Name: Bioink Preparation, Acoustic Device Assembly, and Viability Analysis of Cell Spheroids (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-10-13T12:30:00
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bioink preparation, acoustic device assembly, and viability analysis of cell spheroids

Three-Dimensional Acoustic Assembly Device for Mass Manufacturing of Cell Spheroids

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Bioink Preparation, Acoustic Device Assembly, and Viability Analysis of Cell Spheroids (Video) | JoVE 

Bioink तैयारी, ध्वनिक उपकरण विधानसभा, र सेल Spheroids को व्यवहार्यता विश्लेषण

जैव स्याही समाधान तैयार करने के लिए निष्फल जेलएमए समाधान के साथ सी 3 ए सेल निलंबन की उचित मात्रा मिलाएं। 20 मिनट के लिए 37 डिग्री पर दो माइक्रोमोलर सेल ट्रैकर समाधान के साथ C3A सेल spheroids दिखावा. कोशिकाओं को धोने के लिए, पहले, अपकेंद्रित्र द्वारा supernatin को हटाने और फिर ताजा सेल संस्कृति माध्यम जोड़ें.निष्फल ध्वनिक उपकरण कक्ष में जैव स्याही के कम से कम दो मिलीलीटर जोड़ें। सेल समुच्चय की एक 3 डी सरणी उत्पन्न करने के लिए प्रत्येक PZT ट्रांसड्यूसर के सक्रियण आरंभ करने के लिए फ़ंक्शन जनरेटर और पावर एम्पलीफायर चालू करें। 3 डी हाइड्रोगेल मचान बनाने के लिए 30 सेकंड के लिए नीली रोशनी का उपयोग करके जैव स्याही को क्रॉसलिंक करें, इकट्ठे सेल समुच्चय को ध्वनिक रूप से समझाया जाए।अगला, ध्यान से एक पेट्री डिश में कक्ष से 3 डी hydrogel मचान हस्तांतरण. एक साफ रेजर का उपयोग कर छोटे टुकड़ों में यह कटौती, और फिर पेट्री डिश में सेल संस्कृति माध्यम जोड़ें. पीबीएस के एक मिलीलीटर में अलग-अलग संस्कृति समय बिंदुओं पर सी 3 ए सेल स्फेरॉइड को इनक्यूबेट करें जिसमें कैल्शियम एम के एक माइक्रोलीटर और प्रोपिडियम आयोडाइड के दो माइक्रोलीटर 37 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट के लिए होते हैं।पीबीएस के साथ दो बार हाइड्रोजेल मचान में एम्बेडेड नमूना कुल्ला। प्राप्त spheroids के लिए, पांच मिनट के लिए 200 जी पर centrifugation प्रदर्शन और पीबीएस के साथ दो बार धो लें. एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप का प्रयोग, spheroids निरीक्षण और छवियों पर कब्जा.सेल समुच्चय एक हरे रंग फ्लोरोसेंट संकेत के साथ नियमित रूप से 3 डी डॉट सरणी पैटर्न में व्यवस्थित किया गया. इकट्ठे C3A gelMA समुच्चय धीरे-धीरे एकीकृत और तीन दिन तक तंग spheroids का गठन, अंडाकार व्यास में वृद्धि के साथ. सेल spheroids की व्यवहार्यता तीन दिन से पहले अच्छा रहा, लेकिन थोड़ा संस्कृति के एक सप्ताह के बाद कमी.जारी किए गए स्फेरॉइड ने एल्ब्यूमिन की वांछनीय व्यवहार्यता और अभिव्यक्ति के साथ एक संकीर्ण आकार वितरण के साथ एक अच्छा गोलाकार आकारिकी बनाए रखा।

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