Name: mating and tetrad separation of <em>chlamydomonas reinhardtii</em> for genetic analysis
Uploaded: 2009-08-12T19:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis at JoVE.com

<p class="jove_content"> Dit protocol is gebaseerd op technieken geleerd in het laboratorium van Francis-Andre Wollman aan het Institut de Biologie Fysisch-Chimique, Parijs, Frankrijk. De auteurs danken een schuld van dankbaarheid aan Jacqueline Girard-Bascou, die oorspronkelijk DBS geïntroduceerd om <em>Chlamydomonas</em> genetische technieken. <em>Chlamydomonas</em> onderzoek in het auteurs &#39;laboratorium wordt ondersteund door de National Science Foundation Award MCB-0646350. </p>

<p class="jove_title"> Deel 1: Voorbereiding van de stammen voor gametogenese </p><p class="jove_content"> Opmerking: Alle handelingen moeten worden uitgevoerd bij kamertemperatuur. Hogere of lagere temperaturen hebben invloed op de snelheid van de zygote kiemen en kan negatieve invloed hebben op levensvatbaarheid. <br /> Belangrijke overweging: Het is essentieel dat de stammen worden gedekt robuuste groeien en zijn vrij van besmettelijke schimmels of bacteriën. Als de stammen niet op regelmatige wijze overgedragen, moeten passage op rijk medi...

<ol>
	<li>Harris, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Chlamydomonas+Sourcebook:+Introduction+to+Chlamydomonas+and+Its+Laboratory+Use.">The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use.</a> <em style='font-style: italic'>Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc</em>. , 119-273 (2005).</li></ol>

<p class="jove_content"> Genetische analyse is eenvoudig in <em>Chlamydomonas,</em> maar het vereist specifieke technieken voor het genereren van gameten en aparte tetrade nageslacht. Met een gezonde stammen, zijn de technieken gemakkelijk verworven. Bij sommige mutante stammen, wordt het meer een kunst, en lezers moeten Volume 1 refereren aan de onlangs gepubliceerde <em>Chlamydomonas bronnenboek</em> voor historische notities en praktische tips. Bovendien moet worden opgemerkt dat er vele variaties op het basisthema hierboven beschreven, vari...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>CC-125</td>
<td>Mating type <em>plus</em> strain</td>
<td><em>Chlamydomonas</em> Stock Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CC-124</td>
<td>Mating type <em>minus</em> strain</td>
<td><em>Chlamydomonas</em> Stock Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tris-Acetate-Phosphate (TAP) </td>
<td>Growth medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N10</td>
<td>Growth medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Difco agar</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Stainless-Steel Blades</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-916-5B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Surgical Blade Handles</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-914-5</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Metal Scalpels</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-920A</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

mating and tetrad separation of <em>chlamydomonas reinhardtii</em> for genetic analysis

<p class="jove_content">De eencellige groene alg<em&gt; Chlamydomonas reinhardtii</em&gt; (<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;) Is uitgegroeid tot een populaire organisme voor het onderzoek in diverse gebieden van de celbiologie en genetica vanwege zijn eenvoudige levenscyclus, het gemak van de groei en manipulatie voor genetische analyse, genomische middelen en transformability van de kern en beide organellen. Paring stammen is een gangbare praktijk bij het genetische benaderingen worden gebruikt in<em&gt; Chlamydomonass</em&gt;, Om vegetatieve diploïden te creëren voor de analyse van dominantie, of na tetrad dissectie om na te gaan nucleaire vs organellar erfenis, tot allelism te testen, om te epistasy analyseren, of om de bevolking voor het doel van de kaart op basis van klonen te genereren. Daarnaast worden genetische kruisen routinematig gebruikt om organellar genotypen te combineren met het bijzonder nucleaire genotypes. Hier laten we zien standaard methoden voor gametogenese, paring, zygote kieming en tetrade scheiding. Dit protocol bestaat uit een gemakkelijk te volgen reeks van stappen die ervoor zorgt dat genetische benaderingen vatbaar is voor wetenschappers die minder bekend zijn met<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;. Belangrijke parameters en knelpunten worden toegelicht. Tot slot worden de middelen voor verdere informatie en alternatieve methoden.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis at JoVE.com

Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis

<p class="jove_content">Paring en tetrade scheiding nodig zijn voor genetische analyse in<em&gt; Chlamydomonas reinhardtii</em&gt;. Hier laten we zien standaard methoden voor gametogenese, paring, zygote kieming en tetrade dissectie. Dit protocol bestaat uit een gemakkelijk te volgen reeks van stappen die ervoor zorgt dat genetische benaderingen vatbaar is voor wetenschappers die minder bekend zijn met<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;.</p>

Paring en Viertal Scheiding van<em> Chlamydomonas reinhardtii</em> Voor Genetische analyse

The unicellular green alga Chlamydomonas reinhardtii (Chlamydomonas) has become a popular organism for research in diverse areas of cell biology and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Mating and Tetrad Separation of <em>Chlamydomonas reinhardtii</em> for Genetic Analysis

Light/dark Transition Test for Mice

Licht / donker Overgang test voor Muizen

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

Methode voor Cultuur van Early kippenembryo&#39;s ex vivo (Nieuwe Cultuur)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

Dubbele Hele Mount in situ hybridisatie van het vroege embryo&#39;s Chick

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

Methode voor Whole Mount antilichaam kleuring in Chick

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

Test voor Neurale Inductie in het kippenembryo

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

Een Neuronale en astrocyte co-cultuur assay voor High Content Analysis van neurotoxiciteit

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissectie van de hippocampus dentate gyrus van de volwassen muis

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments

Agarosegelelektroforese voor de scheiding van DNA fragmenten

Agarose gel electrophoresis is the most effective way of separating DNA fragments of varying sizes ranging from 100 bp to 25 kb1. Agarose is isolated from ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

Alternatieve Cultures for Human pluripotente stamcellen zijn Productie, Onderhoud, en genetische analyses

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

DNA Electroporation, Isolation and Imaging of Myofibers

DNA Elektroporatie, Isolatie en beeldvorming van myofibers

Mature muscle has a unique structure that is amenable to live cell imaging. Herein, we describe the experimental protocol for expressing fluorescently ...

Paring en Viertal Scheiding van Chlamydomonas reinhardtii Voor Genetische analyse