Préparez la solution mère de gélatine à 10 % en pesant et en dissolvant la gélatine dans le tampon ADS et en autoclavant la solution. Réchauffez le bouillon de gélatine à 10 % à 37 degrés Celsius, jusqu’à ce qu’il devienne liquide. Diluez ensuite le stock de gélatine, à l’aide d’un tampon ADS préchauffé, pour obtenir la solution finale injectable à 5 % de gélatine.
Suspendre 96 billes cardiomyocytaires dans 100 microlitres de solution injectable préchauffée. Chargez la suspension à billes cardiomyocytaires dans la seringue d’injection de cellules sans aspirer l’excès d’air. Ensuite, tenez la seringue verticalement, avec l’aiguille vers le haut, et tapotez la seringue pour recueillir les bulles au niveau de l’arête supérieure de la seringue.
Observez également les billes cardiomyocytaires se déposer progressivement sur le joint en caoutchouc du piston. Maintenez la position verticale de la seringue et poussez lentement le piston pour éliminer les bulles et l’excès de solution de suspension cellulaire, jusqu’à ce qu’il reste 20 microlitres de suspension cellulaire dans la seringue et que la bille cardiomyocytaire reste posée sur le joint en caoutchouc du piston. Une fois cela fait, plongez la seringue bouchée dans un bain de glace pendant cinq minutes et fixez l’appareil de seringue d’injection sur le stade animal avant d’activer le pousse-seringue principal lors de la transplantation de cellules percutanées chez un rat anesthésié.