Name: chronic constriction injury of the rat's infraorbital nerve (ion-cci) to study trigeminal neuropathic pain
Uploaded: 2015-09-21T15:45:00.000+00:00
Duration: 10 min 52 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain at JoVE.com

The authors acknowledge the work that was done by the first author of the IoN-CCI model, Bart Vos&#8224;.

Etik bildirimi: Hayvanlar tedavi Araştırma ve IASP 11 Etik Sorunlar Komitesi yönergelere göre bakılmaktadır. Protokol, kurumsal Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. 1. Başlık <ol><li> Erkek Sprague-Dawley sıçanları (varış 250-300 gr) kullanın. </li><li> % 40-60 bir nem ve 21 ± 1 ° C bir RT ile koloni odasında katı dipli kafeslerde Ev fareler. </li><li> Libitum su ve yiyecek temin edin. </li><li> Bir ters 00:12 saat aydınlık / karanlık döngüsü altında fareler tutun (20 saat ışıklar). </li></ol> 2. Cerrahi <ol><li> Sıçan başına, uzun yaklaşık 6 cm kromik bağırsak ligasyonu (5-0) iki adet hazırlayıp kurutma ve sert ve kırılgan olma önlemek için steril serum fizyolojik koyun. </li><li> Pentobarbital ile hayvan (60 mg / kg, ip) anestezi ve atropin (0.1 mg / kg, ip) ile tedavi edilir. Bir bacak ve Pinchi uzatarak anestezi düzeyini izlemekbir tırnak ile ayak parmakları arasında cilt web ng yeterli basınç uygulandığında sağlamak. Hayvan onun uzuv esnek olmadığından emin olun. Gerekirse, ek pentobarbital yönetmek. </li><li> Bir orta hat kafa derisi insizyon gözün merkezine eşit uzaklıktadır anterior ve posterior ile yaklaşık 25 mm arasında yapılabilir, böylece sıçan tıraş. </li><li> Stereotaksik çerçeve içinde sıçan başını düzelt veya başka sıçan başını sabitleşmek. Vücut ısısını korumak için ısıtılmış bir pad üzerinde sıçan yerleştirin. </li><li> Kurumasını zarar görmesini önlemek için her iki göze oftalmik merhem sürün. </li><li> Daha sonra betadine, alkol ile traş kafa alanı fırçalayın. </li><li> Kafatası ve burun kemiği açığa orta hat kafa derisi kesi olun. </li><li> 2.16 arasındaki adımları 2.9 gerçekleştirmek için bir operasyon mikroskobu kullanın. </li><li> Bir pamuk uçlu çubuk ve Dumont forseps bir çift kullanarak, maksiller, frontal, gözyaşı ve elmacık kemiklerinin oluşturduğu serbest yörüngeye, kenarını parçalara ayır. Çubukla kadar kullanınolası kanama kan ak. </li><li> Ion erişim vermek yavaşça Ion üstün haçlar anterior etmoid sinir overstretch vermemeye dikkat ederek, hassas bir pamuklu çubukla yörünge içeriğini saptırmak için. Hassas bir pamuk uçlu çubuk ve yayma hareketi ile Dumont forseps bir çift kullanarak, çevredeki bağ dokusundan ION ücretsiz parçalara ayır. Olası kanama kan emmesi için bez kullanın. </li><li> Bir ligasyonu gerçekleştirmek için, aşağı frontal kemik boyunca kromik bağırsak tek parça bir ucunu itin, İyon medial ve ION birkaç milimetre paralel ve aşağı ilerlemek. Bağ şimdi İyon ve frontal kemik arasındaki yerinde tutulur. </li><li> Ligature yakın yerleştirmek ION altında 45 derece açılı Dumont forseps ucu kayma. Yavaşça forseps bitişik harfleri ve bahşiş ortaya çıkarmak için yanal ION çekin. Kavrama forseps ile ligature ve ION altından yanal forseps çıkarın. </li&gt; <li> Ligature her iki ucu daha az ya da eşit uzaklıkta ION dan kadar orbita boşluğuna bitişik harfleri çekin. </li><li> Ligature iki ucu bir &quot;kayma düğüm&quot; daralma derecesi üzerinde mükemmel denetime izin ve iyon karşı düğüm slayt olun. Sinir çapı ancak fark miktarda azalır, böylece bir iyon daraltmak için daha düğüm kaydırın. Daralma miktarı sabit tutulur ve böylece (örneğin, kaymasını önlemek için bir yarık düğüm) kayma düğüm üstüne normal bir düğüm yapın. </li><li> Düğümden serbest uçlarından yaklaşık 2 mm bırakmak bitişik harfler kesin. </li><li> Aynı prosedür, ilk dışında ikinci bir ligasyon 2 mm yapmak için (2.11 2.15 adımları) tekrarlayın. </li><li> Sham için 2.10 adımları 2.2 gerçekleştirin. </li><li> Polyester dikişlerle (4-0) kullanarak kafa derisi kesi kapatın ve sıçan ısıtılmış pad üzerinde kurtarmak için izin verir. Yeterli eksilerini kazanmış olan gözetimsiz kadar hayvan bırakmayınciousness sternum yatma korumak ve tamamen iyileşti kadar diğer hayvanların şirkete hayvan dönmez. </li><li> Nöropatik ağrı gelişimi üzerindeki önleyici analjezik etkileri önlemek için, ameliyat sonrası ağrı için analjezi uygulamaları yoktur. </li></ol> 3. Davranış Testi Prosedürü <ol><li> Sıçanlar ameliyat öncesi test etmeden önce barınma koşulları en az 8 gün boyunca iklime alışmaları için izin verir. </li><li> Ameliyat öncesi test edilmeden önce en az bir kez günde üç gün boyunca test prosedürüne sıçan alıştırmak. </li><li> 60 W kırmızı ampul tarafından sağlanan ışık ile karanlık bir odada Davranış test test alanının merkezini aydınlatma ama loş ve karanlık oda geri kalanı çevresi bırakarak merkezinin üstünde 1 m askıya aldı. </li><li> Ani işitme uyarılması parazitleri azaltmak için yeterli arka plan gürültü olduğundan emin olun. Gerekirse, beyaz gürültü sağlamak. </li><li> Yüz bakım davranışlarının gözlenmesi <ol><li> Tyatak olmadan kapalı plastik kafes içinde test odasına koloniden bir tek sıçan ransport. Not: İdeal olarak, bu minimal dış uyaranlara ile kısa bir yolculuk olmalı. </li><li> Yatak olmadan kapalı, şeffaf plastik kafese sıçan yerleştirin (UxGxY: 24 cm x 14 cm x 17 cm) geri bir video kamera önünde yansıtılmış bir ile. </li><li> Hayvanın davranışının bir 10 dakika kayıt olun. Kayıt sırasında, emin deneyi test odasında mevcut olmadığından emin olun. </li><li> Bir sonraki hayvan yerleştirmeden önce gözlem kafesini temizleyin. </li><li> Kaydedilen davranış sıçan deneysel durumuna kör bir deneyci tarafından analiz edilir emin olun. </li><li> 10 dakika kayıt sırasında her yüz bakım bölüm kaydını yapın. Not: Yüz bakım forepaws yüz alanları ile temas ettirildiği hareket kalıpları olarak tanımlanır. </li><li> Yüz bakım davranışı iki tür arasında bir ayrım yapmak. Bir dizi öncesinde ne de takip ediyor, ne varsatımar gövde (yani, yüz dışındaki bir vücut alanının bakım), izole yüz damat olarak bölüm sınıflandırır. Vücut tımar önce veya yüz damat hemen sonra yapılırsa, vücut tımar sırasında yüz damat olarak bölüm sınıflandırır. </li><li> Yüz bakım ataklarının sayısını belirler. <ol><li> Içi bölüm alanı olarak 4 saniyeyi geçmez yüz damat eylemler arasında bir süreyi kategorize (yani tek bir bölüm içinde yüz damat eylemler arasında bir duraklama). </li><li> Inter-bölüm alanı (yani, iki bölüm arasındaki yüz damat eylemlerin tam bir kesinti) olarak 4 sn aşıyor yüz damat eylemler arasındaki süreyi sınıflandırır. </li></ol></li></ol></li><li> Mekanik uyarım testi <ol><li> Yatak ile kapalı kafeste test odasına koloniden kadar 6 hayvan gruplarında Ulaştırma sıçanlar. Bu minimal dış uyaranlara ile kısa bir gezi olduğundan emin olun. </li><li> Yeribireysel yatak takımları ile şeffaf plastik kafeslerde sıçan: menteşeli kapaklı (lxwxh 24 cm x 14 cm x 17 cm) kolayca açılıp kapatılabilir, böylece. </li><li> Beş von Frey tüyleri kademeli bir dizi kullanın. Not: kıllar bükmek için gereken kuvvet 0,015 g, 0,127 g, 0,217 g, 0,745 g, 2,150 g, ve bir. </li><li> 10 dakika boyunca gözlem kafesine sıçan ve ulaşan hareketleri alıştırmak. Her 30 sn, kapağı açın ve yavaşça bir plastik çubuk ile kafesin duvarına dokunun. </li><li> Hayvan (yani dört pençeleri zemine yerleştirilen birlikte, ne hareketli ne de dondurucu, ancak davranış sergileyen koklama) bir koklama / hayır lokomosyon durumundayken, vibrissal pad merkezine yakın iyon sınırları içinde ilk von Frey saçı uygulamak , mystacial burun kılı çevreleyen kıllı deri üzerine. </li><li> Aşağıdaki yanıtı kategorilerden 4 birine ait stimülasyon hayvanın tepkisi Puan. <ol><li> Olarak cevap tam bir eksikliği kategorize0 puan. </li><li> Puan olarak bir uyarıcı algılama (yani sıçan uyarıcı nesneye doğru başını çevirir ve uyarıcı nesne daha sonra keşfediliyor) kategorize 1. </li><li> Bir geri çekilme reaksiyonu kategorize (yani., Sıçan yavaşça başını açar veya briskly geriye stimülasyon uygulandığı zaman, bazen tek bir yüz uyarılmış alana ipsilateral mendil çeker oluşur) olarak skoru 2. </li><li> (Bir kaçış / saldırı yanıtı kategorize yani., Sıçan, ya da aktif uyaran nesneyi saldıran yaparak kafes duvara bir çömelmiş pozisyon üstlenmeye uyarıcı nesneden uzak gövdesini hareket ettirerek ya pasif, teşvik nesnesi ile daha fazla temas önler ısırma ve skor 3 gibi) hareketleri kapma. </li><li> Skor 4 olarak damat asimetrik yüz (yani sıçan uyarılmış yüz alana doğru yönlendirilmiş, en az üç yüz yıkama vuruş kesintisiz bir dizi görüntüler) sınıflandırır. </li><li> Her bir hayvan içinde, stimu geçerlidiryoğunluk bir artan li. Bir uyarıcı yoğunluğu bir tarafına uygulanmış sonra, bir sonraki uyan yoğunluğunda geçmeden önce, diğer tarafa uygulanmaktadır. Ipsilateral ve kontralateral tarafları teşvik sırayı Rastgele. Hayvan Her stimülasyon önce koklama / hayır lokomosyon durumda olması gerektiğini unutmayın. </li></ol></li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Jensen, T. S., Gottrup, H., Sindrup, S. H., Bach, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+clinical+picture+of+neuropathic+pain.">The clinical picture of neuropathic pain.</a> Eur J Pharmacol. 429 (1-3), 1-11 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+a+multidimensional+burden+for+patients.">Neuropathic pain a multidimensional burden for patients.</a> Eur J Pain. 5 (4), 379-389 (2001).</li><li>Meyer Rosberg, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+SF+36+and+Nottingham+Health+Profile+in+patients+with+chronic+neuropathic+pain.">Comparison of the SF 36 and Nottingham Health Profile in patients with chronic neuropathic pain.</a> Eur J Pain. 5 (4), 391-403 (2001).</li><li>Vos, B. P., Strassman, A. M., Maciewicz, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+evidence+of+trigeminal+neuropathic+pain+following+chronic+constriction+injury+to+the+rats+infraorbital+nerve.">Behavioral evidence of trigeminal neuropathic pain following chronic constriction injury to the rats infraorbital nerve.</a> J Neurosci. 14, 2708-2723 (1994).</li><li>Clavelou, P., Pajot, J., Dallel, R., Raboisson, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+the+formalin+test+to+the+study+of+orofacial+pain.">Application of the formalin test to the study of orofacial pain.</a> Neurosci Lett. 103, 349-353 (1989).</li><li>Vos, B. P., Hans, G., Adriaensen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+assessment+of+facial+pain+in+rats+face+grooming+patterns+after+painful+and+non-painful+sensory+disturbances+in+the+territory+of+the+rats+infraorbital+nerve.">Behavioral assessment of facial pain in rats face grooming patterns after painful and non-painful sensory disturbances in the territory of the rats infraorbital nerve.</a> Pain. 76 (1-2), 173-178 (1998).</li><li>Deseure, K. R., Adriaensen, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+two+types+of+behavioral+variables+of+non+evoked+facial+pain+after+chronic+constriction+injury+to+the+rat+infraorbital+nerve.">Comparison between two types of behavioral variables of non evoked facial pain after chronic constriction injury to the rat infraorbital nerve.</a> Comp Med. 52 (1), 44-49 (2002).</li><li>Deseure, K., Adriaensen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonevoked+facial+pain+in+rats+following+infraorbital+nerve+injury+a+parametric+analysis.">Nonevoked facial pain in rats following infraorbital nerve injury a parametric analysis.</a> Physiol Behav. 81 (4), 595-604 (2004).</li><li>Deseure, K., Hans, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+study+of+non+evoked+orofacial+pain+following+different+types+of+infraorbital+nerve+injury+in+rats.">Behavioral study of non evoked orofacial pain following different types of infraorbital nerve injury in rats.</a> Physiol Behav. 138, 292-296 (2015).</li><li>Deseure, K., Koek, W., Adriaensen, H., Colpaert, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+administration+of+the+5+hydroxytryptamine1A+agonist+(3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl)+-amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone+(F+13640)+attenuates+allodynia+like+behavior+in+a+rat+model+of+trigeminal+neuropathic+pain.">Continuous administration of the 5 hydroxytryptamine1A agonist (3-Chloro-4-fluoro-phenyl)-[4-fluoro-4-[[(5-methyl-pyridin-2-ylmethyl) -amino]-methyl]piperidin-1-yl]-methadone (F 13640) attenuates allodynia like behavior in a rat model of trigeminal neuropathic pain.</a> J Pharmacol Exp Ther. 306 (2), 505-514 (2003).</li><li>Zimmerman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ethical+Guidelines+for+investigations+of+experimental+pain+in+conscious+animals.">Ethical Guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals.</a> Pain. 16, 109-110 (1983).</li><li>Mogil, J. S., Crager, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+should+we+be+measuring+in+behavioral+studies+of+chronic+pain+in+animals.">What should we be measuring in behavioral studies of chronic pain in animals.</a> Pain. 112 (1-2), 12-15 (2004).</li><li>Backonja, M. M., Stacey, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+symptoms+relative+to+overall+pain+rating.">Neuropathic pain symptoms relative to overall pain rating.</a> J Pain. 5 (9), 491-497 (2004).</li><li>Imamura, Y., Kawamoto, H., Nakanishi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+heat+hyperalgesia+in+an+experimental+trigeminal+neuropathy+in+rats.">Characterization of heat hyperalgesia in an experimental trigeminal neuropathy in rats.</a> Exp Brain Res. 116, 97-103 (1997).</li><li>Chichorro, J. G., Zampronio, A. R., Souza, G. E., Rae, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orofacial+cold+hyperalgesia+due+to+infraorbital+nerve+constriction+injury+in+rats+reversal+by+endothelin+receptor+antagonists+but+not+non+steroidal+anti+inflammatory+drugs.">Orofacial cold hyperalgesia due to infraorbital nerve constriction injury in rats reversal by endothelin receptor antagonists but not non steroidal anti inflammatory drugs.</a> Pain. 123 (1-2), 64-74 (2006).</li><li>Kramer, P. R., Bellinger, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meal+Duration+as+a+Measure+of+Orofacial+Nociceptive+Responses+in+Rodents.">Meal Duration as a Measure of Orofacial Nociceptive Responses in Rodents.</a> J Vis Exp. (83), e50745 (2014).</li><li>Rossi, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+bilateral+trigeminal+constriction+injury+using+an+operant+facial+pain+assay.">Characterization of bilateral trigeminal constriction injury using an operant facial pain assay.</a> Neuroscience. 224, 294-306 (2012).</li><li>Anderson, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+Operant+Orofacial+Pain+Assessment+Device+(OPAD)+to+Measure+Changes+in+Nociceptive+Behavior.">Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior.</a> J Vis Exp. (76), 50336 (2013).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

İyon-CCI modelinin en ilginç yönü, kendiliğinden olmayan uyarılmış (nöropatik) ağrı eşsiz bir ölçü sağlamasıdır. Spinal sinir modelleri kullanarak nöropatik ağrı çoğu hayvan çalışmaları, sadece nocifensive davranışları ele (örn., Seslendirme ve yoksunluk cevabı), mekanik veya termal uyarılara 12 aşırı duyarlılık yansıtan. Ancak, hastaların baş klinik şikayeti devam eden ağrı, değil hiperaljezi veya allodini 13 olduğunu. <p class="jove_conte...

Somatosensori sinirlerin hasar çoğunlukla duyu kaybına yol açar. Çok iyi anlaşılmış neden ve nasıl, bazı durumlarda, periferik sinir hasarı, kronik ağrıya yol açar değildir. Sonuç olarak, ağrılı nöropatiler 1 tedavi ve yaşam 2-3 hastaların kalitesinde önemli azalmalar neden zor bir durum kalır. Hayvan modelleri önemli bir araç mevcut ve yeni geliştirilen ilaçların etkinliğini incelemek ve nöropatik ağrının geliştirme ve bakım katılan patofizyolojik mekanizmaları belirlemek için vardır. Translasyonel ağrı araştırmaları için önemli zorluklar arasında belirlenmesi ve (hayvanlarda spontan ağrı ölçüm, yani fizyolojik, akut kişinin bazal durumuna bindirilmiş uyarılmalara prob ile meydan edilmemesi hayvanlarda ağrı varlığına işaret davranışsal ya da diğer belirtiler ). Bu prosedürün genel amacı cerrahi bir neden olduğunuHer iki spontan gelişimine yol açar ve trigeminal nöropatik ağrı ve tedavisi ile ilgilenen mekanizmaları incelemek için kullanılabileceğini nocifensive davranış uyarılmış bir sıçan infraorbital sinir yaralanması. Yönetmen, izole yüz tımar sıçanlarda spontan nöropatik ağrının eşsiz bir ölçüsüdür. Infraorbital sinir kronik sıkışma yaralanması (CCI) (ION) ardından sıçanlar, kendiliğinden davranışının ve kalıcı ağrı ve mekanik alodinya 4 göstergesidir dokunma uyarısına tepki olarak değişiklik gösterir. Yüz yıkama, öncelikle sinir yaralı iyon topraklarına yönelik vuruş ile iyon-CCI ardından sıçanlar, yani bir artış ve asimetrik yüz bakım aktivite gösterirler. Yüzün zararlı stimülasyon (örn formalin enjeksiyonu) 5 aksine, olmayan ağrılı duyu bozuklukları (örneğin, tek taraflı burun kılı kırpma, anestezik infraorbital sinir blokajı, VIBRI üzerinde mineral yağ uygulamasıSSAE) değil ya da çok kısa bir süre (örneğin, başlangıcından sonra ilk dakika) davranışı 6 damat karşısında önemli bir değişiklik neden yaptım. Bu iyon-CCI sonra bu anormal tımar yaralı sinir topraklarında kendiliğinden, güçlü caydırıcı duyumları bir davranış tezahürü olduğu sonucuna varılmıştır. İyon-CCI sıçanlarda Bu davranış hastalarında gözlenen spontan ağrı güçlü bir benzerlik taşımaktadır. Daha ileri çalışmalara daha genel bir vücut bakım davranışlarının bir parçası olan yüz damat davranış arasında önemli bir fark tespit ettik (yani, &quot;damat vücudun sırasında yüz tımar&quot;), iyon-CCI büyük ölçüde etkilenmez kalır ve nocifensive yüz damat o ne öncesinde ne ölçüde iyon-CCI 7-9 sonra artar, (yani, &quot;izole yüz damat&quot;) damat vücut tarafından izledi. Farmakolojik, vücut tımar sırasında yüz tımar non-spesifik ilaç etkileri için mükemmel bir kontrol ölçümü (oluşturmaktadır <em&gt; Motor fonksiyonlarını bozabilir örneğin, sedasyon). Yüz damat iki tip sırasında ön ayakları hareketleri tam olarak aynıdır. İyon CCI sıçanlarında da mekanik alodini 4, 10 göstergesidir dokunma uyarısına tepki olarak değişiklik gösteren et. İyon CCI sonraki ilk hafta (ler) boyunca fareler artık hafif veya orta derecede dokunsal (örneğin, von Frey yanıt ) uyaranlara. Bu cevapsız bir ruhsal duruma sonra aniden bile çok zayıf uyaran yoğunlukları nocifensive davranışı kışkırtmak sayede aşırı aşırı duyarlılığı ile değiştirilir. Aşırı duyarlılığı başlangıcı sıçanlar arasında değişebilir, ancak en sıçanlar, üç ila dört hafta sonra, ameliyat sonrası hyperresponsive hale gelmiştir.

<table><tbody><tr><td>Chromic catgut</td><td>Dynek&amp;nbsp;</td><td>CG504</td><td></td></tr><tr><td>Nembutal&amp;nbsp; (pentobarbital)</td><td>Pharmacy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Pharmacy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Clippers for small animals - Favorita II</td><td>Aesculap</td><td>GT104</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic instrument</td><td>Stoelting</td><td>51600</td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmic ointment (Liposic)</td><td>Pharmacy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Homeothermic monitor system</td><td>Harvard Apparatus</td><td>PY8 50-7221-F</td><td></td></tr><tr><td>Cotton applicator</td><td>Pharmacy</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Precision cotton swab</td><td>Qosina</td><td>10225</td><td></td></tr><tr><td>Operation microscope</td><td>Kaps</td><td>SOM 62</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-10</td><td></td></tr><tr><td>Dumont forceps - Micro-blunted tips (#5/45)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>Scissors - blunt tips</td><td>Fine Science Tools</td><td>14574-09</td><td></td></tr><tr><td>Polyester sutures - Mersilene (4-0)</td><td>Ethicon</td><td>R871H</td><td></td></tr><tr><td>Digital video camera</td><td>Sony</td><td>HDR-CX330E</td><td></td></tr><tr><td>Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit</td><td>Stoelting</td><td>58011</td><td></td></tr></tbody></table>

chronic constriction injury of the rat's infraorbital nerve (ion-cci) to study trigeminal neuropathic pain

Hayvan modelleri nöropatik ağrının patofizyolojisi ve farmakoloji incelemek için önemli araçlardır. Bu el yazması sıçanlarda trigeminal nöropatik ağrı incelemek için cerrahi ve davranışsal prosedürleri açıklar. Trigeminal nöropatik ağrı sendromları özgünlüğünü karşılamak için, infraorbital sinir (ION) gevşek sinir bağlanarak kronik daralma yaralanma (CCI) tabi tutulur. Içi orbital yaklaşım ortaya çıkarmak ve orbita boşluğuna iyon bağlanması için sunulmuştur. ION Ligasyondan sonra, sıçanlar kendiliğinden davranışının ve kalıcı ağrı ve mekanik alodinya göstergesidir Frey saç uyarılmasına tepki olarak değişiklik gösterir. İki faz davranış değişiklikleri gelişiminde tanımlanabilir. Yüz yıkama, öncelikle sinir yaralı iyon topraklarına yönelik vuruş ile iyon-CCI (faz 1) takip eden ilk haftasında, sıçanlar, yani bir artış ve asimetrik yüz bakım aktivite gösterirler. Bir ayrım yüz gr arasında yapılırİyon-CCI büyük ölçüde etkilenmez daha genel bir vücut bakım davranışı, bir parçası olan davranışları ooming ve yüz o öncesinde ne ölçüde iyon-CCI sonra artmıştır vücut damat, izler ne tımar. Bu dönemde, iyon topraklarının mekanik uyarıya yanıt azalır. Bu cevapsız bir ruhsal duruma aniden bile çok zayıf uyaran yoğunlukları nocifensive davranışı (faz 2) kışkırtmak sayede aşırı aşırı duyarlılığı ile değiştirilir. Bu davranış değişiklikler ve yüz ağrısı belirtileri bildirdi arasındaki benzerlikler fenomenolojik (yani, yüzün zararlı uyarısına yanıt) bağlandı iyon topraklarında disestezidir / parestezi ve mekanik allodininin varlığını düşündürmektedir.

İyon-CCI sıçanları izole yüzü damat (Şekil 1) harcanan süreyi güçlü bir post-operatif artış göstermektedir. Daha sonra artış ilk post-operatif hafta sonunda zirveleri ve aşağıdaki hafta boyunca azalır. En son çalışmalar anlamlı bir ila üç hafta boyunca arttığı bakım yüzü bulduk. Sahte işlemden geçirilmiş sıçanlarla Yüz bakım davranışı daha az ya da etkilenmez. İyon-CCI sıçanları da ilk post-operatif hafta (Şekil...

Watch this Scientific Journal Video about Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain at JoVE.com

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat&#8217;s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia.

Trigeminal Nöropatik Ağrı Eğitim için Rat adlı infraorbital Sinir (ION-CCI) kronik Daralma Yaralanma

Animal models are important tools to study the pathophysiology and pharmacology of neuropathic pain. This manuscript describes the surgical and behavioral ...

chronic-constriction-injury-rat-s-infraorbital-nerve-ion-cci-to-study

Research

JoVE Journal

Medicine

Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to Study Trigeminal Neuropathic Pain

19.5K Görüntüleme.  University of Antwerp. This manuscript describes a rodent model to study trigeminal neuropathic pain. The methods described include surgical procedures to perform a chronic constriction injury of the rat’s infraorbital nerve and the post-surgical behavioral tests to measure the changes in spontaneous and evoked behavior that are indicative of persistent pain and allodynia. 

Video: Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve IoN-CCI to Study Trigeminal Neuropathic Pain

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Tıp

The Spared Nerve Injury (SNI) Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

Peripheral neuropathic pain is a severe chronic pain condition which may result from trauma to sensory nerves in the peripheral nervous system. The spared nerve injury (SNI) model induces symptoms of neuropathic pain such as mechanical allodynia i.e. pain due to tactile stimuli that do not normally provoke a painful response [1]. 
The SNI mouse model involves ligation of two of the three branches of the sciatic nerve (the tibial nerve and the common peroneal nerve), while the sural nerve is left intact [2]. The lesion results in marked hypersensitivity in the lateral area of the paw, which is innervated by the spared sural nerve. The non-operated side of the mouse can be used as a control. The advantages of the SNI model are the robustness of the response and that it doesn&#x2019;t require expert microsurgical skills.
The threshold for mechanical pain response is determined by testing with von Frey filaments of increasing bending force, which are repetitively pressed against the lateral area of the paw [3], [4]. A positive pain reaction is defined as sudden paw withdrawal, flinching and/or paw licking induced by the filament. A positive response in three out of five repetitive stimuli is defined as the pain threshold. 
As demonstrated in the video protocol, C57BL/6 mice experience profound allodynia as early as the day following surgery and maintain this for several weeks.

The Spared Nerve Injury SNI Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice

The Spared Nerve Injury animal model is described here as a mouse model of peripheral neuropathic pain following partial denervation of the sciatic nerve by lesioning the tibial and common peroneal nerve branches, leaving the remaining sural nerve intact. Behavioral modification resulting from mechanical allodynia is quantified by von Frey filaments.

Fare İndüklenmiş Mekanik allodini ayrılan sinir hasarı (SNI) Model

Peripheral neuropathic pain is a severe chronic pain condition which may result from trauma to sensory nerves in the peripheral nervous system. The spared ...

Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of the population1,2. Symptoms include spontaneous (tingling, burning, electric-shock like) pain, dysaesthesia, paraesthesia, allodynia (pain resulting from normally non-painful stimuli) and hyperalgesia (an increased response to painful stimuli). The sensory symptoms are co-morbid with behavioural disabilities, such as insomnia and depression. To study chronic neuropathic pain several animal models mimicking peripheral nerve injury have been developed, one of the most widely used is Bennett and Xie's (1988) unilateral sciatic nerve chronic constriction injury (CCI)3 (Figure 1). Here we present a method for performing CCI and testing pain hypersensitivity.
CCI is performed under anaesthesia, with the sciatic nerve on one side exposed by making a skin incision, and cutting through the connective tissue between the gluteus superficialis and biceps femoris muscles. Four chromic gut ligatures are tied loosely around the sciatic nerve at 1 mm intervals, to just occlude but not arrest epineural blood flow. The wound is closed with sutures in the muscle and staples in the skin. The animal is then allowed to recover from surgery for 24 hrs before pain hypersensitivity testing begins.
For behavioural testing, rats are placed into the testing apparatus and are allowed to habituate to the testing procedure. The area tested is the mid-plantar surface of the hindpaw (Figure 2), which falls within the sciatic nerve distribution. Mechanical withdrawal threshold is assessed by mechanically stimulating both injured and uninjured hindpaws using an electronic dynamic plantar von Frey aesthesiometer or manual von Frey hairs4. The mechanical withdrawal threshold is the maximum pressure exerted (in grams) that triggers paw withdrawal. For measurement of thermal withdrawal latency, first described by Hargreaves et al (1988), the hindpaw is exposed to a beam of radiant heat through a transparent glass surface using a plantar analgesia meter5,6. The withdrawal latency to the heat stimulus is recorded as the time for paw withdrawal in both injured and uninjured hindpaws. Following CCI, mechanical withdrawal threshold, as well as thermal withdrawal latency in the injured paw are both significantly reduced, compared to baseline measurements and the uninjured paw (Figure 3). The CCI model of peripheral nerve injury combined with pain hypersensitivity testing provides a model system to investigate the effectiveness of potential therapeutic agents to modify chronic neuropathic pain. In our laboratory, we utilise CCI alongside thermal and mechanical sensitivity of the hindpaws to investigate the role of neuro-immune interactions in the pathogenesis and treatment of neuropathic pain.

Due to the simplicity of surgery and the robust behavioural outcome, chronic constriction of the sciatic nerve is one of the pre-eminent animal models of neuropathic pain. Within 24 hrs following surgery, pain hypersensitivity is established and can be quantitatively measured using a von Frey aesthesiometer (mechanical test) and plantar analgesia meter (thermal test).

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of ...

Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim) for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. It has been extensively used in various clinical settings. Based upon recent discoveries related to the systemic effects of voluntary breathing and intrinsic physiological interactions among systems during voluntary breathing, a new EStim protocol, Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim), has been developed to augment the effects of electrical stimulation. In BreEStim, a single-pulse electrical stimulus is triggered and delivered to the target area when the airflow rate of an isolated voluntary inspiration reaches the threshold. BreEStim integrates intrinsic physiological interactions that are activated during voluntary breathing and has demonstrated excellent clinical efficacy. Two representative applications of BreEStim are reported with detailed protocols: management of post-stroke finger flexor spasticity and neuropathic pain in spinal cord injury.

Breathing-controlled Electrical Stimulation BreEStim for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

The purpose is to present a new method, breathing-control electrical stimulation (BreEStim) for management of neuropathic pain and spasticity.

Nöropatik Ağrı ve Spastisite Yönetiminde Solunum kontrollü Elektriksel Stimülasyon (BreEStim)

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. ...

Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats

Complex regional pain syndrome type-I (CRPS-I) is a neurological disease that causes severe pain among patients and remains an unresolved medical condition. However, the underlying mechanisms of CRPS-I have yet to be revealed. It is known that ischemia/reperfusion is one of the leading factors that causes CRPS-I. By means of prolonged ischemia and reperfusion of the hind limb, the rat chronic post-ischemia pain (CPIP) model has been established to mimic CRPS-I. The CPIP model has become a well-recognized animal model for studying the mechanisms of CRPS-I. This protocol describes the detailed procedures involved in the establishment of the rat model of CPIP, including anesthesia, followed by ischemia/reperfusion of the hind limb. Characteristics of the rat CPIP model are further evaluated by measuring the mechanical and thermal hypersensitivities of the hind limb as well as the nocifensive responses to acute capsaicin injection. The rat CPIP model exhibits several CRPS-I-like manifestations, including hind limb edema and hyperemia in the early stage after establishment, persistent thermal and mechanical hypersensitivities, and increased nocifensive responses to acute capsaicin injection. These characteristics render it a suitable animal model for further investigation of the mechanisms involved in CRPS-I.

Provided here is a protocol that details steps to establish an animal model of chronic post-ischemia pain (CPIP). This is a well-recognized model mimicking human complex regional pain syndrome type-I. Mechanical and thermal hypersensitivities are further evaluated, as well as capsaicin-induced nocifensive behaviors observed in the CPIP rat model.

Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli

Complex regional pain syndrome type-I (CRPS-I) is a neurological disease that causes severe pain among patients and remains an unresolved medical ...

Davranış

Assessment of Nerve Injury-Induced Mechanical Hypersensitivity in Rats Using an Orofacial Operant Pain Assay

Pain has sensory and affective components. Unlike traditional, reflex-based pain assays, operant pain assays can produce more clinically relevant results by addressing the cognitive and motivational aspects of pain in rodents. This paper presents a protocol for assessing mechanical hypersensitivity following chronic constriction injury of the infraorbital nerves (CCI-ION) in rats using an orofacial operant pain system. Before CCI-ION surgery, rats were trained in an orofacial pain assessment device (OPAD) to drink sweetened condensed milk while making facial contact with the metal spiked bars and lick-tube.
In this assay, rats can choose between receiving milk as a positive reinforcer or escaping an aversive mechanical stimulus that is produced by a vertical row of small pyramid-shaped spikes on each side of the reward access hole. Following 2 weeks of training in the OPAD and before the CCI-ION surgery, baseline mechanical sensitivity data were recorded for 5 days for each rat during a 10 min testing session. During a session, the operant system automatically records the number of reward bottle activations (licks) and facial contacts, contact duration, and latency to the first lick, among other measures.
Following baseline measurements, rats underwent either CCI-ION or sham surgery. In this protocol, mechanical hypersensitivity was quantified by measuring the number of licks, latency to the first lick, the number of contacts, and the ratio of licks to facial contacts (L/F). The data showed that CCI-ION resulted in a significant decrease in the number of licks and the L/F ratio and an increase in the latency to the first lick, indicating mechanical hypersensitivity. These data support the use of operant-based pain assays to assess mechanical pain sensitivity in preclinical pain research.

This protocol describes the assessment of mechanical hypersensitivity in a rat model of neuropathic orofacial pain using an operant-based orofacial pain assessment device.

Sıçanlarda Sinir Hasarına Bağlı Mekanik Aşırı Duyarlılığın Orofasiyal Operant Ağrı Testi Kullanılarak Değerlendirilmesi

Pain has sensory and affective components. Unlike traditional, reflex-based pain assays, operant pain assays can produce more clinically relevant results ...

Sıçan trigeminal ganglionunun kalsiyum göstergeleri ile in vivo görselleştirilmesi

In-Vivo Calcium Imaging of Sensory Neurons in the Rat Trigeminal Ganglion

Genetically encoded calcium indicators (GECIs) enable imaging techniques to monitor changes in intracellular calcium in targeted cell populations. Their large signal-to-noise ratio makes GECIs a powerful tool for detecting stimulus-evoked activity in sensory neurons. GECIs facilitate population-level analysis of stimulus encoding with the number of neurons that can be studied simultaneously. This population encoding is most appropriately done in vivo. Dorsal root ganglia (DRG), which house the soma of sensory neurons innervating somatic and visceral structures below the neck, are used most extensively for in vivo imaging because these structures are accessed relatively easily. More recently, this technique was used in mice to study sensory neurons in the trigeminal ganglion (TG) that innervate oral and craniofacial structures. There are many reasons to study TG in addition to DRG, including the long list of pain syndromes specific to oral and craniofacial structures that appear to reflect changes in sensory neuron activity, such as trigeminal neuralgia. Mice are used most extensively in the study of DRG and TG neurons because of the availability of genetic tools. However, with differences in size, ease of handling, and potentially important species differences, there are reasons to study rat rather than mouse TG neurons. Thus, we developed an approach for imaging rat TG neurons in vivo. We injected neonatal pups (p2) intraperitoneally with an AAV encoding GCaMP6s, resulting in &gt;90% infection of both TG and DRG neurons. TG was visualized in the adult following craniotomy and decortication, and changes in GCaMP6s fluorescence were monitored in TG neurons following stimulation of mandibular and maxillary regions of the face. We confirmed that increases in fluorescence were stimulus-evoked with peripheral nerve block. While this approach has many potential uses, we are using it to characterize the subpopulation(s) of TG neurons changed following peripheral nerve injury.

Yazar Spotlight: Trigeminal Sinir Hasarında Nöropatik Ağrının Periferik Mekanizmalarının Araştırılması 

Genetically encoded calcium indicators (GECI) enable a robust, population-level analysis of sensory neuron signaling. Here, we have developed a novel approach that allows for in vivo GECI visualization of rat trigeminal ganglia neuron activity.

Canlı Olarak Taşınabilir Sıçan Trigeminal Ganglionundaki Duyusal Nöronların Kalsiyum Görüntülemesi

Genetically encoded calcium indicators (GECIs) enable imaging techniques to monitor changes in intracellular calcium in targeted cell populations. Their ...

Nörobilim

<meta charset="utf8"></head><body>Trigeminal Nöropatik Ağrı için Fare Modelinin Kurulması

Chronic Constriction Injury of the Distal Infraorbital Nerve (DIoN-CCI) in Mice to Study Trigeminal Neuropathic Pain

Animal models remain necessary tools to study neuropathic pain. This manuscript describes the distal infraorbital nerve chronic constriction injury (DIoN-CCI) model to study trigeminal neuropathic pain in mice. This includes the surgical procedures to perform the chronic constriction injury and the postoperative behavioral tests to evaluate the changes in spontaneous and evoked behavior that are signs of ongoing pain and mechanical allodynia. The methods and behavioral readouts are similar to the infraorbital nerve chronic constriction injury (IoN-CCI) model in rats. However, important changes are necessary for the adaptation of the IoN-CCI model to mice. First, the intra-orbital approach is replaced by a more rostral approach with an incision between the eye and the whisker pad. The IoN is thus ligated distally outside the orbital cavity. Secondly, due to the higher locomotor activity in mice, allowing rats to move freely in small cages is replaced by placing mice in custom-designed and constructed restraining devices. After DIoN ligation, mice exhibit changes in spontaneous behavior and in response to von Frey hair stimulation that are similar to those in IoN-CCI rats, i.e., increased directed face grooming and hyperresponsiveness to von Frey hair stimulation of the IoN territory.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Trigeminal Nöropatik Ağrı ve Tedavi Stratejilerini Araştırmak İçin Farelerde İnfraorbital Sinir Ligasyonunun Kullanılması

Chronic constriction injury of the distal infraorbital nerve in mice induces changes in spontaneous behavior (increased face grooming activity) and nocifensive behavior in response to tactile stimulation (hyperresponsiveness to von Frey hair stimulation) that are signs of ongoing pain and allodynia and serves as a model for trigeminal neuropathic pain.

Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Farelerde Distal İnfraorbital Sinirin (DIoN-CCI) Kronik Daralma Hasarı

Animal models remain necessary tools to study neuropathic pain. This manuscript describes the distal infraorbital nerve chronic constriction injury ...

Trigeminal Nöropatik Ağrı Eğitim için Rat adlı infraorbital Sinir (ION-CCI) kronik Daralma Yaralanma

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Fare İndüklenmiş Mekanik allodini ayrılan sinir hasarı (SNI) Model

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Nöropatik Ağrı ve Spastisite Yönetiminde Solunum kontrollü Elektriksel Stimülasyon (BreEStim)

Sıçanlarda Kompleks Bölgesel Ağrı Sendromu Tip-I kronik Post-Iskemi Ağrı Modeli

Sıçanlarda Sinir Hasarına Bağlı Mekanik Aşırı Duyarlılığın Orofasiyal Operant Ağrı Testi Kullanılarak Değerlendirilmesi

Canlı Olarak Taşınabilir Sıçan Trigeminal Ganglionundaki Duyusal Nöronların Kalsiyum Görüntülemesi

Canlı Olarak Taşınabilir Sıçan Trigeminal Ganglionundaki Duyusal Nöronların Kalsiyum Görüntülemesi

Canlı Olarak Taşınabilir Sıçan Trigeminal Ganglionundaki Duyusal Nöronların Kalsiyum Görüntülemesi

Trigeminal Nöropatik Ağrıyı İncelemek İçin Farelerde Distal İnfraorbital Sinirin (DIoN-CCI) Kronik Daralma Hasarı