160; product</td>
			<td style="width:167px;">diameter 500&#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:167px;">section thickness 100 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:167px;">polytetrafluorethylene catheter</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">PROLENE Suture 6/0&#160;</td>
			<td style="width:71px;">ETHICON</td>
			<td style="width:119px;">8707H</td>
			<td style="width:167px;">polypropylene monofilament suture, unresorbable, needle CC1, 13mm, 3/8 Circle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">7/0 Silk</td>
			<td style="width:71px;">Seraflex</td>
			<td style="width:119px;">IC 1005171Z</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ultrasound&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Vevo, Canada</td>
			<td style="width:119px;">770 Vevo</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimal invasive surgical procedure of inducing myocardial infarction in mice

Miyokard infarktüsü hala son yıllarda stent geliştirme alanında önemli ilerlemelere rağmen, batı ülkelerinde ölüm ana nedeni olmaya devam etmektedir. Altında yatan mekanizmaların aydınlatılması ve yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesi için, geçerli hayvan modellerinde durumu zorunludur. Biz miyokard enfarktüsü mücadele in vivo koşullarda altında kalp ve damar hastalıkları patomekanizmaların yeni anlayışlar gerektiğinden, hayvan modelinin geçerliliği önemli bir yönüdür. Bununla birlikte, hayvan koruma, bu bağlamda oldukça önemlidir. Bu nedenle, bir yüksek tekrarlanabilirlik ve hayvanların hayatta kalma oranını garanti farelerde miyokard infarktüsü minimal invaziv ve basit bir model kurmak. Böylece, bu modeller hayvan deneyleri için 3R prensibi gereksinimlerini (Yedek, Sadeleştirme ve Azaltma) yerine getirir ve cardiov için terapötik stratejilerin daha gelişmekte için gerekli olan bilimsel bilgileri teminascular hastalıkları.

miyokard enfarktüsü prosedürü 25-30 dakika içinde meydana gelir ve% 10 mortalite oranını gösterir. Ameliyattan sonra, fareler sonraki 15 dakika içinde anestezi kurtarmak. Hiçbir fiziksel bozukluk işletilen fare gözlendi. Tamir işlemleri inflamatuar aşamasında rahatsız Ancak, post-kronik miyokard enfarktüsü sonrası kalp rüptürü riski daha yüksek bir hafta var. Kalp pompalama sırasında önemli ölçüde boyutlarını değiştirmek mümkün olduğundan, tüm toplanan kalpleri Diastola örneğin, aynı pozisyonda durdurulması için, önemlidir. Bu, doymuş KCI çözeltisi ile kalp perfüze ile elde edilebilir. Hücre-dışı K + konsantrasyonu blokları iyonik pompalar artan kalp aktivitesinin diyastolik durması ile sonuçlanan kardiyak hücreler membran dinlenme potansiyelini azaltır. enfarktüs alanı ultrason analizi (Şekil 3A, alt panel) görülebilir. KıyaslaNormal miyokard, iskemik bölgeler ince ve hipokinetik (Şekil 3A, üst panel) görünür. Kullanılan modele bağlı olarak, enfarktüs boyutu değişir. İskemi / reperfüzyon, ince, orta duvar indükler ve kalp (Şekil 3C) içinde ise, kronik enfarktüs modeli, apeks (Şekil 3B), dairesel, transmural enfarktüs indükler. Enfarktüs boyutunu belirlemek için birçok yöntem vardır. Amaç kalp canlılığı üzerinde doğrudan etkisi analiz ise, 18 boyama bir Evans-Mavi / TTC miyokardiyumun herhangi bir değişiklik görmek mümkün, en az 2 saat reperfüzyon sonrasında yapılması gösterilir. Bölümler boyama hemen sonra (Şekil 3B, orta panel) analiz edilebilir veya 2-3 gün (Şekil 3C, orta panel) için formalin içerisinde, cam slaytlar arasında tutulabilir. mavi alan iskemi etkilenmez sağlıklı miyokardı, temsil eder. kırmızı alan th içinde canlı miyokard temsile iskemik alanı (risk miyokard), beyaz alan ölü dokuyu temsil eder. Genellikle, enfarktüs boyutu risk alanından yüzdesi olarak ifade edilir. işlemleri biçimlenme sonra elde edilen, olgun yara kolayca Gomori en tek-aşamalı bir boyası ile immunohistolgy ile ölçülebilir. Blue lekeli enfarkte ve kırmızı lekeli sağlıklı ventriküler alanları (Şekil 3B ve C, sağ panel), mitral kapak kadar her düzeyde ilk bölümünde belirlenmiştir. , Farklı seviyelerde LAD bağlanması ile değişimini önlemek için, tüm bölümünden enfarktüsü olarak kabul edilir ve toplam sol ventrikül hacminin bir yüzdesi olarak ifade edilir. Kronik enfarktüs modelinde ve% 10-15 iskemi / reperfüzyon modelinde sonra% 15-20 arasında bir enfarktüs hacmi elde edilebilir. Bundan başka, kronik enfarkt modeli abartılı şekilde genişleme neden olacaktır, iskemi / reperfüzyon modelinde gözlemlenmemiştir (Şekil 3B ve C right panel). Gibi kullanılabilir geleneksel boyama işlemleri: CD31 anjiyojenezi ortaya çıkarmak için kullanılan boyama (kırmızı, Şekil 4A) veya düz kas aktini boyama miyofibroblastlar (yeşil, Şekil 4B) belirlemek gerekmektedir. Çift floresan boyama, aynı zamanda kardiyomiyositlerin mevcut olmaması otomatik immünofloresan (Şekil 4C) verir, enfarktüs alanında farklı hedef molekülleri tanımlamak için uygulanabilir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52197/52197fig1.jpg" /> Şekil 1: Medial insizyon ve entübasyon en kanül (A) ekleme. doku (B) açıklık yoluyla metal kanül stereomicroscopic görselleştirme. trakea halkaları (mavi oklar) ve kanül (siyah ok) işaret edilmektedir. Kronik enfarktüs mo için interkostal insizyondel ve LAD bağ (C). bağ referans olarak (mavi şematik, alt panel) ven ucunu alarak (kulak kepçesi ve apeks, alt panelde siyah arasında) kalbin ortasında yer almaktadır. Arterin iki kol (alt panelde kırmızı) bağlı olması. gri renk Enfarktüslü alanı gösterir ve kalbin (sağ alt panel) alt yarısı kısmında görünür. iskemi / reperfüzyon modeli için bağ, bir silikon tüpe (sağ taraf) (D) üzerindeki LAD ana gövdesini (alt panel kırmızı) bağlanma, kulak kepçesi altında yapılır. gri renk, tüm kalp (sağ alt panel) üzerindeki mevcut infracted alanı gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52197/52197fig2.jpg" /> Şekil 2: </strOng&gt; kaburga dikiş contalar göğüs medial dikiş hem kronik (A) 90 ° &#39;lik bir açı ile konumlandırılmıştır halinde insizyon ve iskemi / reperfüzyon (B, sol panel) kaburga dikiş., in vivo görüntüleme (Cı, sol panel ), kas sütür (C orta panel) ve cilt sütür (C sağ panel). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52197/52197fig3.jpg" /> Şekil 3: Ekokardiyografik görüntüler. Normal (A, üst panel) ve enfarkte alanlar (A, alt panel) görüntüleri, uzun eksende edinilen (boyuna, sol paneller) veya kısa eksen (enine, sağ paneller) &#39;de .. İnfarkt kronik dikilen tarafından uyarılan(B) ve reperfüzyon (C) ile, ardından bir saat iskemi. Evans Mavi / TTC lekelemesi perfüze (mavi) tanımlanmasını / perfüze olmayan alanlar gibi canlı (kırmızı) / ölü (beyaz) miyokard (B, C, orta paneller) sağlar. Gomori en tek adım boyama enfarkte alanlar (mavi) belirlenmesini sağlar ve normal bölgeler (kırmızı) (B, C, sağ paneller) onları ayırır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52197/52197fig4.jpg" /> Şekil 4: Farklı renklendirmeler gibi tarif edilen yeni-anjiyogenez ile CD31 (A, kırmızı, basit oklar) veya miyofibroblastlar için düz kas aktini (B, g, infracted bölgede gerçekleştirilebilirReen basit oklar) yanı sıra çift boyama (Cı-CD31-kırmızı / düz kas aktin-yeşil)) çekirdek (mavi DAPI ile karşıt. Miyofibroblastlar daima endotel tabakasının (C oklar) eşlik küçük ya da büyük arterlerden düz kas hücreleri, kolayca ayırt edilebilir. Çift oklar eritrosit otofloresans etmektedir. Ölçek 50 mikron barlar.

Watch this Scientific Journal Video about Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice at JoVE.com

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

minimal-invasive-surgical-procedure-inducing-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

27.1K Görüntüleme.  RWTH Aachen University, Germany. A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Video: Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Sıçanlarda Akut Miyokard Enfarktüsü

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Tıp

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

Yetişkin Zebra balığı Myokard İnfarktüsü İndüksiyon Cryoinjury kullanma

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Domuzlar miyokard enfarktüsü ve Fonksiyonel Sonuç Değerlendirmesi

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Akut Miyokard İnfarktüsü bir Domuz Modeli İlköğretim Sonuç Değerlendirmesi

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Yenidoğan Farelerde Miyokard Enfarktüsü, Kalp Rejenerasyon Bir Model

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Akut miyokard infarktüsünde farelerde gerçek zamanlı basınç-hacim Analizi

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Farede Miyokard Enfarktüsü Çalışması İçin Kriyoyaralanma Modeli

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Sıçanlarda Miyokard İnfarktüsü İndükleyen Yarı-Minimal İnvaziv Yöntem ve İzole Çalışan Kalp Sistemi Ile Kardiyak Fonksiyonun Değerlendirilmesi

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...

A Modified Simple Method for Induction of Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI remodeling and evaluation of novel therapeutics. Different methods (e.g., isoproterenol treatment, cryoinjury, coronary artery ligation, etc.) have been used to induce MI. Compared with isoproterenol treatment and cryoinjury, coronary artery ligation may better reflect the ischemic response and chronic remodeling after MI. However, traditional methods for coronary ligation in mice are technically challenging. The current study describes a simple and efficient process for induction of MI in mice with readily available materials. The mouse chest skin was cut open under stable anesthesia. The heart was immediately externalized through the intercostal space after blunt separation of the pectoralis major and pectoralis minor. The left anterior descending branch (LAD) was ligated with a 6-0 suture 3 mm from its origin. Following LAD ligation, staining with 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC) indicated successful induction of MI and temporal changes of post-MI scar size. Meanwhile, survival analysis results showed overt mortality within 7 days after MI, mainly due to cardiac rupture. Moreover, post-MI echocardiographic assessment demonstrated successful induction of contractile dysfunction and ventricular remodeling. Once mastered, an MI model can be established in mice within 2-3 min with readily available materials.

Under adequate anesthesia, the mouse heart was externalized through the intercostal space, and myocardial infarction was successfully induced by ligating the left anterior descending artery (LAD) using materials readily available in most laboratories.

Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI ...