Fare Orthotopic metastatik meme kanseri Model oluşturma ve fare radikal mastektomi gerçekleştirme

Bu yöntem, bir fare modelinde insan meme kanseri ilerleme ve tedavi taklit hakkında meme kanseri alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir. Bu fare meme kanseri modelinin en büyük avantajı ortotopik implantasyon sonrası yüksek tümörigenez oranına ve mastektomi sonrası düşük lokal nüks oranına sahip olmasıdır. Anestezili dişi farede ayak parmak kıskacına yanıt eksikliğini onaylayarak ve hayvanın uzuvlarını cerrahi tahtaya bantlayarak başlayın.

Steril pamuk bezleri nin kullanılması cerrahi bölgeyi klorheksidin, iyot ve %75 etanol ile sterilize eder. Ve ön göğüs duvarının ortasında beş milimetrelik deri kesiği yapın. Sonraki kesi bitişik cildin sağ tarafını kaldırın ve göğüs duvarından cilt ayırmak için steril mikrodiseksiyon makası kullanın.

Doğru iki numaralı meme yağ yastığıortaya çıkarmak için cilt ters ve dikkatle yağ yastığı içine yara yoluyla kanser hücresi süspansiyon 20 mikrolitre enjekte etmek için 28,5-gauge iğne ile donatılmış bir mililitrelik insülin şırınga kullanın. Jelatinimsi kanser hücresi protein karışımının iğneyi çıkarmadan önce katılaşmasını sağlamak ve kesiyi steril 5-0 emilemez dikişlerle kapatmak için iğneyi yağ yastığının içinde beş saniye tutun. Sonra tam recumbency kadar izleme ile temiz bir kafese hayvan yerleştirin.

Kanser aşısı sekiz gün sonra mastektomi gerçekleştirmek için sadece gösterildiği gibi cerrahi için fare hazırlamak, ve kanser hücresi inoülasyonu cerrahi yara iki milimetre solunda beş milimetrelik deri kesi yapmak. Tümörü çıkarmak için ön ekstremite köküne doğru kesi genişletin, ve deri, cerrahi yara dahil, ve tümör ile temas lezyon, ve genellikle görünür lenf düğümleri mastektomi sırasında mevcut aksiller lenf düğümü havzası. Daha sonra y.şeklinde steril 5-0 emilir dikişler ile cilt kusurlarını kapatın ve tam görevde kalakadar izleyerek hayvanı kafesine geri döndürün.

İnogülasyondan 21 gün sonra akciğer metastazı niceliği için ötanaziden 15 dakika önce d-Luciferin IP kilogramı başına 150 miligram enjekte edin. Ve orta karın deri ve periton açmak için kavisli Mayo makas kullanın. Diyafram görüntülenebilir kadar karaciğer aşağı basın, ve diyafram ve bilateral kaburga caudad cephalad kesti.

Akciğerleri ortaya çıkarmak için ön toraks duvarını çevirin ve akciğerleri kaldırarak akciğerleri omurilikle bağlayan bir kordona benzeyen torasik özofagusu tanımlayın. Mikrodiseksiyon makas ile yemek borusu kesin ve kaudad doğru ikili akciğerler ve kalp çekmek için forceps kullanın. Sonra sefalad de akciğer apeks için trakea ve büyük damarları kesmek ve biyolüminesans görüntüleme için 10 santimetre Petri çanak içine akciğerler yerleştirin.

Akciğer dokusundan kalp kaldırmak için makas kullanın. Meme yağ yastığı kanser hücresi aşılama yaklaşık sekiz gün sonra başlayan akciğerlerde biyolüminesans daha derin ve canlı farelerde birincil tümör yükünü yansıtan primer lezyon daha küçüktür. Kaliperlerle tümör boyutunun ölçülmesi, tümör hacminin yerinde tahmin insasına olanak sağlar.

Bu mastektomi modeli aynı zamanda hayvanları ötenazi ye gerek kalmadan seri metastatik tümör yükünün izlenmesine olanak sağlar. Akciğer metastazlarının tümör yükü de ex vivo görüntüleme ile ölçülebilir, ancak sınırlama farelerin ötenazi olması gerektiğidir. Cerrahi tedavi sonrası fare sağkalım da translatable klinik uç nokta olarak izlenebilir.

Bu teknik, geliştirilmesinden sonra meme kanseri alanında araştırmacıların sadece yeni ilaç gelişimini değil, genel olarak meme kanseri araştırmalarını da keşfetmelerinin önünü açmıştır.