Uploaded: 2023-07-28T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Perfusion Culture of Blood Vessels in the 3D-Printed Bioreactor at JoVE.com

perfusion culture of blood vessels in the 3d-printed bioreactor

Ex Vivo Perfusion Culture of Large Blood Vessels in a 3D Printed Bioreactor

Watch this Scientific Journal Video about Perfusion Culture of Blood Vessels in the 3D-Printed Bioreactor at JoVE.com

Perfusjonskultur av blodkar i den 3D-printede bioreaktoren

Å klargjøre prøven for perfusjonskultur ved bruk av den 3D-printede bioreaktoren. I et laminært strømningskabinett plasserer du de isolerte carotisarterieprøvene fra svin i kalde transportmedier. Bruk et skalpellblad, fjern overflødig bindevev og trim endene av vevet.Vask deretter vevet to ganger i kalde transportmedier. Deretter legger du vevet i transportmedier på en orbital shaker i minst 30 minutter for en grundig sluttvask. Deretter kobler du et ikke-forgrenende segment av den vasket arterien til det fabrikkerte bioreaktorsystemet ved hjelp av to pigglokkforbindelser.Og fest den ved hjelp av en karbinding laget av vaskulære silikonbånd. Bruk en liten sprøyte festet til den første lokkeforbindelsen, og kjør mediet forsiktig gjennom arterien for å sikre at den er patency. Etter å ha sikret arterien til den fremstilte innsatsen, fyll reaksjonsrommet med perfusjonsmedier.Deretter fyller du forsiktig luminalsirkulasjonssløyfen med media, og fjerner eventuell gjenværende luft fra systemet. Til slutt, koble reaksjonsrommet til det monterte perfusjonssystemet, og fullfør sirkulasjonen. For å utføre perfusjonskulturen, plasser perfusjonssystemet i en inkubator.Etter at du har koblet den til en peristaltisk pumpe, kobler du til eventuelle ekstra innsamlingssystemer, for eksempel trykksensorer. La systemet balansere over natten med en lav mediestrømningshastighet på omtrent 10 til 15 milliliter per minutt. Neste dag, øk strømmen trinnvis til en endelig strømningshastighet på 35 milliliter per minutt oppnås.Hver tredje dag skiftes 50 % av mediet ut ved å koble en sprøyte med nye medier til mediebytteporten nærmere pumpen og en tom sprøyte til porten nærmere reservoaret for å samle opp det brukte mediet. Etter forsøket, ved hjelp av steril kirurgisk saks, høst vevet fra reaksjonskammeret ved å trimme vevendene som er koblet til bioreaktoren. Konfokal avbildning ved hjelp av endotel- og glattmuskelspesifikke markører viste at den normale strukturen til en arterie var godt bevart og opprettholdt gjennom hele, fra høsttidspunktet til rengjøring og behandling, og til og med etter perfusjonskultur.Feil håndtering under prosessering resulterte imidlertid i tap av endotelet foran kulturen, og anvendelsen av ikke-fysiologiske dyrkningsbetingelser som brå initiering av høy strømning viste lysskader. Histologisk evaluering av vevet ved hjelp av hematoksylin- og eosinfarging og immunfluorescensfarging ved høsting og etter syv dager med perfusjonskultur viste at morfologien og den totale fordelingen av cellene i karveggen ble opprettholdt hele veien.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Perfusion Culture of Blood Vessels in the 3D-Printed Bioreactor

A Novel 3D Printed Bioreactor for Ex Vivo Culture of Blood Vessels in Perfusion

EasyFlow Â– An Economical and Adaptable Perfusion Bioreactor for Large Blood Vessel Culture (Video) | JoVE

Eks Vivo Perfusjonskultur av store blodkar i en 3D-printet bioreaktor

Vascular disease forms the basis of most cardiovascular diseases (CVDs), which remain the primary cause of mortality and morbidity worldwide. Efficacious ...

Assembly and Priming of the 3D-Printed Bioreactor for Perfusion Culture

Assembly and Priming of the 3D-Printed Bioreactor for Perfusion Culture (Video) | JoVE 

Montering og priming av den 3D-printede bioreaktoren for perfusjonskultur