Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81973569, 82274207 ve 82104533), TCM Chengdu Üniversitesi'nin Xinglin Akademik Araştırma Teşvik Projesi (XKTD2022013) ve Ningxia Temel Araştırma ve Geliştirme Programı (2023BEG02012) tarafından desteklenmiştir.

Rhodiola crenulata Çin'in Sichuan Eyaleti, Ganzi Tibet Özerk İli, Zhuoda Kar Dağı, Ganzi İlçesi'nden (N 31.44570°, D 99.96086°, 4892 m) toplandı. Bitkiler, Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Etnik Tıp Okulu'nda Profesör Yi Zhang tarafından gerçek olarak doğrulandı.
1. Rhodiola crenulata koleksiyonu
<ol><li>Rhodiola crenulata'nın habitat haritasını fotoğraflayın.</li>
	<li>Rhodiola crenulata'nın tüm bitkisini, yapraklarını, kaliksini ve köksapını fotoğraflayın.</li>
	<li>Daha sonra sorunsuz madenciliği sağlamak için Rhodiola crenulata'nın 1 m içindeki yabani otları ve kırık taşları temizlemek için bir kürek kullanın.</li>
	<li>Tüm rizosfer görünene kadar toprağı bir çapa ile kazın ve kazık kökü toplayın. NOT: Tıbbi kısımlarda kullanılan Rhodiola crenulata'nın kökleri ve rizomları, çiçek saplarının solduğu sonbaharda toplanmalıdır.</li>
</ol>2. Karakteristik tanımlama
<ol><li>Rhodiola crenulata'nın görünüm özelliklerini çıplak gözle gözlemleyin: silindirik ve kısa kazık kökler ve rizomlar, kahverengi yüzey, pembe desenli zarlı sarı epidermis ve turuncu-kırmızı veya bordo dilimler.</li>
	<li>Koku ile tanıyın: Burun kenarındayken hoş kokulu bir koku verir.</li>
	<li>Damak tadınıza göre tanımlayın: Ağzınıza küçük bir parça kök alın, önce yudumlayın ve sonra çiğneyin, tadı biraz acı, sonra tatlı.</li>
</ol>3. Tıbbi tozdaki nişasta granüllerinin mikroskobik tanımlanması
<ol><li>Rhodiola crenulata'nın yüzeyindeki toprağı bir fırça ile alın, 40 °C'de fırına koyun ve her 24 saatte bir otları çevirin. NOT: Tıbbi malzemelerin kırılma kolaylığı, nemin kurutulması için standart olarak kabul edilir.</li>
	<li>Kurutulmuş tıbbi malzemeleri bir toz makinesi kullanarak toz haline getirin ve ilaçlı No. 3 elek kullanarak tıbbi tozu süzün (bkz.</li>
	<li>Temiz bir slayt alın (Malzeme Tablosuna bakın), tozu bir diseksiyon iğnesi ile kazın (Malzeme Tablosuna bakın) ve 2 mm içinde slaytın üçte birine eşit şekilde yerleştirin.</li>
	<li>Toza bir damla deiyonize su eklemek için bir cam damlalık kullanın (Malzeme Tablosuna bakın). Sıvı seviyesine hızlı bir şekilde dokunmak ve tozu örtmek için kapak camının bir ucunu tutmak için bir cımbız kullanın (Malzeme Tablosuna bakın). NOT: Numunenin homojen bir şekilde karışmasını sağlamak için su ve tıbbi tozu nazikçe karıştırmak için anatomik bir iğne kullanın. Sürgü, toz ve kapak camı arasında hava kabarcığı olmamalıdır.</li>
	<li>Mikroskobu açın ( Malzeme Tablosuna bakın) ve sabitlemek için 3.4 adımındaki slaytı platforma yerleştirin. Tozu görmek için ışık kaynağını ve kaba odak spiralini ayarlayın. Dokular net bir şekilde görülene kadar ince parafokal spirali ayarlayın. 40x'lik bir hedefe geçin ve nişasta granüllerini gözlemleyin. NOT: Tekli veya çoklu taneler halinde sunulan taneleri nişastalayın ve göbek noktası balıksırtı veya çatlak şeklinde görünür.</li>
</ol>4. Tıbbi tozdaki kateterlerin, mantar hücrelerinin, liflerin, odun parankim hücrelerinin ve pigment kütlelerinin mikroskobik tanımlanması
<ol><li>Temiz bir slayt alın ( Malzeme Tablosuna bakın), tozu bir diseksiyon iğnesi ile kazın (Malzeme Tablosuna bakın) ve slaytın üçte birine yerleştirin.</li>
	<li>Toza bir damla kloral hidrat (Malzeme Tablosuna bakınız) eklemek için bir cam damlalık (Malzeme Tablosuna bakınız) kullanın. Slaytı bir cımbızla alın ( Malzeme Tablosuna bakın) ve alkol lambasında her seferinde 1 saniye boyunca üç kez ısıtın. NOT: Isıtma sırasında kabarcıklardan kaçınılmalıdır. Sıvı akmaz kalır, bu da penetrasyonun tamamlandığını gösterir.</li>
	<li>Bir damla gliserin eklemek için bir cam damlalık kullanın (Malzeme Tablosuna bakın). Sıvı seviyesine hızlı bir şekilde dokunmak için kapak camının bir ucunu tutmak için bir cımbız kullanın.</li>
	<li>Mikroskobu açın ve sabitlemek için slaydı platforma yerleştirin. Tozu görmek için ışık kaynağını ve kaba odak spiralini ayarlayın. Dokular net bir şekilde görülene kadar ince parafokal spirali ayarlayın. 40x objektif merceğe geçerek kateter, mantar hücreleri, lifler, ahşap parankim hücreleri ve pigment bloğunu gözlemleyin. NOT: Mantar hücrelerinin poligonal veya uzun poligonali, bariz sarmal yapıya sahip spiral damar, kalsiyum oksalat kum kristalleri içeren ksilem parankimi ve kırmızı veya kahverengimsi-kırmızı pigment bloğu.</li>
</ol>5. Rhodiola crenulata ince tabaka kromatografik (TLC) numunelerinin hazırlanması ve referansı
<ol><li>Tartım kağıdını teraziye yerleştirin ( Malzeme Tablosuna bakın) ve 3 g Rhodiola crenulata tozunu tartın.</li>
	<li>Tozu 100 mL'lik konik bir şişeye alın ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve büyük bir göbek pipeti ile 25 mL metanol ekleyin (Malzeme Tablosuna bakınız). Konik şişeyi ultrasonik alete koyun. Gücü 250 W'a, frekansı 40 kHz'e ve süreyi 30 dakikaya ayarlayın ( Malzeme Tablosuna bakın) ve cihazı açın. NOT: Ultrason cihazının amacı, Rhodiola crenulata tozunun sonraki ince tabaka kromatografik deneylerin sonuçlarını etkilemeden tamamen çözülmesini sağlamaktır.</li>
	<li>Konik şişeyi çıkarın ve dış şişeyi oda sıcaklığına (RT) kadar akan su ile durulayın.</li>
	<li>Adım 5.3'te hazırlanan 800 μL sıvıyı 1 mL'lik bir şırınga ile aspire edin. 0.22 μm mikro gözenekli filtre membranı ile filtreleyin ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve kromatografik bir numune şişesinde 400 μL orta akış Rhodiola crenulata numune çözeltisi toplayın.</li>
	<li>Tartın ve sırasıyla 3 ayrı 100 mL konik şişeye 2 mg salidrosit, tirosol ve gallik asit ekleyin ( Malzeme Tablosuna bakınız). Her konik şişeye büyük bir göbek pipeti ile 25 mL metanol ekleyin.</li>
	<li>Konik şişeyi ultrasonik alete koyun, gücü 250 W'a, frekansı 40 kHz'e ve zamanı 30 dakikaya ayarlayın ve adım 5.3'ü tekrarlayın (Malzeme Tablosuna bakınız).</li>
	<li>Adım 5.6'da hazırlanan 800 μL sıvıyı 1 mL'lik bir şırınga ile aspire edin. 0.22 μm mikro gözenekli filtre membranı ile filtreleyin (Malzeme Tablosuna bakın) ve ilgili kromatografik numune şişelerinde 400 μL orta akış salidrosid, tirosol ve gallik asit standart çözeltisi toplayın.</li>
</ol>6. TLC tanımlaması
<ol><li>Pipet triklorometan (5 mL), etil asetat (4 mL), metanol (2 mL) ve formik asit (0,5 mL) (bkz. Çift tanklı kromatografi silindirinin bir tarafına ekleyin ( Malzeme Tablosuna bakın), çalkalayın ve eşit şekilde karıştırın. Üst silindir kapağını kapatın.</li>
	<li>Gallik asit, salidrosit, tirosol standart çözeltisi ve Rhodiola crenulata çözeltisini numune rafına A1-A4 konumlarına yerleştirin.</li>
	<li>5 cm x 10 cm silikon levhayı (Malzeme Tablosuna bakın) örnekleme tablosuna yerleştirin. Otomatik numune alma makinesini çalıştırın ( Malzeme Tablosuna bakın) ve hava kontrol valfini açın.</li>
	<li>visionCATS yazılımını açın (bkz. Tamam'> Yeni > Yeni Klasör (Rhodiola crenulata sample test adlı) seçeneğine tıklayın. ATS 4> Tamam'> Yeni Yöntem'e (Rhodiola crenulata örnek testi adı) tıklayın.</li>
	<li>Adım Tanımını Bitir'i tıklatın. Açıklamayı düzenlemek için Atamayı İzle'ye tıklayın (gallik asit, salidrosit, tirosol ve Rhodiola crenulata örneği).</li>
	<li>HPTLC Adımları'na tıklayın. İnce katman parametrelerini ayarlayın (5 cm x 10 cm). Uygulama Türü'nü (bant) seçin, parametreleri ayarlayın (Tablo 1) ve Tamam düğmesine tıklayın.</li>
	<li>Açık Dolum/Durulama Kalitesi. Yalnızca Programlanmış Birimi Doldur'u işaretleyin. Flakon alt seviyesini (mm) 0,5'e ayarlayın ve OK düğmesine basın.</li>
	<li>Execute Method'a (Yöntemi Yürüt) tıklayın.</li>
	<li>Atamayı İzle düğmesini tıklayın, Ortala'yı işaretleyin ve parametreleri ayarlayın (Tablo 2).</li>
	<li>Otomatik örnekleme için Devam düğmesine tıklayın.</li>
	<li>Otomatik numune alma makinesini ve hava valfini kapatın. Silikon tabakayı otomatik numune alma makinesinden çıkarın.</li>
	<li>Silikon tabakayı adım 6.1'de çift tanklı kromatografi silindirinin diğer tarafına koyun, üst silindir kapağını kapatın ve 20 dakika önceden doyurun.</li>
	<li>İnce tabaka plakasının üst ucunu bir cımbızla hafifçe sıkıştırın, silikon tabakayı hızlı bir şekilde geliştirme maddesine yerleştirin ve üst silindir kapağını kapatın. NOT: Açılan ön kenar, ince tabaka plakasının üst ucundan 0.5-1.0 cm uzakta olduğunda silikon tabakayı çıkarın.</li>
	<li>Organik çözücü buharlaştıktan sonra, kromojenik sonuçlar elde etmek için kromojenik çözeltiyi oda sıcaklığında silikon tabakanın yüzeyine püskürtün. NOT: Kromojenik çözelti, %2FeCl3 ve %1K3[Fe(CN)6] içeren sulu bir çözeltidir.</li>
</ol>

Rhodiola crenulate'ın Mikroskobik Karakterizasyonu ve TLC Tabanlı Tanımlanması

<ol>
	<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traditional+herbal+medicine+and+nanomedicine:+Converging+disciplines+to+improve+therapeutic+efficacy+and+human+health.">Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).</li><li>Yin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+positive+role+and+mechanism+of+herbal+medicine+in+Parkinson's+Disease.">The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).</li><li>Li, F. S., Weng, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demystifying+traditional+herbal+medicine+with+modern+approach.">Demystifying traditional herbal medicine with modern approach.</a> Nature Plants. 3, 17109 (2017).</li><li>da Fonseca, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbal+medicinal+products+from+Passiflora+for+anxiety:+An+unexploited+potential.">Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential.</a> The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).</li><li>Aziato, L., Antwi, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Facilitators+and+barriers+of+herbal+medicine+use+in+Accra,+Ghana:+an+inductive+exploratory+study.">Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).</li><li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+species:+A+comprehensive+review+of+traditional+use,+phytochemistry,+pharmacology,+toxicity,+and+clinical+study.">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dietary+supplement+Rhodiola+crenulata+extract+alleviates+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis+in+mice+through+anti-inflammation,+mediating+gut+barrier+integrity+and+reshaping+the+gut+microbiome.">The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome.</a> Food &amp; Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).</li><li>Xie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+crenulate+alleviates+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+via+adjusting+NF-&#954;B/NLRP3-mediated+inflammation.">Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-&#954;B/NLRP3-mediated inflammation.</a> Phytomedicine. 103, 154240 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salidroside,+a+phenyl+ethanol+glycoside+from+Rhodiola+crenulata,+orchestrates+hypoxic+mitochondrial+dynamics+homeostasis+by+stimulating+Sirt1/p53/Drp1+signaling.">Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling.</a> Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).</li><li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+characteristics+of+Rhodiola+Crenulata+and+its+mechanism+in+acute+mountain+sickness+using+UHPLC-Q-TOF-MS/MS+combined+with+network+pharmacology+analysis.">Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+crenulata+attenuates+apoptosis+and+mitochondrial+energy+metabolism+disorder+in+rats+with+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+by+regulating+the+HIF-1&#945;/microRNA+210/ISCU1/2(COX10)+signaling+pathway.">Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1&#945;/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway.</a> Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).</li><li>d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+current+status+of+knowledge+of+herbal+medicine+and+medicinal+plants+in+Fiche,+Ethiopia.">The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia.</a> Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).</li><li>S&#225;nchez, M., Gonz&#225;lez-Burgos, E., Divakar, P. K., G&#243;mez-Serranillos, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-based+authentication+and+metabolomics+analysis+of+medicinal+plants+samples+by+DNA+barcoding+and+ultra-high-performance+liquid+chromatography/triple+quadrupole+mass+spectrometry+(UHPLC-MS).">DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS).</a> Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).</li><li>. Rhodiola renulata (Hook.fil &amp; Thomson) H.Ohba Available from: <a target="_blank" href="https://www.gbif.org/species/4200529">https://www.gbif.org/species/4200529</a> (2023)</li><li>. Plant + data center Available from: <a target="_blank" href="https://www.iplant.cn/">https://www.iplant.cn/</a> (2023)</li><li>. Chinese virtual herbarium Available from: <a target="_blank" href="https://www.cvh.ac.cn/">https://www.cvh.ac.cn/</a> (2023)</li><li>Cunningham, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=There+&amp;#34;ain't+no+mountain+high+enough&amp;#34;?:+The+drivers,+diversity+and+sustainability+of+China's+Rhodiola+trade.">There &amp;#34;ain't no mountain high enough&amp;#34;?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade.</a> Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).</li><li>Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Rhodiola+species+by+using+RP-HPLC.">Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC.</a> Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).</li><li>Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+two+major+Rhodiola+species+and+the+systemic+changing+characteristics+of+metabolites+of+Rhodiola+crenulata+in+different+altitudes+by+chemical+methods+combined+with+UPLC-QqQ-MS-based+metabolomics.">Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics.</a> Molecules. 25 (18), 4062 (2020).</li><li>Zhao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPLC+fingerprint+differentiation+between+natural+and+ex+situ+populations+of+Rhodiola+sachalinensis+from+Changbai+Mountain,+China.">HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China.</a> PloS One. 9 (11), 112869 (2014).</li><li>Yu, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+evaluation+of+Tibetan+medicine+Rhodiolae+crenulatae+radix+et+rhizome+based+on+sensory+recognition+and+near+infrared+spectrum+analysis.">Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis.</a> Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).</li><li>Lv, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+determination+of+5+chemical+components+in+3+kinds+of+Rhodiola+rosea+by+HPLC.">Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC.</a> China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).</li><li>Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altitudinal+variation+of+metabolites,+mineral+elements+and+antioxidant+activities+of+Rhodiola+crenulata+(Hook.f.+&amp;+Thomson)+H.Ohba.">Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. &amp; Thomson) H.Ohba.</a> Molecules. 26 (23), 7383 (2021).</li><li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+UHPLC+fingerprints+combined+with+chemical+pattern+recognition+analysis+in+the+differentiation+of+six+Rhodiola+species.">Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species.</a> Molecules. 26 (22), 6855 (2021).</li><li>Li, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+discrimination+of+different+Rhodiola+species+using+1H-NMR+and+GEP+combinational+chemometrics.">Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics.</a> Chemical &amp; Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Hippophae+species+(Shaji)+through+DNA+barcodes.">Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes.</a> Chinese Medicine. 10, 28 (2015).</li></ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Dünyada 90'dan fazla Rhodiola bitkisi türü vardır ve tüm türlerin %60'ından fazlası Çin'de bulunur, Rhodiola crenulata, Rhodiola rosea, Rhodiolas achalinensis ve Rhodiola algida17 dahil olmak üzere yaygın olanlar. Çin Farmakopesi'nin (2020) ilk bölümünde kaydedilen Rhodiola crenulata, yüksek irtifalarda yetişen geleneksel bir Tibet tıbbıdır. Rhodiola crenulata için pazar talebi her yıl artmaktadır, bu nedenle kaynağın doğru ku...

Bitkisel tıbbın Çin'de uzun bir geçmişi ve zengin uygulama deneyimi vardır ve Shennong'un bitkisel klasiği1'deki ilk sistematik kayıttır. Sıtmaya uygulanan artemisinin keşfi, bitkisel ilaçların gelişimini yeni bir aşama1'e teşvik etti. Bitkisel tıbbın kesin mekanizmasını ortaya çıkarmak için modern bilimsel teknolojinin kullanılması, bitkisel ilaçlara olan kullanım oranını ve talebi artırarak bunun için yeni bir uluslararası pazar açmaktadır 2,3,4. Ancak, bu bir dizi olumsuz etkiye yol açmıştır. Profesyonel olmayanlar, bitkisel ilaçların özelliklerini belirsiz bir şekilde anlamaktadır, bu da bitkisel ilaç kullanımını büyük bir güvenlik riskiyle karşı karşıya bırakmaktadır5.
Rhodiola türünün bitkilerinden biri olan Rhodiola crenulata, esas olarak Tibet, kuzeybatı Yunnan ve Çin'in batı Sichuan'ında yayılış gösterir (Şekil 1)6,7. Rhodiola crenulata "qi'yi canlandırma ve kan dolaşımını teşvik etme, nabzı temizleme ve astımı yatıştırma" işlevi ile hipoksik ilişkili hastalıkların tedavisi için salidrosid, tirosol, gallik asit ve diğer bileşikleri içerir8,9,10,11. Saha araştırması, Rhodiola crenulata'nın 4.000-5.600 m yükseklikte alpin talus bölgelerinde, oluk yamaçlarında ve kaya yarıklarında bulunabileceğini göstermektedir. Yetiştirme ortamı soğuk, güneş ışığı ve yoğun radyasyonla doludur ve alpin çayır ekosistemine aittir. Rhodiola crenulata büyüme alanına göre lameller ve nokta benzeri popülasyonlarda dağılabilir ve gen akışı çapraz tozlaşma yoluyla gerçekleştirilebilir.
Rhodiola cinsinin polen kürtajı, yasadışılık kazısı ve yozlaşmış ekolojik çevre, Rhodiola crenulata'yı nesli tükenmekte olan bir türhaline getirmektedir 6,12. Rhodiola crenulata'nın yüksek tıbbi değeri göz önüne alındığında, sahte ürünlerin piyasaya akması bekleniyor. Bu makale, Rhodiola crenulata habitatını ve bazı uygun laboratuvar tanımlama yöntemlerini sunmaktadır. İlk olarak, Rhodiola crenulata'nın büyüme ortamını ve tıbbi özelliklerini gözlemledik. İkinci olarak, tıbbi tozun mikro yapısı mikroskopla gözlendi. Son adım kilit noktadır. Rhodiola crenulata'nın temsili bileşenleri, bu bileşenlerin belirli bir maddedeki farklı adsorpsiyon veya çözünme özelliklerine göre ayrıldı ve tanımlandı. Tıbbi bitkilerin DNA tabanlı kimlik doğrulama veya metabolomik analiz yöntemleri karmaşık ve pahalıdır13. Bu temel, kullanışlı ve ekonomik yöntemler, Rhodiola crenulata'yı hızlı bir şekilde tanımlayabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#956;m millipore filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGP033RB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic sampling machine</td>
			<td>CAMAG</td>
			<td>ATS 4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloral hydrate</td>
			<td>Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd</td>
			<td>ST1002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromatographic&#160;sample&#160;bottles</td>
			<td>Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd</td>
			<td>C0000008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical flask</td>
			<td>Sichuan Shubo Co., Ltd</td>
			<td>1121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd</td>
			<td>10211818c</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting needle</td>
			<td>Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd</td>
			<td>BY-5026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>SHIMADZU</td>
			<td>ATX124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>2022120901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formic acid</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>2021110801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid</td>
			<td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td>
			<td>M-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd</td>
			<td>10010618</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High speed&#160; crusher</td>
			<td>Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd</td>
			<td>FW-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>20230108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Chongqing Oprec Nistrument Co.,&#160; Ltd</td>
			<td>B203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slide</td>
			<td>Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd</td>
			<td>7105P-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td>DHG-8145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pharmacopoeia sieve</td>
			<td>Hangzhou Xingrun sieve factory</td>
			<td>572423281330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette</td>
			<td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>120302008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salidroside</td>
			<td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td>
			<td>H-040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saturate tank&#160;</td>
			<td>Yancheng Liegu Technology Co., Ltd</td>
			<td>10*20 P-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica gel plate</td>
			<td>Yantai Jiangyou Silica Gel Development&#160; Co., Ltd</td>
			<td>HSG20211227</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloromethane</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>20221013-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezer&#160;</td>
			<td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>130302027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyrosol</td>
			<td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td>
			<td>L-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound equipment</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td>
			<td>SB-8200DTS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric pipet</td>
			<td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>120301006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

field collection and laboratory routine identification of rhodiola crenulata

Tıbbi materyallerin tanımlanması, ilaç güvenliğinin öncülü ve garantisidir. Bilimsel araştırmacıların çoğu, bitkilerin basit, hızlı, etkili ve ucuz tanımlama sürecini tercih etmek zorundadır. Rhodiola crenulata , çoğunlukla Çin'in Tibet, Yunnan ve Sichuan bölgelerinde dağıtılan, yüksek rakımlarda yetişen geleneksel bir Tibet tıbbıdır. Rhodiola crenulate , anti-inflamatuar, anti-hipoksi ve antioksidan özellikler gibi çoklu biyoaktivitelere sahiptir ve gelişme için büyük bir potansiyele sahiptir. Artan pazar talebi ve kaynak içeriğindeki hızlı düşüşle birlikte, Rhodiola crenulata'nın çok sayıda kafası karışmış ürünü insanları rahatsız ediyor. Bu nedenle, bu protokol, rutin laboratuvar testleri ile birlikte sahada Rhodiola crenulata tanımlanması için standart bir süreç sunar. Habitat, mikroskobik özellikler ve ince tabaka kromatografisinin kombinasyonu, şüphesiz Rhodiola crenulata'yı hızlı, verimli ve ekonomik bir şekilde tanımlayacak ve Tibet tıbbının sürekli gelişimine ve tıbbi malzemelerin kalite kontrolüne katkıda bulunacaktır.

Bu deneysel protokol, sahada Rhodiola crenulate'ın tanımlanmasını ve toplanmasını açıklar. Rhodiola crenulate , yüksek rakımlarda alpin talus bölgelerinde, oluk yamaçlarında ve kaya yarıklarında yaşama eğilimindedir. Rhodiola crenulate'in habitatı, bütün bitkisi, çiçeği ve yaprakları Şekil 2'de gösterilebilir. Rhodiola crenulate kırmızımsı kahverengi bir köksapa sahiptir (Şekil 3A). Tıbbi tozun...

Watch this Scientific Journal Video about Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata at JoVE.com

Yazar Gündemi: Rhodiola crenulata için Tanımlama Yöntemlerinin Geliştirilmesi ve Kaynak Dağılımı ve Farmakolojik Etkilerinin Araştırılması

Burada, Rhodiola Crenulata'nın habitat, bitki morfolojisi, tıbbi özellikler, mikroskobik özellikler ve ince tabaka kromatografisinden tanımlanmasını açıklıyoruz.

Rhodiola crenulata için Saha Toplama ve Laboratuvar Rutin Tanımlaması

The identification of medicinal materials is the premise and guarantee of drug safety. The majority of scientific researchers are bound to favor the ...

Araştırmamızın kapsamı, etnik tıbbın bir kaynak araştırmasının yürütülmesine odaklanmıştır. Özellikle, bu çalışma Rhodiola crenulata'nın tanımlanması için hızlı ve uygun yöntemler geliştirmeyi amaçlamaktadır. Sunduğumuz protokol, çeşitli tıbbi bitkisel materyalleri tanımlamak için uygun maliyetli, basit ve hızlı bir yöntem sunar.Laboratuvarımız gelecekteki araştırma çabalarını iki ana alanı, Rhodiola crenulata ile ilişkili araştırmaların dağılımı ve bu türün farmakolojik etkileri üzerine yoğunlaştıracaktır.

field-collection-laboratory-routine-identification-rhodiola

Research

JoVE Journal

Medicine

Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata

548 Görüntüleme.  Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. Araştırmamızın kapsamı, etnik tıbbın bir kaynak araştırmasının yürütülmesine odaklanmıştır. Özellikle, bu çalışma Rhodiola crenulata'nın tanımlanması için hızlı ve uygun yöntemler geliştirmeyi amaçlamaktadır. Sunduğumuz protokol, çeşitli tıbbi bitkisel materyalleri tanımlamak için uygun maliyetli, basit ve hızlı bir yöntem sunar.Laboratuvarımız gelecekteki araştırma çabalarını iki ana alanı, Rhodiola crenulata ile ilişkili araştırmalar...

Video: Yazar Gündemi: Rhodiola crenulata için Tanımlama Yöntemlerinin Geliştirilmesi ve Kaynak Dağılımı ve Farmakolojik Etkilerinin Araştırılması

Collection Protocol for Human Pancreas

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation of pancreas recovered from cadaveric organ donors. The pancreas is divided into 3 main regions (head, body, tail) followed by serial transverse sections throughout the medial to lateral axis. Alternating sections are used for fixed paraffin and fresh frozen blocks and remnant samples are minced for snap frozen sample preparations, either with or without RNAse inhibitors, for DNA, RNA, or protein isolation. The overall goal of the pancreas dissection procedure is to sample the entire pancreas while maintaining anatomical orientation.
Endocrine cell heterogeneity in terms of islet composition, size, and numbers is reported for human islets compared to rodent islets 1. The majority of human islets from the pancreas head, body and tail regions are composed of insulin-containing &beta;-cells followed by lower proportions of glucagon-containing &alpha;-cells and somatostatin-containing &delta;-cells. Pancreatic polypeptide-containing PP cells and ghrelin-containing epsilon cells are also present but in small numbers. In contrast, the uncinate region contains islets that are primarily composed of pancreatic polypeptide-containing PP cells 2. These regional islet variations arise from developmental differences. The pancreas develops from the ventral and dorsal pancreatic buds in the foregut and after rotation of the stomach and duodenum, the ventral lobe moves and fuses with the dorsal 3. The ventral lobe forms the posterior portion of the head including the uncinate process while the dorsal lobe gives rise to the rest of the organ. Regional pancreatic variation is also reported with the tail region having higher islet density compared to other regions and the dorsal lobe-derived components undergoing selective atrophy in type 1 diabetes4,5.
Additional organs and tissues are often recovered from the organ donors and include pancreatic lymph nodes, spleen and non-pancreatic lymph nodes. These samples are recovered with similar formats as for the pancreas with the addition of isolation of cryopreserved cells. When the proximal duodenum is included with the pancreas, duodenal mucosa may be collected for paraffin and frozen blocks and minced snap frozen preparations.

This video demonstrates a dissection procedure for processing human pancreas into multiple storage formats. Anatomical orientation is maintained throughout the pancreatic regions to allow definition of regional islet composition and density.

İnsan Pankreas için Toplama Protokolü

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Tıp

The Use of Primary Human Fibroblasts for Monitoring Mitochondrial Phenotypes in the Field of Parkinson's Disease

Parkinson's disease (PD) is the second most common movement disorder and affects 1% of people over the age of 60 1. Because ageing is the most important risk factor, cases of PD will increase during the next decades 2. Next to pathological protein folding and impaired protein degradation pathways, alterations of mitochondrial function and morphology were pointed out as further hallmark of neurodegeneration in PD 3-11.
After years of research in murine and human cancer cells as in vitro models to dissect molecular pathways of Parkinsonism, the use of human fibroblasts from patients and appropriate controls as ex vivo models has become a valuable research tool, if potential caveats are considered. Other than immortalized, rather artificial cell models, primary fibroblasts from patients carrying disease-associated mutations apparently reflect important pathological features of the human disease.
Here we delineate the procedure of taking skin biopsies, culturing human fibroblasts and using detailed protocols for essential microscopic techniques to define mitochondrial phenotypes. These were used to investigate different features associated with PD that are relevant to mitochondrial function and dynamics. Ex vivo, mitochondria can be analyzed in terms of their function, morphology, colocalization with lysosomes (the organelles degrading dysfunctional mitochondria) and degradation via the lysosomal pathway. These phenotypes are highly relevant for the identification of early signs of PD and may precede clinical motor symptoms in human disease-gene carriers. Hence, the assays presented here can be utilized as valuable tools to identify pathological features of neurodegeneration and help to define new therapeutic strategies in PD.

The Use of Primary Human Fibroblasts for Monitoring Mitochondrial Phenotypes in the Field of Parkinson&#039;s Disease

Fibroblasts from patients carrying mutations in Parkinson's disease-causing genes represent an easily accessible ex vivo model to study disease-associated phenotypes. Live cell imaging gives the opportunity to study morphological and functional parameters in living cells. Here we describe the preparation of human fibroblasts and subsequent monitoring of mitochondrial phenotypes.

Parkinson Hastalığı Alanında Mitokondriyal Fenotiplerinin İzleme İlköğretim İnsan Fibroblast Kullanımı

Parkinson's disease (PD) is the second most  common movement disorder and affects 1% of people over the age of 60 1. Because ageing is  the most important ...

Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 reached a staggering sum of $190.2 billion in direct medical costs alone. Obesity is a major risk factor for a wide host of diseases. Historically, little was known regarding adipose and its major and essential functions in the body. Brown and white adipose are the two main types of adipose but current literature has identified a new type of fat called brite or beige adipose. Research has shown that adipose depots have specific metabolic profiles and certain depots allow for a propensity for obesity and other related disorders. The goal of this protocol is to provide researchers the capacity to identify and excise adipose depots that will allow for the analysis of different factorial effects on adipose; as well as the beneficial or detrimental role adipose plays in disease and overall health. Isolation and excision of adipose depots allows investigators to look at gross morphological changes as well as histological changes. The adipose isolated can also be used for molecular studies to evaluate transcriptional and translational change or for in vitro experimentation to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to other published techniques due to the design allowing for isolation of multiple depots with simplicity and minimal contamination.

Due to the drastic and negative connection between obesity and other comorbidities, research on the role adipose plays in disease and overall health is warranted. We present a protocol for the isolation and excision of adipose depots allowing for the study of adipose using in situ and in vitro methods.

Yerelleştirme, Kimlik ve Eksizyon Kemirgen Yağ depolarının

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 ...

Methodology for Sputum Induction and Laboratory Processing

The technique of sputum induction and processing is a recognized non-invasive method allowing the collection and analysis of cells from the airways, which is interesting in various respiratory diseases like asthma, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), chronic cough, or idiopathic pulmonary fibrosis. This technique is well tolerated, safe and non-invasive, but is currently limited to research services and specialized centers in clinical practice because it is technically demanding, time-consuming, and requires trained staff. The success rate of sputum induction and analysis is about 80%.
Here, we describe the induction and laboratory processing of sputum samples. Sputum is induced by inhalation of hypertonic or isotonic saline with salbutamol. For the processing, we use the whole sputum technique. Dithiothreitol (DTT) is used to allow mucolysis of sputum samples. The primary aim of sputum processing is to obtain a differential cell count to study the cell types present in the airway lumen. Additional analyses may also be performed on sputum supernatant and sputum cells, which may allow further investigation into inflammatory processes and immune mechanisms. Examples include studying mediators in sputum supernatant and performing a large spectrum of analysis on sputum cells such as flow cytometry, genomics, or proteomics.
Finally, representative results of sputum analysis in healthy controls, asthmatics, and COPD patients are presented.

Here we describe the technique of sputum induction. This protocol also explains the sputum processing to perform a differential cell count and to collect sputum supernatant and cells for further analysis.

Metodoloji balgam indüksiyon ve laboratuvar için

The technique of sputum induction and processing is a recognized non-invasive method allowing the collection and analysis of cells from the airways, which ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood banks. Cells fragment off microparticles (MP) when they are stressed. Blood and blood components may contain cellular fragments from a variety of cells, most notably from activated platelets. When performing their roles as innate immune cells and major players in coagulation and hemostasis, platelets change shape and generate microparticles. With dynamic light scattering (DLS)-based microparticle detection, it is possible to differentiate activated (high microparticle) from non-activated (low microparticle) platelets in transfusions, and optimize the use of this scarce blood product. Previous research suggests that providing non-activated platelets for prophylactic use in hematology-oncology patients could reduce their risk of becoming refractory and improve patient care. The goal of this screening method is to routinely differentiate activated from non-activated platelets. The method described here outlines the steps to be performed for routine platelet inventory management in a hospital blood bank: obtaining a sample from a platelet transfusion, loading the sample into the capillary for DLS measurement, performing the DLS test to identify microparticles, and using the reported microparticle content to identify activated platelets.

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative in hospital blood banks. The goal is to differentiate activated from non-activated platelets to optimize the use of platelets. Providing non-activated platelets to hematology-oncology patients might reduce their high risk to become refractory.

Trombosit transfüzyonları Microparticles için yöntem eleme rutin

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Remote Laboratory Management: Respiratory Virus Diagnostics

An uptick in recent pandemics (Ebola, Zika, MERS, influenza, etc.) underlines the need for a more 'nimble,' coordinated response that addresses a multitude of issues ranging from transportation, access, facilities, equipment, and communication to provider training. To address this need, we have developed an innovative, scalable, logistics-enhanced, mobile, laboratory facility for emergencies and epidemics in resource-constrained global settings. Utilizing a background in clinical operations as an academic medical center, we designed a rapidly-deployable, modular BSL-2 and BSL-3 facility with user-friendly software for tracking and management of drugs and supplies in remote regions during epidemics and outbreaks. Here, we present our intermodal, mobile, expandable shipping-container laboratory units. The design of the laboratory facilitates off-grid usage by minimizing power consumption and allowing alternate water sources. The unit's information communication technology (ICT) platform provides (i) user-friendly tablet-based documentation, (ii) enhanced tracking of patients and supplies, and (iii) integrated communication onsite with built-in telehealth capabilities. To ensure quality in remote environments, we have developed a checklist for a basic laboratory workflow and a protocol for respiratory viral diagnosis using reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). As described, this innovative and comprehensive approach allows for the provision of laboratory capability in resource-limited global environments.

A rapidly-deployable, off-grid laboratory has been designed and built for remote, resource-constrained global settings. The features and critical aspects of the logistically-enhanced, expandable, multifunctional laboratory modules are explored. A checklist for a basic laboratory workflow and a protocol for a respiratory viral diagnostic test are developed and presented.

Uzak Laboratuvar Yönetimi: Solunum virüs tanılama

An uptick in recent pandemics (Ebola, Zika, MERS, influenza, etc.) underlines the need for a more 'nimble,' coordinated response that addresses a ...

Learning Modern Laryngeal Surgery in a Dissection Laboratory

Surgery for laryngeal malignancies requires millimetric accuracy from the different endoscopic and open techniques available. Practice of this surgery is almost completely reserved to a few referral centers that deal with a large proportion of this pathology. Practice on human specimens is not always possible for ethical, economic, or availability reasons. The aim of this study is to provide a reproducible method for the organization of a laryngeal laboratory on ex vivo animal models where it is possible to approach, learn, and refine laryngeal techniques. Porcine and ovine larynges are ideal, affordable, models to simulate laryngeal surgery given their similarity to the human larynx in their anatomical layout and tissue composition. Herein, the surgical steps of transoral laser surgery, open partial horizontal laryngectomy, and total laryngectomy are reported. The merging of endoscopic and exoscopic views guarantees an inside-out perspective, which is vital for the comprehension of the complex laryngeal anatomy. The method was successfully adopted during three sessions of a dissection course &#34;Lary-Gym&#34;. Further perspectives on robotic surgical training are described.

The purpose of this paper is to illustrate how to organize a reproducible laboratory for laryngeal surgery on affordable and closely similar animal laryngeal models in order to improve anatomical and surgical knowledge and skills.

Diseksiyon Laboratuvarında Modern Laringeal Cerrahi Öğrenme

Surgery for laryngeal malignancies requires millimetric accuracy from the different endoscopic and open techniques available. Practice of this surgery is ...

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, establishing a method to determine the multi-component in vitro dissolution of RG is of great significance for quality control. This study uses the second paddle method of the fourth general rule 0931 from the Chinese Pharmacopoeia (2020 edition), compliant with apparatus 2 of the United States Pharmacopeia (USP). The dissolution apparatus was set to a rotation speed of 100 rpm with ultrapure water as the dissolution medium. A sample volume of 1 mL was collected at each timepoint. Furthermore, the cumulative dissolution of gallic acid, salidroside, and ethyl gallic acid in RG at different time points was determined by high-performance liquid chromatography (HPLC). Finally, the dissolution curves were drawn, and the curves were fitted to the GompertzMod, the Gompertz, the Logistic, and the Weibull equations. The results showed that the cumulative dissolution of gallic acid in RG was over 80% at 1 min, the cumulative dissolution of salidroside and ethyl gallic acid was over 65% at 5 min, and the cumulative dissolution of each index component decreased after 30 min. The curve fitting demonstrated that the GompertzMod equation was the best-fitting model for each index component of RG. In conclusion, the dissolution test method described in this protocol is simple, accurate, and reliable. It can characterize the dissolution behavior of the index components in RG in vitro, which provides a methodological reference for quality control of RG and quality evaluation of other ethnic compounds.

An In Vitro Dissolution Determination of Multi-Index Components in Tibetan Medicine Rhodiola Granules

Here, we test the dissolution of Rhodiola granules (RG) in vitro, draw dissolution curves of salidroside, gallic acid, and ethyl gallate in ultrapure water, and fit the curves to different mathematical models. This protocol provides information and guidance for in vivo bioequivalence and in vivo-in vitro correlation studies of RG.

Tibet Tıbbında Rhodiola Granüllerinde Çok İndeksli Bileşenlerin In Vitro Çözünme Tayini

The composition of the Tibetan medicine Rhodiola granules (RG) is complex, and the overall quality of RG is difficult to determine. Therefore, ...

Ferric Chloride-Induced Arterial Thrombosis and Sample Collection for 3D Electron Microscopy Analysis

Cardiovascular diseases are a leading cause of mortality and morbidity worldwide. Aberrant thrombosis is a common feature of systemic conditions like diabetes and obesity, and chronic inflammatory diseases like atherosclerosis, cancer, and autoimmune diseases. Upon vascular injury, usually the coagulation system, platelets, and endothelium act in an orchestrated manner to prevent bleeding by forming a clot at the site of the injury. Abnormalities in this process lead to either excessive bleeding or uncontrolled thrombosis/insufficient antithrombotic activity, which translates into vessel occlusion and its sequelae. The FeCl3-induced carotid injury model is a valuable tool in probing how thrombosis initiates and progresses in vivo. This model involves endothelial damage/denudation and subsequent clot formation at the injured site. It provides a highly sensitive, quantitative assay to monitor vascular damage and clot formation in response to different degrees of vascular damage. Once optimized, this standard technique can be used to study the molecular mechanisms underlying thrombosis, as well as the ultrastructural changes in platelets in a growing thrombus. This assay is also useful to study the efficacy of antithrombotic and antiplatelet agents. This article explains how to initiate and monitor FeCl3-induced arterial thrombosis and how to collect samples for analysis by electron microscopy.

The present protocol describes how to use a FeCl3-mediated injury to induce arterial thrombosis, and how to collect and prepare arterial injury samples at various stages of thrombosis for electron microscopy analysis.

Ferrik Klorür Kaynaklı Arteriyel Tromboz ve 3D Elektron Mikroskobu Analizi için Numune Toplama

Cardiovascular diseases are a leading cause of mortality and morbidity worldwide. Aberrant thrombosis is a common feature of systemic conditions like ...

İnsan Limbal Niş Hücrelerini İzole Etmek, Kültürlemek ve Tanımlamak için Bir Protokol

Isolation and Identification of Limbal Niche Cells

Here we report a standard procedure for the isolation and identification of limbal niche cells (LNCs). Limbus tissue obtained from an eye bank was used for LNCs isolation. The tissue was divided into 12 pieces under aseptic conditions and digested for 18 h at 37 &#176;C in the cell culture incubator using collagenase A to obtain cell clusters with LNCs and limbal&#160;epithelial progenitor cells. The cell clusters were further digested for 15 min at 37 &#176;C using 0.25% trypsin-EDTA to obtain single cells and then cultured in modified embryonic stem cell medium (MESCM) on a plastic surface coated with 5% Matrigel. Cells were passaged upon 70% confluence, and LNCs were identified using immunofluorescence, real-time quantitative PCR (qPCR), and flow cytometry. Primary LNCs were isolated and passaged more than 12 times. The proliferation activity of LNCs from P4 to P6 was the highest. LNCs expressed higher stem cell markers than BMMSCs (SCF, Nestin, Rex1, SSEA4, CD73, CD90, MSX1, P75NTR, and PDGFR&#946;). Furthermore, results showed that P4 LNCs uniformly expressed VIM, CD90, CD105, and PDGFR&#946;, but not Pan-CK, which could be used as a marker for the identification of LNCs. Flow cytometric analysis showed that approximately 95%, 97%, 92%, and 11% of LNCs expressed CD73, CD90, CD105, and SCF respectively, while they were&#160;68%, 99%, 20%, and 3% in&#160;BMMSCs. The standard process for LNC&#160;isolation and identification could provide&#160;a reliable laboratory basis for the widespread use of LNCs.

Yazar Gündemi: Yaygın LNC Araştırmalarını Desteklemek için Limbal Niş Hücre (LNC) İzolasyonunun ve Karakterizasyonunun Standardizasyonu 

Here, we present a protocol to isolate and identify the human limbal niche cells.

Limbal Niş Hücrelerin İzolasyonu ve Tanımlanması

Here we report a standard procedure for the isolation and identification of limbal niche cells (LNCs). Limbus tissue obtained from an eye bank was used ...