Name: mating and tetrad separation of <em>chlamydomonas reinhardtii</em> for genetic analysis
Uploaded: 2009-08-12T19:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis at JoVE.com

<p class="jove_content"> Ce protocole est basé sur les techniques apprises dans le laboratoire de Francis-André Wollman à la France Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris,. Les auteurs ont une dette de gratitude à Jacqueline Girard-Bascou, qui avait initialement introduit DBS aux techniques de <em>Chlamydomonas</em> génétique. <em>Chlamydomonas</em> la recherche dans le laboratoire de l&#39;auteur »est soutenu par la National Science Foundation récompense MCB-0646350. </p>

<p class="jove_title"> Partie 1: Préparation des souches pour la gamétogenèse </p><p class="jove_content"> Remarque: Toutes les manipulations doivent être effectuées à température ambiante. Températures supérieures ou inférieures auront une incidence sur la vitesse de germination zygote et peuvent nuire à la viabilité. <br /> Considération importante: Il est essentiel que des souches à croissance robuste sont accouplés et sont libres de contamination des champignons ou des bactéries. Si les souches n&#39;ont pas été transfér?...

<ol>
	<li>Harris, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Chlamydomonas+Sourcebook:+Introduction+to+Chlamydomonas+and+Its+Laboratory+Use.">The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use.</a> <em style='font-style: italic'>Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc</em>. , 119-273 (2005).</li></ol>

<p class="jove_content"> L&#39;analyse génétique est simple chez <em>Chlamydomonas,</em> mais elle nécessite des techniques particulières pour générer des gamètes et la progéniture tétrade séparé. Avec les souches saines, les techniques sont facilement acquises. Avec certaines souches mutantes, il devient de plus d&#39;un art, et les lecteurs doivent se reporter tome 1 du <em>Sourcebook</em> publié récemment des <em>Chlamydomonas</em> notes historiques et des conseils pratiques. Par ailleurs, il convient de noter qu&#39;il ya beauc...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>CC-125</td>
<td>Mating type <em>plus</em> strain</td>
<td><em>Chlamydomonas</em> Stock Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CC-124</td>
<td>Mating type <em>minus</em> strain</td>
<td><em>Chlamydomonas</em> Stock Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tris-Acetate-Phosphate (TAP) </td>
<td>Growth medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N10</td>
<td>Growth medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Difco agar</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Stainless-Steel Blades</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-916-5B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Surgical Blade Handles</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-914-5</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Metal Scalpels</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-920A</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

mating and tetrad separation of <em>chlamydomonas reinhardtii</em> for genetic analysis

<p class="jove_content">L&#39;algue verte unicellulaire<em&gt; Chlamydomonas reinhardtii</em&gt; (<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;) Est devenu un organisme populaire pour la recherche dans divers domaines de la biologie cellulaire et la génétique en raison de son cycle de vie simple, la facilité de croissance et de manipulation pour l&#39;analyse génétique, les ressources génomiques et transformabilité du noyau et les deux organites. Souches accouplement est une pratique courante lors des approches génétiques sont utilisés dans<em&gt; Chlamydomonass</em&gt;, De créer des diploïdes végétative pour l&#39;analyse de la domination, ou suite à une dissection de tétrade d&#39;héritage nucléaire vs organelles vérifier, de tester allélisme, d&#39;analyser epistasy, ou de générer des populations dans le but d&#39;une carte basée sur le clonage. En outre, les croisements génétiques sont couramment utilisés pour combiner les génotypes organelles avec notamment des génotypes nucléaires. Ici nous démontrons des méthodes standard pour la gamétogenèse, l&#39;accouplement, la germination et la séparation zygote tétrade. Ce protocole consiste en une série facile à suivre des étapes qui feront des approches génétiques se prêtent à des scientifiques qui sont moins familiers avec<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;. Les paramètres clés et les points chauds sont expliquées. Enfin, les ressources pour plus d&#39;informations et les méthodes alternatives sont fournies.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis at JoVE.com

Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis

<p class="jove_content">L&#39;accouplement et la séparation des tétrades sont nécessaires pour l&#39;analyse génétique dans<em&gt; Chlamydomonas reinhardtii</em&gt;. Ici nous démontrons des méthodes standard pour la gamétogenèse, l&#39;accouplement, la germination et la dissection de tétrade zygote. Ce protocole consiste en une série facile à suivre des étapes qui feront des approches génétiques se prêtent à des scientifiques qui sont moins familiers avec<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;.</p>

L&#39;accouplement et la séparation des Tétrade<em> Chlamydomonas reinhardtii</em> Pour l&#39;analyse génétique

The unicellular green alga Chlamydomonas reinhardtii (Chlamydomonas) has become a popular organism for research in diverse areas of cell biology and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Mating and Tetrad Separation of <em>Chlamydomonas reinhardtii</em> for Genetic Analysis

Light/dark Transition Test for Mice

Test de transition clair / foncé pour souris

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Recherche

Biologie

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

Méthode pour la culture d&#39;embryons de poulet Early ex vivo (Nouvelle Culture)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

Double Mont entier hybridation in situ d&#39;embryons de poulet début

Method for Whole Mount Antibody Staining in Chick

Méthode de coloration Mont anticorps entier de Chick

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

Dosage de l&#39;induction neurale dans l&#39;embryon de poulet

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

Un neuronale et astrocytes de co-culture de dosage pour l&#39;analyse du contenu haute de la neurotoxicité

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

Dissection de l&#39;hippocampe gyrus denté de souris adulte

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

Agarose Gel Electrophoresis for the Separation of DNA Fragments

Électrophorèse sur gel d&#39;agarose pour la séparation de fragments d&#39;ADN

Agarose gel electrophoresis is the most effective way of separating DNA fragments of varying sizes ranging from 100 bp to 25 kb1. Agarose is isolated from ...

Alternative Cultures for Human Pluripotent Stem Cell Production, Maintenance, and Genetic Analysis

Cultures alternatives pour souches pluripotentes humaines production cellulaire, le maintien et l&#39;analyse génétique

Human pluripotent stem cells (hPSCs) hold great promise for regenerative medicine and biopharmaceutical applications. Currently, optimal culture and ...

DNA Electroporation, Isolation and Imaging of Myofibers

ADN électroporation, isolement et d&#39;imagerie de myofibres

Mature muscle has a unique structure that is amenable to live cell imaging. Herein, we describe the experimental protocol for expressing fluorescently ...

L'accouplement et la séparation des Tétrade Chlamydomonas reinhardtii Pour l'analyse génétique