Cultivo e Enumeração de Bactérias de Amostras de Solo
Fonte: Laboratórios do Dr. Ian Pepper e Dr. Charles Gerba - Universidade do Arizona
Autores de Demonstração: Bradley Schmitz e Luisa Ikner
Solos superficiais são uma mistura heterogênea de partículas inorgânicas e orgânicas que se combinam para formar agregados secundários. Dentro e entre os agregados estão vazios ou poros que contêm visualmente ar e água. Essas condições criam um ecossistema ideal para bactérias, de modo que todos os solos contêm vastas populações de bactérias, geralmente mais de 1 milhão por grama de solo.
Bactérias são os mais simples dos microrganismos, conhecidos como procariotes. Dentro deste grupo procariótico, há os micróbios filamentosos conhecidos como actinomycetes. Os actinomycetes são na verdade bactérias, mas são frequentemente considerados um grupo único dentro da classificação de bactérias por causa de sua estrutura filamentosa, que consiste em múltiplas células amarradas juntas para formar hifa. Este experimento usa mídia de caso de glicerol que selecionam para colônias de actinomyceto, durante a diluição e o revestimento. Normalmente, os actinomycetes são aproximadamente 10% da população bacteriana total. Bactérias e actinomycetes são encontrados em todos os ambientes da Terra, mas a abundância e diversidade desses micróbios no solo é incomparável. Esses micróbios também são essenciais para a vida humana e afetam o que as pessoas comem, bebem, respiram ou tocam. Além disso, existem espécies bacterianas que podem infectar pessoas e causar doenças, e existem bactérias que podem produzir produtos naturais capazes de curar pessoas. Actinomiccetos são particularmente importantes para a produção de antibióticos, como a estreptomicina. As bactérias são fundamentais para o ciclismo de nutrientes, crescimento vegetal e degradação de contaminantes orgânicos.
As bactérias são altamente diversas em termos do número de espécies que podem ser encontradas no solo, em parte porque são fisiologicamente e metabolicamente diversas. As bactérias podem ser heterotróficas, o que significa que utilizam compostos orgânicos, como glicose, para alimentos e energia, ou autotróficas, o que significa que utilizam compostos inorgânicos, como enxofre elementar, para alimentos e energia. Eles também podem ser aeróbicos, utilizando oxigênio para respiração, ou anaeróbico, utilizando formas combinadas de oxigênio, como nitrato ou sulfato, para respirar. Algumas bactérias podem usar oxigênio ou formas combinadas de oxigênio e são conhecidas como anaerobes facultativos.
1. Preparação de Diluições do Solo
- Para iniciar o procedimento, pese 10 g de amostra de solo e adicione a 95 mL de água deionizada. Agite bem a suspensão, e rotule como "A".
- Antes que o solo se instale, remova 1 mL da suspensão com uma pipeta estéril e transfira-a para uma água deionizada de 9 mL em branco. Vórtice completamente, e rotular como "B".
- Repita esta etapa de diluição três vezes, cada vez com 1 mL da suspensão anterior e uma água deionizada de 9 mL e...
Uma amostra de 10 g de solo com teor de umidade de 20% em base de peso seco é analisada para bactérias culturaveis viáveis através de técnicas de diluição e revestimento. As diluições foram feitas conforme mostrado na Tabela 1. 1 mL de solução E é derramado em um meio apropriado e resulta em 200 colônias bacterianas.
Mas, por 10 g de solo úmido,
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Existem duas aplicações fundamentais de diluição e revestimento de bactérias do solo. A primeira aplicação é a enumeração de bactérias culturais dentro de um determinado solo. A quantificação do número de bactérias do solo indica a saúde do solo. Por exemplo, se houver 106 a 108 bactérias culturable presentes por grama de solo, este seria considerado um número saudável. Um número inferior a 106 por grama indica pior saúde do solo, o que pode ser devido à falta de nut...
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