Bu araştırma, Translational Health Sciences Enstitüsü pilot proje hibe fırsatı (UL1TR000423), Washington Üniversitesi İnsan Gelişim ve Engellilik Merkezi ve Washington Hayvan Davranışı Çekirdeği ve Beyin Görüntüleme Çekirdeği Üniversitesi tarafından desteklenmiştir. Burada sunulan orijinal Radyal Su Basamalı labirent tasarımı ve protokolünün geliştirilmesi ve yaygınlaştırılmasındaki rolünden dolayı Dr. Warren Ladiges&#39;i kabul etmek istiyoruz. Bu projeye yardım ettiği için Toby Cole&#39;a da teşekkür ediyoruz.

Tüm işlemler ve hayvan taşımacılığı, Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan hayvan bakım kılavuzlarına ve Washington Üniversitesi Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi tarafından yürütüldü. 1. Cerrahi <ol><li> Bilinci kesilene kadar bir indüksiyon kutusunda fareyi% 5 izofluran ile anestezi altına alınız. Anestezi solunum hızında bir azalma ile ve ayak parmaklarını takiben geri çekilme refleksi olmadığı zaman onaylayın. </li><li> Ameliyat boyunca burun konisi yoluyla anestezi bakımını% 2-2.5 arasında tutun. Farenin bilinçsiz kalmasını sağlamak için ameliyat boyunca solunum hızını izleyin. </li><li> Fareyi eğilimli bir ısıtma yatağına yerleştirin ve fareyi stereotaktik cihazın içine kulak çubuklarını kullanarak yerleştirin ve başın düz ve sağlam olmasını sağlayın. </li><li> Saç kremi kullanarak kafa derisindeki saçları alın. Kafa derisini tuzlu su ile iyice durulayın. </li><li> Cerrahi alanı alternatif iyot ve% 70 etanol yıkama ile temizleyin. </li><li> Administe(1 mg / kg) subkütan enjeksiyonu ile kafa derisine uygulandı. </li><li> Cerrahi makasla boyuna bir orta hat kesisi yapın ve kafatasını ortaya çıkarmak için cildi geri çekin. </li><li> 5 mm&#39;lik bir trefin kullanıldığında, sol frontoparietal korteks üzerine bregma&#39;nın 2,5 mm ve orta hattın 2.5 mm solunda merkez noktası olan bir kraniotomi ön form oluşturur. Beyni açığa çıkarmak için dikkatli bir şekilde kemik çemberini çıkarın. </li><li> Çarpan cihazı 6 m / s ve 200 ms bekleme süresine ayarlayın. </li><li> Çarpma aletini, 3 mm dışbükeyim etki ucu beynin yüzeyine 2,5 mm&#39;lik bregma ve 2,55 mm&#39;lik orta çizginin solundan hafifçe dokunana kadar konumlandırın. Darbe ucunu geri çekin ve 1 mm daha indirin (darbe derinliği). Hazır olduğunda, istenen darbe üreten cihazı çalıştırın. </li><li> Kraniyotomiyi doku yapıştırıcısı ile dermaya çimentolanmış steril bir polipropilen disk ile örtün ve kesi kapalı olarak dikin. </li><li> Fareyi anesteziden çıkarın ve Bupr&#39;un IP enjeksiyonu yapınEnorfin (0.5 mg / kg). </li><li> Farenin temiz bir kafeste ısıtılması için bir ısıtma masası ile ısınmasına izin verin. Farenin önümüzdeki 24 saat içinde acı veya sıkıntı belirtileri olup olmadığı izlenmelidir. NOT: Sahte kumandalar, yukarıdaki adımlarla aynı işlem görmeli ve 1.8-1.9 arası adımlar atlanmış olmalıdır. </li></ol> 2. Radyal Su Geçişli Labirent İnşaatı <ol><li> 32 inç çapında galvanizli çelik küvet çevresine eşit aralıklarla 1-1 / 2 inç ABS DWV SPG x SJ tuzak adaptörünü yerleştirmek için yeterince büyük 9 çıkış deliği delinmiştir. Bu çıkış deliklerini kabin tabanından kabaca 2-1 / 4 inç yukarıda ortalayın. </li><li> Çıkış deliklerinden birine 1-1 / 2 inç ABS DWV SPG x SJ tampon adaptörü yerleştirin ve birlikte gelen halka somunlarıyla sabitleyin. </li><li> Lastik tıkaçlarla, aparatın dışındaki dokuz çıkışın sekizünü kapatın. Nihai, kapatılamayan çıkış kaçış yolu olarak kullanılacaktır. Hangi çıkışın kaçış yolu olarak belirlendiği önemli değildir. </li><li> 90 ° ABS takınDirsekten kalan ucun dış ucuna. 90 ° viraj, test deneklerinin labirentin içinden doğru kaçış yolunu görsel olarak tespit etmesini önlemeye yarar. </li><li> Kaçış kutusunu sıhhileştirilebilen ve kabaca 30 cm x 15 cm x 15 cm boyutlarında opak kutudan oluşturun. Kutunun kenarında, 90 ° ABS dirseğini barındıracak kadar geniş, doğrudan zemin üzerinde bir delik açın. </li><li> Kaçış kutusunu 90 ° ABS dirseğinin sonuna takın. </li><li> Kaçış kutusunu zemin yüzeyinin biraz üstünde (bir inçten daha az) kaldırın. Bu, kaçış kutusunun altına yerleştirilecek bir elektrikli ısıtma pedi veya diğer ısıtma kaynağı için geniş bir alan sağlar. </li><li> En az 5 benzersiz görsel ipucu yazdırın ve laminatlayın. Cihaz içinde kolaylıkla fark edilebilen basit, yüksek kontrastlı görüntüler kullanın. Siyah-beyaz küçük resim şekilleri (üçgen, kare, daire) önerilir. </li><li> Mıknatısları kullanarak, görsel ipuçlarınıaygıt. İpuçları, cihazın çevresi etrafında yaklaşık eşit uzaklıkta olmalıdır. </li></ol> 3. Radyal Su Basamalı Labirent Protokolü NOT: Su labaratuvarı testi ancak cerrahi alan iyileştikten sonra başlamalıdır (ameliyattan yaklaşık bir hafta sonra). <ol><li> Test için hazırlanıyor. <ol><li> Farelerin teste başlamadan önce en az 30 dakika boyunca test odasına alışmasına izin verin. </li><li> Cihazı% 70&#39;lik bir etanol spreyi kullanarak haşlayın. </li><li> Cihazı kabaca 1 inç soğuk (12-14 ° C) suyla doldurun. </li><li> Doğrudan kaçış kutusunun altına bir elektrikli ısıtma pedi veya diğer ısıtma kaynağı yerleştirin. Sınama süresi boyunca kaçış kutusunu karanlık ve sıcak tutun. </li><li> Cihaz üzerinde parlak bir ışık kaynağı yerleştirin. NOT: Hayvanları cihazdan araştırmak için görünür olabilecek bir lamba kullanılıyorsa, lambanın aynı poya yerleştirildiğinden emin olun.Her geçen gün. Lambanın kendisi, farelerin kaçış kutusunu bulmak için kullanabileceği başka bir görsel ipucu da olabilir ve her geçen gün büyük bir oranda hareket ettirmek sonuçların karmaşıklaşmasına neden olabilir. </li></ol></li><li> Test Protokolü <ol><li> Fareyi kuyruğundan nazikçe çıkarın ve aygıtın ortasına yerleştirin. </li><li> Hayvan alet içerisindeyken zamanlama başlar. </li><li> Hayvan doğru çıkışı bulduktan ve kaçış kutusunu bulduktan / girdikten sonra, zamanlamayı durdurun ve doğru yolu bulmak için gereken saniye sayısını kaydedin. </li><li> Eğer hayvan sonlanan bir deliğe tırmanmaya çalışırsa ve 10 saniye sonra kendiliğinden tekrar labirente girmezse, hayvanı labirentin merkezine elle geri götürün. </li><li> Hayvan, kaçış kutusuna doğru yolu 3 dakika içinde bulmazsa (180 saniye), duruşmayı bir başarısızlık olarak puanlayın ve 180 saniye olarak kaydedin. Hayvanı elle doğru yoldan dikkatlice yönlendirin. </li><li> Izin verFare, 1 dakika süreyle kaçış kutusunun içinde kalacak, deneme arası dinlenecek. </li><li> 1 dakika dinlenme bittikten sonra, hayvanı kaçış kutusundan çıkarın ve ev kafesine geri dönün. </li><li> Kaçış kutusunu iyice hortumlandırın ve farenin doğru kaçış yolunu bulmak için koku alma ipuçlarını kullanmasını önlemek için% 70 etanol spreyiyle çıkar. Bu adım birkaç saniyeden fazla sürmemelidir. </li><li> Bir sonraki deneme için fareyi labirente geri döndürün. </li><li> Fare toplam üç deneme tamamlanıncaya kadar ya da kaçış kutusuna üç kez ulaştığında ya da kaçış kutusu çıkana kadar, 3.2.1-3.2.9. Adımları yineleyin. </li><li> Son 1 dakikalık dinlenmeyi takiben, fare ev kafesine dönün. </li><li> Deney boyunca tutarlı sıcaklığın sağlanması için hayvanlar arasındaki cihazdaki suyu boşaltın ve değiştirin. </li><li> Test edilecek her fare için 3.2.1-3.2.12 adımlarını tekrarlayın. </li><li> Ertesi gün, 3.2.1-3.2.5 hazırlık adımlarını tekrarlayın. Görsel ipuçlarının kalmasını sağlamak için özen gösterinTest günleri arasındaki tutarlı pozisyonlarda. </li><li> Hayvanlar, yukarıdaki günlük test protokolünü kullanarak, dört gün boyunca (eğitim süresi) günde üç kez test edin ve beşinci güne bellek tutma için son üç deneme testi uygulayın. Onaltıncı günde bir altıncı üç deneme sınavı (Uzun Vadeli Hafıza alıkoyma) verilebilir. </li><li> Beşinci ve on ikinci günleri test etmek için herhangi bir test yapmayın. </li></ol></li><li> analiz <ol><li> Bir fare, iki günlük bir periyot boyunca 180 saniye altındaki labirenti tamamlayamazsa (diğer bir deyişle, toplam 180 s&#39;de atılan toplam 6 deneme), fare test koşulları tarafından yeteri kadar motive edilmiş sayılır ve analizden çıkarılır. </li><li> Deney tarihe göre üç günlük denemelerini o gün ortalaması alarak her bir öznenin labirentini tamamlamak için ortalama gecikme süresini hesaplayın. </li><li> Beşinci gün testinde ve uzun süreli bellek test tarihindeki grupları karşılaştırmak için standart t-testlerini kullanarak bellek tutma düzeyinde grup farklılıkları elde edin. Eğer mCevherin karşılaştırılması için, tek yönlü ANOVA ve ardından elde edilen herhangi bir anlamı izlemek için uygun post-hoc analizi (Tukey testi gibi) kullanılmalıdır. </li><li> Tekrarlanan ölçüm varyansı analizi vasıtasıyla edinme döneminde (1-4 günler arası) grup farklılıkları elde edin. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Levin, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioral+outcome+of+closed+head+injury:+Implications+for+clinical+trials.">Neurobehavioral outcome of closed head injury: Implications for clinical trials.</a> J. Neurotrauma. 12 (4), 601-610 (1995).</li><li>Schretlen, D., Shapiro, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+review+of+the+effects+of+traumatic+brain+injury+on+cognitive+functioning.">A quantitative review of the effects of traumatic brain injury on cognitive functioning.</a> Int Rev Psychiatry. 15 (4), 341-349 (2003).</li><li>Cline, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+application+of+a+radial+water+tread+maze+can+distinguish+cognitive+deficits+in+mice+with+traumatic+brain+injury.">Novel application of a radial water tread maze can distinguish cognitive deficits in mice with traumatic brain injury.</a> Brain Res. 1657, 140-147 (2017).</li><li>Ellenbroek, B., Youn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+in+neuroscience+research:+Is+it+a+rat+race?.">Rodent models in neuroscience research: Is it a rat race?.</a> Dis. Model. Mech. 9 (10), 1079-1087 (2016).</li><li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat.">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J. Neurosci Methods. 11 (1), 47-60 (1984).</li><li>Barnes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+deficits+associated+with+senescence:+A+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat.">Memory deficits associated with senescence: A neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> J. Comp. Physiol. Psych. 93 (1), 74-104 (1979).</li><li>Frick, K., Stillner, E., Berger-Sweeney, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+are+not+little+rats:+Species+differences+in+a+one-day+water+maze+task.">Mice are not little rats: Species differences in a one-day water maze task.</a> Neuroreport. 11 (16), 3461-3465 (2000).</li><li>Whishaw, I., Tomie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+Mice+and+Mazes:+Similarities+Between+Mice+and+Rats+on+Dry+Land+But+Not+Water+Mazes.">Of Mice and Mazes: Similarities Between Mice and Rats on Dry Land But Not Water Mazes.</a> Physiol Behav. 60 (5), 1191-1197 (1995).</li><li>Francis, D., Zaharia, M., Shanks, N., Anisman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress-induced+disturbances+in+Morris+water-maze+performance:+Interstrain+variability.">Stress-induced disturbances in Morris water-maze performance: Interstrain variability.</a> Physiol Behav. 58 (1), 57-65 (1995).</li><li>Wahlsten, D., Rustay, N., Metten, P., Crabbe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+search+of+a+better+mouse+test.">In search of a better mouse test.</a> Trends Neurosci. 26 (3), 132-136 (2003).</li><li>Crawley, , et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotypes+of+inbred+mouse+strains:+implications+and+recommendations+for+molecular+studies.">Behavioral phenotypes of inbred mouse strains: implications and recommendations for molecular studies.</a> Psychopharmacology. (Berl). 132 (2), 107-124 (1997).</li><li>Wahlsten, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+data+from+different+labs:+lessons+from+studies+of+gene-environment+interaction.">Different data from different labs: lessons from studies of gene-environment interaction.</a> J. Neurobiol. 54 (1), 283-311 (2002).</li><li>Rogers, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+SHIRPA+and+discriminant+analysis+to+characterise+marked+differences+in+the+behavioural+phenotype+of+six+inbred+mouse+strains.">Use of SHIRPA and discriminant analysis to characterise marked differences in the behavioural phenotype of six inbred mouse strains.</a> Behav Brain Res. 105 (2), 207-217 (1999).</li><li>Wolfer, D. P., Stagljar-Bozicevic, M., Errington, M. L., Lipp, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+Memory+and+Learning+in+Transgenic+Mice:+Fact+or+Artifact?.">Spatial Memory and Learning in Transgenic Mice: Fact or Artifact?.</a> Physiology. 13 (3), 118-123 (1998).</li><li>Koopmans, G., Blokland, A., Vannieuwenhuijzen, P., Prickaerts, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+spatial+learning+abilities+of+mice+in+a+new+circular+maze.">Assessment of spatial learning abilities of mice in a new circular maze.</a> Physiol Behav. 79 (4-5), 683-693 (2003).</li><li>Deacon, R., Rawlins, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+impairments+of+hippocampal-lesioned+mice+in+a+paddling+pool.">Learning impairments of hippocampal-lesioned mice in a paddling pool.</a> Behav Neurosci. 116 (3), 472-478 (2002).</li><li>Pettan-Brewer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+radial+water+tread+maze+tracks+age-related+cognitive+decline+in+mice.">A novel radial water tread maze tracks age-related cognitive decline in mice.</a> Pathobiol Aging Age Relat Dis. 3, 1-4 (2013).</li><li>Wiley, J., Pettan-Brewer, C., Ladiges, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenylbutyric+acid+reduces+amyloid+plaques+and+rescues+cognitive+behavior+in+AD+transgenic+mice.">Phenylbutyric acid reduces amyloid plaques and rescues cognitive behavior in AD transgenic mice.</a> Aging Cell. 10 (3), 418-428 (2011).</li><li>Enns, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+Protein+Kinase+A+in+Mice+Enhances+Healthy+Aging.">Disruption of Protein Kinase A in Mice Enhances Healthy Aging.</a> PLoS ONE. 4 (6), (2009).</li><li>Ivonen, H., Nurminen, L., Harri, M., Tanila, H., Puolivali, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermia+in+mice+tested+in+Morris+water+maze.">Hypothermia in mice tested in Morris water maze.</a> Behav Brain Res. 141 (2), 207-213 (2003).</li><li>Shultz, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor+is+neuroprotective+in+experimental+traumatic+brain+injury.">Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor is neuroprotective in experimental traumatic brain injury.</a> J Neurotrauma. 31 (10), 976-983 (2014).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Burada sunulan RWT labirent protokolü, CCI ile indüklenen TBI fareleri ve sahte kontrolleri arasında başarılı bir şekilde ayrım yapıyor ve MWM ve Barnes dairesel labirentine alternatif olarak fare merkezli bir alternatif sunuyor. Burada bildirilen sonuçlar yalnızca bir TBI fare modelinde RWT labirentinin kullanımıyla ilgiliyken, bu cihaz yaşlı ve transjenik modellerde başarılı bir şekilde kullanılmıştır; burada, MWM pratik 15 , 17 ile yap?...

Bellek bozuklukları travmatik beyin hasarını takiben hastalar tarafından bildirilen en yaygın semptomlardır ( 1 , 2) . Bu nedenle, TBI hayvan modellerinde benzer bellek eksikliklerinin doğru bir şekilde belirlenmesi ve değerlendirilmesi, bu durumun anlaşılması ve yönetimi için esastır. Burada, bir Radial Su Basamağı (RWT) labirentini kullanarak TBI fare modelinde mekansal belleği test etmek için bir protokol sunuyoruz. Bu cihaz, daha önce, kontrollü kortikal etki (CCI) ile tetiklenen TBI 3&#39;ün fare modellerinde bilişsel eksiklikleri değerlendirmek üzere gösterilmiştir ve sıçanın geçerliliği olan yüz tanımaya dayalı yüz tanıma testlerine alternatif bir alternatif teşkil etmektedir. Transgenik fare modellerinin çeşitliliği ve bulunabilmesi, bilimsel araştırmada farelerin farelerde kullanımında son yıllarda artışa neden olmuştur 4 . Bu kaymaya rağmen, araştırmacılar davranışsal veVe ilk olarak sıçan kullanımı için tasarlanmış ve onaylanmış bilişsel görevler. Farelerde biliş değerlendirmek için şu anda kullanılan en yaygın testler, Morris Su Labirenti (MWM) ve Barnes dairesel labirenti, 5 , 6 sıçanlarında bulunan içgüdüsel davranışları değerlendirmek için özel olarak tasarlanmıştır. Bu iki tür 4. arasında mevcut genetik neuroethological ve bilişsel farklılıklar dikkate alındığında, şaşırtıcı olduğu farenin bu görevler 7, 8, sürekli düşük performans. Test yeteneğinde cinsiyete bağlı farklılıklar, özellikle MWM gibi yüzme ağırlıklı bilişsel testlerde görülür. Her iki sıçan ve fareler iyi yüzücüler iken araştırmacılar, yüzme ağırlıklı bilişsel görevler üzerinde oldukça düşük performans gösteren birkaç fare suşu tespit ettiler. 9 , 10 , </Sup&gt; 11 , 12 , 13 . Vahşi tipli hayvanlarda bile sıçanlar genellikle fareler 7 , 8&#39;den daha iyi performans gösterirler. Bu uzamsal bellekte bir türe özgü fark olarak yorumlanabilir rağmen, kuru kara labirent kullanılarak analog takip testi bilişsel performans 8&#39;de hiçbir türe bağımlı farklılıklar ortaya çıkardı. Yüzme yeteneği veya arama stratejisinde tür bağımlı farklılıklar da dahil olmak üzere, bu bulguyu, bilişle ilgisi olmayan bir dizi faktör hesaplayabilir. Gerçekten de, MWM&#39;deki fare spesifik arama stratejilerinin faktör analizi, bilişsel olmayan faktörlerin (özellikle, tigomotaks ve pasiflik [ yani , yüzen]) MWM performansında mekansal öğrenmeden 14 daha önemli rol oynayabileceğini göstermektedir. Burada, içeri girmek için tasarlanmış bir bilişsel testin kullanımını göstermektedirFarelerin stentik davranışı ve yüzme gerektirmeyen, CCI kaynaklı TBI fare modelinde mekansal bellek bozukluğunu ölçmek için kullanılmıştır. RWT labirenti ( Şekil 1 A-B ), MWM ve Barnes dairesel labirentinin yeni bir hibrid olarak düşünülürken, fareler 15 , 16&#39;ya içgüdüsel tigmotaktik davranışından yararlanmak için özel olarak tasarlanmıştır. Cihaz 32 inç çapında galvanize edilmiş çelik bir küvete sahiptir ve içerisinde dokuz adet eşit aralıklarla yerleştirilmiş çıkış delikleri bulunmaktadır. Delikler, küvetin tabanının 2-1 / 4 inç üstünde ortalanır ve yaygın olarak bulunan 1-1 / 2 inç ABS DWV SPG x SJ tuzak adaptörlerine uyacak şekilde boyutlandırılır. Çıkışların sekizi dışarıdan kapatıldı ve lastik tıkaçlarla 1 inç derinliğe kadar körleştirildi. Dokuzuncu madde, 90 ° akrilonitril bütadien stiren (ABS) dirseğinden, testten sonra fare kolayca çıkarılacak olan opak plastik bir kutuya bağlanır. A süresinceKısa bilgi edinme döneminde, fare, bu kaçış kutusunu bulmak için labirenti astarlayan benzersiz görsel ipuçlarını kullanacak şekilde eğitilir. Test sırasında labirent, bir kaç santigrat soğuk suyla (12-14 ° C) doldurulur, kaçışını teşvik edecek kadar yeterince aversive, ancak farenin yüzmesi gerektiği kadar derin değildir. RWT labirenti MWM&#39;ye düşük maliyetli, bakım gerektirmeyen bir alternatiftir ve 15 , 17 , 18 , 19 yaşlı ve transjenik farelerde, TBI 3&#39;ün CCI kaynaklı fare modellerinde başarılı bir şekilde kullanılmıştır. Burada özetlenen protokol, yaralanma öncesi eğitim gerektirmeyen, mekansal bellek bozukluğunu ölçmek için basit ve etkili bir yöntemi temsil eder ve bir araştırma laboratuvarının özel ihtiyaçlarına göre kolayca değiştirilebilir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="937">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:304px;">35 Gal. Hot Dipped Steel Round Tub</td>
			<td style="width:123px;">Home Depot</td>
			<td style="width:344px;">&#160;Internet #206638142</td>
			<td style="width:167px;">Needed: 1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1-1/2 in. ABS DWV SPG x SJ Trap Adapter</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>Internet #100344703, Store SKU #188956</td>
			<td>Needed: 9</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1-3/4 in. x 1-7/16 in. Black Rubber Stopper</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>Internet #100114974 Store SKU #755844</td>
			<td>Needed: 8</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">1-1/2 in. ABS DWV 90 Degree Hub x Hub Elbow</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>Internet #100346663 Store SKU #188603</td>
			<td>Needed: 1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:304px;">HDX 
			10 Gal. Storage Tote</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>Internet #202523587 Store SKU #258804 Store SO SKU #258804</td>
			<td>Needed: 1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Impact One Stereotaxic Impactor for CCI</td>
			<td>Leica Biosystems&#160;</td>
			<td>39463920</td>
			<td>Needed: 1</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Vernier Stereotaxic w/ Manual Fine Drive Stereotaxic Instrument for Small Animals</td>
			<td>Leica Biosystems&#160;</td>
			<td>39463001</td>
			<td>Needed: 1</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing spatial memory impairment in a mouse model of traumatic brain injury using a radial water tread maze

Bilimsel araştırmalarda fare modellerinin kullanımındaki son artışa rağmen, araştırmacılar başlangıçta tasarlanmış ve fare kullanımı için onaylanmış bilişsel görevleri kullanmaya devam ediyor. Uzamsal hafızanın radyal su izi (RWT) labirent testi (fareler için özel olarak tasarlanmış ve yüzme gerektirmemesi) daha önce kontrollü kortikal darbe kaynaklı TBI fareleri ve sahte kontroller arasında başarılı bir şekilde ayrım yapmış olarak gösterilmiştir. Burada, bu görev için ayrıntılı bir protokol sunulmuştur. RWT labirenti, farelerin, açık alanlardan kaçınarak, bir aygıtın kenarlarını sarmak (tigmotaksis) lehine doğal bir eğilimden yararlanmaktadır. Labirentin duvarları, cihazın zemininin üzerine yerleştirilmiş dokuz kaçış deliği ile kaplanmıştır ve fareler, labirentin dışına çıkan kaçış deliğinin yerini belirlemek için görsel ipuçları kullanmaları için eğitilmektedir. Labirent, bir kaç santigrat soğuk suyla doluyor, kaçışı motive etmeye yeterli ama fare suyunun yüzmesini gerektirmeyecek kadar derin değil. Edinme süresi yalnızca dört eğitim alırGün beş haftalık hafıza testi ve 12. günde uzun süreli hafıza testi ile test edildi. Burada bildirilen sonuçlar, RWT labirentinin sıçanın geçerliliği olan, yüzme temelli bilişsel testlere uygulanabilir bir alternatif olduğunu göstermektedir. TBI fare modellerinde hafıza eksikliği.

RWT labirenti ( Şekil 1 ), kontrollü kortikal darbe kaynaklı TBI veya sahte cerrahi almak için rasgele atanan farelerde yaralanmaya bağlı mekansal hafıza defisitlerini araştırmak için kullanılmıştır. Zarar, 3 mm dışbükey ucu olan bir solenoid tahrikli kortikal darbe ve aşağıdaki yaralanma parametreleri kullanılarak üretildi: 6 m / s grev hızı, 1 mm penetrasyon derinliği ve 200 ms temas süresi. Fareler, cerrahiden 35 gün sonra başl...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze at JoVE.com

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

Burada, yüzmeye ihtiyaç duymayan bilişe ait fare-spesifik bir test için bir protokol sunuyoruz. Bu test kontrollü kortikal darbe kaynaklı travmatik beyin hasarı farelerini sahte kontrollerden başarılı bir şekilde ayırt etmek için kullanılabilir.

Radyal bir Su Basamalı Labirent Kullanarak Travmatik Beyin Hasarı Fare Modelinde Mekansal Bellek Bozukluğunu Değerlendirme

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

assessing-spatial-memory-impairment-mouse-model-traumatic-brain

Research

JoVE Journal

Behavior

7.0K Görüntüleme.  University of Washington.  Burada, yüzmeye ihtiyaç duymayan bilişe ait fare-spesifik bir test için bir protokol sunuyoruz. Bu test kontrollü kortikal darbe kaynaklı travmatik beyin hasarı farelerini sahte kontrollerden başarılı bir şekilde ayırt etmek için kullanılabilir. 

Video: Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

Shallow Water (Paddling) Variants of Water Maze Tests in Mice

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to the mouse becoming increasingly important. But researchers found that some strains of mutant mice were prone to problems like passively floating or diving when they were tested in the Morris water maze11. This was unsurprising considering their natural habitat; rats swim naturally (classically, the "sewer rat"), whereas mice evolved in the dry areas of central Asia.
To overcome these problems, it was considered whether shallow water would be a sufficient stimulus to provide escape motivation for mice. This would also avoid the problems of drying the small creatures with a towel and then putting them in a heated recovery chamber to avoid hypothermia, which is a much more serious problem than with rats; the large ratio of surface area to volume of a mouse makes it particularly vulnerable to rapid heat loss.
Another consideration was whether a more natural escape strategy could be used, to facilitate learning. Since animals that fall into water and swim away from the safety of the shore are unlikely to pass on their genes, animals have evolved a natural tendency to swim to the edge of a body of water. The Morris water maze, however, requires them to swim to a hidden platform towards the center of the maze - exactly opposite to their evolved behavior. Therefore the paddling maze should incorporate escape to the edge of the apparatus. This feature, coupled with the use of relatively non-aversive shallow water, embodies the "Refinement" aspect of the "3 Rs" of Russell and Burch8.
Various types of maze design were tried; the common feature was that the water was always shallow (2 cm deep) and escape was via a tube piercing the transparent wall of the apparatus. Other tubes ("false exits") were also placed around the walls but these were blocked off. From the inside of the maze all false exits and the single true exit looked the same. Currently a dodecagonal (12-sided) maze is in use in Oxford, with 12 true/false exits set in the corners. In a recent development a transparent paddling Y-maze has been tested successfully.

Shallow Water Paddling Variants of Water Maze Tests in Mice

Mice can swim, but many strains appear to find this activity stressful. To overcome this problem mazes have been devised where escape from shallow water is used to motivate behaviour. These have been demonstrated to support learning at least as good as the traditional and widely used Morris water maze.

Farelerde Su Maze Testleri Sığ Su (kürek çekmeye) Türevleri

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to ...

Davranış

Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food deprivation, and may introduce scent cue confounds. The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs. Specifically, subjects are required to avoid the arms previously used for escape during each testing day (working memory) as well as avoid the fixed arms, which never contain escape platforms (reference memory). Re-entries into arms that have already been used for escape during a testing session (and thus the escape platform has been removed) and re-entries into reference memory arms are indicative of working memory deficits. Alternatively, first entries into reference memory arms are indicative of reference memory deficits. We used this maze to compare performance of rats with neonatal brain injury and sham controls following induction of hypoxia-ischemia and show significant deficits in both working and reference memory after eleven days of testing. This protocol could be easily modified to examine many other models of learning impairment.

The eight-arm radial water maze is designed to evaluate reference and working memory performance simultaneously by requiring subjects to use extra-maze cues to locate escape platforms and remedies the limitations observed in land based radial arm maze designs.

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

Çift H Maze: Kemirgenler A Sağlam Davranış Öğrenme için test ve Hafıza

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

Morris Water Maze Testi: Fare Gerilme ve Test Ortamı için Optimizasyon

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, few studies have investigated the long-term effects of injury in rodent models of TBI. Shown here are behavioral measures that are well-established in TBI research for times early after injury, such as two weeks, until two months. Some of these methods have previously been used at later times after injury, up to one year, but by very few laboratories. The methods demonstrated here are a short neurological assessment to test reflexes, a Beam-Balance to test balance, a Beam-Walk to test balance and motor coordination, and a working memory version of the Morris water maze that can be sensitive to deficits in reference memory. Male rats were handled and pre-trained to neurological, balance, and motor coordination tests prior to receiving parasagittal fluid percussion injury (FPI) or sham injury. Rats can be tested on the short neurological assessment (neuroscore), the beam-balance, and the Beam-Walk multiple times, while testing on the water maze can only be done once. This difference is because rats can remember the task, thus confounding the results if repeated testing is attempted in the same animal. When testing from one to three days after injury, significant differences are detected in all three non-cognitive tasks. However, differences in the Beam-Walk task were not detectable at later time points (after 3 months). Deficits were detected at 3 months in the Beam-Balance and at 6 months in the neuroscore. Deficits in working memory were detected out to 12 months after injury, and a deficit in a reference memory first appeared at 12 months. Thus, standard behavioral tests can be useful measures of persistent behavioral deficits after FPI.

The goal of the behavioral tests presented here is to detect functional deficits in rats after traumatic brain injury. Four specific tests are presented that detect deficits in behaviors to reflect the damage to specific brain areas at times extending to one year after injury.

Travmatik beyin hasarı sonra Sıçanlarda algılama davranış açıkları

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Using Laser Doppler Imaging and Monitoring to Analyze Spinal Cord Microcirculation in Rat

Laser Doppler flowmetry (LDF) is a noninvasive method for blood flow (BF) measurement, which makes it preferable for measuring microcirculatory alterations of the spinal cord. In this article, our goal was to use both Laser Doppler imaging and monitoring to analyze the change of BF after spinal cord injury. Both the laser Doppler image scanner and the probe/monitor were being employed to obtain each readout. The data of LDPI provided a local distribution of BF, which gave an overview of perfusion around the injury site and made it accessible for comparative analysis of BF among different locations. By intensely measuring the probing area over a period of time, a combined probe was used to simultaneously measure the BF and oxygen saturation of the spinal cord, showing overall spinal cord perfusion and oxygen supply. LDF itself has a few limitations, such as relative flux, sensitivity to movement, and biological zero signal. However, the technology has been applied in clinical and experimental study due to its simple setup and rapid measurement of BF.

Here we present a combination of laser Doppler perfusion imaging (LDPI) and laser Doppler perfusion monitoring (LDPM) to measure spinal cord local blood flows and oxygen saturation (SO2), as well as a standardized procedure for introducing spinal cord trauma on rat.

Lazer Doppler görüntüleme ve izleme sıçan Spinal kord mikro analiz etmek için kullanma

Laser Doppler flowmetry (LDF) is a noninvasive method for blood flow (BF) measurement, which makes it preferable for measuring microcirculatory ...

A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often stereotyped actions elicited in response to innately aversive sensory stimuli, but their success requires enough flexibility for adapting to different spatial environments, which can change rapidly. Here, we describe a behavioral assay to evaluate the influence of learned spatial knowledge on defensive behaviors in mice. We have adapted the widely used Barnes maze spatial memory assay to investigate how mice navigate to a shelter during escape responses to innately aversive sensory stimuli in a novel environment, and how they adapt to acute changes in the environment. This new assay is an ethological paradigm that does not require training and exploits the natural exploration patterns and navigation strategies in mice. We propose that the set of protocols described here are a powerful means of studying goal-directed behaviors and stimulus-triggered navigation, which should be of interest to both the fields of instinctive behaviors and spatial memory.

This protocol describes a behavioral assay, based on the Barnes maze test, to study how instinctive defensive actions are modified by the knowledge of spatial environment.

Fareler içgüdüsel savunma sırasında kayma bellek rolünün araştırılması için davranışsal bir tahlil

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

Stress-Enhanced Fear Learning, a Robust Rodent Model of Post-Traumatic Stress Disorder

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders such as post-traumatic stress disorder (PTSD). To understand the biological mechanisms of fear dysregulation in PTSD, it is important to start with a valid animal model of the disorder. This protocol describes the methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of PTSD, in both rats and mice. SEFL was developed to recapitulate critical aspects of PTSD, including long-term sensitization of fear learning caused by an acute stressor. SEFL uses aspects of Pavlovian fear conditioning but produces a distinct and robust sensitized fear response far greater than normal conditional fear responses. The trauma procedure involves placing a rodent in a conditioning chamber and administering 15 unsignaled shocks randomly distributed over 90 minutes (for rat experiments; for mouse experiments, 10 unsignaled shocks randomly distributed over 60 minutes are used). On day 2, rodents are placed in a novel conditioning context where they receive a single shock; then, on day 3 they are placed back in the same context as on day 2 and tested for changes in freezing levels. Rodents that previously received the trauma display enhanced levels of freezing on the test day compared to those that received no shocks on the first day. Thus, with this model, a single highly stressful experience (the trauma) produces extreme fear of the stimuli associated with the traumatic event.

Here we describe the detailed methodology required to conduct stress-enhanced fear learning (SEFL) experiments, a preclinical model of post-traumatic stress disorder, in both rats and mice. The model utilizes aspects of Pavlovian fear conditioning and freezing as an index of enhanced fear in rodents.

Stres gelişmiş korku öğrenme, travma sonrası stres bozukluğu güçlü bir kemirgen modeli

Fear behaviors are important for survival, but disproportionately high levels of fear can increase the vulnerability for developing psychiatric disorders ...

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various physiological or pathological changes. The object location task (OLT) and the novel object recognition task (NORT) are two effective behavioral tasks commonly used to reveal the function and relative health of specific brain regions involved in memory. While both of these tests exploit the inherent preference of mice for the novelty to reveal memory for previously encountered objects, the OLT primarily evaluates spatial learning, which relies heavily on hippocampal activity. The NORT, in contrast, evaluates non-spatial learning of object identity, which relies on multiple brain regions. Both tasks require an open-field-testing arena, objects with equivalent intrinsic value to mice, appropriate environmental cues, and video recording equipment and the software. Commercially available systems, while convenient, can be costly. This manuscript details a simple, cost-effective method for building the arenas and setting up the equipment necessary to perform the OLT and NORT. Furthermore, the manuscript describes an efficient testing protocol that incorporates both OLT and NORT and provides typical methods for data acquisition and analysis, as well as representative results. Successful completion of these tests can provide valuable insight into the memory function of various mouse model systems and appraise the underlying neural regions that support these functions.

Here we provide a protocol which includes comprehensive instructions for the economical establishment of murine object location and novel object recognition behavioral testing, including the design, cost, and construction of required equipment as well as execution of behavioral testing, data collection, and analysis.

Yeni nesne tanıma ve nesnenin konumunu bir bütçe farelerde test davranış

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Analysis of Learning and Memory Ability in an Alzheimer's Disease Mouse Model using the Morris Water Maze

A Morris water maze (MWM) experiment forces experimental animals to swim and learn to find a platform hidden in the water. It is widely used in scientific research to assess the learning and memory of animals. Due to the extensive use of the MWM test, visual experimental protocols are essential for researchers. This manuscript uses the latest studies to introduce the protocol of the MWM test. Alzheimer&#8217; Disease (AD) is characterized by a progressive loss of memory and cognitive function. An alternative and complementary treatment used for AD is Manual Acupuncture (MA). To assess the learning and memory ability of AD model mice, the MWM test was conducted. The visible platform trial, hidden platform trial, probe trial, and reversal trial of MWM were used to evaluate spatial learning and memory ability. In the visible platform trial, the swimming speed and escape latency of mice in different groups was not significantly different. In the hidden platform and reversal trials, the AD group showed a long escape latency. The escape latency decreased significantly after the MA treatment. Low platform crossover number and the proportion of time in the SW quadrant in the probe trial increased after the MA treatment (p &#60; 0.05 or p &#60; 0.01). The results of the MWM tests suggest that MA can effectively improve the spatial learning and memory abilities of AD model mice. Rigorous experimental operations provided assurance of the reliability of the results.

Herein, a protocol to conduct the Morris water maze tests to evaluate the ability of learning and memory of Alzheimer&#8217;s Disease model mice and to assess the effect of manual acupuncture for treating them is described.

Morris Su Labirenti Kullanarak Alzheimer Hastalığı Fare Modelinde Öğrenme ve Hafıza Yeteneğinin Analizi

A Morris water maze (MWM) experiment forces experimental animals to swim and learn to find a platform hidden in the water. It is widely used in scientific ...