Uploaded: 2024-02-16T14:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cell Seeding in the Membrane-Based Cell Culture Platform and Reconfiguring it to Microfluidic Mode at JoVE.com

cell seeding in the membrane-based cell culture platform and reconfiguring it to microfluidic mode

Transforming Static Barrier Tissue Models into Dynamic Microphysiological Systems

Watch this Scientific Journal Video about Cell Seeding in the Membrane-Based Cell Culture Platform and Reconfiguring it to Microfluidic Mode at JoVE.com

झिल्ली-आधारित सेल कल्चर प्लेटफॉर्म में सेल सीडिंग और इसे माइक्रोफ्लुइडिक मोड में पुन: कॉन्फ़िगर करना

शुरू करने के लिए, सेल लगाव में सुधार करने के लिए कमरे के तापमान पर एक घंटे के लिए फाइब्रोनेक्टिन के प्रति वर्ग सेंटीमीटर पांच माइक्रोग्राम के साथ इकट्ठे पुन: कॉन्फ़िगर करने योग्य सेल संस्कृति मंच की झिल्ली को कोट करें। फिर, एक p200 विंदुक का उपयोग करके, कोटिंग समाधान को महाप्राण करें। कोर मॉड्यूल में पैटर्निंग स्टैंसिल को अच्छी तरह से रखें।डिवाइस के अच्छी तरह से और नीचे चैनल के लिए सेल मीडिया जोड़ें. बीज मानव गर्भनाल शिरा endothelial कोशिकाओं को कुएं में. डिवाइस को पेट्री डिश में रखें।स्थानीय आर्द्रता बनाए रखने के लिए पेट्री डिश में विआयनीकृत पानी युक्त 15 मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूब कैप जोड़ें। पेट्री डिश सेटअप इनक्यूबेटर में स्थानांतरण. संस्कृति वह प्रवाह के तहत कोशिकाओं के लिए, माइक्रोफ्लुइडिक मोड के लिए खुले अच्छी तरह से मंच को पुन: कॉन्फ़िगर करने के लिए आगे बढ़ें।ऐसा करने के लिए, एंडोथेलियल सेल ग्रोथ मीडिया के साथ जलाशयों और ट्यूबों को भरें। नमूना चरण पर निचले आवास रखें। निचले आवास में ओपन-वेल कोर मॉड्यूल डालें, फिर स्टैंसिल को हटा दें, मॉड्यूल के कुएं से सेल मीडिया को महाप्राण करें, और प्रवाह मॉड्यूल को कुएं में रखें।अगला, कोर मॉड्यूल में प्रवाह मॉड्यूल को अच्छी तरह से सील करने के लिए ऊपरी आवास रखें। इनलेट और आउटलेट वितरण युक्तियों को प्रवाह मॉड्यूल बंदरगाहों से कनेक्ट करें। सिस्टम में द्रव प्रवाह शुरू करने के लिए पेरिस्टाल्टिक पंप शुरू करें।पंप बंद करो जब सरासर प्रवाह जोखिम के लिए वांछित समय तक पहुँच गया है. इनलेट और आउटलेट डिस्पेंसिंग टिप्स निकालें, फिर ऊपरी हाउसिंग को हटा दें। धीरे चिमटी का उपयोग कर अच्छी तरह से प्रवाह मॉड्यूल को हटा दें.अंत में, वांछित परख का संचालन करने से पहले अच्छी तरह से सेल मीडिया के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें। प्रवाह के तहत सुसंस्कृत कोशिकाएं, प्रवाह दिशा के साथ संरेखित होती हैं, जबकि प्रवाह के बिना सुसंस्कृत कोशिकाएं बेतरतीब ढंग से उन्मुख रहती हैं। सरासर तनाव के लिए कोशिकाओं के संपर्क में आने से क्रुपेल जैसे कारक 2 और एंडोथेलियल नाइट्रिक ऑक्साइड सिंथेज़ का अपग्रेडेशन हुआ, जो स्वस्थ रक्त वाहिकाओं में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं।

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Cell Seeding in the Membrane-Based Cell Culture Platform and Reconfiguring it to Microfluidic Mode

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