Name: mating and tetrad separation of <em>chlamydomonas reinhardtii</em> for genetic analysis
Uploaded: 2009-08-12T19:00:00
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<p class="jove_content"> Este protocolo é baseado em técnicas aprendidas no laboratório de Francis-André Wollman na França Institut de Biologie Physico-Chimique, Paris,. Os autores têm uma dívida de gratidão para com Jacqueline Girard-Bascou, que originalmente introduzido DBS para <em>Chlamydomonas</em> técnicas genéticas. <em>Chlamydomonas</em> pesquisa no laboratório dos autores é suportado pelo National Science Foundation prêmio MCB-0646350. </p>

<p class="jove_title"> Parte 1: Preparação de cepas de gametogênese </p><p class="jove_content"> Nota: Todas as manipulações devem ser realizadas à temperatura ambiente. Temperaturas superiores ou inferiores irá afetar a velocidade de germinação zigoto e pode afetar adversamente a viabilidade. <br /> Consideração importante: é essencial que as cepas de ser acoplado estão crescendo robustamente e estão livres de contaminação de fungos ou bactérias. Se as cepas não foram transferidos regularmente, passagem em meio rico deve prec...

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	<li>Harris, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Chlamydomonas+Sourcebook:+Introduction+to+Chlamydomonas+and+Its+Laboratory+Use.">The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use.</a> <em style='font-style: italic'>Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc</em>. , 119-273 (2005).</li></ol>

<p class="jove_content"> Análise genética é simples em <em>Chlamydomonas,</em> mas exige técnicas específicas para gerar gametas e progênie tetrad separado. Com cepas saudável, as técnicas são facilmente adquiridos. Com alguns mutantes, torna-se mais de uma arte, e os leitores devem consultar Volume 1 <em>do</em> Livro de <em>Chlamydomonas</em> recentemente publicado por notas históricas e dicas práticas. Além disso, deve-se notar que há muitas variações sobre o tema básico descrito acima, que vão desde o método para induzir g...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>CC-125</td>
<td>Mating type <em>plus</em> strain</td>
<td><em>Chlamydomonas</em> Stock Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>CC-124</td>
<td>Mating type <em>minus</em> strain</td>
<td><em>Chlamydomonas</em> Stock Center</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Tris-Acetate-Phosphate (TAP) </td>
<td>Growth medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>N10</td>
<td>Growth medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Difco agar</td>
<td>Reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Stainless-Steel Blades</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-916-5B</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>BD Surgical Blade Handles</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-914-5</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fisherbrand Metal Scalpels</td>
<td>Tools</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-920A</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

mating and tetrad separation of <em>chlamydomonas reinhardtii</em> for genetic analysis

<p class="jove_content">A alga verde unicelular<em&gt; Chlamydomonas reinhardtii</em&gt; (<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;) Tornou-se um organismo popular para pesquisas em diversas áreas da biologia celular e genética por causa do seu ciclo de vida simples, facilidade de cultivo e manipulação de análise genética, genômica recursos, e transformabilidade do núcleo e ambas as organelas. Cepas de acasalamento é uma prática comum quando abordagens genéticas são usados ​​em<em&gt; Chlamydomonass</em&gt;, Para criar diplóides vegetativo para a análise de dominância, ou após a dissecção tetrad à herança nuclear vs organellar verificar, testar alelismo, para analisar epistasia, ou para gerar populações com a finalidade de mapa-base de clonagem. Além disso, cruzamentos genéticos são usados ​​rotineiramente para combinar com genótipos organellar especial genótipos nuclear. Aqui demonstramos métodos padrão para a gametogênese, o acasalamento de germinação, zigoto e separação tétrade. Este protocolo consiste de uma série fácil de seguir de etapas que farão abordagens genéticas passíveis de cientistas que estão menos familiarizados com<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;. Parâmetros-chave e pontos de conflito são explicados. Finalmente, os recursos para obter mais informações e métodos alternativos são fornecidos.</p>

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Mating and Tetrad Separation of Chlamydomonas reinhardtii for Genetic Analysis

<p class="jove_content">Acasalamento e separação tetrad são necessários para análise genética em<em&gt; Chlamydomonas reinhardtii</em&gt;. Aqui demonstramos métodos padrão para a gametogênese, o acasalamento de germinação, zigoto e dissecção tétrade. Este protocolo consiste de uma série fácil de seguir de etapas que farão abordagens genéticas passíveis de cientistas que estão menos familiarizados com<em&gt; Chlamydomonas</em&gt;.</p>

Acasalamento e separação da Tétrade<em> Chlamydomonas reinhardtii</em> Para análise genética

The unicellular green alga Chlamydomonas reinhardtii (Chlamydomonas) has become a popular organism for research in diverse areas of cell biology and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Mating and Tetrad Separation of <em>Chlamydomonas reinhardtii</em> for Genetic Analysis

Light/dark Transition Test for Mice

Claro / escuro Teste de transição para Ratos

Although all of the mouse genome sequences have been determined, we do not yet know the functions of most of these genes. Gene-targeting techniques, ...

Biologia

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Double Whole Mount in situ Hybridization of Early Chick Embryos

Monte Whole dupla hibridização in situ de embriões de galinha precoce

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Acasalamento e separação da Tétrade Chlamydomonas reinhardtii Para análise genética