Yazarlar, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'nın (61822505; 11774101; 61627827; 81630046), Çin'in Guangdong Eyaleti Bilim ve Teknoloji Planlama Projesi (2015B02020233016) ve Guangzhou Bilim ve Teknoloji Programı (No. 2019020001).

Tüm hayvan deneyleri, Güney Çin Normal Üniversitesi, Guangzhou, Çin'in kurumsal hayvan bakım ve kullanım komitesi tarafından sağlanan yönergelere uygun olarak gerçekleştirildi.
1. Sistem Kurulumu
<ol><li>Optik yol (Şekil 1)<ol>
<li>Sistem lazer kaynağı olarak 532 nm darbe lazer kullanın. Lazerin tekrarlama hızını 10 kHz, çıkış enerjisini %100 ve tetik ayarını kullanıcı tanımlı bir program kullanarak harici tetikleyici olarak ayarlayın.</li>
		<li>Lazer ışınını optik fiber bağlayıcı (FC1) ile tek modlu fibere (SMF) birleştirir. Lazer ışınını iki boyutlu motorlu bir aşamada (Motor, maksimum hız: 20 mm/sn) optik fiber kolimatör (FC2) kullanarak işle.</li>
		<li>İki eksenli galvanometre tarayıcı (Galva) kullanarak lazer ışınını saptırın. Işını yansıtmak için hareket ettirilebilir bir ayna (M1) kullanın. Işını 4 × objektif bir mercekle odakla (OL, Sayısal diyafram: 0.1).</li>
		<li>Kendi kendine yapılan içi boş ultrasonik dönüştürücüyü (UT, Merkezi frekans: 25 MHz) düzeltmek için bir XY çevirmen montajı (TM) kullanın; Bant genişliği: %90'dan fazla; Orta delik: 3 mm) OL12'nindibinde. Odaklanmış kirişi ultrasonik dönüştürücünün orta deliğinden geçirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tarama yolu<ol>
<li>GALVA'yı WIM sırasında alan programlanabilir bir kapı dizisi (FPGA 2) kullanarak kilitleyin. Kullanıcı tanımlı bir program tarafından uygun tarama aralığını ve tarama hızını ayarlayın.</li>
		<li>RIM sırasında sahada programlanabilir bir kapı dizisi (FPGA 1) kullanarak Motoru kilitleyin. FPGA 2 kullanarak tarama sıklığını ve tarama noktalarının sayısını ayarlayın. Başlatmayı denetlemek ve taramayı durdurmak için kullanıcı tanımlı bir program kullanın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Veri toplama<ol>
<li>PA sinyalini yükseltmek için 50 dB amplifikatör (AMP) kullanın. Sinyali veri toplama kartına (DAQ) göre dijitalleştirin. Tetik sinyalini FPGA 1 veya FPGA 2 üzerinden alın.</li>
		<li>Verileri işlemek ve görüntüleri paralel olarak görüntülemek için bir grafik işlem birimi (GPU) kullanın13.</li>
	</ol>
</li>
	<li>CCD görüntüleme sistemi<ol>
<li>Halka şeklinde beyaz bir LED kullanın (Renk sıcaklığı: 6500 K; Illuminance: 40000 lüks; Çap: 7,5 cm) aydınlatma kaynağı olarak. M1'i çıkarın, ışığı yansıtmak için sabit bir ayna (M2) kullanın.</li>
		<li>Görüntüleri PA görüntüleme sistemine ccd kamera (6,3 milyon piksel) kullanarak kaydedin. Görüntüleri bir görüntüleme yazılımıyla görüntüleyin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Sistem hizalaması
<ol><li>Bir su deposu seçin (10 cm × 10 cm × 4,4 cm; alt pencere: 3 cm × 3 cm). Tüm su deposunu bir polietilen membran (membran kalınlığı: 10 μm) kullanarak örtün. Yeterli ultra saf su ekleyin.</li>
	<li>Su haznesini çalışma aşamasına yerleştirin.</li>
	<li>Lazer anahtarını aç. Lazer kontrol programını seçin. 5 dakika önceden ısıtın. Pompalama düğmesindeki "AÇ" düğmesine basın. Lazer parametrelerini adım 1.1.1'e göre ayarlayın. Lazerin şaşkınlıklarını aç.</li>
	<li>Toplanan A satırı programını seçin. Tek nokta sinyalini yakalamak ve mevcut A-line sinyalinin genliğini ve spektrumu görüntülemek için "Başlat" düğmesine basın.</li>
	<li>Su deposunun dibine bir bıçak yerleştirin. Akustik bağlantı için UT'nin alt kısmını su haznesi içine daldırın. UT'nin alt kısmında kabarcıklardan kaçının.</li>
	<li>Galva'nın konumunu ayarlayın, salınım sinyalini önlemek için UT ve OL arasındaki XY çevirmenini ayarlayın ve bunun konfokal olduğundan emin olun.</li>
	<li>Sinyalin genliğini en üst düzeye çıkarmak için çalışma aşamasının yüksekliğini ayarlayın ve odak konumunu belirleyin.</li>
</ol>3. Hayvan deneyi
<ol><li>Vücut ağırlığı 20\u201230 g olan 5\u20126 haftalık balb/c fare kullanın.</li>
	<li>Deneyden önce intraperitoneally enjekte edilen üretan (1 g/kg) kullanarak hayvanı uyuşturun.</li>
	<li>WIM ve RIM arasında geçiş gerçekleştirin.<ol>
<li>Düzlemsel ultrasonik dönüştürücü kullanın. Düzeltici ve depilatör krem kullanarak farenin sırtındaki kürkü tıraş edin. Fareyi tutucunun üzerine (8 cm × 2,8 cm × 2 cm) eğilimli konumda yerleştirin.</li>
		<li>Ultrason jeli kullanarak görüntüleme bölgesinin polietilen membranla temas etmesine izin verin. Temas kısmında kabarcıklardan kaçının.</li>
		<li>Tutucuyu akustik bağlantı için çalışma sahnesine yerleştirin. Lazeri başlatmak ve A hattı sinyali toplamak için 2.3\u20122.4 adımlarını izleyin. Hizalamak için 2.6\u20122.7 adımlarını izleyin. Hizalamadan sonra koleksiyonu sonlandırmak için "Dur" tuşuna basın.</li>
		<li>WIM programını seçin. Yeni oluşturulan klasörü adlandırın. Tarama parametresini "Tarama Hızı" sekmesinde 20 mm/sn, "Tarama Alanı" sekmesinde "20 mm*20 mm" ve "Adım" sekmesinde "20" olarak ayarlayın. Taramaya başlamak için Topla düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Edinimden sonra taramayı sonlandırmak için Durdur düğmesini tıklatın. Motoru sıfıra getirmek için Sıfıra Döndür'ü tıklatın. Lazer şaşkınlıklarını kapatın. Tetikleyici ayarını dahili tetikleyici olarak ayarlayın. Pompalama düğmesi için KAPA düğmesine basın.</li>
		<li>WIM tetikleyicisini RIM tetikleyicisi olarak değiştirin ve harici lazer tetiğine bağlayın. Pompalama anahtarı için ON düğmesine basın. Tetikleyici ayarını dış tetikleyiciye ayarlayın. WIM programından çıkmak için Çıkış düğmesini tıklatın.</li>
		<li>A hattı sinyalini toplamak için 2.4 adımını kullanın. Lazer şaşkınını aç. Hizalamak için 2.6\u20122.7 adımlarını izleyin. Hizalamadan sonra koleksiyonu sonlandırmak için Durdur tuşuna basın.</li>
		<li>RIM programını seçin. Yeni oluşturulan klasörü adlandırın. Taramaya başlamak için Topla düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Edinme işlemini tamamladıktan sonra taramayı sonlandırmak için Durdur düğmesini tıklatın. RIM programından çıkmak için Çıkış düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Görüntülemenin sonunda servikal çıkık kullanarak hayvanı ötenazi.</li>
	</ol></li>
	<li>Vasküler görselleştirmenin WIM'ini gerçekleştirin.<ol>
<li>Odaklanmış ultrasonik dönüştürücü kullanın (Merkezi frekans: 25 MHz; Bant genişliği: %90'dan fazla; Odak uzaklığı: 8 mm). Fare kulağının veya kafa derisinin kıllarını çıkarın.<ol>
<li>Farenin kraniyal zamansal üst kısmının yan tarafında küçük bir kesi yapmak için bir neşter kullanın (kafatasına derinlik). Bu kesiden başlamak için oftalmik makas kullanın. Kafa derisini kafatasının dış tarafında kesin. Kanamayı durdurmak için kanama noktasını sıkıştırın. Yarayı normal salinle yıkayın. Fareyi tutucunun üzerine yerleştirin.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Ultrason jeli kullanarak görüntüleme bölgesinin polietilen membranla temas etmesine izin verin. Temas bölgesindeki kabarcıklardan kaçının (Ek Şekil 1).</li>
		<li>Tutucuyu akustik bağlantı için çalışma sahnesine yerleştirin. Lazeri açmak ve A hattı sinyali toplamak için 2.3\u20122.4 adımlarını kullanın. Hizalamak için 2.6\u20122.7 adımlarını kullanın. Hizalamadan sonra koleksiyonu sonlandırmak için Durdur tuşuna basın.</li>
		<li>WIM programını seçin. Yeni oluşturulan klasörü adlandırın. Tarama parametresini "Tarama Hızı" sekmesinde "10 mm/s", "Tarama Alanı" sekmesinin altında "10 mm*10 mm" ve "Adım" sekmesinde "10" olarak ayarlayın. Taramaya başlamak için Topla düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Edinme işlemini tamamladıktan sonra taramayı sonlandırmak için Durdur düğmesini tıklatın. Motorun sıfıra dönmesini sağlamak için Sıfıra Dön'ü tıklatın. WIM programından çıkmak için Çıkış düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Hayvan hala anestezi altındayken prosedürün sonunda hayvanı ötenazi edin.</li>
	</ol></li>
	<li>Küçük hayvanların dinamik izlenmesi için RIM'i gerçekleştirin.<ol>
<li>Fare karnının saçını tıraş edin. Fareyi tutucunun üzerine supine pozisyonunda yerleştirin.</li>
		<li>Ultrason jeli kullanarak görüntüleme bölgesinin polietilen membranla temas etmesine izin verin. Temas bölgesindeki kabarcıklardan kaçının.</li>
		<li>Tutucuyu akustik bağlantı için çalışma sahnesine yerleştirin. Lazeri başlatmak ve A hattı sinyalini toplamak için 2.3\u20122.4 adımlarını uygulayın. Hizalamak için 2.6\u20122.7 adımlarını gerçekleştirin. Hizalamadan sonra koleksiyonu sonlandırmak için Durdur tuşuna basın.</li>
		<li>RIM programını seçin. Yeni oluşturulan klasörü adlandırın. Taramaya başlamak için Topla düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Edinme işlemini tamamladıktan sonra taramayı sonlandırmak için Durdur düğmesini tıklatın. RIM programından çıkmak için Çıkış düğmesini tıklatın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kullanıcı tanımlı program tarafından derinlik yönü boyunca maksimum genlik projeksiyonunun (MAP) yeniden yapılandırılması için RIM verilerini kullanın. Hayvandaki dinamik değişiklikleri gözlemleyin.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-impulse+panoramic+photoacoustic+computed+tomography+of+small-animal+whole-body+dynamics+at+high+spatiotemporal+resolution.">Single-impulse panoramic photoacoustic computed tomography of small-animal whole-body dynamics at high spatiotemporal resolution.</a> Nature Biomedical Engineering. 1 (5), 0071 (2017).</li><li>Jeon, S., Kim, J., Lee, D., Baik, J. W., Kim, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+on+practical+photoacoustic+microscopy.">Review on practical photoacoustic microscopy.</a> Photoacoustics. 15, 100141 (2019).</li><li>Baik, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super+wide-field+photoacoustic+microscopy+of+animal+and+humans+in+vivo.">Super wide-field photoacoustic microscopy of animal and humans in vivo.</a> IEEE Transactions on Medical Imaging. 39 (4), 975-984 (2019).</li><li>Omar, M., Aguirre, J., Ntziachristos, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optoacoustic+mesoscopy+for+biomedicine.">Optoacoustic mesoscopy for biomedicine.</a> Nature Biomedical Engineering. 3 (5), 354-370 (2019).</li><li>Lin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-breath-hold+photoacoustic+computed+tomography+of+the+breast.">Single-breath-hold photoacoustic computed tomography of the breast.</a> Nature Communications. 9 (1), 2352 (2018).</li><li>Yang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wide-field+monitoring+and+real-time+local+recoding+microvascular+networks+on+small+animals+with+a+dual-raster-scanned+photoacoustic+microscope.">Wide-field monitoring and real-time local recoding microvascular networks on small animals with a dual-raster-scanned photoacoustic microscope.</a> Journal of Biophotonics. 13 (6), 202000022 (2020).</li><li>Sun, J., Zhou, Q., Yang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Label-free+photoacoustic+imaging+guided+sclerotherapy+for+vascular+malformations:+a+feasibility+study.">Label-free photoacoustic imaging guided sclerotherapy for vascular malformations: a feasibility study.</a> Optics Express. 26 (4), 4967-4978 (2018).</li><li>Xu, D., Yang, S., Wang, Y., Gu, Y., Xing, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+and+high-resolving+photoacoustic+dermoscopy+of+human+skin.">Noninvasive and high-resolving photoacoustic dermoscopy of human skin.</a> Biomedical Optics Express. 7 (6), 2095-2102 (2016).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniaturized+photoacoustic+probe+for+in+vivo+imaging+of+subcutaneous+microvessels+within+human+skin.">Miniaturized photoacoustic probe for in vivo imaging of subcutaneous microvessels within human skin.</a> Quantitative Imaging in Medicine and Surgery. 9 (5), 807-814 (2019).</li><li>Chen, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultracompact+high-resolution+photoacoustic+microscopy.">Ultracompact high-resolution photoacoustic microscopy.</a> Optics Letters. 43 (7), 1615-1618 (2018).</li><li>Lan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-speed+widefield+photoacoustic+microscopy+of+small-animal+hemodynamics.">High-speed widefield photoacoustic microscopy of small-animal hemodynamics.</a> Biomedical Optics Express. 9, 4689-4700 (2018).</li><li>Ma, H., Yang, S., Cheng, Z., Xing, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+confocal+dermoscope+with+a+waterless+coupling+and+impedance+matching+opto-sono+probe.">Photoacoustic confocal dermoscope with a waterless coupling and impedance matching opto-sono probe.</a> Optics Letters. 42 (12), 2342-2345 (2017).</li><li>Kang, H., Lee, S. W., Lee, E. S., Kim, S. H., Lee, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+GPU-accelerated+processing+and+volumetric+display+for+wide-field+laser-scanning+optical-resolution+photoacoustic+microscopy.">Real-time GPU-accelerated processing and volumetric display for wide-field laser-scanning optical-resolution photoacoustic microscopy.</a> Biomedical Optics Express. 6 (12), 4650-4660 (2015).</li></ol>

Tüm hayvan deneyleri Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nin onaylı kılavuz ve yönetmeliklerine göre gerçek gerçekleştirildi. Yazarların makaleyle ilgili herhangi bir finansal çıkarları yoktur ve açıklayacak başka bir potansiyel çıkar çatışması yoktur.

Burada, vaskülatın yapısını ve ilgili dinamik kan değişimini yakalamak için tasarlanmış ve geliştirilmiş noninvaziv vasküler görselleştirme için çift raster taramalı fotoakoustik küçük hayvan görüntüleyici sunduk. DRS-PAI'nin avantajı, WIM ve RIM'i tek bir sisteme entegre etmesidir, bu da küçük hayvanların vasküler dinamik ve vasküler ağ yapısını incelemeyi kolaylaştırır. Sistem yüksek çözünürlüklü geniş alan vasküler görselleştirme ve gerçek zamanlı kan dinamiği sağla...

Temel biyomedikal alanda, küçük hayvanlar insan fizyolojik işlevini simüle edebilir. Bu nedenle, küçük hayvan görüntüleme, insan homolog hastalıklarının araştırılmasına rehberlik etme ve etkili tedavi arayışında önemli bir rol oynar1. Fotoakoustik görüntüleme (PAI), optik görüntüleme ve ultrason görüntülemenin avantajlarını birleştiren invaziv olmayan bir görüntüleme tekniğidir2. Fotoakoustik mikroskopi (PAM), küçük hayvanların temel araştırmaları için değerli bir görüntüleme yöntemidir3. PAM, optik uyarlama ve ultrason algılamaya dayalı olarak yüksek çözünürlüklü, derin penetrasyon, yüksek özgüllük ve yüksek kontrastlı görüntüleri kolayca elde edebilir4.
Belirli bir dalga boylarına sahip bir darbe lazeri, dokuların endojen kromoforları tarafından emilir. Daha sonra, dokunun sıcaklığı yükselir, bu da fotoğraf kaynaklı ultrasonik dalgaların üretimiyle sonuçlanır. Ultrasonik dalgalar ultrasonik dönüştürücü tarafından tespit edilebilir. Sinyal alımı ve görüntü rekonstrüksiyonundan sonra emicinin mekansal dağılımı elde edilebilir5. Bir yandan, tüm organ damar ağının görselleştirilmesi geniş bir görüş alanı gerektirir. Geniş alan tarama işlemi genellikle yüksek çözünürlüklü 6 ,7,8sağlamak için uzun zaman alır. Öte yandan, küçük hayvanların hemodinamik aktivitelerini gözlemlemek hızlı gerçek zamanlı görüntüleme gerektirir. Gerçek zamanlı görüntüleme, küçük hayvanların yaşamsal belirtilerini gerçek zamanlı olarak incelemek için faydalıdır9,10,11. Gerçek zamanlı görüntülemenin görüş alanı genellikle yüksek bir güncelleme oranı sağlamak için yeterince küçüktür. Bu nedenle, genellikle geniş bir görüş alanına ulaşmak ve gerçek zamanlı görüntüleme arasında bir denge vardır. Daha önce, geniş alan görüntüleme veya gerçek zamanlı görüntüleme için ayrı ayrı iki farklı sistem kullanılmıştır.
Bu çalışma, iki boyutlu motorlu çeviri aşamasına ve iki eksenli galvanometre tarayıcısına dayalı gerçek zamanlı görüntülemeye dayalı geniş alan görüntülemeyi entegre eden çift raster taramalı fotoakoustik görüntüleyici (DRS-PAI) rapor eder. Geniş alan görüntüleme modu (WIM) vasküler morfolojiyi göstermek için gerçekleştirilir. Gerçek zamanlı görüntüleme modu (RIM) için şu anda iki işlev vardır. İlk olarak, RIM gerçek zamanlı B tarama görüntüleri sağlayabilir. Vaskülatın derinlik yönü boyunca yer değiştirmesi ölçülerek, solunum veya nabız özellikleri ortaya çıkabilir. İkinci olarak, RIM WIM görüntüsündeki belirli alanı nicel olarak ölçebilir. Yerel WIM bölgelerinin karşılaştırılabilir görüntülerini sağlayarak, yerel değişikliğin ayrıntıları doğru bir şekilde ortaya çıkabilir. Sistem, vasküler görselleştirmenin geniş alan görüntülemesi ile yerel dinamiğin gerçek zamanlı görüntülenmesi arasında esnek bir geçiş tasarlar. Sistem, küçük hayvan görüntülemeye ihtiyaç duyulan temel biyomedikal araştırmalarda arzu edilir.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 bit multi-purpose digitizer</td>
			<td>Spectrum</td>
			<td>M3i.3221</td>
			<td>Data acquisition card</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A-line collected program</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>LabVIEW</td>
			<td>User-defined program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amplifier</td>
			<td>RF Bay</td>
			<td>LNA-650</td>
			<td>Amplifier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory Cream</td>
			<td>Veet</td>
			<td>33-II</td>
			<td>Animal depilatory</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiberport Coupler</td>
			<td>Thorlab</td>
			<td>PAF-X-7-A</td>
			<td>Fiber Coupler</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Field Programmable Gate Array</td>
			<td>Altera</td>
			<td>Cyclone IV</td>
			<td>Trigger Control</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed Focus Collomation Packages</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>F240FC-532</td>
			<td>Fiber Collimator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foused ultrasonic transducer</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphics Processing Unit</td>
			<td>NVIDIA</td>
			<td>GeForce GTX 1060</td>
			<td>Processing data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Holder</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td>Animal fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laser control program</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>LabVIEW</td>
			<td>User-defined program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Guangdong Medical Laboratory Animal Center</td>
			<td>BALB/c</td>
			<td>Animal Model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope camera</td>
			<td>Mshot</td>
			<td>MS60</td>
			<td>CCD camera</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Objective</td>
			<td>Daheng Optics</td>
			<td>GCO-2111</td>
			<td>Objective Lens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mirror</td>
			<td>Daheng Optics</td>
			<td>GCC-1011</td>
			<td>Moveable/Fixed Mirror</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moving Magnet Capacitive Detector Galvanometer Scanner</td>
			<td>Century Sunny</td>
			<td>S8107</td>
			<td>real-time scanner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mshot image analysis system</td>
			<td>Mshot</td>
			<td></td>
			<td>Display software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Saline</td>
			<td>CR DOUBLE-CRANE</td>
			<td>H34023609</td>
			<td>Normal Saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Scissors</td>
			<td>SUJIE</td>
			<td></td>
			<td>Scalp Remove</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Planar ultrasonic transducer</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Wrap</td>
			<td>HJSJLSL</td>
			<td></td>
			<td>Polyethylene Membrane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Program Control Software</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>LabVIEW</td>
			<td>User-defined Program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulsed Q-swithched Laser</td>
			<td>Laser-export</td>
			<td>DTL-314QT</td>
			<td>532-nm pulse Laser</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Real-time imaging program</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>LabVIEW</td>
			<td>User-defined program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ring-shaped white LED</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaver</td>
			<td>Codos</td>
			<td>CP-9200</td>
			<td>Animal Shaver</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single-Mode Fibers</td>
			<td>Nufern</td>
			<td>460-HP</td>
			<td>Single-mode fiber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade</td>
			<td>SUJIE</td>
			<td>11</td>
			<td>Blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Scalpel</td>
			<td>SUJIE</td>
			<td>7</td>
			<td>Scalp Remove</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Translation Stage</td>
			<td>Jiancheng Optics</td>
			<td>LS2-25T</td>
			<td>wide-field scanning stage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic Transducer</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>GUANGGONG PAI</td>
			<td>ZC4252418</td>
			<td>Acoustic Coupling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urethane</td>
			<td>Tokyo Chemical Industry</td>
			<td>C0028</td>
			<td>Animal Anestheized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water tank</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wide-field imaging program</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>LabVIEW</td>
			<td>User-defined program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XY Translator Mount</td>
			<td>Self-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dual raster-scanning photoacoustic small-animal imager for vascular visualization

Vasküler ağların küçük hayvanlar üzerinde görüntülenmesi temel biyomedikal araştırmalarda önemli rol oynamıştır. Fotoakoustik görüntüleme teknolojisi, küçük hayvanların görüntübiliminde büyük bir uygulama potansiyeline sahiptir. Küçük hayvanların geniş alan fotoakoustik görüntülemesi, yüksek mekansal çözünürlük, derin penetrasyon ve çoklu kontrastlarla görüntüler sağlayabilir. Ayrıca, gerçek zamanlı fotoakoustik görüntüleme sistemi, küçük hayvan fizyolojik özelliklerinin dinamik izlenmesini araştırmak için kullanılabilecek küçük hayvan vaskülatının hemodinamik faaliyetlerini gözlemlemek için arzu edilir. Burada, değiştirilebilir çift modlu görüntüleme işlevine sahip çift raster taramalı bir fotoakoustik görüntüleyici sunulmaktadır. Geniş alan görüntüleme iki boyutlu motorlu çeviri aşaması ile yönlendirilirken, gerçek zamanlı görüntüleme galvanometreler ile gerçekleştirilir. Farklı parametreler ve görüntüleme modları ayarlanarak, küçük hayvan damar ağının in vivo görselleştirmesi yapılabilir. Gerçek zamanlı görüntüleme, ilaç kaynaklı vb. Geniş alan görüntüleme tümör vaskülatının büyüme değişimini izlemek için kullanılabilir. Bunlar temel biyotıp araştırmalarının çeşitli alanlarında benimsenmesi kolaydır.

DRS-PAI şeması Şekil 1'de gösterilmiştir. Sistem, RIM ile WIM arasında esnek ve tekrarlanabilir geçiş sağlar. Elde edilen PA sinyali, PA B-Scan ve MAP görüntülerini oluşturmak için hızlı bir şekilde işlenir. CCD kamera örneklerin fotoğraflarını sağlayabilir.
DRS-PAI'nin tüm bileşenleri entegre edilir ve bir görüntüleyici kurulumuna monte edilir (Şekil 2), montajı ve çalışmasını kolaylaştırır. WIM'...

Watch this Scientific Journal Video about Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization at JoVE.com

Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization

Geniş alan görüntüleme ve gerçek zamanlı görüntülemeyi entegre eden çift raster taramalı fotoakoustik görüntüleyici tasarlanmıştır.

Vasküler Görselleştirme için Çift Raster Taramalı Fotoakoustik Küçük Hayvan Görüntüleyici

Imaging of vascular networks on small animals has played an important role in basic biomedical research. Photoacoustic imaging technology has great ...

dual-raster-scanning-photoacoustic-small-animal-imager-for-vascular

Research

JoVE Journal

Bioengineering

4.0K Görüntüleme.  South China Normal University. Geniş alan görüntüleme ve gerçek zamanlı görüntülemeyi entegre eden çift raster taramalı fotoakoustik görüntüleyici tasarlanmıştır.

Video: Dual Raster-Scanning Photoacoustic Small-Animal Imager for Vascular Visualization

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As the mainstays of in vivo three-dimensional (3-D) optical microscopy, single-/multi-photon fluorescence microscopy and optical coherence tomography (OCT) have demonstrated their extraordinary sensitivities to fluorescence and optical scattering contrasts, respectively. However, the optical absorption contrast of biological tissues, which encodes essential physiological/pathological information, has not yet been assessable. 
The emergence of biomedical photoacoustics has led to a new branch of optical microscopy optical-resolution photoacoustic microscopy (OR-PAM)1, where the optical irradiation is focused to the diffraction limit to achieve cellular1 or even subcellular2 level lateral resolution. As a valuable complement to existing optical microscopy technologies, OR-PAM brings in at least two novelties. First and most importantly, OR-PAM detects optical absorption contrasts with extraordinary sensitivity (i.e., 100%). Combining OR-PAM with fluorescence microscopy3 or with optical-scattering-based OCT4 (or with both) provides comprehensive optical properties of biological tissues. Second, OR-PAM encodes optical absorption into acoustic waves, in contrast to the pure optical processes in fluorescence microscopy and OCT, and provides background-free detection. The acoustic detection in OR-PAM mitigates the impacts of optical scattering on signal degradation and naturally eliminates possible interferences (i.e., crosstalks) between excitation and detection, which is a common problem in fluorescence microscopy due to the overlap between the excitation and fluorescence spectra. 
Unique for optical absorption imaging, OR-PAM has demonstrated broad biomedical applications since its invention, including, but not limited to, neurology5, 6, ophthalmology7, 8, vascular biology9, and dermatology10. In this video, we teach the system configuration and alignment of OR-PAM as well as the experimental procedures for in vivo functional microvascular imaging.

Optical-resolution photoacoustic microscopy (OR-PAM) is an emerging technology capable of imaging optical absorption contrasts in vivo with cellular resolution and sensitivity. Here, we provide a visualized instruction on the experimental protocols of OR-PAM, including system configuration, system alignment, typical in vivo experimental procedures, and functional imaging schemes.

Üç boyutlu optik çözünürlük foto akustik Mikroskopi

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Biyomühendislik

Detection and Isolation of Circulating Melanoma Cells using Photoacoustic Flowmetry

Circulating tumor cells (CTCs) are those cells that have separated from a macroscopic tumor and spread through the blood and lymph systems to seed secondary tumors1,2,3. CTCs are indicators of metastatic disease and their detection in blood samples may be used to diagnose cancer and monitor a patient&prime;s response to therapy. Since CTCs are rare, comprising about one tumor cell among billions of normal blood cells in advanced cancer patients, their detection and enumeration is a difficult task. We exploit the presence of pigment in most melanoma cells to generate photoacoustic, or laser induced ultrasonic waves in a custom flow cytometer for detection of circulating melanoma cells (CMCs)4,5. This process entails separating a whole blood sample using centrifugation and obtaining the white blood cell layer. If present in whole blood, CMCs will separate with the white blood cells due to similar density. These cells are resuspended in phosphate buffered saline (PBS) and introduced into the flowmeter. Rather than a continuous flow of the blood cell suspension, we induced two phase flow in order to capture these cells for further study. In two phase flow, two immiscible liquids in a microfluidic system meet at a junction and form alternating slugs of liquid6,7. PBS suspended white blood cells and air form microliter slugs that are sequentially irradiated with laser light. The addition of a surfactant to the liquid phase allows uniform slug formation and the user can create different sized slugs by altering the flow rates of the two phases. Slugs of air and slugs of PBS with white blood cells contain no light absorbers and hence, do not produce photoacoustic waves. However, slugs of white blood cells that contain even single CMCs absorb laser light and produce high frequency acoustic waves. These slugs that generate photoacoustic waves are sequestered and collected for cytochemical staining for verification of CMCs.

We have developed a flow cytometer using laser induced ultrasound to detect circulating melanoma cells as an early indicator of metastatic disease.

Sirkülasyon Melanom Hücreler foto akustik flowmetre kullanarak Algılama ve İzolasyonu

Circulating tumor cells (CTCs) are those cells that have separated from a macroscopic tumor and spread through the blood and lymph systems to seed ...

Integrated Photoacoustic Ophthalmoscopy and Spectral-domain Optical Coherence Tomography

Both the clinical diagnosis and fundamental investigation of major ocular diseases greatly benefit from various non-invasive ophthalmic imaging technologies. Existing retinal imaging modalities, such as fundus photography1, confocal scanning laser ophthalmoscopy (cSLO)2, and optical coherence tomography (OCT)3, have significant contributions in monitoring disease onsets and progressions, and developing new therapeutic strategies. However, they predominantly rely on the back-reflected photons from the retina. As a consequence, the optical absorption properties of the retina, which are usually strongly associated with retinal pathophysiology status, are inaccessible by the traditional imaging technologies.
Photoacoustic ophthalmoscopy (PAOM) is an emerging retinal imaging modality that permits the detection of the optical absorption contrasts in the eye with a high sensitivity4-7 . In PAOM nanosecond laser pulses are delivered through the pupil and scanned across the posterior eye to induce photoacoustic (PA) signals, which are detected by an unfocused ultrasonic transducer attached to the eyelid. Because of the strong optical absorption of hemoglobin and melanin, PAOM is capable of non-invasively imaging the retinal and choroidal vasculatures, and the retinal pigment epithelium (RPE) melanin at high contrasts 6,7. More importantly, based on the well-developed spectroscopic photoacoustic imaging5,8 , PAOM has the potential to map the hemoglobin oxygen saturation in retinal vessels, which can be critical in studying the physiology and pathology of several blinding diseases 9 such as diabetic retinopathy and neovascular age-related macular degeneration.
Moreover, being the only existing optical-absorption-based ophthalmic imaging modality, PAOM can be integrated with well-established clinical ophthalmic imaging techniques to achieve more comprehensive anatomic and functional evaluations of the eye based on multiple optical contrasts6,10 . In this work, we integrate PAOM and spectral-domain OCT (SD-OCT) for simultaneously in vivo retinal imaging of rat, where both optical absorption and scattering properties of the retina are revealed. The system configuration, system alignment and imaging acquisition are presented.

Photoacoustic ophthalmology (PAOM), an optical-absorption-based imaging modality, provides the complementary evaluation of the retina to the currently available ophthalmic imaging technologies. We report the using of PAOM integrated with spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) for simultaneous multimodal retinal imaging in rats.

Entegre Photoacoustic Oftalmoskopi ve Spektral-domain optik koherens tomografi

Both the clinical diagnosis and fundamental investigation of major ocular diseases greatly benefit from various non-invasive ophthalmic imaging ...

Photoacoustic Cystography

Conventional pediatric cystography, which is based on diagnostic X-ray using a radio-opaque dye, suffers from the use of harmful ionizing radiation. The risk of bladder cancers in children due to radiation exposure is more significant than many other cancers. Here we demonstrate the feasibility of nonionizing and noninvasive photoacoustic (PA) imaging of urinary bladders, referred to as photoacoustic cystography (PAC), using near-infrared (NIR) optical absorbents (i.e. methylene blue, plasmonic gold nanostructures, or single walled carbon nanotubes) as an optical-turbid tracer. We have successfully imaged a rat bladder filled with the optical absorbing agents using a dark-field confocal PAC system. After transurethral injection of the contrast agents, the rat's bladders were photoacoustically visualized by achieving significant PA signal enhancement. The accumulation was validated by spectroscopic PA imaging. Further, by using only a laser pulse energy of less than 1 mJ/cm2 (1/20 of the safety limit), our current imaging system could map the methylene-blue-filled-rat-bladder at the depth of beyond 1 cm in biological tissues in vivo. Both in vivo and ex vivo PA imaging results validate that the contrast agents were naturally excreted via urination. Thus, there is no concern regarding long-term toxic agent accumulation, which will facilitate clinical translation.

Photoacoustic cystography (PAC) has a great potential to map urinary bladders, a radiation sensitive internal organ in pediatric patients, without using any ionizing radiation or toxic contrast agent. Here we demonstrate the use of PAC for mapping urinary bladders with an injection of optical-opaque tracers in rats in vivo.

Foto akustik Sistografi

Conventional pediatric cystography, which is based on diagnostic X-ray using a radio-opaque dye, suffers from the use of harmful ionizing radiation. The ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. Collagen has been extensively used for a wide range of biomedical applications and is considered a valid alternative to synthetic materials due to its inherent biocompatibility (i.e., low antigenicity, inflammation, and cytotoxic responses). However, the limited mechanical properties and the related low hand-ability of collagen gels have hampered their use as scaffold materials for vascular tissue engineering. Therefore, the rationale behind this work was first to engineer cellularized collagen gels into a tubular-shaped geometry and second to enhance smooth muscle cells driven reorganization of collagen matrix to obtain tissues stiff enough to be handled.
The strategy described here is based on the direct assembling of collagen and smooth muscle cells (construct) in a 3D cylindrical geometry with the use of a molding technique. This process requires a maturation period, during which the constructs are cultured in a bioreactor under static conditions (without applied external dynamic mechanical constraints) for 1 or 2 weeks. The &#8220;static bioreactor&#8221; provides a monitored and controlled sterile environment (pH, temperature, gas exchange, nutrient supply and waste removal) to the constructs. During culture period, thickness measurements were performed to evaluate the cells-driven remodeling of the collagen matrix, and glucose consumption and lactate production rates were measured to monitor the cells metabolic activity. Finally, mechanical and viscoelastic properties were assessed for the resulting tubular constructs. To this end, specific protocols and a focused know-how (manipulation, gripping, working in hydrated environment, and so on) were developed to characterize the engineered tissues.

In this work, we present a technique for the rapid fabrication of living vascular tissues by direct culturing of collagen, smooth muscle cells and endothelial cells. In addition, a new protocol for the mechanical characterization of engineered vascular tissues is described.

Vasküler Doku Rejenerasyon için Mühendislik 3D cellularized Kollajen jeller

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Preparation and Photoacoustic Analysis of Cellular Vehicles Containing Gold Nanorods

Gold nanorods are attractive for a range of biomedical applications, such as the photothermal ablation and the photoacoustic imaging of cancer, thanks to their intense optical absorbance in the near-infrared window, low cytotoxicity and potential to home into tumors. However, their delivery to tumors still remains an issue. An innovative approach consists of the exploitation of the tropism of tumor-associated macrophages that may be loaded with gold nanorods in vitro. Here, we describe the preparation and the photoacoustic inspection of cellular vehicles containing gold nanorods. PEGylated gold nanorods are modified with quaternary ammonium compounds, in order to achieve a cationic profile. On contact with murine macrophages in ordinary Petri dishes, these particles are found to undergo massive uptake into endocytic vesicles. Then these cells are embedded in biopolymeric hydrogels, which are used to verify that the stability of photoacoustic conversion of the particles is retained in their inclusion into cellular vehicles. We are confident that these results may provide new inspiration for the development of novel strategies to deliver plasmonic particles to tumors.

We show the preparation and address the feasibility of cellular vehicles containing gold nanorods for the photoacoustic imaging of cancer.

Altın nanorods İçeren Hücresel Araçların Hazırlama ve foto akustik Analizi

Gold nanorods are attractive for a range of biomedical applications, such as the photothermal ablation and the photoacoustic imaging of cancer, thanks to ...

The Arteriovenous (AV) Loop in a Small Animal Model to Study Angiogenesis and Vascularized Tissue Engineering

A functional blood vessel network is a prerequisite for the survival and growth of almost all tissues and organs in the human body. Moreover, in pathological situations such as cancer, vascularization plays a leading role in disease progression. Consequently, there is a strong need for a standardized and well-characterized in vivo model in order to elucidate the mechanisms of neovascularization and develop different vascularization approaches for tissue engineering and regenerative medicine.
We describe a microsurgical approach for a small animal model for induction of a vascular axis consisting of a vein and artery that are anastomosed to an arteriovenous (AV) loop. The AV loop is transferred to an enclosed implantation chamber to create an isolated microenvironment in vivo, which is connected to the living organism only by means of the vascular axis. Using 3D imaging (MRI, micro-CT) and immunohistology, the growing vasculature can be visualized over time. By implanting different cells, growth factors and matrices, their function in blood vessel network formation can be analyzed without any disturbing influences from the surroundings in a well controllable environment. 
In addition to angiogenesis and antiangiogenesis studies, the AV loop model is also perfectly suited for engineering vascularized tissues. After a certain prevascularization time, the generated tissues can be transplanted into the defect site and microsurgically connected to the local vessels, thereby ensuring immediate blood supply and integration of the engineered tissue. By varying the matrices, cells, growth factors and chamber architecture, it is possible to generate various tissues, which can then be tailored to the individual patient's needs.

The Arteriovenous AV Loop in a Small Animal Model to Study Angiogenesis and Vascularized Tissue Engineering

We describe a microsurgical approach for the generation of an arteriovenous (AV) loop as a model for analyzing vascularization in vivo in an isolated and well-characterized environment. This model is not only useful for the investigation of angiogenesis, but is also optimally suited for engineering axially vascularized and transplantable tissues.

Bir Küçük Hayvan Modelinde Arteriovenöz (AV) Döngü Anjiogenez ve Vaskülarize Doku Mühendisliği Eğitim için

A functional blood vessel network is a prerequisite for the survival and growth of almost all tissues and organs in the human body. Moreover, in ...

Switchable Acoustic and Optical Resolution Photoacoustic Microscopy for In Vivo Small-animal Blood Vasculature Imaging

Photoacoustic microscopy (PAM) is a fast-growing invivo imaging modality that combines both optics and ultrasound, providing penetration beyond the optical mean free path (~1 mm in skin) with high resolution. By combining optical absorption contrast with the high spatial resolution of ultrasound in a single modality, this technique can penetrate deep tissues. Photoacoustic microscopy systems can have either a low acoustic resolution and probe deeply or a high optical resolution and probe shallowly. It is challenging to achieve high spatial resolution and large depth penetration with a single system. This work presents an AR-OR-PAM system capable of both high-resolution imaging at shallow depths and low-resolution deep-tissue imaging of the same sample in vivo. A lateral resolution of 4 &#181;m with 1.4 mm imaging depth using optical focusing and a lateral resolution of 45 &#181;m with 7.8 mm imaging depth using acoustic focusing were successfully demonstrated using the combined system. Here,&#160;in vivo&#160;small-animal blood vasculature imaging is performed to demonstrate its biological imaging capability.

Switchable Acoustic and Optical Resolution Photoacoustic Microscopy for In Vivo Small-animal Blood Vasculature Imaging

Here a switchable acoustic resolution (AR) and optical resolution (OR) photoacoustic microscopy (AR-OR-PAM) system capable of both high resolution imaging at shallow depth and low resolution deep tissue imaging on the same sample in vivo is demonstrated.

Için değiştirilebilir Akustik ve Optik Çözünürlük Fotoakustik Mikroskopi<emIn vivo</em&gt; Küçük Hayvan Kan Vaskülatür Görüntüleme

Photoacoustic microscopy (PAM) is a fast-growing invivo imaging modality that combines both optics and ultrasound, providing penetration beyond the ...

A High-performance Compact Photoacoustic Tomography System for In Vivo Small-animal Brain Imaging

In vivo small-animal imaging has an important role to play in preclinical studies. Photoacoustic tomography (PAT) is an emerging hybrid imaging modality that shows great potential for both preclinical and clinical applications. Conventional optical parametric oscillator-based PAT (OPO-PAT) systems are bulky and expensive and cannot provide high-speed imaging. Recently, pulsed-laser diodes (PLDs) have been successfully demonstrated as an alternative excitation source for PAT. Pulsed-laser diode PAT (PLD-PAT) has been successfully demonstrated for high-speed imaging on photoacoustic phantoms and biological tissues. This work provides a visualized experimental protocol for in vivo brain imaging using PLD-PAT. The protocol includes the compact PLD-PAT system configuration and its description, animal preparation for brain imaging, and a typical experimental procedure for 2D cross-sectional rat brain imaging. The PLD-PAT system is compact and cost-effective and can provide high-speed, high-quality imaging. Brain images collected in vivo at various scan speeds are presented.

A High-performance Compact Photoacoustic Tomography System for In Vivo Small-animal Brain Imaging

A compact pulsed-laser diode-based photoacoustic tomography (PLD-PAT) system for high-speed in vivo brain imaging in small animals is demonstrated.

Için yüksek performanslı bir Kompakt Fotoakustik Tomografi Sistemi<emIn vivo</em&gt; Küçük Hayvanlı Beyin Görüntüleme

In vivo small-animal imaging has an important role to play in preclinical studies. Photoacoustic tomography (PAT) is an emerging hybrid imaging modality ...

Ultrathin Porated Elastic Hydrogels As a Biomimetic Basement Membrane for Dual Cell Culture

The basement membrane is a critical component of cellular bilayers that can vary in stiffness, composition, architecture, and porosity. In vitro studies of endothelial-epithelial bilayers have traditionally relied on permeable support models that enable bilayer culture, but permeable supports are limited in their ability to replicate the diversity of human basement membranes. In contrast, hydrogel models that require chemical synthesis are highly tunable and allow for modifications of both the material stiffness and the biochemical composition via incorporation of biomimetic peptides or proteins. However, traditional hydrogel models are limited in functionality because they lack pores for cell-cell contacts and functional in vitro migration studies. Additionally, due to the thickness of traditional hydrogels, incorporation of pores that span the entire thickness of hydrogels has been challenging. In the present study, we use poly-(ethylene-glycol) (PEG) hydrogels and a novel zinc oxide templating method to address the previous shortcomings of biomimetic hydrogels. As a result, we present an ultrathin, basement membrane-like hydrogel that permits the culture of confluent cellular bilayers on a customizable scaffold with variable pore architectures, mechanical properties, and biochemical composition.

Current bilayer culture models do not allow for functional in vitro studies that mimic in vivo microenvironments. Using polyethylene glycol and a zinc oxide templating method, this protocol describes the development of an ultrathin biomimetic basement membrane with tunable stiffness, porosity, and biochemical composition that closely mimics in vivo extracellular matrices.

Kültür Ultrathin Porated elastik Hydrogels bir Biomimetic membran için çift olarak hücre

The basement membrane is a critical component of cellular bilayers that can vary in stiffness, composition, architecture, and porosity. In vitro studies ...