Name: drosophila larval nmj immunohistochemistry
Uploaded: 2009-03-28T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry at JoVE.com

Innan du börjar <ol><li> Förbered följande lösningar: PBT (0,1% Triton X100 i 1X PBS), PBTB (0,2% BSA i PBT) och PBTN (2% NGS i PBTB). </li><li> Dissekera Drosophila larver. Se Drosophila Larvernas NMJ Dissection. </li></ol> Immunohistokemi <ol><li> Flytta larverna till ett 1,5 ml rör som innehåller PBT. Tvätta larver två gånger 15 minuter i PBT. Observera: att tvätta, placera 1,5 ml röret på en nutator mixer. Ta bort vätska med pippetor och ersätta den...

<ol>
	<li>Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties+of+the+larval+neuromuscular+junction+in+Drosophila+Melanogaster.">Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster.</a> J. Physiol. 262, 189-214 (1976).</li><li>Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotypic+morphology+of+glutamatergic+synapses+on+identified+muscle+cells+of+Drosophila+larvae.">Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on identified muscle cells of Drosophila larvae.</a> J Neurosci. 9, 710-725 (1989).</li><li>Kesheshian, H., Broadie, K., Chiba, A., Bate, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+neuromuscular+junction:+a+model+system+for+studying+synaptic+development+and+function.">The Drosophila neuromuscular junction: a model system for studying synaptic development and function.</a> Annu Rev Neurosci. 19, 545-575 (1996).</li><li>Collins, C. A., DiAntonio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+development:+insights+from+Drosophila.">Synaptic development: insights from Drosophila.</a> Curr Opin Neurobiol. 17 (1), 35-42 (2007).</li></ol>

Immunohistokemi (IHC) är avgörande för studier av NMJ biologi, eftersom det möjliggör visualisering av NMJ. Detta sker med hjälp av antikroppar som känner igen den neuronala membran (t.ex. HRP), den presynapse (t.ex. CSP, SYT), och / eller postsynapse (t.ex. DLG). Signalmolekyler, strukturella proteiner, eller nya proteiner av intresse kan också färgas. Sedan kan gener vara muterade eller missexpressed, och IHC kan upptäcka störning av synaptiska struktur och / eller neuronal signalering. <p class="jove_c...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Stereomicroscope &#x201C;Stemi&#x201D; 2000</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Carl Zeiss MicroImaging Inc.</td>
<td>495101-9804-000</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Light Source KL 1500 LCD</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Carl Zeiss MicroImaging Inc. </td>
<td>000000-1063-181</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dumont SS Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools Inc.</td>
<td>11200-33</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dumont #5 Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools Inc.</td>
<td>11252-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Adams&#x2122; Nutator Mixer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton, Dickinson and Company</td>
<td>421105</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>No.1 Precision knife</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>X-Acto</td>
<td>3201</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>No. 16 Blades</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>X-Acto</td>
<td>216</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>ProLong Gold Antifade reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen Corporation</td>
<td>36930</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

drosophila larval nmj immunohistochemistry

Den<em&gt; Drosophila</em&gt; Neuromuskulära förbindelsen (NMJ) är en etablerad modell som används för studier av synaptiska utveckling och plasticitet. Den utbredda användningen av<em&gt; Drosophila</em&gt; Motorn är på grund av sin höga tillgänglighet. Den kan analyseras med encelliga upplösning. Det finns 30 muskler per hemisegment vars arrangemang inom det perifera kroppen väggen är kända. Sammanlagt 31 motoriska nervceller fäster dessa muskler i ett mönster som har hög trohet. Använda molekylärbiologi och genetik, kan man skapa transgena djur eller mutanter. Sedan kan man studera utveckling konsekvenser på morfologi och funktion NMJ. Immunohistokemi kan användas för att tydligt bild komponenterna i NMJ. I den här artikeln visar vi hur man använder antikroppar färgning att visualisera<em&gt; Drosophila</em&gt; Larver NMJ.

Watch this Scientific Journal Video about Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry at JoVE.com

Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

Detta protokoll visar hur du utför immunohistokemi på dissekeras Drosophila larv.

Drosophila Larvernas NMJ Immunohistokemi

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

Research

JoVE Journal

Biology

Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

Dissekering av Larvernas CNS i Drosophila melanogaster

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry

Tunna Sektionering av Slice Förberedelser för Immunohistokemi

Many investigations in neuroscience, as well as other disciplines, involve studying small, yet macroscopic pieces or sections of tissue that have been ...

Drosophila Larval NMJ Dissection

Drosophila Larvernas NMJ Dissection

Electrophysiological Methods for Recording Synaptic Potentials from the NMJ of Drosophila Larvae

Elektrofysiologiska metoder för inspelning Synaptic Potentials från NMJ av Drosophila Larver

In this video, we describe the electrophysiological methods for recording synaptic transmission at the neuromuscular junction (NMJ) of Drosophila larva. ...

Historical View and Physiology Demonstration at the NMJ of the Crayfish Opener Muscle

Historisk Visa och fysiologi demonstration på NMJ av Kräftor öppnare Muscle

Here we present some of the key important discoveries made with the opener neuromuscular (NMJ) preparation of crustaceans and illustrate that there is ...

Monitoring Heart Function in Larval Drosophila melanogaster for Physiological Studies

Monitoring Heart Function in Larval Drosophila melanogaster for Physiological Studies

Övervakning av hjärtfunktion i Larvernas Drosophila melanogaster För fysiologiska studier

We present various methods to record cardiac function in the larval Drosophila. The approaches allow heart rate to be measured in unrestrained  and  ...

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Dissection and Staining of Drosophila Larval Ovaries

Dissektion och färgning av Drosophila Larvernas Äggstockar

Many organs depend on stem cells for their development during embryogenesis and for maintenance or repair during adult life. Understanding how stem cells ...

Drosophila Pupal Abdomen Immunohistochemistry

Drosophila Pupal Abdomen Immunohistochemistry

Drosophila PUPP-Mage Immunohistokemi

The Drosophila pupal abdomen is an established model system for the study of epithelial morphogenesis and the development of sexually dimorphic ...

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

Undersökning av<em&gt; Drosophila</em&gt; Larvernas Trakealtuber Terminal Celler med ljusmikroskop

Cell shape is critical for cell function. However, despite the importance of cell morphology, little is known about how individual cells generate specific ...

Sonication-facilitated Immunofluorescence Staining of Late-stage Embryonic and Larval Drosophila Tissues In Situ

Sonication-facilitated Immunofluorescence Staining of Late-stage Embryonic and Larval Drosophila Tissues In Situ

Sonikering-underlättas immunofluorescensfärgning av Late steg embryonala och Larv<em&gt; Drosophila</em&gt; Vävnader<em&gt; In Situ</em

Studies performed in Drosophila melanogaster embryos and larvae provide crucial insight into developmental processes such as cell fate specification and ...