Name: zebrafish brain ventricle injection
Uploaded: 2009-04-06T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Zebrafish Brain Ventricle Injection at JoVE.com

लेखकों के लिए लौरा ऐनी Lowery जो प्रयोगशाला में इस तकनीक विकसित धन्यवाद देना चाहूंगा. एच एस NIHMH70926 द्वारा समर्थित है. जेनिफर Gutzman / CSBi मर्क postdoctoral फैलोशिप द्वारा समर्थित किया गया था.

प्रोटोकॉल भाग 1: microinjection के लिए तैयारी <ol><li> केशिका Sutter उपकरण सुई खींचने का उपयोग सुइयों खींच द्वारा इंजेक्शन के लिए तैयार है. </li><li> एक फ्लोरोसेंट रंजक (जैसे टेक्सास रेड Dextran) के साथ सुई भरें. </li><li> एक micromanipu...

<ol>
	<li>Gutzman, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+the+zebrafish+midbrain-hindbrain+boundary+constriction+requires+laminin-dependent+basal+constriction.">Formation of the zebrafish midbrain-hindbrain boundary constriction requires laminin-dependent basal constriction.</a> Mech. Dev. 125, 974-983 (2008).</li><li>Lowery, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+Classification+of+Zebrafish+Brain+Morphology+Mutants.">Characterization and Classification of Zebrafish Brain Morphology Mutants.</a> Anat. Rec. (Hoboken). 292, 94-106 (2009).</li><li>Lowery, L. A., Sive, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+formation+of+zebrafish+brain+ventricles+occurs+independently+of+circulation+and+requires+the+nagie+oko+and+snakehead/atp1a1a.1+gene+products.">Initial formation of zebrafish brain ventricles occurs independently of circulation and requires the nagie oko and snakehead/atp1a1a.1 gene products.</a> Development. 132, 2057-2067 (2005).</li><li>Kimmel, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+of+embryonic+development+of+the+zebrafish.">Stages of embryonic development of the zebrafish.</a> Dev. Dyn. 203, 253-310 (1995).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Zebrafish Book: A guide for the laboratory use of zebrafish. , (1995).</li></ol>

हम इस वीडियो में प्रदर्शन कैसे zebrafish मस्तिष्क ventricles के विकास में फ्लोरोसेंट रंजक (टेक्सास लाल Dextran) इंजेक्षन करने के लिए. इस विधि के आसपास neuroepithelium के विपरीत में मस्तिष्क के वेंट्रिकल अंतरिक्ष कल्पना करने के ल?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>Tool</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11252-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillary Tubes (needles)</td>
<td>Tools</td>
<td>Frederick Haer and Co.</td>
<td>30-30-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Agarose-Coated dishes</td>
<td>Tools</td>
<td>Agarose (Seakem GTG; Lonza) Dishes (Corning) </td>
<td>Agarose (50027) Dishes (430166) </td>
<td>Make agarose approximately 2-3 mm deep in the dish depending on the stage of embryo you are injecting</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting Microscope</td>
<td>Microscope</td>
<td>Zeiss Stereomicroscope Stemi SV 6 </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microscope Camera with Fluorescence capabilities and with image capture software</td>
<td>Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1-200 &mu; pipette tips</td>
<td>Tools</td>
<td>Tip One, US Scientific</td>
<td>1111-0806</td>
<td>These are the perfect size to poke the holes in the agarose and have the embryos fit perfectly.</td>
</tr>
<tr>
<td>Photoshop</td>
<td>Image Analysis</td>
<td>Adobe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Embryo Loop</td>
<td>Tools</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Make these yourself with a glass pipette and hair or fishing line and seal with beeswax.</td>
</tr>
<tr>
<td>Microinjector</td>
<td>Tools</td>
<td>Medical Systems Research Products Harvard Apparatus</td>
<td>PL1-100</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Puller</td>
<td>Tools</td>
<td>Sutter Instruments</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Settings (Heat 785, Pull 70, Velocity 40, Time 70).</td>
</tr>
<tr>
<td>Micromanipulator</td>
<td>Tools</td>
<td>Narishige</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fluorescent dye Texas-Red Dextran 70,000MW</td>
<td>Reagent</td>
<td>Molecular Probes</td>
<td>D1830</td>
<td>Other Molecular weights are available if desired.</td>
</tr>
<tr>
<td>Tricaine (3-aminobenzoic acid ethyl ester)</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>A-5040</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Embryo Media</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>According to Westerfield (5)</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

zebrafish brain ventricle injection

भ्रूण के मस्तिष्क के विकास के दौरान उचित मस्तिष्क वेंट्रिकल गठन सामान्य मस्तिष्क समारोह के लिए आवश्यक है. मस्तिष्क ventricles के दिमाग है कि मस्तिष्कमेरु द्रव के साथ भर रहे हैं के भीतर cavities उच्च संरक्षित कर रहे हैं. Zebrafish में, न्यूरल ट्यूब गठन के बाद, neuroepithelium संकोचनों और परतों की एक श्रृंखला आए जबकि यह मस्तिष्क वेंट्रिकल गठन में जिसके परिणामस्वरूप तरल पदार्थ के साथ भरता है. आदेश में समझने के लिए निलय गठन की प्रक्रिया, और neuroepithelial आकार में परिवर्तन है कि एक ही समय में होते हैं, हम मस्तिष्क के ऊतकों की तुलना में निलय अंतरिक्ष कल्पना की जरूरत है. हालांकि, पारदर्शी zebrafish भ्रूण की प्रकृति यह निलय अंतरिक्ष से मुश्किल ऊतक अंतर करने के लिए बनाता है. इसलिए, हम एक मस्तिष्क निलय इंजेक्शन तकनीक जहां वेंट्रिकल अंतरिक्ष एक फ्लोरोसेंट रंजक के साथ भरा हुआ है और brightfield और फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी द्वारा imaged विकसित की है. brightfield और फ्लोरोसेंट छवियों तब संसाधित कर रहे हैं और फ़ोटोशॉप में आरोपित हैं. इस तकनीक brightfield छवि में neuroepithelium के आकार की तुलना में, फ्लोरोसेंट रंजक के साथ निलय अंतरिक्ष के दृश्य के लिए अनुमति देता है. Zebrafish में ब्रेन निलय इंजेक्शन जल्दी लार्वा चरणों के माध्यम से 18 घंटे के बाद निषेचन से नियोजित किया जा सकता है. हम इस तकनीक का इस्तेमाल किया है बड़े पैमाने पर अच्छी तरह के रूप में मस्तिष्क morphogenesis म्यूटेंट (1-3) निस्र्पक में मस्तिष्क के वेंट्रिकल गठन और morphogenesis के हमारे अध्ययन में.

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Zebrafish Brain Ventricle Injection

न्यूरल ट्यूब गठन के बाद, neuroepithelium constricts और परतों जबकि ट्यूब भ्रूण मस्तिष्कमेरु द्रव (eCSF) भ्रूण मस्तिष्क ventricles के फार्म के साथ भरता है. हम इस निलय इंजेक्शन तकनीक विकसित करने के लिए बेहतर से एक जीवित भ्रूण में neuroepithelial आकार के विपरीत में तरल पदार्थ भरा अंतरिक्ष कल्पना.

Zebrafish ब्रेन निलय इंजेक्शन

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Imaging of the Zebrafish Embryonic Brain by Confocal Microscopy

Confocal माइक्रोस्कोपी द्वारा Zebrafish भ्रूण मस्तिष्क की इमेजिंग लाइव

In this video, we demonstrate the method our lab has developed to analyze the cell shape changes and rearrangements required to bend and fold the ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में इंजेक्शन रेट्रो - कक्षीय

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Transplantation of GFP-expressing Blastomeres for Live Imaging of Retinal and Brain Development in Chimeric Zebrafish Embryos

के ट्रांसप्लांटेशन GFP chimeric Zebrafish भ्रूण में रेटिना और मस्तिष्क के विकास के लाइव इमेजिंग के लिए Blastomeres व्यक्त

Cells change extensively in their locations and property during embryogenesis. These changes are regulated by the interactions between the cells and their ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में Intraperitoneal इंजेक्शन

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Direct Delivery of MIF Morpholinos Into the Zebrafish Otocyst by Injection and Electroporation Affects Inner Ear Development

इंजेक्शन और electroporation द्वारा Zebrafish Otocyst में MIF Morpholinos के प्रत्यक्ष डिलिवरी भीतरी कान विकास को प्रभावित करता है

In recent years, electroporation has become a popular technique for in vivo transfection of DNA, RNA, and morpholinos into various tissues, including the ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos के vivo electroporation में वयस्क Zebrafish रेटिना में

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Morpholinos की में Regenerating वयस्क Zebrafish पूंछ फिन में vivo electroporation में

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Gavaging Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish Gavaging

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

Reverse Genetic Morpholino Approach Using Cardiac Ventricular Injection to Transfect Multiple Difficult-to-target Tissues in the Zebrafish Larva

Zebrafish लार्वा में एकाधिक मुश्किल लक्ष्य ऊतकों Transfect हृदय निलय इंजेक्शन का उपयोग जेनेटिक morpholino दृष्टिकोण रिवर्स

The zebrafish is an important model to understand the cell and molecular biology of organ and appendage regeneration. However, molecular strategies to ...

Nephrotoxin Microinjection in Zebrafish to Model Acute Kidney Injury

Zebrafish में Nephrotoxin Microinjection गुर्दे की गंभीर चोट मॉडल के लिए

The kidneys are susceptible to harm from exposure to chemicals they filter from the bloodstream. This can lead to organ injury associated with a rapid ...