Name: creation of a rodent model of abdominal aortic aneurysm by blocking adventitial vasa vasorum perfusion
Uploaded: 2017-11-08T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion at JoVE.com

Bu eser için bilimsel araştırma (B) (20291958) N.U. için Grants-in-Aid tarafından desteklenen; Grants-in-Aid genç bilim adamları oyuncak için (A) (25713024)

hayvan bakımı ve deneyler gerçekleştirilen Hamamatsu Üniversitesi okul, tıp hayvan bakımı Komitesi merkezi yönergelere uygun olarak hayvan bakımı.
 1. Model oluşturmak için cerrahi müdahale Not: boncuk Sterilizatör 10 için cerrahi aletler yerleştirebilmesine s preoperatively. Ameliyathanede steril eldiven kullanın.
<ol><li>300-400 g ağırlığında kullanım erkek rats fareler yiyecek erişmesine izin vermek ve ad libitum su.</li>
	<li>İsoflurane inhalasyon (2.0-3.0 mL/L) fareyle anestezi. Uygun anesthetization ayak çimdik tarafından onaylayın.</li>
	<li>Tıraş Tıraş ile karın üzerinde saç ve karın alkol ve povidone-iyot çözüm ile fırçalayın.</li>
	<li>Fare operasyon masada sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Veteriner merhem üzerinde fareyi kullanın &#39; kuruluk anestezi iken altında önlemek için gözleri.</li>
	<li>Kullanarak bir makası bir ventral karın Ensizyon ile laparatomi gerçekleştirin. Karın içeriği açık cerrahi alan güvenliğini sağlamak için bir yara Retraktörü kullanarak steril gazlı bez ile karın boşluğu içinde paketi.</li>
	Aort Perivasküler dokusundan ayırmak için <li>yavaşça al ve aort duvar ortaya çıkarmak ve infrarenal aortada çatallanma sol renal ven düzeyinden Retroperitonal alana pul pul dökmek için cımbız ile retroperitoneum gözyaşı Perivasküler doku ( şekil 1A).</li>
	<li>5-0 ipek dize içeren abdominal aorta gelen blok kan için dallanma damarları tedarik aort Lümen dar değil aort uzak bir noktada Ligate.</li>
	Aort kan akışını engellemek için <li>yer vasküler klipleri hemen altında renal arter ve hemen üstünde aort bifurkasyon. 
	Not: Küçük resim boyutunu kan akımı tamamen engellemek için aort çapı daha büyük olması gerekir. Geçici bir 5-0 ipek dize bağ da küçük resimleri yerine kan akışını engelleme için yeterli olduğunu.</li>
	<li>Poliüretan bir kateter eklemek için bir mikro-makas 5 mm'den klemple aort klibi, renal arter dalları için bitişik kullanarak ön aort duvar kesme aort duvar yüzeyinde bir nokta kanama oluşturma benzer.</li>
	<li>Poliüretan bir kateter takın (dış çap çap içinde 0.55 mm 0.37 mm) 24'lik indwelling kullanarak iğne derin kan aort su ile yıkayıp kesi yoluyla. Poliüretan kateter su 1 mL şırınga yönetmek ve uzak kalan kan aort su ile yıkayın. Sonra sulama, katater aort kaldırmak.</li>
	<li>Poliüretan bir kateter takmadan önce (dış çap çap içinde 1.20 mm 0.94 mm) bir 18'lik indwelling iğne kullanılarak kesme poliüretan kateter 10 mm den uzun ( şekil 1B).
	<ol><li>Ekle kesme kimden adım 1.9 yapılan kesi aort Lümen içine poliüretan kateter parçası. Tamamen 10 mm katater aort Lümen yerleştirin ve belgili tanımlık kesme konumunu eşleştirmek için kateter orta noktasını yeniden konumlandırmak (Yani, kateter ile belgili tanımlık kesme kapak).</li>
	</ol></li> <li>8-0 monofilament dize ( şekil 1 c) kullanarak kesintiye uğramış dikiş ile belgili tanımlık kesme onarmak.</li>
	<li>5-0 ipek dize ve poliüretan kateter ( şekil 1 d) bir birleşimini kullanarak abdominal aort ligate. 
	Not: Aortik Lümen Kalıcı kateter tarafından korunabilir. Sıkıca kateter pozisyonu misaligning önlemek için aort ligate. Cerrah &#39; s düğüm önerilir, çünkü ne zaman ilk atmak oluşturan çift bir yukarıdan aşağı düğüm düğüm bağlama ilave bir büküm ekler ve ek bir dönüş daha fazla sürtünme sağlar ve gevşeme azaltabilirsiniz.</li>
	<li>Sonra tüp ligasyonu, damar klibi de aort çatallanma, vasküler kırpmak aşağı antegrade kan akımı geri yüklemek için renal arter sökün ve. Brüt aortik nabız onaylayın.</li>
	<li>Belgili tanımlık karın kesme iki kat, Periton ve 4-0 polipropilen sütür ile diğer katmanları kapatın. Sıkı bir protrüze organ önlemek için belgili tanımlık kesme dikiş.</li>
	<li>Topikal lidokain belgili tanımlık karın kesme üzerinde uygulayın. Bilinç dönünceye kadar fareyi bir Isıtma yastığını yerleştirin. Sternal recumbency korumak için yeterli kendine geldi kadar bir fare sahipsiz bırakmayın. Tamamen iyileşmiş kadar bu işlemi diğer rats şirkete uğramıştır bir sıçan döndürmüyor.</li>
	<li>Fare operasyon sonrasında yakından izleriz. Bir sıçan sıkıntı veya vücut kilo kaybı belirtileri gösteriyorsa steril serum fizyolojik (1.0-2.0 mL) bolus subkutan enjekte.</li>
	<li>Postoperatively, bir ultrason echogram üzerinde genişlemiş aort zamanlı Kurs gelişimi gözlemlemek. Maksimum çapı iç kenar açıklanan 5 olarak abdominal aort dış kenarına ölçü.</li>
</ol> 2. Hasat, sabitleme ve Elastica-van Gieson (EVG) Staining <ol><li>28 gün postoperatively, sodyum Fentobarbital yönetmek &#8805; 100 mg/kg intraperitoneally fareler ötenazi.</li>
	<li>Kesmek açık sıçan &#39; s karın boşluklar ventrally. Bir neşter kullanarak ilk kesi yapmak. Makas kullanarak anevrizma hasat ve yansıtmaya arabelleğe alınan % 10 formalin 24-48 h için hasat aortas yer 
	Not: Cerrah yaralanma aort ve diğer organlara anevrizma maruz önlemek dikkatli olmanız gerekir. Yükseltilmiş bir karın organ, AAA oluşumu gösteren dikkat edilmelidir. Şekil 2 bir vivo içinde görüntü ve ex vivo görüntü gösterir; AAAs temsilcisi Bu örnek değil yırtıldı.</li>
	<li>EVG boyama 9 <ol><li>Çözüm hazırlık <ol><li>hazırla Verhoeff &#39; tarafından verilen sırayla aşağıdakileri karıştırma s Hematoksilen: Alkollü Hematoksilen 20 mL, % 10 ferrik klorid 8.0 mL, ve Lugol &#39; s iyot 8 mL. Her ek arasında çözüm mix. Bu çözüm gerektiği gibi taze hazırlanabilir.</li>
			<li>Hazırlama Van Gieson &#39; % 1 asit fuchsin karıştırma tarafından s çözüm 1 mL ve doymuş Pikrik asit 45 mL. Gecede durup iyice karıştırın sağlar. Bu çözüm 2 hafta boyunca stabildir.</li>
			<li>Hazırlamak ayırt çözüm (%2 ferrik klorid) % 10 FeCl 3 40 ml 10 mL karışımı ile distile su. Bu çözüm gerektiği gibi taze hazırlanmış.</li>
			<li>Hazırla % 5 hipo 5.0 g sodyum thiosulfate 100 mL distile su içinde eriterek tarafından. Bu çözüm için 1 yıl stabildir.</li>
		</ol></li> <li>Staining yordamı Not: ayrıntılı bilgi için bkz: başvuru 9.
		<ol><li>Verhoeff içinde aortas 10 dk. yerleştirmek için distile su içinde hasat aortas sabit parafin bölümlerini kısaca, hidrat &#39; s Hematoksilen 25 dk. yıkama su ve 10 - 30 kez çözüm (%2 FeCl 3) ayırt içinde dip ile. Suyla durulayın. 1 dk. yıkama suda % 5 hipo yerleştirin. Van Gieson yerde &#39; 5 dakika süreyle s çözüm</li>
			<li>Dehydrate alkol aşağıdaki sipariş: %30 75, % 90'ı, % 95, % 100 ve % 100 alkol her s. O zaman, Ksilen 5 min için iki kez temizleyin. Bir coverslip ile reçine montaj orta yerinde. 
			Not: Elastik lifler için siyah mavi-siyah görünür; Çekirdek: bla mavicK; kollajen: kırmızı; ve diğer doku öğeleri: sarı.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wolinsky, H., Glagov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+abdominal+and+thoracic+aortic+medial+structure+in+mammals.+Deviation+of+man+from+the+usual+pattern.">Comparison of abdominal and thoracic aortic medial structure in mammals. Deviation of man from the usual pattern.</a> Circ Res. 25 (6), 677-686 (1969).</li><li>Sano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphangiogenesis+and+angiogenesis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Lymphangiogenesis and angiogenesis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 9 (3), e89830 (2014).</li><li>Vorp, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+intraluminal+thrombus+in+abdominal+aortic+aneurysm+with+local+hypoxia+and+wall+weakening.">Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening.</a> J Vasc Surg. 34 (2), 291-299 (2001).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adventitial+vasa+vasorum+arteriosclerosis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Adventitial vasa vasorum arteriosclerosis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 8 (2), e57398 (2013).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoperfusion+of+the+Adventitial+Vasa+Vasorum+Develops+an+Abdominal+Aortic+Aneurysm.">Hypoperfusion of the Adventitial Vasa Vasorum Develops an Abdominal Aortic Aneurysm.</a> PLoS One. 10 (8), e0134386 (2015).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Mass+Spectrometry+Reveals+a+Unique+Distribution+of+Triglycerides+in+the+Abdominal+Aortic+Aneurysmal+Wall.">Imaging Mass Spectrometry Reveals a Unique Distribution of Triglycerides in the Abdominal Aortic Aneurysmal Wall.</a> J Vasc Res. 52 (2), 127-135 (2015).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preventive+effect+of+fish+oil+on+abdominal+aortic+aneurysm+development.">The preventive effect of fish oil on abdominal aortic aneurysm development.</a> Biosci Biotechnol Biochem. 80 (6), 1186-1191 (2016).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+in+vascular+wall+can+induce+the+rupture+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Adipocyte in vascular wall can induce the rupture of abdominal aortic aneurysm.</a> Sci Rep. 6, 31268 (2016).</li><li>Lichtenberg, A., Cebotari, S., Tudorache, I., Hilfiker, A., Haverich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+scaffolds+for+heart+valve+tissue+engineering.">Biological scaffolds for heart valve tissue engineering.</a> Methods Mol Med. 140, 309-317 (2007).</li><li>Heistad, D. D., Marcus, M. L., Larsen, G. E., Armstrong, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+vasa+vasorum+in+nourishment+of+the+aortic+wall.">Role of vasa vasorum in nourishment of the aortic wall.</a> Am J Physiol. 240 (5), H781-H787 (1981).</li><li>Yoshimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regression+of+abdominal+aortic+aneurysm+by+inhibition+of+c-Jun+N-terminal+kinase.">Regression of abdominal aortic aneurysm by inhibition of c-Jun N-terminal kinase.</a> Nat Med. 11 (12), 1330-1338 (2005).</li><li>Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+murine+experimental+abdominal+aortic+aneurysms+with+elastase.">Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase.</a> J Vis Exp. (29), (2009).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+Infusion+using+Osmotic+Pumps+Induces+Aortic+Aneurysms+in+Mice.">Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice.</a> J Vis Exp. (103), (2015).</li><li>United Kingdom, E. T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+versus+open+repair+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Endovascular versus open repair of abdominal aortic aneurysm.</a> N Engl J Med. 362 (20), 1863-1871 (2010).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Dış ve orta katman VV tarafından hangi adventitia medial VV1içine nüfuz beslenir, ancak fizyolojik koşullar altında aort duvar iç katmanları Difüzyon luminal kan akışı tarafından beslenir. VV kan akımı abdominal aort duvar içine aşağıdaki üç yön/alanlarından kaynaklanan: (1) aort duvar, aort duvar ve (3) Perivasküler doku10üzerinden (2) distal yönü ile proksimal yönü. Daha önce histolojik analizimizi insan dokuların önemli stenoz veya abdominal aort duvar VV kan akışına azaltılmış4olabilir düşündüren VV AAA duvarındaki tıkanıklığı tespit. Bir infrarenal AAA poliüretan kateter ekleme ve dikiş ligasyonu infrarenal abdominal aort birleşimiyle neden oldu bu iletişim kuralındaki son derece önemli bir noktasıdır. Dikkatle doku tabakası pul pul dökmek için cerrahlar sorunsuz poliüretan katater aort yerleştirin ve sıkıca Aort Anevrizma oluşumu ve adventitial VV hipoperfüzyon nedeniyle kronik hipoksi neden ligate. Bu tekniklerin kullanımı, kan akımı aort duvarındaki sonuç olarak azalır ve yerel bir hipoksik ortamda indüklenen. Kan akışını azaltma ve hipoksi indüklenen anevrizma oluşumu gösterir VV kan akımı abdominal aort duvara AAA oluşumu patogenezinde bir rol oynar.
Özellikle, bir aort anevrizması modeli aşağıdaki koşulları karşılamalıdır: temel, tunica medya dejenerasyon ve aort duvar iltihabı karşılaştırıldığında damar çapı 1.5-fold bir artış. En popüler hayvan modelleri inflamatuar yanıt CaCl211, elastase12ve Anjiyotensin II13gibi maddeler kullanarak inducing tarafından inşa edilmiştir. Bu modeller yüksek tekrarlanabilirlik ve belli ki patolojik değişiklik neden olabilir ve bunlar genellikle araştırma çalışmalarında kullanılmıştır. Bizim modelinde, önce yordamı yordam (şekil 3) sonra 28 güne kadar gerçekleştirilen her 7 günde gelen Ultrasonografi kullanarak aort çapı değerlendirildi. Sonuçlar aort çapı orta çapı bu değişiklik önceki kemirgen modellerinde benzer olduğunu belirten 28 gün içinde artış gösterdi. Brüt gözlem vasküler formunun düzgün fusiform şekli (Şekil 2) belirtti. Günde 28, fareler kurban ve histopatolojik çözümlemenin kurtarıldı aort dokusu. Yırtılma ve tunica medya ve adventitia elastik ve kollajen liflerinin ortadan kaybolması (şekil 4) tespit edildi. Ayrıca, inflamatuar hücreler, makrofajlar gibi tunica medyaya tunica adventitia hazır bulundu.
Şu anda, AAAs için tedavi seçenekleri cerrahi onarım ve endovasküler stent greft, 30-%50 AAA rüptürü14olan hastalarda mortalite oranları ile sınırlıdır. Ancak, hiçbir ilaç AAAs tedavisi klinik kullanım için onaylanmıştır. Patolojik bulgular kurulan hayvan modelleri AAA araştırmalarında kullanılan ve insanlar arasındaki tutarsızlıklar vardır tartışma vardır. Benzerlikler insan AAA ve hayvan AAA modelleri arasında patogenezinde farmakolojik tedaviler gelişimi için gereklidir. Kemirgen modelleri etkinliği ile ilgili olarak, bizim fare modeli görünümlü insanlar intraluminal trombüsü5 ve adipogenesis8açısından benzerdir. Ayrıca, bu çalışmada sıçan yaklaşık % 20 AAA rüptürü vardı ve prosedür sonra 28 gün içinde öldü. Aort anevrizması rüptürü bu hastalık için en önemli olay olsa da, rüptürü ile kurulan AAA modeller nadirdir ve mekanizması değil henüz aydınlatılmamıştır. Bu nedenle, bu model aort çapı otu ve Anevrizma Rüptürü mekanizmasını anlamak için yararlıdır.
Bu modelinin oluşturulması bazı cerrahi işlemler için gereklidir. Bu nedenle, araştırmacılar bu model bir kısıtlamasıdır bu model oluşturmak Pratik yapman gerek. Gelecekte, biz hangi biz kan akışı yavaş yavaş VV duvar kalınlaşma tarafından kendiliğinden aort anevrizması kaynaklanan düşürebilir kemirgen bir model oluşturmak istiyorum.

Abdominal aort aşağıdaki üç katmandan oluşur: iç damar duvar (intima), orta katman (medya) ve dış vasküler suru (adventitia), ve bunlardan vasa vasorum (VV) bilinen sistem kaynağı benzersiz bir kan adventitia vardır. Aort dokusu oksijen adventitial VV perfüzyon ve aort kan akışı1basit Oksijen difüzyon ile sağlanır. Ancak, coğrafi olarak, abdominal aort VVs bu aort diğer bölgelerinde karşılaştırıldığında en azından dağılımı gösterir. 2
Bir önceki çalışma insan abdominal aort anevrizması doku hipoksi (AAA) duvarlar kalın intraluminal trombüsü (ILT)3ile bildirdi. Ayrıca, aneurysmal duvar adventitial bir VV doku hipoksi AAA duvarlar4ile ilişkili bir anlamlı olarak daha yüksek hızda arteriosclerotic değişikliklerle tıkandı gösterilmiştir. Bu bulgulara dayanarak, AAA bir roman kemirgen modeli adventitial VV hipoperfüzyon5inducing tarafından oluşturuldu. Bu modelde, VV hipoperfüzyon doku hipoksi ve morfolojik ve patolojik özellikleri bir insan AAA6benzer vardı bir infrarenal AAA, gelişimi neden oldu. Asal örnekler ILTs varlığı ve hyperplastic adiposit6ve rüptür7,8neden potansiyeline birikimi vardı. Bu bulgular nadiren önceki kemirgen modellerinde gözlemledim. Bu nedenle, bu modeli büyük ölçüde AAA geliştirme ve rüptür sorumlu mekanizma daha derin bir anlayış için katkıda bulunabilir. Biz tanıtmak ve AAAs adventitial VV hipoperfüzyon ikna etmek için kullanılan bir standart iletişim kuralı tanımlamak ve hipoksi cerrahi yöntemlerle aort duvarındaki ikna etmek nasıl açıklarız.

<table><tbody><tr><td>rat</td><td>Japan SLC.Inc</td><td>Slc:SD rat</td><td>Sprague&amp;ndash;Dawley ratTM</td></tr><tr><td>povidone-iodine solution</td><td>Libatape Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>4987335 111457</td><td></td></tr><tr><td>5-0 silk string</td><td>Akiyama Medical MFG. CO.,LTD</td><td>JIS No.1</td><td></td></tr><tr><td>vascular clips</td><td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td><td>C-42-S-2</td><td></td></tr><tr><td>polyurethane catheter (24-gauge indwelling needle)</td><td>MEDIKIT</td><td>24G</td><td>Supercath Z4VTM, 24-gauge indwelling needle</td></tr><tr><td>polyurethane catheter (18-gauge indwelling needle)</td><td>MEDIKIT</td><td>18G</td><td>Supercath Z3VTM, 18-gauge indwelling needle</td></tr><tr><td>8-0 monofilament string</td><td>Ethicon Suture</td><td>c-42-S-2</td><td>PROLENE Polypropylene Suture, Repair the incision with the suture</td></tr></tbody></table>

creation of a rodent model of abdominal aortic aneurysm by blocking adventitial vasa vasorum perfusion

Adventitial vasa vasorum (VV) oksijen ve besin aort duvara sağlar. Aort duvarındaki hipoksi genişlemiş abdominal aort anevrizması (AAAs) neden olabilir. Bu makalede tanıtır ve AAAs aort Lümen ve dikiş ligasyonu infrarenal abdominal aort içine poliüretan kateter ekleme bir kombinasyonu ile oluşturulan adventitial VV hipoperfüzyon yoluyla ikna etmek için kullanılan bir standart iletişim kuralı açıklar.
Protokol erkek rats vezin 300-400 g, hangi yiyecek ve su ad libitumsağlanan kullanımı içerir. Ventral bir karın Ensizyon ile laparotomi sonra pul pul dökülme aort gerçekleştirilen hangi Perivasküler dokusundan kan akışını engeller. Renal arter dalları için bitişik küçük bir insizyon attım içeren Aortotomy gerçekleştirilir ve poliüretan bir kateter bir 18'lik indwelling iğne kullanarak eklenir. Kesi, aort sıkı ligasyonu kateter blok VV kan akışı üzerinde proksimal aort duvarından yönünden aort kan akışını bozmadan onarımından sonra. Bu teknik bir AAA Progresif aort dilatasyonu ile tetikleyebilir.
Bu modelin en büyük yararı VV hipoperfüzyon doku hipoksi ve morfolojik ve patolojik bir insan AAA benzer özelliklere sahip bir infrarenal AAA, gelişimine neden olur.

Açıklanan ameliyat teknikleri bir kronik aort anevrizması hipoksi indüklenen roman hayvan modeli de, fareler poliüretan kateter ekleme ve dikiş ligasyonu infrarenal abdominal aort bir arada kullanarak oluşturun. Protokol bölümünde açıklanan fareler euthanized 28 gün sonra yordamı vardı. Aortas hasat ve anevrizma oluşumu görselleştirmek için görüntüsü. Şekil 2 fusiform AAA gelişimini gösterir. Ex vivo aort alt ve üst ucuna dilatasyon olmadan normal bir çapa sahip. Aort çapları transabdominal Ultrasonografi (şekil 3) kullanılarak ölçüldü. Çapı genellikle yaklaşık 14 gün sonra yordam, en fazla boyutuna eriştiğinde; Bundan sonra bu değişmeden kalır ya da biraz artırır. Şekil 4 EVG boyama sonra en fazla çapına anevrizma histopatolojik görüntüsünü gösterir. Görüntü (anevrizma) günde 28 dokusunun Elastik lifler gün 0 kıyasla belirgin bozulma gösterdi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig1.jpg"> 
Resim 1: abdominal aort anevrizması (AAA) ikna etmek için cerrahi işlemler. (A) infrarenal aortada çevre dokudan bakımı. (B) 10 mm uzun kesilmiş poliüretan kateter aort içinde küçük bir kesi aracılığıyla eklenir. (C) belgili tanımlık kesme bir 8-0 monofilament dikiş ile tamir ve kan akımı geri yüklenir. (D) aort 5-0 ipek sütür ile eklenen kateter bakmaksızın. Ölçek çubuğu 5 mm. = <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig2.jpg"> 
Resim 2: Ameliyat sonrası temsilcisi sonuçları. Ameliyat sonrası gün 28 gösteren geliştirme fusiform abdominal Aort Anevrizmalarının makroskopik görünümü. Retroperitoneum yükseltilmiş sayfanın kenar anevrizma (kırık çizgiler; sol) dış kenarına doğru karşılık gelir. Ex vivo aort alt ve üst ucuna (sağda) normaldir. Ölçek çubuğu 3 mm. = <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig3.jpg"> 
Şekil 3: transabdominal Ultrasonografi kullanarak ölçülen maksimum aort çapları. Aort çapı bu sıçan modelinde giderek arttı. Aort çapları ortalama ± standart sapma sunulmaktadır (n = 12). <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig4.jpg"> 
Şekil 4: Elastica van Gieson boyama ile aneurysmal dokusunun temsilcisi görüntüler. Histolojik değerlendirme EVG dejeneratif elastik lamina medya ve bir intraluminal trombüsü oluşumu 28 gün sonra yordamı (sağda) gösterilen boyama ile. Elastik lif parçalanma aort medya ve aortik adventitia seyrek kollajen lif 28 günde gözlenen. 0 gün önce işlemdir (solda). Ölçek çubuğu 500 µm. = <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion at JoVE.com

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Aort Lümen ve dikiş ligasyonu aort içine poliüretan kateter ekleme neden adventitial vasa vasorum hipoperfüzyon nedeniyle kronik hipoksi. Bu makalede, abdominal aort anevrizması (AAA) insanlarda bu AAA benzer özelliklere sahip yeni bir hayvan modeli.

Abdominal aort anevrizması Adventitial Vasa Vasorum perfüzyon engelleyerek kemirgen bir Model oluşturulması

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

creation-rodent-model-abdominal-aortic-aneurysm-blocking-adventitial

Research

JoVE Journal

Medicine

9.0K Görüntüleme.  Hamamatsu University School of Medicine. Aort Lümen ve dikiş ligasyonu aort içine poliüretan kateter ekleme neden adventitial vasa vasorum hipoperfüzyon nedeniyle kronik hipoksi. Bu makalede, abdominal aort anevrizması (AAA) insanlarda bu AAA benzer özelliklere sahip yeni bir hayvan modeli.

Video: Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant vasculopathy (TVP).
The commonly used animal model for cardiovascular chronic rejection studies is the heterotopic heart transplant model performed in laboratory rodents. This model is used widely in experiments since Ono and Lindsey (3) published their technique. To analyze the findings in the blood vessels, the heart has to be sectioned and all vessels have to be measured.
Another method to investigate chronic rejection in cardiovascular questionings is the aortic transplant model (1, 2). In the orthotopic aortic transplant model, the aorta can easily be histologically evaluated (2). The PVG-to-ACI model is especially useful for CAV studies, since acute vascular rejection is not a major confounding factor and Cyclosporin A (CsA) treatment does not prevent the development of CAV, similar to what we find in the clinical setting (4). A7-day period of CsA is required in this model to prevent acute rejection and to achieve long-term survival with the development of TVP.
This model can also be used to investigate acute cellular rejection and media necrosis in xenogeneic models (5).

This video demonstrates the orthotopic aortic transplant model as a simple model to study the development of transplant vasculopathy (TVP) in rats.

Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Tıp

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase 

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of abdominal aortic aneurysm (AAA) ever since it was first described in rats by Anidjar and colleagues.1 The rationale for its development was based on the disrupted nature of elastin observed in AAAs. This rat model has been modified to produce AAAs in the infrarenal aortic region of mice.2 The model has the ability to add broad insight into the pathobiology of AAA due to the emergence of numerous transgenic and gene knockout mice. Moreover, it is a viable platform to test potential therapeutic agents for AAA. In this video, we demonstrate the elastase infusion AAA procedure used in our laboratory. 
Mice are anesthetized using 2.5% isoflurane, and a laparotomy is performed under sterile conditions. The abdominal aortais isolated with the assistance of an operating stereomicroscope (Leica). After placing temporary ligatures around the proximal and distal aorta, an aortotomy is created at the bifurcation with the tip of a 30-gauge needle. A heat-tapered segment of PE-10 polyethylene tubing is introduced through the aortotomy and secured. The aortic lumen is subsequently perfused for 5-15 minutes at 100 mm Hg with saline containing type I porcine pancreatic elastase (4.5 U/mL; Sigma Chemical Co.). After removing the perfusion catheter, the aortotomy is repaired without constriction of the lumen.

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase

This video shows how to induce abdominal aortic aneurysms (AAA) in mice via transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta. The model has the ability to add broad insight into the pathobiology of AAA due to the emergence of numerous transgenic and gene knockout mice.

Elastaz ile murin Deneysel Abdominal Aort Anevrizmalarının Yaratılış

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of ...

Biyoloji

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced into clinical practice. Furthermore, experimental models are needed to elucidate the complex aneurysm biology leading to rupture of saccular aneurysms.
Several different kinds of experimental models for saccular aneurysms have been established in different species. Many of them, however, require special skills, expensive equipment, or special environments, which limits their widespread use. A simple, robust, and inexpensive experimental model is needed as a standardized tool that can be used in a standardized manner in various institutions.
The microsurgical rat abdominal aortic sidewall aneurysm model combines the possibility to study both novel endovascular treatment strategies and the molecular basis of aneurysm biology in a standardized and inexpensive manner. Standardized grafts by means of shape, size, and geometry are harvested from a donor rat&#39;s descending thoracic aorta and then transplanted to a syngenic recipient rat. The aneurysms are sutured end-to-side with continuous or interrupted 9-0 nylon sutures to the infrarenal abdominal aorta.
We present step-by-step procedural instructions, information on necessary equipment, and discuss important anatomical and surgical details for successful microsurgical creation of an abdominal aortic sidewall aneurysm in the rat.

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

Helsinki Rat Mikrocerrahi Yanduvar Anevrizma Modeli

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and fluid retention. Changes in myocardial structure, electrical conduction, and energy metabolism develop with heart failure, leading to contractile dysfunction, increased risk of arrhythmias, and sudden death. Hypertensive heart disease is one of the key contributing factors of cardiac remodeling associated with heart failure. The most commonly-used animal model mimicking hypertensive heart disease is created via surgical interventions, such as by narrowing the aorta. Abdominal aortic constriction is a useful experimental technique to induce a pressure overload, which leads to heart failure. The surgery can be easily performed, without the need for chest opening or mechanical ventilation. Abdominal aortic constriction-induced cardiac pathology progresses gradually, making this model relevant to clinical hypertensive heart failure. Cardiac injury and remodeling can be observed 10 weeks after the surgery. The method described here provides a simple and effective approach to produce a hypertensive heart disease animal model that is suitable for studying disease mechanisms and for testing novel therapeutics.

A rat model of abdominal aortic constriction that induces cardiac hypertrophy and remodeling is described. An efficient, highly-reproducible, and minimally-invasive method is used to provide a simple yet useful platform for research in myocardial hypertrophy and dysfunction.

Sıçanlarda Karın Aort Konstrüksiyon sayesinde Kardiyak Yaptırma Bir Model

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. However, only minor improvement in the long-term results of transplanted solid organs could be observed over the past decades. In this context, chronic allograft vasculopathy (CAV) still represents the leading cause of late organ failure in cardiac, renal and pulmonary transplantation.
Thus far, the underlying pathogenesis of CAV development remains unclear, explaining why effective treatment strategies are presently missing and emphasizing a need for relevant experimental models in order to study the underlying pathophysiology leading to CAV formation. The following protocol describes a murine heterotopic cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique. In this technique, a segment of the thoracic aorta is interpositioned in the right common carotid artery. With the use of the non-suture cuff technique, an easy to learn and reproducible model can be established, minimizing the possible heterogeneity of sutured vascular micro anastomoses.

Here, we present a protocol of heterotopic aortic transplantation in mice using the non-suture cuff technique in a cervical murine model. This model can be used to study the underlying pathology of chronic allograft vasculopathy (CAV) and can help evaluate new therapeutic agents in order to prevent its formation.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

İnfrarenal Abdominal Aort Anevrizması Porcine Modeli

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...

<meta charset="utf8"></head><body>Murin abdominal aort anevrizmasının altında yatan moleküler mekanizmaların araştırılması

A Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model by Periadventitial Calcium Chloride and Elastase Infiltration

Abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening disease associated with high mortality rates. It is characterized by the permanent dilation of the abdominal aorta with at least a 50% increase in arterial diameter. Various animal models of AAA have been introduced to mimic the pathophysiological changes and study the underlying mechanisms of AAA. Among these models, the calcium chloride (CaCl2)- and elastase-induced AAA models are commonly used in mice. However, these methods have certain limitations. Traditional intraluminal porcine pancreatic elastase (PPE) perfusion is associated with high technical difficulty and a high rupture rate, while periadventitial administration of PPE yields inconsistent results. In addition, the CaCl2-induced AAA model lacks human AAA features, such as atherothrombosis and aneurysm rupture. Therefore, the combined application of CaCl2 and PPE has been proposed as an approach to enhance success rates and induce greater diameter increases in AAA animal models. This manuscript presents a comprehensive protocol for establishing a mouse AAA model through periaortic infiltration of PPE and CaCl2 in the infrarenal segment of the abdominal aorta. By following this protocol, we can achieve an AAA formation rate of approximately 90% with technical simplicity and reproducibility. Further ultrasound and histological experiments confirm that this model effectively replicates the morphological and pathological changes observed in human AAA.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Abdominal Aort Anevrizması için Bir Fare Modelinin Geliştirilmesi ve Karakterizasyonu

This manuscript presents a protocol for establishing a mouse abdominal aortic aneurysm model using calcium chloride and elastase, combining the advantages of previous modeling methods. This model can be utilized to investigate the pathophysiological mechanisms underlying abdominal aortic aneurysms.

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening disease associated with high mortality rates. It is characterized by the permanent dilation of the ...

Abdominal aort anevrizması Adventitial Vasa Vasorum perfüzyon engelleyerek kemirgen bir Model oluşturulması

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Elastaz ile murin Deneysel Abdominal Aort Anevrizmalarının Yaratılış

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Helsinki Rat Mikrocerrahi Yanduvar Anevrizma Modeli

Sıçanlarda Karın Aort Konstrüksiyon sayesinde Kardiyak Yaptırma Bir Model

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

İnfrarenal Abdominal Aort Anevrizması Porcine Modeli

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Periadventitial Kalsiyum Klorür ve Elastaz İnfiltrasyonu ile Bir Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli