Placer de mærkede TSA- og SAB-bundfældningsplader nær arbejdsområdet, men i et område, der ikke forstyrrer testen. Dokumentér starttidspunktet for prøveudtagningen. Åbn begge plader aseptisk, og anbring lågene på en ren overflade i det biologiske sikkerhedsskab væk fra arbejdsområdet i op til fire timer for at forhindre, at agaren tørrer ud.
Ved afslutningen af behandlingen lukkes pladernes låg, og prøvetagningstiden dokumenteres. Løst skal du pakke pladerne og inkubere kulturerne. Til handskefingerspidsprøveudtagning skal du få to mærkede TSALT-plader.
Fjern låget på pladerne aseptisk, og anbring det på en ren arbejdsflade væk fra prøveudtagningsområdet. Rul forsigtigt puden på hver finger og tommelfinger på pladens overflade. Brug tilstrækkelig kraft til at lave små fordybninger på agaren uden at revne agaroverfladen.
Sæt låget aseptisk tilbage på pladen. Efter rensning af hænderne ved afslutningen af prøveudtagningen skal du løst pakke pladerne og inkubere kulturerne. For direkte podning, efter den amerikanske farmakopémetode, placeres TSA- og SAB-bundfældningspladerne i biosikkerhedsskabet.
Når du har forberedt kabinettet og iscenesat materialerne, skal du dokumentere starttidspunktet for prøveudtagningen. Få testartiklen og de tilhørende tryptiske sojabuljong og flydende thioglycollate medium flasker. Hvis flaskerne har en septum, skal du fjerne beskyttelseshætterne fra hver flaske og tørre septum med en steril alkoholserviet.
Vortex testartiklen for at sikre en homogen suspension og pode flaskerne med et valideret volumen af testartiklen ved hjælp af en steril sprøjte og en kanyle. Tør septum af med en steril alkoholserviet, og indsæt en steril udluftningsenhed for at muliggøre luftudveksling under inkubation. Gentag trinnene for hver testartikel i den pågældende session.
Luk TSA- og SAB-bundfældningspladerne aseptisk, og dokumentér prøveudtagningens sluttidspunkt, før der udføres den behandskede fingerspidsprøveudtagning. Tør handskerne af med 70% steril isopropylalkohol, poser pladerne løst og inkuber kulturerne. Overfør alle testmaterialer ud af det biologiske sikkerhedsskab.
På samme måde skal TSA- og SAB-bundfældningspladerne placeres i biosikkerhedsskabet efter NIH's alternative sterilitetstestmetode efter NIH's alternative sterilitetstestmetode og dokumentere prøveudtagningens starttidspunkt. Hent testartiklen og den tilhørende IFA Plus-mærkede, IFN Plus-mærkede og SAB-plade. Fjern beskyttelseshætterne fra IFA Plus- og IFN Plus-flaskerne, og tør skillevæggen af med en steril alkoholserviet.
Efter hvirvelstrøm af testartiklen podes flaskerne med valideret volumen af testartiklen ved hjælp af en steril sprøjte og en kanyle og tørres af septum igen. Inkuber flaskerne på BACT/ALERT Dual T-instrumentet. Ved hjælp af en pipetter podes SAB-pladen med en valideret mængde af testartiklen og striber til isolering ved hjælp af en steril sløjfe.
Lad stå i 10 minutter for at sikre, at prøven ikke løber på pladelåget, når den vendes til inkubation Anbring hver SAB-plade, der er podet med en testartikel, i en plastikpose. Bind dem løst. Luk TSA- og SAB-bundfældningspladerne aseptisk.
Dokumentér prøveudtagningens sluttidspunkt på pladerne, og udfør den behandskede fingerspidsprøveudtagning. Efter prøveudtagning tørres handskerne af med 70% alkohol. Pose pladerne løst efter at have tørret handskerne med alkohol og inkuber kulturerne.
En TSA-luftbundfældningsplade, der illustrerer en enkelt koloni af et forurenende stof, der dyrkes under passiv luftprocesovervågning i det biologiske sikkerhedsskab, vises her. TSALT-overfladeprøvetagningspladen med tre kolonidannende enheder af to forskellige kolonimorfologier er vist i denne figur. TSALT-overfladekulturen med en enkelt koloni på pladens kant indikerer dårlig aseptisk håndtering under prøveudtagningsprocessen.
Den korrekte metode til opnåelse af handskefingerspidsprøver ved hjælp af det største overfladeareal af hver finger eller tommelfinger er vist på dette billede. Den forkerte proces, hvor kun fingerspidsen er samplet, vises her. Et eksempel på skimmelkugler, der er synlige med det blotte øje, og som ikke automatisk blev detekteret af BACT/ALERT-systemet, er vist her.
Baseret på disse resultater anbefales terminal visuel inspektion af alle BACT / ALERT-flasker og tilsætning af SAB-pladen til svampedyrkning ved hjælp af NIH alternativ sterilitetstestmetode.
