تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81973569 و 82274207 و 82104533) ، ومشروع تعزيز أبحاث Xinglin Scholar التابع لجامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي (XKTD2022013) ، وبرنامج البحث والتطوير الرئيسي في نينغشيا (2023BEG02012).

يتم جمع رهوديولا كرينولاتا من جبل Zhuoda Snow ، مقاطعة Ganzi ، محافظة Ganzi التبتية ذاتية الحكم ، مقاطعة سيتشوان ، الصين (N 31.44570 ° ، E 99.96086 ° ، 4892 م). تم اعتماد النباتات على أنها أصلية من قبل البروفيسور يي تشانغ في كلية الطب العرقي ، جامعة تشنغدو للطب الصيني التقليدي.
1. مجموعة من رهوديولا كرينولاتا
<ol><li>صور خريطة الموائل رهوديولا كرينولاتا.</li>
	<li>صور النبات بأكمله ، والأوراق ، والكأس ، وجذمور رهوديولا كرينولاتا.</li>
	<li>استخدم الأشياء بأسمائها الحقيقية لإزالة الأعشاب الضارة والأحجار المكسورة على بعد 1 متر من رهوديولا كرينولاتا لضمان التعدين السلس اللاحق.</li>
	<li>حفر التربة مع مجرفة حتى يتم رؤية جذري كامل وجمع الجذر. ملاحظة: يجب جمع جذور وجذور رهوديولا كرينولاتا المستخدمة في الأجزاء الطبية في الخريف ، عندما تذبل الزهرة.</li>
</ol>2. تحديد مميز
<ol><li>راقب سمات مظهر رهوديولا كرينولاتا بالعين المجردة: جذور وجذور أسطوانية وقصيرة ، سطح بني ، بشرة صفراء غشائية بنمط وردي ، وشرائح برتقالية حمراء أو بورجوندي.</li>
	<li>التعرف عليه عن طريق الرائحة: يعطي رائحة عطرة عندما يكون بالقرب من الأنف.</li>
	<li>حدده حسب الذوق: خذ قطعة صغيرة من الجذر في الفم ، ورشفها أولا ثم امضغها ، وتذوقها مريرة قليلا ، ثم حلوة.</li>
</ol>3. التحديد المجهري لحبيبات النشا في مسحوق طبي
<ol><li>قم بإزالة التربة الموجودة على سطح رهوديولا كرينولاتا بفرشاة ، وضعها في الفرن على حرارة 40 درجة مئوية ، واقلب الأعشاب كل 24 ساعة. ملاحظة: تعتبر سهولة تكسير المواد الطبية معيارا لتجفيف الرطوبة.</li>
	<li>قم بمسحوق المواد الطبية المجففة باستخدام آلة المسحوق وقم بتصفية المسحوق الطبي باستخدام المنخل الطبي رقم 3 (انظر جدول المواد).</li>
	<li>خذ شريحة نظيفة (انظر جدول المواد) ، وحفر المسحوق بإبرة تشريح (انظر جدول المواد) ، وضعه بالتساوي في ثلث الشريحة في حدود 2 مم.</li>
	<li>استخدم قطارة زجاجية (انظر جدول المواد) لإضافة قطرة من الماء منزوع الأيونات إلى المسحوق. استخدم ملقط (انظر جدول المواد) لتثبيت أحد طرفي زجاج الغطاء (انظر جدول المواد) للمس مستوى السائل بسرعة وتغطية المسحوق. ملاحظة: استخدم إبرة تشريحية لخلط الماء والمسحوق الطبي برفق لضمان خلط العينات بشكل موحد. يجب ألا تكون هناك فقاعات هواء بين الشريحة والمسحوق وغطاء الزجاج.</li>
	<li>افتح المجهر (انظر جدول المواد) وضع الشريحة في الخطوة 3.4 على المنصة لتثبيتها. اضبط مصدر الضوء ودوامة التركيز الخشنة لرؤية المسحوق. اضبط اللولب شبه البؤري الدقيق حتى ترى الأنسجة بوضوح. قم بالتبديل إلى هدف 40x وراقب حبيبات النشا. ملاحظة: نشا الحبوب التي تظهر على شكل حبيبات مفردة أو متعددة ، وتظهر النقطة السرية متعرجة أو على شكل صدع.</li>
</ol>4. التحديد المجهري للقسطرة وخلايا الفلين والألياف وخلايا حمة الخشب والكتل الصبغية في مسحوق طبي
<ol><li>خذ شريحة نظيفة (انظر جدول المواد) ، واحفر المسحوق بإبرة تشريح (انظر جدول المواد) ، وضعه في ثلث الشريحة.</li>
	<li>استخدم قطارة زجاجية (انظر جدول المواد) لإضافة قطرة من هيدرات الكلورال (انظر جدول المواد) إلى المسحوق. خذ الشريحة بملقط (انظر جدول المواد) وقم بتسخينها في مصباح الكحول ثلاث مرات ، في كل مرة لمدة 1 ثانية. ملاحظة: يجب تجنب الفقاعات أثناء التسخين. يبقى السائل غير متدفق ، مما يشير إلى اكتمال الاختراق.</li>
	<li>استخدم قطارة زجاجية لإضافة قطرة من الجلسرين (انظر جدول المواد). استخدم ملقط لتثبيت أحد طرفي غطاء الزجاج للمس مستوى السائل بسرعة.</li>
	<li>افتح المجهر وضع الشريحة على المنصة لتثبيتها. اضبط مصدر الضوء ودوامة التركيز الخشنة لرؤية المسحوق. اضبط اللولب شبه البؤري الدقيق حتى ترى الأنسجة بوضوح. راقب القسطرة وخلايا الفلين والألياف وخلايا النسيج البرنشيمي الخشبي وكتلة الصباغ عن طريق التبديل إلى عدسة موضوعية 40x. ملاحظة: مضلع أو طويل الأضلاع لخلايا الفلين ، وعاء حلزوني ذو بنية حلزونية واضحة ، حمة نسيج الخشب تحتوي على بلورات رمل أكسالات الكالسيوم ، وكتلة صبغة حمراء أو بنية حمراء.</li>
</ol>5. تحضير عينات كروماتوغرافية رقيقة الطبقة (TLC) من رهوديولا كرينولاتا ومرجعها
<ol><li>ضع ورق الوزن على الميزان (انظر جدول المواد) وقم بوزن 3 جم من مسحوق رهوديولا كرينولاتا.</li>
	<li>خذ المسحوق في زجاجة مخروطية سعة 100 مل (انظر جدول المواد) ، وأضف 25 مل من الميثانول مع ماصة بطن كبيرة (انظر جدول المواد). ضع الزجاجة المخروطية في أداة الموجات فوق الصوتية. اضبط الطاقة على 250 واط ، والتردد على 40 كيلو هرتز ، والوقت على 30 دقيقة (انظر جدول المواد) ، وقم بتشغيل الجهاز. ملاحظة: الغرض من أداة الموجات فوق الصوتية هو التأكد من إذابة مسحوق رهوديولا كرينولاتا تماما دون التأثير على نتائج التجارب الكروماتوغرافية اللاحقة للطبقة الرقيقة.</li>
	<li>قم بإزالة الزجاجة المخروطية وشطف الزجاجة الخارجية بالماء الجاري إلى درجة حرارة الغرفة (RT).</li>
	<li>نضح 800 ميكرولتر من السائل المحضر في الخطوة 5.3 باستخدام حقنة 1 مل. قم بالترشيح باستخدام غشاء مرشح صغير يسهل اختراقه 0.22 ميكرومتر (انظر جدول المواد) واجمع 400 ميكرولتر من محلول عينة منتصف مجرى الطريق من رهوديولا كرينولاتا في زجاجة عينة كروماتوغرافية.</li>
	<li>قم بوزن وإضافة 2 مجم من الساليدروسيد والتيروسول وحمض الغال (انظر جدول المواد) في 3 زجاجات مخروطية منفصلة سعة 100 مل ، على التوالي. أضف 25 مل من الميثانول مع ماصة بطن كبيرة في كل زجاجة مخروطية.</li>
	<li>ضع الزجاجة المخروطية في أداة الموجات فوق الصوتية ، واضبط الطاقة على 250 واط ، والتردد على 40 كيلو هرتز ، والوقت على 30 دقيقة ، وكرر الخطوة 5.3 (انظر جدول المواد).</li>
	<li>نضح 800 ميكرولتر من السائل المحضر في الخطوة 5.6 باستخدام حقنة سعة 1 مل. قم بالتصفية باستخدام غشاء مرشح صغير يسهل اختراقه 0.22 ميكرومتر (انظر جدول المواد) واجمع 400 ميكرولتر من محلول ساليدروسيد والتيروسول وحمض الغال القياسي في زجاجات العينات الكروماتوغرافية المقابلة.</li>
</ol>6. تحديد TLC
<ol><li>ماصة ثلاثي كلورو الميثان (5 مل) ، أسيتات الإيثيل (4 مل) ، ميثانول (2 مل) ، وحمض الفورميك (0.5 مل) (انظر جدول المواد). أضف إلى جانب واحد من أسطوانة الكروماتوغرافيا ذات الخزان المزدوج (انظر جدول المواد) ، رجها ، واخلطها بالتساوي. قم بتغطية رأس الأسطوانة العلوي.</li>
	<li>ضع حمض الغال ، والساليدروسيد ، والمحلول القياسي للتيروسول ، ومحلول رهوديولا كرينولاتا على رف العينة في المواضع A1-A4.</li>
	<li>ضع لوح السيليكون مقاس 5 سم × 10 سم (انظر جدول المواد) على طاولة أخذ العينات. ابدأ تشغيل آلة أخذ العينات الأوتوماتيكية (انظر جدول المواد) ، وافتح صمام التحكم في الهواء.</li>
	<li>افتح برنامج visionCATS (انظر جدول المواد). انقر فوق مجلد جديد > جديد (يسمى اختبار عينة رهوديولا crenulata ) > موافق. انقر فوق طريقة جديدة (اسم اختبار عينة رهوديولا كرينولاتا ) > موافق > ATS 4.</li>
	<li>انقر فوق تعريف خطوة الإنهاء. انقر فوق تعقب المهمة لتحرير الوصف (عينة حمض الغال والساليدروسيد والتيروسول ورهوديولا كرينولاتا ).</li>
	<li>انقر فوق خطوات HPTLC. اضبط معلمات الطبقة الرقيقة (5 سم × 10 سم). حدد نوع التطبيق (النطاق) ، واضبط المعلمات (الجدول 1) ، وانقر فوق OK .</li>
	<li>فتح جودة التعبئة / الشطف. حدد ملء وحدة التخزين المبرمجة فقط. اضبط المستوى السفلي للقارورة (مم) على 0.5 ، وانقر فوق OK .</li>
	<li>انقر فوق طريقة التنفيذ.</li>
	<li>انقر فوق الزر تعقب التعيين ، وتحقق من المركز ، وقم بتعيين المعلمات (الجدول 2).</li>
	<li>انقر فوق الزر "متابعة " لأخذ العينات تلقائيا.</li>
	<li>قم بإيقاف تشغيل آلة أخذ العينات الأوتوماتيكية وصمام الهواء. قم بإزالة لوح السيليكون من آلة أخذ العينات الأوتوماتيكية.</li>
	<li>ضع لوح السيليكون في الجانب الآخر من أسطوانة كروماتوغرافيا الخزان المزدوجة في الخطوة 6.1 ، وقم بتغطية رأس الأسطوانة العلوي ، وقم بالتشبع المسبق لمدة 20 دقيقة.</li>
	<li>قم بتثبيت الطرف العلوي من لوحة الطبقة الرقيقة برفق باستخدام ملقط ، ثم ضع لوح السيليكون بسرعة في عامل التطوير ، وقم بتغطية رأس الأسطوانة العلوي. ملاحظة: أخرج لوح السيليكون عندما تكون الحافة الأمامية التي تتكشف على بعد 0.5-1.0 سم من الطرف العلوي للوحة الطبقة الرقيقة.</li>
	<li>بعد أن يتبخر المذيب العضوي ، قم برش المحلول الكروموجيني على سطح لوح السيليكون في درجة حرارة الغرفة للحصول على نتائج كروموجينية. ملاحظة: المحلول الكروموجيني عبارة عن محلول مائي يحتوي على 2٪ FeCl3 و 1٪ K3 [Fe (CN) 6].</li>
</ol>

التوصيف المجهري والتعرف القائم على TLC لكرينولات رهوديولا

<ol>
	<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traditional+herbal+medicine+and+nanomedicine:+Converging+disciplines+to+improve+therapeutic+efficacy+and+human+health.">Traditional herbal medicine and nanomedicine: Converging disciplines to improve therapeutic efficacy and human health.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 178, 113964 (2021).</li><li>Yin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+positive+role+and+mechanism+of+herbal+medicine+in+Parkinson's+Disease.">The positive role and mechanism of herbal medicine in Parkinson's Disease.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2021, 9923331 (2021).</li><li>Li, F. S., Weng, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demystifying+traditional+herbal+medicine+with+modern+approach.">Demystifying traditional herbal medicine with modern approach.</a> Nature Plants. 3, 17109 (2017).</li><li>da Fonseca, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbal+medicinal+products+from+Passiflora+for+anxiety:+An+unexploited+potential.">Herbal medicinal products from Passiflora for anxiety: An unexploited potential.</a> The Scientific World Journal. 2020, 6598434 (2020).</li><li>Aziato, L., Antwi, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Facilitators+and+barriers+of+herbal+medicine+use+in+Accra,+Ghana:+an+inductive+exploratory+study.">Facilitators and barriers of herbal medicine use in Accra, Ghana: an inductive exploratory study.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 16, 142 (2016).</li><li>Tao, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+species:+A+comprehensive+review+of+traditional+use,+phytochemistry,+pharmacology,+toxicity,+and+clinical+study.">Rhodiola species: A comprehensive review of traditional use, phytochemistry, pharmacology, toxicity, and clinical study.</a> Medicinal Research Reviews. 39 (5), 1779-1850 (2019).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dietary+supplement+Rhodiola+crenulata+extract+alleviates+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis+in+mice+through+anti-inflammation,+mediating+gut+barrier+integrity+and+reshaping+the+gut+microbiome.">The dietary supplement Rhodiola crenulata extract alleviates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through anti-inflammation, mediating gut barrier integrity and reshaping the gut microbiome.</a> Food &amp; Function. 12 (7), 3142-3158 (2021).</li><li>Xie, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+crenulate+alleviates+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+via+adjusting+NF-&#954;B/NLRP3-mediated+inflammation.">Rhodiola crenulate alleviates hypobaric hypoxia-induced brain injury via adjusting NF-&#954;B/NLRP3-mediated inflammation.</a> Phytomedicine. 103, 154240 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salidroside,+a+phenyl+ethanol+glycoside+from+Rhodiola+crenulata,+orchestrates+hypoxic+mitochondrial+dynamics+homeostasis+by+stimulating+Sirt1/p53/Drp1+signaling.">Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from Rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/p53/Drp1 signaling.</a> Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).</li><li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+characteristics+of+Rhodiola+Crenulata+and+its+mechanism+in+acute+mountain+sickness+using+UHPLC-Q-TOF-MS/MS+combined+with+network+pharmacology+analysis.">Chemical characteristics of Rhodiola Crenulata and its mechanism in acute mountain sickness using UHPLC-Q-TOF-MS/MS combined with network pharmacology analysis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 294, 115345 (2022).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rhodiola+crenulata+attenuates+apoptosis+and+mitochondrial+energy+metabolism+disorder+in+rats+with+hypobaric+hypoxia-induced+brain+injury+by+regulating+the+HIF-1&#945;/microRNA+210/ISCU1/2(COX10)+signaling+pathway.">Rhodiola crenulata attenuates apoptosis and mitochondrial energy metabolism disorder in rats with hypobaric hypoxia-induced brain injury by regulating the HIF-1&#945;/microRNA 210/ISCU1/2(COX10) signaling pathway.</a> Journal of Ethnopharmacology. 241, 111801 (2019).</li><li>d'Avigdor, E., Wohlmuth, H., Asfaw, Z., Awas, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+current+status+of+knowledge+of+herbal+medicine+and+medicinal+plants+in+Fiche,+Ethiopia.">The current status of knowledge of herbal medicine and medicinal plants in Fiche, Ethiopia.</a> Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 10, 38 (2014).</li><li>S&#225;nchez, M., Gonz&#225;lez-Burgos, E., Divakar, P. K., G&#243;mez-Serranillos, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA-based+authentication+and+metabolomics+analysis+of+medicinal+plants+samples+by+DNA+barcoding+and+ultra-high-performance+liquid+chromatography/triple+quadrupole+mass+spectrometry+(UHPLC-MS).">DNA-based authentication and metabolomics analysis of medicinal plants samples by DNA barcoding and ultra-high-performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry (UHPLC-MS).</a> Plants (Basel, Switzerland). 9 (11), 1601 (2020).</li><li>. Rhodiola renulata (Hook.fil &amp; Thomson) H.Ohba Available from: <a target="_blank" href="https://www.gbif.org/species/4200529">https://www.gbif.org/species/4200529</a> (2023)</li><li>. Plant + data center Available from: <a target="_blank" href="https://www.iplant.cn/">https://www.iplant.cn/</a> (2023)</li><li>. Chinese virtual herbarium Available from: <a target="_blank" href="https://www.cvh.ac.cn/">https://www.cvh.ac.cn/</a> (2023)</li><li>Cunningham, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=There+&amp;#34;ain't+no+mountain+high+enough&amp;#34;?:+The+drivers,+diversity+and+sustainability+of+China's+Rhodiola+trade.">There &amp;#34;ain't no mountain high enough&amp;#34;?: The drivers, diversity and sustainability of China's Rhodiola trade.</a> Journal of Ethnopharmacology. 252, 112379 (2020).</li><li>Wang, Q., Ruan, X., Jin, Z. H., Yan, Q. C., Tu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Rhodiola+species+by+using+RP-HPLC.">Identification of Rhodiola species by using RP-HPLC.</a> Journal of Zhejiang University. Science. B. 6 (6), 477-482 (2005).</li><li>Dong, X., Guo, Y., Xiong, C., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+two+major+Rhodiola+species+and+the+systemic+changing+characteristics+of+metabolites+of+Rhodiola+crenulata+in+different+altitudes+by+chemical+methods+combined+with+UPLC-QqQ-MS-based+metabolomics.">Evaluation of two major Rhodiola species and the systemic changing characteristics of metabolites of Rhodiola crenulata in different altitudes by chemical methods combined with UPLC-QqQ-MS-based metabolomics.</a> Molecules. 25 (18), 4062 (2020).</li><li>Zhao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPLC+fingerprint+differentiation+between+natural+and+ex+situ+populations+of+Rhodiola+sachalinensis+from+Changbai+Mountain,+China.">HPLC fingerprint differentiation between natural and ex situ populations of Rhodiola sachalinensis from Changbai Mountain, China.</a> PloS One. 9 (11), 112869 (2014).</li><li>Yu, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quality+evaluation+of+Tibetan+medicine+Rhodiolae+crenulatae+radix+et+rhizome+based+on+sensory+recognition+and+near+infrared+spectrum+analysis.">Quality evaluation of Tibetan medicine Rhodiolae crenulatae radix et rhizome based on sensory recognition and near infrared spectrum analysis.</a> Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).</li><li>Lv, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+determination+of+5+chemical+components+in+3+kinds+of+Rhodiola+rosea+by+HPLC.">Simultaneous determination of 5 chemical components in 3 kinds of Rhodiola rosea by HPLC.</a> China Pharmacy. 29 (18), 2515-2519 (2018).</li><li>Dong, T., Sha, Y., Liu, H., Sun, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altitudinal+variation+of+metabolites,+mineral+elements+and+antioxidant+activities+of+Rhodiola+crenulata+(Hook.f.+&amp;+Thomson)+H.Ohba.">Altitudinal variation of metabolites, mineral elements and antioxidant activities of Rhodiola crenulata (Hook.f. &amp; Thomson) H.Ohba.</a> Molecules. 26 (23), 7383 (2021).</li><li>Ma, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+UHPLC+fingerprints+combined+with+chemical+pattern+recognition+analysis+in+the+differentiation+of+six+Rhodiola+species.">Application of UHPLC fingerprints combined with chemical pattern recognition analysis in the differentiation of six Rhodiola species.</a> Molecules. 26 (22), 6855 (2021).</li><li>Li, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+discrimination+of+different+Rhodiola+species+using+1H-NMR+and+GEP+combinational+chemometrics.">Metabolic discrimination of different Rhodiola species using 1H-NMR and GEP combinational chemometrics.</a> Chemical &amp; Pharmaceutical Bulletin. 67 (2), 81-87 (2019).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Hippophae+species+(Shaji)+through+DNA+barcodes.">Identification of Hippophae species (Shaji) through DNA barcodes.</a> Chinese Medicine. 10, 28 (2015).</li></ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

هناك أكثر من 90 نوعا من نباتات رهوديولا في العالم ، وأكثر من 60٪ من جميع الأنواع موجودة في الصين ، وهي أنواع شائعة بما في ذلك رهوديولا كرينولاتا ، رهوديولا الوردية ، رهوديولا أخالينينسيس ، ورهوديولا ألجيدا17. رهوديولا كرينولاتا ، المسجلة في الجزء الأول من دست...

يتمتع طب الأعشاب بتاريخ طويل وخبرة تطبيقية غنية في الصين ، وكان أول تسجيل منهجي في Shennong's herbal classic1. عزز اكتشاف الأرتيميسينين المطبق على الملاريا تطوير الأدوية العشبية إلى مرحلة جديدة1. إن استخدام التكنولوجيا العلمية الحديثة للكشف عن الآلية الدقيقة للأدوية العشبية يزيد من معدل الاستخدام والطلب على الأدوية العشبية ، مما يفتح سوقا دوليا جديدا لها2،3،4. ومع ذلك ، فقد أدى هذا إلى سلسلة من الآثار السلبية. غير المتخصصين لديهم فهم غامض لخصائص الأدوية العشبية ، مما يجعل استخدام الأدوية العشبية يواجه خطرا كبيرا على السلامة5.
رهوديولا كرينولاتا ، أحد نباتات أنواع رهوديولا ، يتوزع بشكل رئيسي في التبت وشمال غرب يونان وغرب سيتشوان في الصين (الشكل 1)6,7. تتكون رهوديولا كرينولاتا من ساليدروسيد ، تيروسول ، حمض الغال ، ومركبات أخرى لعلاج الأمراض المرتبطة بنقص الأكسجين من خلال وظيفة "تنشيط تشي وتعزيز الدورة الدموية ، وتطهير النبض وتهدئة الربو"8،9،10،11. يظهر التحقيق الميداني أنه يمكن العثور على رهوديولا كرينولاتا في مناطق الكاحل الألبية ومنحدرات الأخاديد والشقوق الصخرية على ارتفاع 4000-5600 متر. بيئتها المتنامية باردة ومليئة بأشعة الشمس والإشعاع الشديد ، وتنتمي إلى النظام البيئي لمروج جبال الألب. يمكن توزيع رهوديولا كرينولاتا في مجموعات صفائحية وشبيهة بالنقاط وفقا لتضاريس النمو ، ويمكن إجراء تدفق الجينات من خلال التلقيح المتبادل.
إن إجهاض حبوب اللقاح من جنس رهوديولا ، والتنقيب غير القانوني ، والبيئة البيئية المتدهورة تجعل رهوديولا كرينولاتا من الأنواع المهددة بالانقراض 6,12. نظرا للقيمة الطبية العالية لرهوديولا كرينولاتا ، من المتوقع أن تتدفق المنتجات المقلدة إلى السوق. تقدم هذه المقالة موطن رهوديولا كرينولاتا وبعض طرق تحديد المختبر المريحة. أولا ، لاحظنا بيئة نمو رهوديولا كرينولاتا وخصائصها الطبية. ثانيا ، لوحظ المجهرية للمسحوق الطبي بواسطة المجهر. الخطوة الأخيرة هي النقطة الأساسية. تم فصل المكونات التمثيلية لرهوديولا كرينولاتا وتحديدها وفقا لخصائص الامتزاز أو الذوبان المختلفة لهذه المكونات في مادة معينة. المصادقة القائمة على الحمض النووي أو طرق تحليل الأيض للنباتات الطبية معقدة ومكلفة13. يمكن لهذه الطرق الأساسية والمريحة والاقتصادية التعرف بسرعة على رهوديولا كرينولاتا.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#956;m millipore filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGP033RB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic sampling machine</td>
			<td>CAMAG</td>
			<td>ATS 4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloral hydrate</td>
			<td>Fuzhou Brunei Technology Co., Ltd</td>
			<td>ST1002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromatographic&#160;sample&#160;bottles</td>
			<td>Zhejiang ALWSCI Technology Co., Ltd</td>
			<td>C0000008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical flask</td>
			<td>Sichuan Shubo Co., Ltd</td>
			<td>1121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass</td>
			<td>Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd</td>
			<td>10211818c</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting needle</td>
			<td>Shanghai Bingyu Fluid Technology Co., Ltd</td>
			<td>BY-5026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic balance</td>
			<td>SHIMADZU</td>
			<td>ATX124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>2022120901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formic acid</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>2021110801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gallic acid</td>
			<td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td>
			<td>M-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd</td>
			<td>10010618</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High speed&#160; crusher</td>
			<td>Beijing Zhongxingweiye Instrument Co., Ltd</td>
			<td>FW-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>20230108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Chongqing Oprec Nistrument Co.,&#160; Ltd</td>
			<td>B203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slide</td>
			<td>Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd</td>
			<td>7105P-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Shanghai Yuejin Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td>DHG-8145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pharmacopoeia sieve</td>
			<td>Hangzhou Xingrun sieve factory</td>
			<td>572423281330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette</td>
			<td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>120302008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salidroside</td>
			<td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td>
			<td>H-040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saturate tank&#160;</td>
			<td>Yancheng Liegu Technology Co., Ltd</td>
			<td>10*20 P-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica gel plate</td>
			<td>Yantai Jiangyou Silica Gel Development&#160; Co., Ltd</td>
			<td>HSG20211227</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trichloromethane</td>
			<td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd</td>
			<td>20221013-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezer&#160;</td>
			<td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>130302027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyrosol</td>
			<td>Chengdu Herbpurify Co., Ltd</td>
			<td>L-042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound equipment</td>
			<td>Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd</td>
			<td>SB-8200DTS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric pipet</td>
			<td>Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>120301006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

field collection and laboratory routine identification of rhodiola crenulata

تحديد المواد الطبية هو فرضية وضمان سلامة المخدرات. لا بد أن يفضل غالبية الباحثين العلميين عملية تحديد الأعشاب البسيطة والسريعة والفعالة وغير المكلفة. رهوديولا كرينولاتا هو دواء تبتي تقليدي يزرع على ارتفاعات عالية ، ويتم توزيعه بشكل رئيسي في مناطق التبت ويونان وسيتشوان في الصين. تمتلك رهوديولا كرينولات أنشطة حيوية متعددة ، مثل الخصائص المضادة للالتهابات والمضادة لنقص الأكسجة ومضادات الأكسدة ، ولديها إمكانات كبيرة للتنمية. مع زيادة الطلب في السوق والانخفاض السريع في محتوى الموارد ، كان عدد كبير من المنتجات المشوشة من رهوديولا crenulata يزعج الناس. لذلك ، يقدم هذا البروتوكول عملية قياسية لتحديد رهوديولا كرينولاتا في الحقل جنبا إلى جنب مع الاختبارات المعملية الروتينية. إن الجمع بين الموائل والميزات المجهرية والكروماتوغرافيا ذات الطبقة الرقيقة سيحدد بلا شك رهوديولا كرينولاتا بسرعة وكفاءة واقتصادية ، مما يساهم في التطوير المستمر للطب التبتي ومراقبة جودة المواد الطبية.

Herbal medicine has a long history and rich application experience in China, and it was the first systematic recording in Shennong&#39;s herbal classic1. The discovery of artemisinin applied to malaria promoted the development of herbal medicine into a new stage1. The use of modern scientific technology to uncover the exact mechanism of herbal medicine increases the utilization rate and demand for herbal medicine, opening a new international market for it2,3,4. However, this has led to a series of negative effects. Non-professionals have a vague understanding of the characteristics of herbal medicine, which makes the use of herbal medicine face a huge safety risk5.
Rhodiola crenulata, one of the plants of the Rhodiola species, is mainly distributed in Tibet, northwest Yunnan, and western Sichuan of China (Figure 1)6,7. Rhodiola crenulata comprises salidroside, tyrosol, gallic acid, and other compounds for the treatment of hypoxic-related diseases through the function of &#34;invigorating qi and promoting blood circulation, clearing pulse and calming asthma&#34;8,9,10,11. Field investigation shows that Rhodiola crenulata can be found in the alpine talus zones, gully slopes, and rock crevices at an altitude of 4,000-5,600 m. Its growing environment is cold, full of sunshine and intense radiation, and it belongs to the alpine meadow ecosystem. Rhodiola crenulata can be distributed in lamellar and point-like populations according to the growth terrain, and gene flow can be carried out through cross-pollination.
The pollen abortion of the genus Rhodiola, illegality excavation, and degenerated ecological environment make Rhodiola crenulata an endangered species6,12. In view of the high medicinal value of Rhodiola crenulata, counterfeit products are expected to flow into the market. This article presents the habitat of Rhodiola crenulata and some convenient laboratory identification methods. Firstly, we observed the growth environment of Rhodiola crenulata and its medicinal properties. Secondly, the microstructure of medicinal powder was observed by microscope. The last step is the key point. The representative components of Rhodiola crenulata were separated and identified according to the different adsorption or dissolution properties of these components in a certain substance. DNA-based authentication or metabolomics analysis methods of medicinal plants are complicated and expensive13. These basic, convenient, and economical methods can quickly identify Rhodiola crenulata.

تسليط الضوء على المؤلف: تطوير طرق التعرف على رهوديولا كرينولاتا والتحقيق في توزيع الموارد والآثار الدوائية

الجمع الميداني والتحديد الروتيني المختبري لرهوديولا كرينولاتا

The scope of our research is centered on conducting a resource survey of ethnic medicine. Specifically, this study aims to develop a rapid and convenient methods for the identification of Rhodiola crenulata. The protocol we offer presents a cost-effective, straightforward, and rapid method for identifying various medicinal herbal materials.Our laboratory will concentrate its future research endeavors on investigation two primary areas, the distribution of research associated with Rhodiola crenulata and the pharmacological impacts of this species.

يصف هذا البروتوكول التجريبي تحديد وجمع كرينولات رهوديولا في الحقل. يميل كرينولات رهوديولا إلى العيش في مناطق الكاحل الألبية ومنحدرات الأخاديد والشقوق الصخرية على ارتفاعات عالية. يمكن توضيح موطن كرينولات رهوديولا ونباتها الكاملة وأزهارها وأوراقها في الشكل 2</stro...

Watch this Scientific Journal Video about Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata at JoVE.com

هنا ، نصف تحديد رهوديولا كرينولاتا من الموائل ، ومورفولوجيا النبات ، والخصائص الطبية ، والسمات المجهرية ، وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة.

The identification of medicinal materials is the premise and guarantee of drug safety. The majority of scientific researchers are bound to favor the ...

يتركز نطاق بحثنا على إجراء مسح للموارد للطب العرقي. على وجه التحديد ، تهدف هذه الدراسة إلى تطوير طرق سريعة ومريحة لتحديد رهوديولا كرينولاتا. يقدم البروتوكول الذي نقدمه طريقة فعالة من حيث التكلفة ومباشرة وسريعة لتحديد المواد العشبية الطبية المختلفة.سيركز مختبرنا مساعيه البحثية المستقبلية على التحقيق في مجالين رئيسيين ، توزيع الأبحاث المرتبطة بهوديولا كرينولاتا والتأثيرات الدوائية لهذا النوع.

field-collection-laboratory-routine-identification-rhodiola

Research

JoVE Journal

Medicine

Field Collection and Laboratory Routine Identification of Rhodiola crenulata

442 Views.  Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. يتركز نطاق بحثنا على إجراء مسح للموارد للطب العرقي. على وجه التحديد ، تهدف هذه الدراسة إلى تطوير طرق سريعة ومريحة لتحديد رهوديولا كرينولاتا. يقدم البروتوكول الذي نقدمه طريقة فعالة من حيث التكلفة ومباشرة وسريعة لتحديد المواد العشبية الطبية المختلفة.سيركز مختبرنا مساعي...

Video: تسليط الضوء على المؤلف: تطوير طرق التعرف على رهوديولا كرينولاتا والتحقيق في توزيع الموارد والآثار الدوائية

The identification of medicinal materials is the premise and guarantee of drug safety. The majority of scientific researchers are bound to favor the simple, fast, effective, and inexpensive identification process of herbals. Rhodiola crenulata is a traditional Tibetan medicine grown at high altitudes, mainly distributed in Tibet, Yunnan, and Sichuan regions of China. Rhodiola crenulate possesses multiple bioactivities, such as anti-inflammatory, anti-hypoxia, and antioxidant properties, and has great potential for development. With the increasing market demand and a rapid decrease in resource content, a large number of confused products of Rhodiola crenulata have been troubling people. Therefore, this protocol introduces a standard process for the identification of Rhodiola crenulata in the field combined with routine laboratory testing. The combination of habitat, microscopic features, and thin-layer chromatography will undoubtedly identify Rhodiola crenulata quickly, efficiently, and economically, contributing to the continuous development of Tibetan medicine and the quality control of medicinal materials.

Here, we describe the identification of Rhodiola Crenulata from habitat, plant morphology, medicinal properties, microscopic features, and thin-layer chromatography.

Macroscopic and Microscopic Identification of Rhodiola crenulata Traits and Constituents

To begin, observe the appearance traits of Rhodiola Crenulata with the unaided eye and record the observations. Inhale near the plant to identify the fragrance smell. Next, place a small piece of the root in the mouth, then sip and chew for taste identification.Using a brush, remove the soil on the surface of the plant. Place the plant in an oven at 40 degrees Celsius and turn it every 24 hours. Then powder the dried medicinal materials using a powder machine and filter it through a medicated number three sieve.Spread the powder evenly on a clean slide using a dissecting needle covering 1/3 of the slide within a two millimeter area. Using a glass dropper, add a drop of deionized water to the powder and quickly place a cover glass using a tweezer. Next, place the slide onto the microscope platform.Adjust the light source and the coarse focus spiral to view the powder. Switch to a 40X objective lens and observe the starch granules. Again, spread the powder evenly on a slide using a dissecting needle, then add a drop of chloral hydrate to the powder.Hold the slide with a tweezer and heat on the alcohol lamp thrice for one second each. Add a drop of glycerin to the powder and quickly place a cover glass onto the drop. After adjusting the microscope settings as demonstrated previously, select a 40X objective lens to visualize the catheter, cork cells and fibers, along with the wood parenchyma cells and pigment block respectively.Microscopic examination of our Crenulata revealed key features with cork cells appearing brownish yellow, or colorless with polygonal shapes. Starch grains were observed as single or multiples with distinctive umbilical points and closely arranged spiral vessels. Additionally, xylem parenchyma cells were visualized as achromatic and oval, containing calcium oxalate sand crystals, and irregularly shaped brown red pigment blocks were identified.

التعرف العياني والمجهري لسمات ومكونات رهوديولا كرينولاتا

Preparing and Analyzing Thin Layer Chromatography Samples of Rhodiola crenulata and Reference Compounds

To begin, weigh three grams of Rhodiola crenulata powder and transfer it into a 100-milliliter conical bottle. Using a large bowl pipette, add 25 milliliters of methanol into the bottle. Place the bottle in the ultrasonic instrument.Set the power to 250 watts, frequency to 40 kilohertz, time to 30 minutes, and start the ultrasonication. Next, rinse the outside of the bottle under running water until it reaches room temperature. Filter the solution through a 0.22-micron microporus membrane.Using a one-milliliter syringe, aspirate 800 microliters of liquid from the bottle and collect 400 microliters of the midstream solution into a chromatographic sample bottle. Measure and add one milligram of salidroside, 0.5 milligrams of tyrosol, and 0.5 milligrams of gallic acid into three separate one-milliliter volumetric flasks. Then, fill each flask to the scale marked with methanol.Sonicate the samples in the ultrasonic instrument using the conditions described previously. Following ultrasonication, aspirate 800 microliters of liquid from the flask. Filter the solution through a 0.22-micrometer microporous membrane and collect 400 microliters of filtrate into the bottle.Add trichloromethane, ethyl acetate, methanol, and formic acid on one side of the double tank chromatography cylinder. Shake the cylinder to mix the contents evenly and cover the upper cylinder head. Arrange the gallic acid, salidroside, tyrosol standard solutions, and our crenulata solution on the sample rack in positions A1 to A4.Place a 5x10-centimeter silicone sheet on the sampling table.Turn on the automatic sampling machine and open the air control valve. Press the Continue button for automatic sampling. After sampling, turn off the machine and air valve.Remove the silicone sheet from the machine. Put the silicone sheet into the other side of the double tank chromatography cylinder. Cover the upper cylinder head and pre-saturate for 20 minutes.Next, use a tweezer to hold the upper end of the thin layer plate and quickly put the silicone sheet into the development agent. Once the organic solvent evaporates, spray the silicone sheet with chromogenic solution. The thin layer chromatographic analysis showed that the R.crenulata sample appeared in spots of the same color, corresponding to the gallic acid, salidroside, and tyrosol standards.