Murine Orthotopic 전이성 유방암 암 모델을 생성 하 고 수행 Murine 과격 한 유 방 절제술

이 방법은 마우스 모형에 있는 인간적인 유방암 진행 그리고 처리를 모방하는 방법에 관하여 유방암 필드에 있는 중요한 질문에 대답하는 것을 도울 수 있습니다. 이 마우스 유방암 모델의 주요 장점은 정형소 이식 후 종양 발생률이 높고 유방 절제술 후 국소 재발률이 낮다는 것입니다. 먼저 마취된 여성 마우스에 발가락 꼬집어에 대한 반응이 부족한지 확인하고 동물의 팔다리를 수술 보드에 테이핑하는 것으로 시작합니다.

멸균 면봉을 사용하여 클로르헨시딘, 요오드 및 75 %의 에탄올로 수술 부위를 살균합니다. 그리고 전방 가슴 벽의 중간에 5 밀리미터 피부 절개를합니다. 다음으로 절개에 인접한 피부의 오른쪽을 들어 올리고 멸균 미세 절 가위를 사용하여 가슴 벽에서 피부를 분리합니다.

피부를 반전하여 올바른 2번 유방 지방 패드를 노출시키고 28.5게이지 바늘이 장착된 1밀리리터 인슐린 주사기를 사용하여 상처를 통해 암세포 현탁액 20마이크로리터를 조심스럽게 지방 패드에 주입합니다. 젤라틴 암 세포 단백질 혼합물이 바늘을 제거하기 전에 고화할 수 있도록 지방 패드 내에서 5 초 동안 바늘을 잡고 멸균 5-0 비흡수성 봉합사로 절개를 닫습니다. 그런 다음 동물을 깨끗한 케이지에 넣고 전체 재조정이 있을 때까지 모니터링합니다.

암 접종 후 8일 간 유방절제술을 수행하여 마우스를 수술에 준비하고, 암세포 접종으로부터 수술 흉터의 왼쪽에 2밀리미터의 5mm 피부 절개를 한다. 종양을 제거하기 위해 앞다리의 뿌리쪽으로 절개를 확장하고, 외과 적 흉터를 포함한 피부, 및 종양과 접촉하는 병변, 및 전형적으로 눈에 보이는 림프절 분지가 유방 절제술시에 존재하지 않는 축삼 림프절 분지. 그런 다음 Y.의 모양으로 멸균 5-0 비흡수성 봉합사로 피부 결함을 닫고 전체 주무일까지 모니터링하여 동물을 케이지로 되돌려 줍니다.

폐 전이 정량화의 경우 접종 후 21 일 D-루시페린 IP의 킬로그램 당 150 밀리그램을 주입 15 분 전에 안락사. 그리고 곡선 마요 가위를 사용하여 중간 복부에서 피부와 복막을 엽니 다. 다이어프램이 시각화될 때까지 간을 누르고, 다이어프램과 카다드에서 세팔라드로 양자 간 갈비뼈를 잘라냅니다.

전방 흉부 벽을 뒤집어 폐를 노출시키고 폐를 들어 올려 폐를 척추에 연결하는 코드처럼 보이는 흉부 식도를 식별합니다. 미세 절 가위로 식도를 자르고 집게를 사용하여 양측 폐와 심장을 카우다드쪽으로 당깁니다. 그런 다음 기관및 주요 혈관을 세팔라드의 폐 정점에 잘라 내고 폐를 생물 발광 이미징을 위해 10센티미터 페트리 접시에 넣습니다.

가위를 사용하여 폐 조직에서 심장을 제거하십시오. 유방 지방 패드 암 세포 접종 후 약 8 일에서 시작하여 폐의 생물 발광은 살아있는 마우스의 1 차적인 종양 부담을 반영하는 1 차적인 병변보다 더 깊고 작습니다. 캘리퍼로 종양 크기의 측정은 그 중종양 부피의 추정을 허용한다.

이 유방 절제술 모델은 또한 동물을 안락사시킬 필요 없이 연쇄 전이성 종양 부담 모니터링을 허용합니다. 폐 전이의 종양 부담은 또한 전 생체 영상에 의해 정량화될 수 있습니다, 그러나 한계는 마우스가 안락사되어야 한다는 것입니다. 외과 적 치료 후 마우스 생존은 또한 번역 가능한 임상 종점으로 모니터링 될 수있다.

개발 후이 기술은 유방암 분야의 연구자들이 신약 개발뿐만 아니라 일반적으로 유방암 연구를 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.