Приготовьте 10%-ный раствор желатина, взвесив и растворив желатин в буфере ADS и автоклавируя раствор. Нагрейте 10%-ный желатиновый бульон при температуре 37 градусов по Цельсию, пока он не станет жидким. Затем разбавьте желатиновую массу, используя предварительно подогретый буфер ADS, чтобы получить окончательный инъекционный 5%-ный раствор желатина.
Суспендировать 96 шариков кардиомиоцитов в 100 микролитрах предварительно подогретого инъекционного раствора. Загрузите суспензию шарика кардиомиоцитов в шприц для инъекций клеток, не отсасывая лишний воздух. Затем держите шприц вертикально, иглой вверх, и постучите по шприцу, чтобы собрать пузырьки на верхнем гребне шприца.
Также наблюдайте, как шарики кардиомиоцитов постепенно оседают на резиновое уплотнение поршня. Сохраняйте вертикальное положение шприца и медленно нажимайте на поршень, чтобы удалить пузырьки и излишки раствора клеточной суспензии, пока в шприце не останется 20 микролитров клеточной суспензии, а шарик кардиомиоцитов останется лежащим на резиновом уплотнении поршня. После этого погрузите шприц с крышкой в ледяную баню на пять минут и зафиксируйте инъекционный шприц-аппарат на животном этапе, прежде чем активировать основной шприцевой насос во время чрескожной трансплантации клеток крысе, находящейся под наркозом.
