Bu protokolün genel amacı, F18 radyoetiketli triptofan izleyiciyi tek kaplı, iki adımlı bir yaklaşımla radyosentezlemektir. Radyotracer, triptofan metabolizmasını görüntülemek için yaygın bir uygulama alanı bulabilir. Teknik, radyoizotopu daha uzun bir yarı ömür, daha az reaksiyon öncüsü ve daha az reaksiyon hacmi ve saflaştırma için çevresel açıdan iyi huylu bir faz ile kullanır.
Radyotracer, epilepsi, nöropsikiyatrik bozukluklar ve nöro-onkoloji dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere beyni etkileyen çeşitli bozuklukların teşhisi için kullanılabilir. Bu yöntem, piyasada satılan diğer radyoetiketleme modüllerine uygulanabilir. F18 florür çözeltisi alındıktan sonra, yüzeydeki kurşun kutusunu inceleyerek başlayın ve bir metre mesafeden maksimum radyasyona maruz kalma oranlarını kaydedin.
Nakliye kutusunun kirlenmediğinden emin olmak için bir silme testi yaptıktan sonra, F18 florür dozunu ve süresini kaydedin. F18 florür çözeltisini radyokimya sentez sistemine aktarın. Argon hattını kısa bir iğneyle ve F18 florür transfer hattını uzun bir iğneyle F18 florür şişesine bağlayın.
Ardından, sıcak hücreli cam kapıyı ve kurşun kapıyı kapatın. Argon Supply'a tıklayarak argon besleme hattını açın. Argon basıncını artırın ve sulu F18 florürü QMA ışık kartuşundan itmek için F18 florür itme hattını açın.
Tüm radyoaktivite QMA ışık kartuşunda sıkışıp kaldıktan ve radyoaktivite dedektörü okuması sabit kaldıktan sonra, argon basıncını artırın ve fazla suyu gidermek için argonu kartuştan beş dakika daha üfleyin. F18 florür itme hattını kapattıktan sonra, argon basıncını sıfıra düşürün ve altı portlu iki konumlu valfi F18 florür yakalama konumundan elüsyon konumuna getirin. Reaksiyon şişesini açın, giriş MVP pozisyonunu bir argon hattını açın ve radyoaktiviteyi reaksiyon şişesine atmak için K222 ve potasyum karbonat çözeltisini QMA ışık kartuşundan bir şişe giriş MVP pozisyonuna itin.
F18 florür elüsyon pozisyonunu yakalama pozisyonuna getirin. Reaktörü 110 santigrat derecede ısıtmak için Isı düğmesine tıklayın, reaktöre bağlanan çıkış MVP pozisyon-dört argon hattını açın ve çözücüyü çıkış MVP pozisyonu dört şişesine buharlaştırın. Reaktörü sıkıştırılmış karbondioksit ile oda sıcaklığına soğutmak için Serin düğmesine tıklayın.
Süpürme hattını kapatın, giriş MVP konumunu bir pozisyona iki konuma değiştirin ve susuz asetonitril'i iki şişeye ekleyin. F18 florürü 110 santigrat derecede azeotropik olarak kurutmak için süpürme hattını ve ısıtıcıyı iki kez açın. Reaktör oda sıcaklığına ulaştığında, süpürme hattını kapatın, giriş MVP pozisyonunu ikinci konuma getirin ve toksilat radyoetiketleme öncüsünü şişe üçe ekleyin.
Reaktörü kapatın ve reaksiyon karışımlarını 10 dakika boyunca 100 santigrat derecede ısıtın. Reaksiyon çözücüsünü buharlaştırmak için, reaktör soğuduktan sonra, süpürme hattını açın ve reaksiyon çözücüsünü 100 santigrat derecede buharlaştırın. Reaktör soğuduktan sonra, süpürme hattını kapatın ve giriş MVP pozisyonunu üçüncüye çevirin.
Hidroklorik asit asetonitril karışımı eklendiğinde, radyoetiketleme öncüllerindeki tert-bütil ve tert-bütiloksikarbonil koruma gruplarının korumasını gidermek için reaksiyonu 100 santigrat derecede 10 dakika ısıtın. Reaksiyonu nötralize etmek için, reaktör oda sıcaklığına ulaştığında, giriş MVP pozisyonunu dördüncü pozisyona beş konumuna getirin ve reaksiyon karışımına iki molar sodyum hidroksit ekleyin ve giriş MVP argon hattını kapatın. Ardından, çıkış MVP'sini havalandırma konumundan beşinci konuma geçirmek için çıkış MVP'sindeki F düğmesine tıklayarak ve ardından giriş MVP'sini beşinci konumdan altıncı konuma geçirmek için giriş MVP'sindeki F düğmesine tıklayarak reaksiyon karışımını ara dosyaya aktarmaya başlayın.
Çıkış MVP argon hattını açtıktan sonra, reaksiyon karışımını istiflenmiş nötr alüminyum oksit ve C8 kartuşlarından HPLC numune döngüsünden önce takılan ara şişeye itin. Reaktörü durulamak için, çıkış MVP pozisyonunu beşten altıncı pozisyona değiştirin, çıkış MVP pozisyonu altıdaki durulama çözeltisini reaksiyon şişesinden, kartuşlardan ve ara şişeden art arda itin. Daha sonra, HPLC döngüsünü enjeksiyon konumundan yük konumuna geçirerek ve giriş MVP argon hattını açarak karışımın saflaştırılmasına başlayın.
Karışım beş mililitrelik HPLC döngüsüne yüklendiğinde, Yükle düğmesini Enjekte Et olarak değiştirin, HPLC kromatogramını dakikada üç mililitrelik bir akış hızında başlatmak için HPLC Enjekte Et'i tıklatın ve ardından gerçek zamanlı HPLC kromatogramına erişmek için HPLC İzleyici düğmesini tıklatın. Hedef HPLC kesirini yaklaşık 12 dakika içinde kısa C18 sütununa yönlendirmek için Saptırma MVP düğmesini tıklatın. Hedef radyoaktivite C18 sütununda toplandıktan sonra, dört portlu iki konumlu saptırma vanasını atık toplama konumuna getirin ve küçük D F18 FETrp enantiyomerini ve diğer ultraviyole safsızlıklarını gidermek için kiral kolonu altı dakika boyunca dakikada dört mililitre oranında yıkayın.
HPLC mobil fazını dakikada üç mililitrede bir formülasyon MVP konumuna geri yönlendirmek için Saptırma MVP düğmesine tıklayın. Mobil fazın, C18 sütununda tutulan L-F18 FETrp'yi saflaştırmak için kiral kolondan ve C18 sütunundan geçtiğini gözlemleyin. Yaklaşık 32 ila 34 dakikada, hedef fraksiyonu formülasyon MVP pozisyonu iki şişeye toplayın.
Ardından, MVP pozisyon iki şişe çözeltisini dağıtım hattından ve steril filtreden son doz şişesine itin. Steril filtreyi çıkardıktan sonra son doz aktivitesini ve hacmini test edin. Sistemi ultra saf su ve ardından yıkama başına en az 15 dakika boyunca dakikada dört mililitre akış hızında etanol ile yıkayın.
HPLC pompasını ve PLC kutusunu kapatın, programı kapatın, sıkıştırılmış havayolunu, argon hattını, karbondioksit hattını ve modülün ana gücünü kapatın. Son dozun yaklaşık 0,1 mililitresini QC şişesinin 0,2 mililitrelik bir ucuna çekin. Kısmi sıra programı metin makalesinde açıklandığı için sıcak örneği çalıştırın.
Enantiyomerik aşırı değer ve molar aktivitedeki kimyasal ve radyokimyasal saflıkları hesaplayarak QC verilerini analiz edin. pH değerini belirledikten sonra, tüm test sonuçları kabul edilebilir aralığı geçerse dozu bırakın. QC için temsili HPLC kromatogramları gösterilmiştir.
Programın 10 dakikasında boşluk hacmi arasındaki önemsiz pikler boş kromatogramda tespit edildi. Radyo-etiketli olmayan standart referans L-floroetil-tripofan, D muadilinin standart referansından iyi ayrılmış tek bir izomerin varlığını gösterdi. L-F18 triptofanın son dozu yüksek kimyasal saflık ve radyokimyasal saflık gösterdi.
Nihai ürünün sekiz saate kadar en yüksek doz konsantrasyonunda stabilite testi, L-F18 triptofanın kimyasal saflık, radyokimyasal saflık, enantiyomerik fazlalık ve pH değeri açısından kararlı olduğunu göstermiştir. %95'ten büyük kimyasal ve radyokimyasal saflıklar bu protokol kullanılarak elde edilmiştir. İzleyici saflaştırma için iki sütun kullanılır.
Kimyasal safsızlıkları gidermek için C18 sütununa geçmeyi unutmayın. Bu yöntemi, flor-18 etiketli triptofan radyotracer'in klinik üretimine hızlı bir şekilde uyarlayabiliriz.
